專利名稱：硅酸鹽細(xì)菌及含有硅酸鹽細(xì)菌的肥料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種硅酸鹽細(xì)菌及其基因，具體地說本發(fā)明涉及能高效分解礦物鉀的芽胞桿菌，以及以該硅酸鹽細(xì)菌為有效成分的生物肥料。
植物生長(zhǎng)需要大量的氮、磷和鉀。隨著化學(xué)氮、磷肥用量的增加，秸稈還田不足，雨水沖刷造成的損失，耕作層土壤氮肥過剩而鉀肥不足已成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的一個(gè)重要問題。土壤養(yǎng)分失去平衡，缺鉀地區(qū)不斷擴(kuò)大，土壤鉀素不足已構(gòu)成我國農(nóng)作物產(chǎn)量提高、品質(zhì)改善的限制因素。因此農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上施用礦質(zhì)鉀肥日益增多。但我國鉀礦資源缺乏，雖每年進(jìn)口約200萬噸鉀肥，仍不能滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)對(duì)鉀肥的需求，且需花費(fèi)2.6億美元外匯。另外，礦質(zhì)鉀肥被作物吸收利用率不高，容易淋失，造成浪費(fèi)和污染環(huán)境。故以多種形式補(bǔ)充土壤中的鉀素，科學(xué)合理施用鉀肥已成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的主要技術(shù)措施之一。其中，尋求一條既能緩解鉀肥供需矛盾，又著眼于農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境保護(hù)，且能達(dá)到農(nóng)業(yè)高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、高效的生物學(xué)途徑顯得更為迫切。
本發(fā)明的目的是提供一株能高效分解礦物鉀的細(xì)菌及其基因，從而能開發(fā)出一種新型的生物鉀肥，能把土壤中不溶或難溶的鉀、磷轉(zhuǎn)化為植物可以直接吸收的速效鉀和有效磷；具有固定空氣中的氮素和提高化肥利用率的能力；在土壤中能產(chǎn)生多種生理活性物質(zhì)，促進(jìn)植物生長(zhǎng)；能改善土壤結(jié)構(gòu)，消除土壤板結(jié)；具有增強(qiáng)作物抗旱、抗寒和抵御病蟲害的能力以及補(bǔ)充硅、鋅等微量元素的作用。
下面敘述本發(fā)明的主要內(nèi)容本發(fā)明所提供的硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株是1986年9月從中國江蘇省南京市黃棕壤中分離而得，其于2000年12月13日在武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，保藏號(hào)為CCTCC No.M200040。該菌株具有下述性質(zhì)1.菌落形態(tài)特征該菌株在玻璃粉培養(yǎng)基和蔗糖無氮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，單個(gè)菌落呈半玻璃珠狀，邊緣整齊，表面濕潤光滑，有光澤，隆起，無色透明。菌苔濃稠富有彈性，接種針挑動(dòng)時(shí)可牽拉出較長(zhǎng)絲。在肉湯培養(yǎng)基上生長(zhǎng)很微弱，菌落小，半透明，易挑起。
2.菌體形態(tài)特征菌體為長(zhǎng)桿狀(1.0-1.5×3-5μm)，兩端鈍圓，幼齡時(shí)周生鞭毛，革蘭氏反應(yīng)陰性(可變)。營養(yǎng)體在60℃經(jīng)15分鐘處理，存活率為80-90％。菌體外有肥厚的莢膜，菌體內(nèi)往往有1-2個(gè)顆粒體。老培養(yǎng)物能形成芽胞，芽胞橢圓形，位于孢囊中部，孢囊不膨大。芽胞在100℃經(jīng)15分鐘處理，存活率為80-85％。
