本發(fā)明涉及藥品質(zhì)量檢測(cè)方法，尤其涉及一種枸櫞酸莫沙必利中間體中氟類(lèi)雜質(zhì)的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)：

1、枸櫞酸莫沙必利(mosapride?citrate)，是一種選擇性5-羥色胺(5-ht4)受體激動(dòng)藥，能促進(jìn)乙酰膽堿的釋放，刺激胃腸道而發(fā)揮促動(dòng)力作用，從而改善功能性消化不良患者的胃腸道癥狀，但不影響胃酸的分泌。其化學(xué)名稱(chēng)為4-氨基-5-氯-2-乙氧基-n-[[4-(4-氟芐基)-2-嗎啉基]甲基]苯甲酰胺枸櫞酸鹽二水合物，cas號(hào)：156925-25-6，具有如下結(jié)構(gòu)：

2、

3、關(guān)于枸櫞酸莫沙必利合成工藝，文獻(xiàn)報(bào)道多以?xún)蓚€(gè)關(guān)鍵側(cè)鏈進(jìn)行縮合反應(yīng)，合成工藝如下：

4、

5、其中，關(guān)鍵中間體2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉(化合物ⅲ)為油狀物質(zhì)，純度低，穩(wěn)定性差，除雜困難，其中所含的氟類(lèi)雜質(zhì)進(jìn)一步反應(yīng)產(chǎn)生的雜質(zhì)與枸櫞酸莫沙必利成品結(jié)構(gòu)相似度較高難以通過(guò)簡(jiǎn)單的工藝去除，由于缺乏對(duì)中間體2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉中氟類(lèi)雜質(zhì)的控制導(dǎo)致了最終產(chǎn)品在檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)時(shí)經(jīng)常難以符合要求，這些雜質(zhì)的存在不僅影響了產(chǎn)品的質(zhì)量，而且對(duì)用藥的安全性方面也存在較大隱患，因此有必要進(jìn)行控制。

6、上述中間體2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉及其氟類(lèi)雜質(zhì)化合物分子結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單紫外吸收較弱，同時(shí)由于含有-nh2基團(tuán)分子極性較大，在反相液相色譜法中不易獲得合適的保留及分離，pka值在9左右，堿性較高，不易獲得良好的峰形。因此尋求一種能夠有效分離中間體2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉中氟類(lèi)雜質(zhì)的分析方法，對(duì)于枸櫞酸莫沙必利的進(jìn)一步質(zhì)量控制具有十分重要的意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種枸櫞酸莫沙必利中間體中氟類(lèi)雜質(zhì)的檢測(cè)方法，能夠?qū)崿F(xiàn)枸櫞酸莫沙必利中間體中氟類(lèi)雜質(zhì)的檢測(cè)。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種枸櫞酸莫沙必利中間體中氟類(lèi)雜質(zhì)的檢測(cè)方法，包括以下步驟：

3、采用液相色譜法對(duì)含2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉的供試品溶液進(jìn)行檢測(cè)，其中，流動(dòng)相為磷酸二氫鉀-磷酸-乙腈緩沖溶液。

4、優(yōu)選的，所述液相色譜法的洗脫梯度為：

5、

6、其中，所述流動(dòng)相a為0.02mol/l磷酸二氫鉀-磷酸緩沖液，所述流動(dòng)相b為0.01mol/l磷酸二氫鉀-磷酸-乙腈緩沖液。

7、優(yōu)選的，所述流動(dòng)相a的制備方法為：

8、配制0.02mol/l磷酸二氫鉀水溶液，用磷酸水溶液調(diào)節(jié)ph值至4.2。

9、在本發(fā)明的一些具體實(shí)施例中，取磷酸二氫鉀5.4g，加水2000ml使溶解，用10％磷酸水調(diào)節(jié)ph值至4.2，得流動(dòng)相a。

10、優(yōu)選的，所述流動(dòng)相b的制備方法為：

11、配制0.01mol/l磷酸二氫鉀溶液，用磷酸水溶液調(diào)節(jié)ph值至4.2。

12、所述0.01mol/l磷酸二氫鉀溶液的溶劑優(yōu)選為水和乙腈。

13、所述水和乙腈的體積比優(yōu)選為1:1。

14、在本發(fā)明的一些具體實(shí)施例中，取磷酸二氫鉀2.7g，加水1000ml使溶解，加乙腈1000ml，混勻，用10％磷酸水調(diào)ph值至4.2，得流動(dòng)相b。

15、所述含2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉的供試品溶液濃度優(yōu)選為2.5mg/ml。

