專(zhuān)利名稱(chēng)：抗微生物劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗微生物劑。更準(zhǔn)確地講，本發(fā)明涉及一系列脫水果糖衍生物的抗微生物活性。
各種原因造成的食物腐敗見(jiàn)于文獻(xiàn)中，已知各種化學(xué)藥品可抑制一種原因造成的各方面的降解。已知降解和新鮮割傷植物部分顏色或香味的喪失是由于氧化作用、酶、微生物和金屬離子引起的。例如，已知酸化劑通過(guò)保持相對(duì)低pH環(huán)境可防止微生物降解，但其有效性?xún)H僅是暫時(shí)性的。
單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)是可以污染某些食物的生物的一個(gè)例子，所述細(xì)菌表現(xiàn)出對(duì)多種理化處理有抗性。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種主要在免疫妥協(xié)患者和新生兒中引起嚴(yán)重感染的革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌。腦膜炎和菌血癥都是李斯特菌病最為常見(jiàn)的表現(xiàn)形式。
蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)是食物中毒的另一種常見(jiàn)病因。已鑒定出兩種不同的臨床綜合征，第一種具有約4小時(shí)的短潛伏期，第二種的潛伏期約為17小時(shí)。蠟狀芽孢桿菌食物中毒當(dāng)孢子形成沒(méi)有烹調(diào)殺死時(shí)且讓污染食物達(dá)到允許所述孢子萌發(fā)和釋放腸毒素的溫度時(shí)發(fā)生。
其中有2000多種不同菌株的沙門(mén)氏菌屬(Salmonella)，是人類(lèi)食物中毒的另一病因。沙門(mén)氏菌屬是棒狀革蘭氏陰性腸桿菌科(Enterobacteriaceae)中的一個(gè)屬，它在腸內(nèi)定居且引起各種感染例如胃腸炎和傷寒。當(dāng)侵入時(shí)，它們可以引起傷寒(例如，由傷寒沙門(mén)氏菌(Salmonella typhi)引起的傷寒或由副傷寒沙門(mén)氏菌(Salmonellaparatyphi)引起的副傷寒)。沙門(mén)氏菌屬中的其它菌株與食物中毒有關(guān)(通常是鼠傷寒沙門(mén)氏菌(Salmonella Typhimurium)、巴拿馬沙門(mén)氏菌(Salmonella panama)或腸炎沙門(mén)氏菌(Salmonella Enteritidis)，后者是眾所周知的家禽污染物)且偶爾在非腸組織中引起敗血癥。
本領(lǐng)域眾所周知的是，沙門(mén)氏菌屬不能在pH值低于4.5的情況下繁殖。因此，弱酸性制品例如精制食品和非發(fā)酵肉制品對(duì)沙門(mén)氏菌屬的攻擊尤其敏感。
對(duì)于肉制品，通常用亞硝酸鹽作為防腐劑。然而，亞硝酸鹽的添加由于其有毒而受到限制(由于其急性毒性以及有與亞硝胺生成相關(guān)的危險(xiǎn)性)。由于沙門(mén)氏菌屬僅在亞硝酸鹽濃度超過(guò)1,000ppm才被抑制，而這遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)法規(guī)的限制。
然而，已經(jīng)顯示亞硝酸鹽和山梨酸的組合可以增加對(duì)沙門(mén)氏菌屬的有效性[亞硝酸鈉和山梨酸鉀可抑制沙門(mén)氏菌屬，載于Frankfurters，Journal of Food Science，47，1982，第1615 ff頁(yè)]。在濃度超過(guò)50ppm的亞硝酸鹽聯(lián)用2600ppm山梨酸時(shí)已經(jīng)觀察到抑制作用。
諸如細(xì)菌素(Nisin)的其它試劑不能抑制食物中的沙門(mén)氏菌屬，而苯甲酸由于只能在酸性制品中觀察到抑制效應(yīng)而不太適用。也測(cè)試了從不同諸如得自不同香料的油提取物的植物成分(“天然物質(zhì)”)的抑制效應(yīng)，但是再次證明達(dá)到對(duì)沙門(mén)氏菌屬的抑制效應(yīng)的所需濃度太高，而且對(duì)食物的感官影響太強(qiáng)。
因此，迄今為止，化學(xué)物質(zhì)的應(yīng)用因?yàn)橐韵略蚨鴩?yán)重受限一方面，根據(jù)毒理學(xué)觀點(diǎn)它們必須是安全的，而另一方面，它們必須在感官上不影響所述產(chǎn)品。
本發(fā)明力圖解決與現(xiàn)有技術(shù)化學(xué)物質(zhì)相關(guān)的問(wèn)題，提供基于脫水果糖衍生物的新型抗微生物組合物。具體地說(shuō)，本發(fā)明力圖提供適合用于食品/飼料的抗微生物劑。