3.主要生理生化特征主要生理生化特征見表1。該菌株能很好的利用葡萄糖、蔗糖、乳糖、甘露醇、腐殖酸等作為碳源，能水解淀粉，不利用纖維素和羧甲基纖維素；在利用各種碳源時(shí)產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，一般培養(yǎng)后基質(zhì)的pH值降低0.4-1.8。能在無氮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，形成豐滿的玻璃珠狀菌落；在有氮培養(yǎng)基上的菌落較小。對(duì)有機(jī)氮源不能很好利用，在肉湯蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)很微弱，不形成莢膜；能利用大多數(shù)氨基酸(見表1)中的氮，也能利用鹽酸硫胺、VB12中的氮，不利用6-BA(6-芐氨基嘌呤)中的氮。能使牛奶胨化，使石蕊褪色。NaCl濃度高于1.0％時(shí)生長(zhǎng)受抑制。代時(shí)為4.08小時(shí)。
4.遺傳學(xué)特征該菌株的G+C mol％為53.7-55％，16S rRNA基因部分序列并已向Genbank提交，登錄號(hào)為AF320074，菌株的16S rRNA基因序列為1、 CCGCGGCGTG CCTAATACAT GCAAGTCGAG CGGAGCACTTCGGTGCTTAA GCGGCGGACG61 GGTGAGTAAC ACGTAGGCAA CCTGCCTGTA AGATCGGGATAACTACCGGA AACGGTAGCA121 AGACCGGATA GCTGGTTTCG GTGCATGCCG GAATCATGAAACACGGGGCA ACCTGTGGCT181 TACGGATGGG CCTGCGGCGCATTAGCTAGT TGGCGGGGTA ACGGCCCACC AAGGCGACGA241 TGCGTAGCCG ACCTGAGAGG GTGATCGGCC ACACTGGGACTGAGACACGG CCCAGACTCC301 TACGGGAGGC AGCAGTAGGG AATCTTGCGC AATGGGCGCAAGCCTGACGG AGCAACGCCG361 CGTGAGTGAT GAAGGTTTTC GGATCGTAAA GCCTGTTGCCAGGGAAGAAC GTCGTGGAGA421 GTAACTGCTC TGCGAATGAC GGTACCTGAG AAGAAAGCCCCGGCTAACTA CGTGCCAGCA481 CCGCGGTAAT ACGTAGGGGG CAAGCGTTGT CCGGAATTATTGGGCGTAAA GCGCGCCAGC541 GGTCTTTTAA GTCTGGTGTT TAAGCCCGGG GCTCAACCCGGTTCGCACCG GAAACTGGAA601 GACTTGAGTG CAGGAGAGGA AAGCGGAATT CCACGTTTAGCGGTGAAATG CGTTAAAATG661 TGGAGGAACA CCAATGGCGA AGGCGGCTTT CTGGACTGTAACTGACGCTG AGGCGCGAAA721 GCGTGGGGAG CAAACAGGAT TAGATACCCT GGTAGTCCACGCCGTAAACG ATGAGTGCTA781 GGTGTTAGGG GTTTCGATAC CCTTGGTGCC GAAGTAAACACAATAAGCAC TCCGCCTGGG841 GAGTACGCTC GCAAGAGTAA ACGCAAAGGA ATTGACGGGGACCCGCACAA GCAGTGGAGT901 ATGTGGTTTA ATTCGAAGCA ACGCGAAGAA CCTTACCAGTCTTGACATCC CTCTGAAAGC961 CCTAGAGATA GGGTCCTCCT TCGGGACAGA GGTGACAGGTGGTGCATGGT TGTCGTCTGC1021 TCATGTCGTG AGATGTTGGG TTAAGTCCCG CAACGAGCGCAACCCTTGAC TTTAGTTGCC1081 AGCATTGAGT TGGGCACTCT AGAGTGACTG CCGGTGACAAACCGGAGGAA GGTGGGGATG1141 ACGTCAAATC ATCATGCCCC TTATGACCTG GGCTACACACGTACTACAAT GGCCGGTACA1201 ACGGGAAGCG AAGTCGCGAG ATGGAGCGAA