16、所述液相色譜法采用的色譜柱優(yōu)選為十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑。

17、所述色譜柱優(yōu)選為ymc-pack?ods-a,4.6×150mm，5μm或其他效能相當(dāng)?shù)纳V柱。

18、所述液相色譜法的柱溫優(yōu)選為40℃。

19、所述液相色譜法的流速優(yōu)選為1ml/min。

20、所述液相色譜法的檢測(cè)波長(zhǎng)優(yōu)選為220nm。

21、所述液相色譜法的進(jìn)樣體積優(yōu)選為5μl。

22、本發(fā)明優(yōu)選的，所述液相色譜法的梯度混合器和進(jìn)樣器之間設(shè)置有雜質(zhì)捕集小柱。

23、所述雜質(zhì)捕集小柱優(yōu)選為ghost?trap?ds?7.6×30mm或其他效能相當(dāng)?shù)纳V柱。

24、上述雜質(zhì)捕集小柱的設(shè)置有助于吸附去除系統(tǒng)中的雜質(zhì)(包括流動(dòng)相、管路及混合器)，保證在較低波長(zhǎng)的條件下，梯度洗脫基線的平穩(wěn)，防止對(duì)目標(biāo)峰產(chǎn)生干擾。

25、優(yōu)選的，上述氟類(lèi)雜質(zhì)包括以下雜質(zhì)中的任意一種或多種：

26、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)a：

27、

28、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)b：

29、

30、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)c：

31、

32、有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)d：

33、

34、氟類(lèi)雜質(zhì)進(jìn)一步反應(yīng)在莫沙必利對(duì)應(yīng)的雜質(zhì)分別為：

35、莫沙必利雜質(zhì)a：

36、

37、莫沙必利雜質(zhì)b：

38、

39、莫沙必利雜質(zhì)c：

40、

41、莫沙必利雜質(zhì)d：

42、

43、試驗(yàn)結(jié)果表明，采用磷酸二氫鉀-磷酸-乙腈緩沖溶液作為流動(dòng)相，可以使2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉和上述4種氟類(lèi)雜質(zhì)均被檢出，且各物質(zhì)分離符合要求。

44、采用其他常規(guī)流動(dòng)相，例如乙酸銨-乙酸-乙腈緩沖溶液，上述4種氟類(lèi)雜質(zhì)不能被檢出，無(wú)法實(shí)現(xiàn)2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉雜質(zhì)的檢測(cè)。

45、當(dāng)色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑，柱溫為40℃，流速為1ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm時(shí)，供試品溶液及各雜質(zhì)出峰良好，能夠有效分離，響應(yīng)值較高，檢測(cè)靈敏度好，為最佳檢測(cè)條件。

46、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種枸櫞酸莫沙必利中間體中氟類(lèi)雜質(zhì)的檢測(cè)方法，包括以下步驟：采用液相色譜法對(duì)含2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉的供試品溶液進(jìn)行檢測(cè)，其中，流動(dòng)相為磷酸二氫鉀-磷酸-乙腈緩沖溶液。

47、本發(fā)明提供的檢測(cè)方法對(duì)有關(guān)物質(zhì)的分離度好且響應(yīng)值高，靈敏度好，能夠?qū)崿F(xiàn)上述4種氟類(lèi)雜質(zhì)的分離，對(duì)中間體2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行有效控制，進(jìn)而可以有效保證枸櫞酸莫沙必利的產(chǎn)品質(zhì)量，同時(shí)可以簡(jiǎn)化后續(xù)雜質(zhì)清除處理工藝，進(jìn)一步降低雜質(zhì)清除分離溶劑的使用量。

技術(shù)特征：

1.一種枸櫞酸莫沙必利中間體中氟類(lèi)雜質(zhì)的檢測(cè)方法，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述液相色譜法的洗脫梯度為：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述流動(dòng)相a的制備方法為：

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述含2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉的供試品溶液濃度為2.5mg/ml。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述液相色譜法采用的色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑；

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述液相色譜法的柱溫為40℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述液相色譜法的流速為1ml/min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述液相色譜法的檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述液相色譜法的進(jìn)樣體積為5μl。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述液相色譜法的梯度混合器和進(jìn)樣器之間設(shè)置有雜質(zhì)捕集小柱；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及藥品質(zhì)量檢測(cè)方法技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種枸櫞酸莫沙必利中間體中氟類(lèi)雜質(zhì)的檢測(cè)方法。所述檢測(cè)方法包括以下步驟：采用液相色譜法對(duì)含2?氨甲基?4?(4?氟芐基)?嗎啉的供試品溶液進(jìn)行檢測(cè)，其中，流動(dòng)相為磷酸二氫鉀?磷酸?乙腈緩沖溶液。本發(fā)明提供的檢測(cè)方法對(duì)有關(guān)物質(zhì)的分離度好且響應(yīng)值高，靈敏度好，能夠?qū)崿F(xiàn)上述4種氟類(lèi)雜質(zhì)的分離，對(duì)中間體2?氨甲基?4?(4?氟芐基)?嗎啉的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行有效控制，進(jìn)而可以有效保證枸櫞酸莫沙必利的產(chǎn)品質(zhì)量，同時(shí)可以簡(jiǎn)化后續(xù)雜質(zhì)清除處理工藝，進(jìn)一步降低雜質(zhì)清除分離溶劑的使用量。

技術(shù)研發(fā)人員：任強(qiáng),徐建,曹翠,李丹,劉丹,閻君,劉興偉
受保護(hù)的技術(shù)使用者：吉林修正藥業(yè)新藥開(kāi)發(fā)有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6