在第一個(gè)方面，本發(fā)明提供包含具有式I的環(huán)狀化合物的抗微生物組合物， 其中R1和R2獨(dú)立地選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基；其中R3選自-OH、＝O、包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基；其中R4和R5各自獨(dú)立地選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基或者其中R4和R5代表與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中所述化合物包含至少一個(gè)酯基。
本發(fā)明的第二個(gè)方面提供一種防止和/或抑制某種物質(zhì)中微生物生長(zhǎng)和/或殺死所述微生物的方法，所述方法包括將所述物質(zhì)與具有式I的環(huán)狀化合物接觸的步驟， 其中R1和R2獨(dú)立地選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基；其中R3選自-OH、＝O、包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基；其中R4和R5各自獨(dú)立地選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基或者其中R4和R5代表與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中所述化合物包含至少一個(gè)酯基。
在第三個(gè)方面，本發(fā)明涉及具有式I的化合物在防止和/或抑制某種物質(zhì)中微生物生長(zhǎng)和/或殺死所述微生物中的應(yīng)用， 其中R1和R2獨(dú)立地選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基；其中R3選自-OH、＝O、包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基；其中R4和R5各自獨(dú)立地選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基或者其中R4和R5代表與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中所述化合物包含至少一個(gè)酯基。
人們將會(huì)認(rèn)識(shí)到，術(shù)語(yǔ)“酯基”是指式X-C(O)O-Y的基團(tuán)，其中X和Y均為烴基。
所述物質(zhì)最好是食品或飼料。因此，在一個(gè)優(yōu)選的方面，本發(fā)明涉及適合用于食品和/或飼料中的抗微生物物質(zhì)，以抑制食物中毒和其中所含有的腐敗菌。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述物質(zhì)是家用品、機(jī)體護(hù)理品或化妝品例如花露水。
作為定義，術(shù)語(yǔ)“抗微生物劑”是指殺死或防止或抑制微生物生長(zhǎng)或繁殖的物質(zhì)?？刮⑸飫┮话阋勒账鼈冇行У挚沟奈⑸镱?lèi)型來(lái)分類(lèi)。例如，抗細(xì)菌物質(zhì)有效抵抗細(xì)菌，抗真菌物質(zhì)有效抵抗包括酵母在內(nèi)的真菌，而抗病毒物質(zhì)有效抵抗病毒。某些抗微生物劑可以在體內(nèi)使用例如抗生素類(lèi)藥物，而其它抗微生物劑僅可外用例如防腐劑。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“烴基”是指包含至少C和H的基團(tuán)并且可以任選包含一個(gè)或多個(gè)其它合適的取代基。這類(lèi)取代基的實(shí)例可包括鹵基-、烷氧基-、硝基-、羥基、羧基、環(huán)氧基、丙烯基、烴基、N-?；颦h(huán)基等等。除所述取代基可為環(huán)基外，所述取代基的組合也可以形成環(huán)基。如果烴基包含不止一個(gè)C，則那些碳不一定需要相互連接。例如，所述碳中至少2個(gè)可以通過(guò)合適的元素或基團(tuán)連接。因此，烴基可以含有雜原子。合適的雜原子對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的，包括例如硫、氮和氧。
在一個(gè)更優(yōu)選的方面，本發(fā)明的環(huán)狀化合物是具有式II的化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5如上文限定。
優(yōu)選所述環(huán)狀化合物是具有式III的化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5如上文限定。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述環(huán)狀化合物為式IV化合物， 其中R1和R2獨(dú)立地選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基；其中R3選自-OH、＝O、包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基；其中R4和R5各自獨(dú)立地選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基或者其中R4和R5代表與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中R6和R7各自獨(dú)立地選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基，或者其中R4和R5代表與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中所述化合物包含至少一個(gè)酯基。