TCCTTAGAAGCCGGTCTCAG TTCGGATTGC1261 AGGCTGCAAC TCGCCTGCAT GAAGTCGGAA TTGCTAGTAATCGCGGATCA GCATGCCCGC1321 AGAAATCGTT CCCGGGTCTT GTACACACCG CCCGTCACACCACGAGATTT ACAACACCCG1381 AAGCCGGTGG GGTAACCCGC AAGGGGGCCA GCCGTCGAAGGTGGGTAGAT TATTTNNNTT1441 NAAGGGNATA根據(jù)中國科學(xué)院微生物所的《一般細(xì)菌常用鑒定方法》、《Bergey’sManual of Systematic Bacteriology》和試驗(yàn)的結(jié)果，本發(fā)明所述的硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株屬于土壤芽胞桿菌(Bacillus edaphicus)類群，但又與土壤芽胞桿菌有明顯的區(qū)別，其主要不同點(diǎn)在于該菌株有鞭毛、能水解淀粉、產(chǎn)生吲哚、液化明膠、使石蕊胨化褪色、VP反應(yīng)呈弱陽性。發(fā)明人初步將其定名為Bacillus edaphicus subsp.。
通過常規(guī)的微生物發(fā)酵方法，可以培養(yǎng)本發(fā)明所述的硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株，并制得以本發(fā)明所述的硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株為有效成分的生物鉀肥。初始生長(zhǎng)pH為5.5-9.0，最適生長(zhǎng)pH為7.0-7.5，最適培養(yǎng)溫度為25-32℃，兼性好氣，可用一般發(fā)酵工業(yè)中的通用發(fā)酵罐進(jìn)行培養(yǎng)。在制造以本發(fā)明所述的硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株為有效成分的生物鉀肥時(shí)，可同樣使用該技術(shù)領(lǐng)域中已知菌肥所通用的肥料基質(zhì)和載體，并能配制成顆粒劑、粉劑等任意的劑型。同時(shí)，在各種制劑中一般可添加一些有益于微生物繁殖及植物生長(zhǎng)的營養(yǎng)液。
本發(fā)明的制劑還可以與其它肥料物質(zhì)、土壤改良劑、殺菌劑、除草劑、殺蟲劑配合使用，但不能和代森錳鋅、福美雙、樂果、甲基1605等農(nóng)藥混用。
本發(fā)明所述的硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株及制得的以本發(fā)明所述的硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株為有效成分的生物鉀肥與現(xiàn)有技術(shù)相比有如下優(yōu)點(diǎn)。
1.固氮和分解礦物釋放鉀、磷和其它微量元素本發(fā)明所述的硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株有固氮酶活性，在無氮培養(yǎng)液中培養(yǎng)后菌液中的氨態(tài)氮含量可達(dá)0.40-0.55mg/ml。
該菌株能在以磷礦石為唯一磷源的固體平板培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，在含磷礦石的解磷培養(yǎng)液中培養(yǎng)28小時(shí)后，用鉬藍(lán)比色法測(cè)定該菌的解磷能力為1.50-2.85mg/kg。
該菌株在搖瓶條件下表現(xiàn)出較強(qiáng)的分解硅酸鹽礦物的能力。以鉀長(zhǎng)石為底物，培養(yǎng)120小時(shí)后，可以從鉀長(zhǎng)石中釋放出鉀151.0-207.9mg/L，比對(duì)照增加209.4-326.02％；以土壤礦物為底物，可釋放出鉀77.0-105.7mg/L，比對(duì)照增加49.2-104.84％。而且，當(dāng)環(huán)境中的鉀離子濃度在100-200mg/L時(shí)該菌的解鉀效率最大。