更優(yōu)選所述環(huán)狀化合物為式V化合物， 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7如上文限定。
優(yōu)選R1選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基。
優(yōu)選R2選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基。
優(yōu)選R3選自包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基。
甚至更優(yōu)選R3為-OC(O)R’，其中R’為H或烴基。
甚至更優(yōu)選R3為-OC(O)R’，其中R’為烴基。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R3為-OC(O)R’，其中R’為R”基團(tuán)。
優(yōu)選R’和/或R”為支鏈或直鏈、取代或未取代的烷基。
更優(yōu)選R’和/或R”為(CH2)pCH3，其中p為1-24。
甚至更優(yōu)選R’和/或R”為C8烷基。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R’和/或R”為C12烷基。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R’和/或R”為C16烷基或C18烷基。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R3為式-(CH2)n-OC(O)-(CH2)pCH3，其中n和p各自獨(dú)立地為1-24。
更優(yōu)選R3為式-(CH2)n-OC(O)-(CH2)7CH3，其中n為1-24、最好是1-20、最好是1-10、最好是1-5或者最好是1、2或3。
在一個(gè)替代優(yōu)選實(shí)施方案中，R3為式-(CH2)n-OC(O)-(CH2)11CH3，其中n為1-24、最好是1-20、最好是1-10、最好是1-5或者最好是1、2或3。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基。
在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4選自烴基、H、OH和＝O。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R5選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基。
在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，R5選自烴基、H、OH和＝O。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4和R5代表與所述環(huán)狀化合物環(huán)上與相鄰原子的化學(xué)鍵。
在一個(gè)尤其優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述化合物被酯化為脫水果糖，其中脫水果糖的至少一個(gè)OH基團(tuán)被酯化，形成-OC(O)R基團(tuán)，其中R為烴基。
優(yōu)選R為支鏈或直鏈、取代或未取代的烷基。
甚至更優(yōu)選R為(CH2)pCH3，其中p為1-24。
再更優(yōu)選R為C8烷基。
在一個(gè)替代優(yōu)選實(shí)施方案中，R為C12烷基。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R為C16烷基或C18烷基。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述環(huán)狀化合物為下式化合物 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，環(huán)狀化合物為下式化合物 更優(yōu)選所述環(huán)狀化合物選自以下化合物 更優(yōu)選所述環(huán)狀化合物選自以下化合物 優(yōu)選本發(fā)明的化合物為殼二孢吡喃酮(Ascopyrone)P、殼二孢吡哺酮M、殼二孢吡喃酮T、殼二孢吡喃酮T1、殼二孢吡喃酮T2、殼二孢吡喃酮T3的衍生物和它們的混合物的衍生物。
甚至更優(yōu)選本發(fā)明的化合物選自酯化殼二孢吡喃酮P、酯化殼二孢吡喃酮M、酯化殼二孢吡喃酮T、酯化殼二孢吡喃酮T1、酯化殼二孢吡喃酮T2、酯化殼二孢吡喃酮T3和它們的混合物。
殼二孢吡喃酮P、殼二孢吡喃酮M、殼二孢吡喃酮T、殼二孢吡喃酮T1、殼二孢吡喃酮T2和殼二孢吡喃酮T3的結(jié)構(gòu)如下所示。 殼二孢吡喃酮M殼二孢吡喃酮P殼二孢吡喃酮T 殼二孢吡喃酮T1殼二孢吡喃酮T2殼二孢吡喃酮T3殼二孢吡喃酮是一種已知的化合物。在1978和1981年，一個(gè)美國(guó)科學(xué)家小組為了應(yīng)用殼二孢吡喃酮P作為有機(jī)合成的原材料而在Montana的Wood Chemistry laboratory通過(guò)熱解膠淀粉、直鏈淀粉和纖維素來(lái)制備殼二孢吡喃酮P[Shafizadeh，F(xiàn).，F(xiàn)urneaux R.H.，Stevenson，T.T.和Cochran，T.G.，1，5-脫水-4-脫氧-D-甘油-己-1-烯-3-酮糖和纖維素的其它熱解產(chǎn)物，Carbohydr.Res.67(1978)433-447；Stevenson，T.T.，Stenkmap，R.E.，Jensen，L.H.，Cochran，T.T.，Shafizadeh，F(xiàn).和FurneauxR.H.，1，5-脫水-4-脫氧-D-甘油-己-1-烯-3-酮糖的晶體結(jié)構(gòu)，Carbohydr.Res.90(1981)319-325]。他們通過(guò)例如1H和13C NMR以及IR光譜學(xué)技術(shù)表征了殼二孢吡喃酮P。提供了殼二孢吡喃酮P的三維結(jié)構(gòu)。通過(guò)熱解獲得的殼二孢吡喃酮P的收率低于3％并且必須使用復(fù)雜的分離方法。
關(guān)于殼二孢吡喃酮P天然存在于得自Alps的非常少研究的真菌的某些種型中已有陳述[M.-A.Baute，G.Deffieux，J.Vercauteren，R.Baute和Badoc A.，盤(pán)菌目和塊菌目酶活性降解1，4-α-葡聚糖為殼二孢吡喃酮P和殼二孢吡喃酮T(Enzymatic activity degrading 1，4-α-glucans toAscopyrones P and T in Pezizales ad Tuberales)，Phytochemistry，33(1993)41-45]。真菌中存在的殼二孢吡喃酮P立刻使人提出殼二孢吡喃酮P可作為抗生素使用的假說(shuō)。然而，在所公開(kāi)的試驗(yàn)中殼二孢吡喃酮P作為抗生素使用并不令人滿(mǎn)意。
殼二孢吡喃酮P和殼二孢吡喃酮T可以采用從以下真菌制備的無(wú)細(xì)胞提取物從1，5-脫水-D-果糖酶法生產(chǎn)盤(pán)菌目(Pezizales)例如Plicaria leiocarpa和Anthracobia melaloma以及塊菌目(Tuberales)例如黑孢塊菌(Tuber melanosporum)。殼二孢吡喃酮T1是殼二孢吡喃酮T的二水合物形式，而殼二孢吡喃酮T2和殼二孢吡喃酮T3是殼二孢吡喃酮T的互變異構(gòu)體一水合物形式。
殼二孢吡喃酮M可以通過(guò)從以下真菌分離的EDTA敏感的脫水酶從1，5-脫水-D-果糖來(lái)生產(chǎn)羊肚菌例如Morchella vulgaris、鹿花菌屬(Gyromitres)、盤(pán)菌(pezizes)例如Peziza echinospora。
殼二孢吡喃酮M、P和T也可以在溫和條件下通過(guò)用堿處理1，5-脫水-D-果糖來(lái)化學(xué)生產(chǎn)[對(duì)某些戊糖和1，5-脫水-D-果糖降解、淀粉降解酶a-1，4-葡聚糖裂合酶產(chǎn)物的研究(Studies on the degradation of somepentoses and of 1，5-anhydro-D-fructose，the product of the starch-degrading enzyme a-1，4-glucan lyase)；Ahmad，T.的論文，The SwedishUniversity of Agricultural Sciences，Sweden，1995]。
當(dāng)通過(guò)化學(xué)方法制備本發(fā)明的化合物時(shí)，可以按照任一下述方法制備所述化合物(1)殼二孢吡喃酮P可以在溫度升高的情況下例如在70℃下通過(guò)用非水酸處理1，5-脫水-D-果糖來(lái)生產(chǎn)。
(2)殼二孢吡喃酮(例如殼二孢吡喃酮P、T和M)可以通過(guò)依照Ahmad，T.，1995的堿處理法從1，5-脫水-D-果糖來(lái)生產(chǎn)。
所生產(chǎn)的所有殼二孢吡喃酮的結(jié)構(gòu)都通過(guò)NMR技術(shù)加以證實(shí)。
本發(fā)明的化合物最好通過(guò)如M.-A.Baute等，[Phytochemistry，33(1993)41-45)中公開(kāi)的酶法來(lái)制備。例如可以采用如M.-A.Baute等公開(kāi)的酶法從1，5-脫水-D-果糖生產(chǎn)殼二孢吡喃酮(例如殼二孢吡喃酮P、T和M)。