該菌株破壞硅酸鹽礦物的同時(shí)還釋放出硅、鋁等元素。以鉀長(zhǎng)石為底物，接菌處理比接滅活菌處理對(duì)照上清液中的SiO2、Al2O3分別增加122-125％、20.0-21.8％；以土壤礦物為底物，接菌處理比接滅活菌處理對(duì)照上清液中的SiO2、Al2O3分別增加155-126.7％、18.0-19.2％。
2.保鉀該菌株能對(duì)環(huán)境中的游離態(tài)鉀起到一定的吸持保蓄作用，吸持的鉀占總解鉀量的92.2-94.3％，使鉀的流失減少35.5-56.5％。
3.分泌有機(jī)酸、氨基酸、植物激素類物質(zhì)該菌株能合成草酸、酒石酸、檸檬酸、蘋果酸等有機(jī)酸，含量范圍分別為66.38-217.43mg/L、59.26-113.31mg/L、77.96-291.94mg/L和33.36-108.89mg/L。
該菌株能合成16種氨基酸，分別為天門冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸和精氨酸。谷氨酸含量最高，達(dá)0.156-3.479mg/L，其次是丙氨酸(0.135-2.237mg/L)和甘氨酸(0.265-0.412mg/L)等，天門冬氨酸、丙氨酸、胱氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸等氨基酸主要在發(fā)酵前期合成，蘇氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸和精氨酸等幾種氨基酸在發(fā)酵后期濃度逐漸增加，而甘氨酸的濃度在發(fā)酵過程中變化不大。
該菌株能產(chǎn)生并分泌植物激素，主要為生長(zhǎng)素(IAA)、赤霉素A3(GA3)和細(xì)胞分裂素(玉米素核苷ZR、異戊烯基腺嘌呤IPA)，含量分別為0.54-3.77nmol/ml、0.19-2.97nmol/ml、0.91-2.62nmol/ml、5.49-31.15nmol/ml，IAA、GA3是在該菌生長(zhǎng)的穩(wěn)定期后期產(chǎn)生的，ZR、IPA則是在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期產(chǎn)生。
4.對(duì)農(nóng)藥抵抗無論在大田農(nóng)藥施用濃度和殘留濃度范圍內(nèi)的丁草胺、綠黃隆、三唑酮粉、多菌靈、馬拉硫磷等農(nóng)藥對(duì)該菌株沒有抑制作用；樂果、甲基1605在大田施用濃度下對(duì)該菌株有一定的抑制作用，而在殘留濃度下無抑制作用；同時(shí)，該菌株對(duì)敵敵畏、三唑酮粉、多菌靈、丁草胺等農(nóng)藥的藥效沒有明顯影響。
以下敘述本發(fā)明的實(shí)施例。
實(shí)施例1 液體制劑將斜面菌種接種于有氮培養(yǎng)基中，培養(yǎng)18小時(shí)后接入種子罐。種子罐為0.5噸，投料量為0.4噸，培養(yǎng)基成分為蔗糖2.0kg，(NH4)2SO40.25kg，KH2PO40.7kg，MgSO40.17kg，NaCl0.07kg，CaCO30.4kg，酵母膏0.2kg。種子罐須先用蒸汽滅菌并冷卻至28-30℃，接種量為5％，種子罐培養(yǎng)溫度控制在28-32℃，攪拌速度為220轉(zhuǎn)/分，無菌空氣通入量為1∶0.8，培養(yǎng)20小時(shí)后將種子液接入生產(chǎn)罐。生產(chǎn)罐為7噸，投料量為4.5噸，培養(yǎng)基成分為蔗糖8kg，淀粉18kg，(NH4)2SO44.5kg，KH2PO49.0kg，MgSO42.3kg，NaCl0.9kg，CaCO34.5kg，酵母膏0.9kg。生產(chǎn)罐預(yù)先用蒸汽滅菌并冷卻至28-30℃，培養(yǎng)溫度控制在28-32℃，攪拌速度為250轉(zhuǎn)/分，無菌空氣通入量為1∶0.8。培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)液中菌體數(shù)量達(dá)到10億/ml以上。培養(yǎng)液即可為制劑。
實(shí)施例2 粉劑將實(shí)施例1所得的培養(yǎng)液用草炭吸附，培養(yǎng)液與草炭之比為1∶3.5，攪拌混合、粉碎，即得制劑。