在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述化合物選自以下化合物或其酯化衍生物 在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，具有式I的環(huán)狀化合物具有針對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和酵母的抗微生物效應(yīng)。
優(yōu)選具有式I的環(huán)狀化合物具有針對(duì)選自以下的微生物的抗微生物效應(yīng)李斯特氏菌屬(Listeria)、沙門(mén)氏菌屬、芽孢桿菌屬(Bacillus)、酵母屬(Saccharomyces)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、梭菌屬(Clostridium)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、索絲菌屬(Brochothrix)、微球菌屬(Micrococcus)、耶爾森氏菌屬(Yersinia)、腸桿菌屬(Eterobacter)和接合酵母屬(Zygosaccharomyces)、葡萄球菌屬(Staphylococcus)、埃希氏菌屬(Escherichia)。
甚至更優(yōu)選具有式I的環(huán)狀化合物具有針對(duì)選自以下的微生物的抗微生物效應(yīng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、大腸桿菌(E.coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、無(wú)害李斯特氏菌(Listeria innocua)、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、沙門(mén)氏菌(Salmonella sp.)、蠟狀芽孢桿菌、枯草桿菌(Bacillus subtilis)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、釀酒酵母奇異變種(Saccharomyces cerevisiae var.paradoxus)、卡爾酵母(Saccharomyces carlsbergensis)、熒光假單胞菌(Pseudomonasfluorescens)、生孢梭菌(Clostridium sporogenes)、清酒乳桿菌(Lactobacillus sake)、熱殺索絲菌(Brochothrix thermosphacta)、藤黃微球菌(Micrococcus luteus)、小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌(Yersiniaenterocolitica)、產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes)和拜耳接合酵母(Zygosaccharomyces bailii)。
甚至更優(yōu)選具有式I的環(huán)狀化合物具有針對(duì)選自以下的微生物的抗微生物效應(yīng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、大腸桿菌、蠟狀芽孢桿菌、釀酒酵母、卡爾酵母、熒光假單胞菌、生孢梭菌、清酒乳桿菌、熱殺索絲菌和藤黃微球菌。
在一個(gè)高度優(yōu)選的方面，式I化合物的衍生物為下式化合物 該化合物(3，6-二-O-乙?；?1，5-脫水-4-脫氧D-甘油-己-3-烯醇吡喃糖-2-酮糖)可以按照Andersen等(1998)(1，5-脫水-D-果糖的結(jié)構(gòu)晶態(tài)乙?；垠w形式的X射線(xiàn)分析，J.Carbohydr.Chem.171027-1035)所述方法來(lái)制備。
本發(fā)明該方面特別優(yōu)選的是其中式I化合物的衍生物為酯，因?yàn)樗龌衔锟梢詾橛H脂性的和/或可以既具有疏水特性又具有親水特性。當(dāng)所述化合物既具有疏水特性又具有親水特性時(shí)，所述化合物容易地存在于乳劑的水/油界面。
所述化合物存在于乳劑的水/油界面可以使其作為乳化劑起作用。因此，本發(fā)明可以進(jìn)一步提供具有雙功能效應(yīng)的化合物。所述化合物既可以用作抗微生物劑又可以用作乳化劑。
許多本發(fā)明的化合物可以衍生自1，5-脫水果糖。1，5-脫水果糖是存在于細(xì)菌、紅藻、真菌和哺乳動(dòng)物中的單酮糖。在紅藻和真菌中，通過(guò)α-1，4-葡聚糖裂合酶[EC 4.2.2.13]的作用分別從紅藻淀粉和糖原產(chǎn)生1，5-脫水果糖。
當(dāng)從1，5-脫水-D-果糖制備本發(fā)明化合物時(shí)，1，5-脫水-D-果糖最好是依照GB-A-2296717來(lái)制備。換句話(huà)說(shuō)，1，5-脫水-D-果糖最好通過(guò)包括用所述酶α-1，4-葡聚糖裂合酶處理α-1，4-葡聚糖的方法來(lái)制備，其特征為使用基本純形式的所述酶。