實(shí)施例3 對(duì)棉花的增產(chǎn)試驗(yàn)在密度、氮磷肥用量、載培管理措施相同的前提下，設(shè)不施鉀(CK)，施鉀(K2O)150.0、262.5、375.0kg/hm2以及實(shí)施例1所得的硅酸鹽菌劑與滅活硅酸鹽菌劑各3000ml/hm2等6個(gè)處理，小區(qū)面積20平方米，隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每個(gè)處理重復(fù)4次。土壤類型為潴育型水稻土，有機(jī)質(zhì)15.1g/kg，全鉀21g/kg，速效鉀122.4mg/kg，，pH8.0。栽培方式為移栽地膜棉；行距127cm，株距33cm，植株密度4.68萬/hm2；肥料運(yùn)籌為5月10日施碳銨(折氮93.75kg/hm2)和過磷酸鈣600 kg/hm2作定植肥，7月11日施第1次花鈴肥(碳銨，折氮112.5kg/hm2)，7月31日施2次花鈴肥(用量同第1次)，蓋頂肥未施用，常規(guī)管理。結(jié)果如表2，可知施硅酸鹽菌劑3000ml/hm2，皮棉產(chǎn)量可達(dá)841.9kg，比不施鉀增產(chǎn)9.05％，差異達(dá)極顯著水平。
實(shí)施例4 對(duì)辣椒的促生作用設(shè)對(duì)照，KCl，實(shí)施例1所得的制劑、滅活實(shí)施例1所得制劑4個(gè)處理，3個(gè)重復(fù)。每缽加土3kg，土壤類型為黃棕壤，有機(jī)質(zhì)11.56g/kg，全氮1.14g/kg，全鉀12.81g/kg，速效鉀51.20mg/kg，pH6.6。每缽施入0.98g尿素，0.92g過磷酸鈣，再按各處理要求分別加0.1g KCl，實(shí)施例1所得的制劑3ml或滅活菌劑。拌勻后移栽辣椒三葉期苗，每缽加去離子水900mL。按常規(guī)管理，注意補(bǔ)充水分和病蟲害防治，同時(shí)測(cè)定原始對(duì)照土樣的本底值。結(jié)果如表3，施硅酸鹽菌劑后，植株速效鉀含量高于對(duì)照和滅活菌劑的處理，說明該制劑將部分鉀礦物轉(zhuǎn)化為有效鉀供植株吸收利用。從植株長(zhǎng)勢(shì)看，施菌劑的株高高于對(duì)照。
實(shí)施例5 對(duì)水稻的抗病增產(chǎn)效果供試土壤為砂壤土，肥力中等，前茬都為三麥，供試面積2.9畝。供試品種為雜交粳稻，秧齡45天，移栽10天后以實(shí)施例2所得的粉劑0.5公斤撒施，栽前畝施尿素10公斤，過磷酸鈣40公斤做基肥，后有追碳銨50公斤，定點(diǎn)定期考察，單收單打。試驗(yàn)結(jié)果見表4。施用該制劑后，水稻紋枯病、稻瘟病發(fā)病率降低，增產(chǎn)8.5％。
實(shí)施例6 對(duì)大白菜用地土壤肥力的培育將實(shí)施例2制得的粉劑與40％有機(jī)肥、適量化學(xué)N、P、K肥同時(shí)施用，作為基肥，以25％葉菜類有機(jī)無機(jī)復(fù)混肥等作對(duì)照。供試土壤為黃泥土，小區(qū)面積為47.5cm2。供試品種為大白菜改良青雜三號(hào)，育苗移栽，收獲后對(duì)種植前后的土樣進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表5。該制劑與有機(jī)、無機(jī)肥混用后，可以使土壤在種植前后保持穩(wěn)定的氮磷鉀肥力，有效磷、鉀甚至還分別增加9-14、16-35mg/kg土。
實(shí)施例7 提高苞菜品質(zhì)將實(shí)施例2制得的粉劑與40％有機(jī)肥、適量化學(xué)N、P、K肥同時(shí)施用，作為基肥，以25％葉菜類無機(jī)復(fù)混肥等作對(duì)照。供試土壤為馬肝土，小區(qū)面積為22.4m2。供試品種為苞菜中甘11號(hào)，育苗移栽，第一次采收后對(duì)鮮樣進(jìn)行品質(zhì)分析，結(jié)果見表6。該制劑與有機(jī)、無機(jī)肥混用后，苞菜硝酸鹽含量降低18.6％，可溶性糖和維生素C分別增加0.19％、22.7％。
實(shí)施例8 對(duì)鉀具有保蓄作用取菜園土45kg，設(shè)不滅菌土壤和滅菌土壤兩組，每組設(shè)不加菌(加無菌去離子水)、加實(shí)施例1所得的硅酸鹽菌劑和加滅活實(shí)施例1所得硅酸鹽菌劑各20ml三個(gè)處理。在無菌條件下水、菌、土混勻裝柱(柱高50cm，內(nèi)徑5cm)，每柱裝土1.5kg，接菌處理的柱子在28℃恒溫室中培養(yǎng)7天。然后分別用200ml 0.1M KCl溶液滴注于土柱上，同時(shí)收集濾液，用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定濾液中的鉀濃度。結(jié)果如下表7。可知，加菌劑處理流失的鉀比對(duì)照減少48.1-56.5％。
實(shí)施例9 可與農(nóng)藥混用共施選擇2種殺蟲劑(敵敵畏、馬拉硫磷)、2種殺菌劑(多菌靈、三唑酮)及1種除草劑(丁草胺)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。將0.1ml實(shí)施例1所得的硅酸鹽菌劑分別加入到上述5種農(nóng)藥40ml中，菌藥混合，28℃振蕩培養(yǎng)30小時(shí)。對(duì)于殺蟲劑以菜青蟲為作用對(duì)象，采用點(diǎn)滴法，將上述不同處理的混合液分別等量滴于蟲體上，隨時(shí)觀察蟲體活動(dòng)情況；對(duì)于殺菌劑，分別用水稻紋枯病菌和小麥赤銹病菌為作用對(duì)象，將不同處理的混合液分別加到PDA平板上(每皿0.3ml)，然后接上供試病原菌，28℃培養(yǎng)3天后觀察；對(duì)于除草劑，以稗草為作用對(duì)象，將稗草種子放入墊有濾紙的平皿中，加去離子水催芽，待萌芽后，分別加入不同處理的混合液0.3ml，室溫下觀察稗草生長(zhǎng)情況。結(jié)果見表8，該菌劑均未對(duì)供試農(nóng)藥的藥效產(chǎn)生明顯的影響。由此可知，供試農(nóng)藥與該菌劑混用，既不會(huì)抑制其中的菌劑活性，又不會(huì)使其中的農(nóng)藥藥效受到影響，可以達(dá)到降低勞動(dòng)強(qiáng)度的目的。
表1 該菌株的生理生化特征和在不同碳源、氮源下的生長(zhǎng)情況生理生化性狀 結(jié)果碳源 生長(zhǎng) 氮源生長(zhǎng)情況 情況過氧化氫酶反應(yīng)+ D(+)-蔗糖++- 甘氨酸 +革蘭氏染色反應(yīng)*- D(+)-葡萄糖 +++-L-絲氨酸 +甘油產(chǎn)二羥丙酮- D(+)-果糖++- L-纈氨酸 +卵磷脂水解- D(+)-阿拉伯 ++- L-賴氨酸 +糖產(chǎn)生吲哚 + D(+)-乳糖+- L-天冬氨酸 +M.R - D(+)-麥芽糖 ++- L-亮氨酸 +V.P(pH) + D(+)-木糖++- L-異亮氨酸 +(6.2)硝酸鹽還原- D(+)-山梨糖 +- L-苯丙氨酸 +酪素水解 - D(+)-甘露醇 +- 精氨酸 +厭氧硝酸鹽產(chǎn)氣- 淀粉水解 + DL-甲硫氨 +酸明膠液化 + 纖維素 - L-酪氨酸 +酪氨酸水解- 羧甲基纖維 - L-脯氨酸 +素1％NaCl - 腐殖酸 + L-蘇氨酸 +肉湯培養(yǎng)基生長(zhǎng) -半乳糖+L-丙氨酸 +鼠李糖+鹽酸硫胺 +維生素B12+6-芐氨基嘌 -呤*革蘭氏染色反應(yīng)為18小時(shí)幼齡菌的反應(yīng)。+-產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。+陽性，生長(zhǎng)。-陰性，不生長(zhǎng)。
表2硅酸鹽菌劑對(duì)棉花的增產(chǎn)效果處理 皮棉產(chǎn)量/kg·hm-2KCl 375kg/hm2917.6(aA)KCl 262.5kg/hm2857.3(bB)菌劑3000ml/hm2841.9(bB)KCl 150kg/hm2801.3(cC)滅活菌劑3000ml/hm2786.3(dC)對(duì)照CK 772.1(dC)注a，b，c，d(p＜0.05)A，B，C(p＜0.01)表3 盆栽辣椒植株及收獲后土壤中的鉀(K)含量處理 土壤全鉀/g 土壤速效鉀 株高 植株鉀/mg·kg-1/mg·kg-1/cm ·kg-1對(duì)照 14.33 62.718.6 19.7滅活硅酸 14.18 56.421.4 19.1鹽菌劑硅酸鹽菌 14.06 71.528.9 24.7劑表4對(duì)水稻的抗病增產(chǎn)效果處理 基 有 分 紋 稻 穗 穗 結(jié) 千 理 實(shí) 增本 效 蘗 枯 瘟 粒 實(shí) 實(shí) 粒 論 產(chǎn) 產(chǎn)苗 穗 穗 病 病 數(shù) 粒 率 重 產(chǎn) 公 率萬/ 萬/ 成 發(fā) 發(fā) 數(shù) 克 公 斤/ ％畝 畝 率 病 病 斤/ 畝％ 率 率 畝硅酸 3.6 15. 52. 5.7 3.8 130 108 83. 37. 594鹽粉 2 66 1 .87 .9 21 3 .25劑對(duì)照 3.5 15. 51. 9.4 6.2 125 100 79. 36. 5479 17 3 .6 .2 73 2 .5比對(duì) 0.4 +0. - - +5. +7. +3. +1. +4 8.5照增 9 7 3.7 2.6 24 74 47 1 6.8減表5 大白菜用地土樣分析結(jié)果
表6 苞菜品質(zhì)分析表
表7 硅酸鹽菌劑的保鉀作用處理 濾液中的 占加入鉀的加菌劑處理流失的鉀(g) 量(％)鉀比對(duì)照減少量(％)菜園土 0.2812.8 -菜園土+滅活硅酸鹽菌 0.2734.6 -劑菜園土+硅酸鹽菌劑0.1417.9 48.1滅菌菜園土 0.2430.7 -滅菌菜園土+滅活硅酸 0.2329.5 -鹽菌劑滅活菜園土+硅酸鹽菌 0.1015.4 56.5劑表8 硅酸鹽菌劑對(duì)農(nóng)藥藥效的影響處理菜青蟲 赤銹病菌 紋枯病稗草菌80％敵敵畏乳劑 +80％敵敵畏乳劑+菌液+65％馬拉硫磷乳劑 +65％馬拉硫磷乳劑+菌液 +20％三唑酮+20％三唑酮+菌液 +50％多菌靈 +50％多菌靈+菌液+60％丁草胺乳劑 +60％丁草胺乳劑+菌液+0.1ml菌劑 - -- -注各種藥劑均40ml。菌液0.1ml。
權(quán)利要求
1.一種硅酸鹽細(xì)菌，其特征在于該菌是土壤芽胞桿菌(Bacillusedaphicus)的NBT菌株，2000年12月13日在武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，保藏號(hào)為CCTCCNo.M200040。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種硅酸鹽細(xì)菌，其特征在于該菌株在玻璃粉培養(yǎng)基和蔗糖無氮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，單個(gè)菌落呈半玻璃珠狀，邊緣整齊，表面濕潤光滑，有光澤，隆起，無色透明；菌體為長(zhǎng)桿狀(1.0-1.5×3-5μm)，兩端鈍圓，幼齡時(shí)周生鞭毛，革蘭氏反應(yīng)陰性(可變)，菌體外有肥厚的莢膜，菌體內(nèi)有1-2個(gè)顆粒體；老培養(yǎng)物能形成芽胞，芽胞橢圓形，位于孢囊中部，孢囊不膨大。
3.一種含有權(quán)利要求1或2所述硅酸鹽細(xì)菌的生物鉀肥，其特征是液體制劑含有效菌數(shù)為10億個(gè)以上/毫升，固體制劑含有效菌數(shù)2億個(gè)以上/克。
全文摘要
本發(fā)明一種硅酸鹽細(xì)菌,該菌是土壤芽胞桿菌(Bacillus edaphicus)的NBT菌株,保藏號(hào)為CCTCCNo.M200040。菌體為長(zhǎng)桿狀(1.0－1.5×3－5μm),兩端鈍圓,幼齡時(shí)周生鞭毛,革蘭氏反應(yīng)陰性(可變),菌體外有肥厚的莢膜,菌體內(nèi)往往有1－2個(gè)顆粒體。老培養(yǎng)物能形成芽胞,芽胞橢圓形,位于孢囊中部,孢囊不膨大。能水解淀粉,明膠液化,使牛奶胨化,使石蕊褪色。具有高效分解釋放礦物和土壤中鉀、磷,固定空氣中的氮素,產(chǎn)生多種生理活性物質(zhì)的能力。以該細(xì)菌為有效成分的生物鉀肥,可改善作物鉀素營養(yǎng),提高作物產(chǎn)量和品質(zhì),改良土壤。
文檔編號(hào)C05F11/08GK1379083SQ0111031
公開日2002年11月13日 申請(qǐng)日期2001年4月3日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月3日
發(fā)明者殷永嫻, 黃為一, 何琳燕 申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)