本發(fā)明的環(huán)狀化合物最好包含五元環(huán)或六元環(huán)。
本發(fā)明的化合物包含至少一個(gè)酯基。因此，本文所用的術(shù)語(yǔ)“酯”包括單酯、二酯、三酯和多酯。
在一個(gè)優(yōu)選的方面，式I化合物是二酯，其中R1取代基是-OH基團(tuán)，其中由R4取代基的-OH基團(tuán)和R3取代基的-OH基團(tuán)形成所述酯鍵。
如上所述，在本發(fā)明一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述化合物是如下所示的6-O-?；?1，5-脫水-D-果糖。 6-O-?；?1，5-脫水-D-果糖的制備可以依照WO 00/56745中詳述的方法通過(guò)化學(xué)方法或通過(guò)酶法來(lái)完成。
所述化學(xué)方法可以包括以下反應(yīng)，以合成脫水果糖的C12酯 所述反應(yīng)用月桂酰氯和吡啶來(lái)進(jìn)行。?；稽c(diǎn)通過(guò)NH2OR衍生化后產(chǎn)物的分離和NMR來(lái)確定。已發(fā)現(xiàn)所述產(chǎn)物為50％ 6-O-?；?1，5-脫水-D-果糖11％ 3-O-酰基-1，5-脫水-D-果糖可以使用類(lèi)似的方法來(lái)制備脫水果糖的其它酯衍生物。
制備6-O-?；?1，5-脫水-D-果糖的酶學(xué)方法可以包括脂酶和蛋白酶的應(yīng)用。在水溶液中，脂酶和蛋白酶可切割酯鍵。脂酶是糖特異性的，而蛋白酶是脂肪酸特異性的。然而，Synthesis 1990，112-115公開(kāi)了脂酶和蛋白酶在非水溶液中可提供活性的逆轉(zhuǎn)，從而形成酯鍵。因此可以用非水溶液中的脂酶和蛋白酶制備按照本發(fā)明的化合物。
按照J(rèn).Chem.Soc.Perkin Trans.I，1995，2203-2222，對(duì)脂酶進(jìn)行篩選以鑒定用于制備按照本發(fā)明化合物的合適脂酶。用吡啶篩選鑒定了Candida antarctica、洋蔥假單胞菌(Pseudomonas cepacia)、熒光假單胞菌和豬胰腺。用叔丁醇∶吡啶為2∶1篩選鑒定了Candida antarctica、Candida cylindrace、洋蔥假單胞菌、熒光假單胞菌、豬胰腺。
因此，按照本發(fā)明的化合物最好用從Candida antarctica、洋蔥假單胞菌、熒光假單胞菌、豬胰腺和Candida cylindrace中獲得的脂酶來(lái)制備。
按照本發(fā)明的化合物最好用從Candida antarctica中獲得的脂酶來(lái)制備。Candida antarctica可得自Novo Nodisk A/S，丹麥，商品名為Novozym 435。
所述酶法通過(guò)用月桂酸酶促?；?，5-脫水-D-果糖生成6-O-?；?1，5-脫水-D-果糖加以證實(shí)。
所述化學(xué)方法可以包括用月桂酸、棕櫚酸和硬脂酸如下將1，5-脫水-D-果糖定量轉(zhuǎn)化為6-O-酰基-1，5-脫水-D-果糖
所述反應(yīng)形成包含單體酮/二聚體1型/二聚體2型-1∶3∶1的組合物。所述混合物可以經(jīng)硅膠色譜純化，得到約70％收率。
本發(fā)明的環(huán)狀化合物可以單獨(dú)使用或與其它組分聯(lián)合使用，所述其它組分例如一種或多種防腐劑、一種或多種螯合劑(例如EDTA鈉鹽、多磷酸鹽或檸檬酸鹽)和/或一種或多種抗氧化劑(例如抗壞血酸、異抗壞血酸、棕櫚酸抗壞血酸酯、BHA或BHT)。
作為定義，在廣義上，術(shù)語(yǔ)“防腐劑”意指包括所有抑制微生物生長(zhǎng)或殺死所述微生物的物質(zhì)。在狹義上，一般理解的是防腐劑以濃度為0.5％或更低濃度使用。有關(guān)除著色劑和甜味劑以外的食品添加劑，在1995年2月20日的European Parliament and Council的RegulationNo.95/2/EG中列出了允許用作防腐劑的食品添加劑。
EU許可的適合與本發(fā)明化合物聯(lián)用的典型食品防腐劑包括山梨酸、苯甲酸、PHB酯(對(duì)羥基苯甲酸酯)和二氧化硫。這些防腐劑的作用模式以及它們的有效范圍如下所述。山梨酸(E200-203)作用模式抑制所述微生物細(xì)胞內(nèi)的各種酶。
有效范圍主要抗酵母和霉菌以及過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性細(xì)菌。不抑制過(guò)氧化氫酶陰性細(xì)菌以及乳酸細(xì)菌和梭菌。
有效濃度500-3000ppm。
食品中的最大許可量馬鈴薯面團(tuán)(potato dough)、加工干酪、包裝面包、精加工焙烤產(chǎn)品、乳化調(diào)味汁等中至多2000ppm。苯甲酸(E210-213)作用模式抑制通過(guò)細(xì)胞膜的氧交換且影響酶結(jié)構(gòu)。
有效范圍僅對(duì)于酸性產(chǎn)品，至多約pH4.5；抑制酵母和霉菌，有限抑制細(xì)菌(沒(méi)有或僅非常微弱地抑制乳酸細(xì)菌和梭菌)。
食品中的最大許可量肉凍、果品、果醬等中至多500ppm。PHB酯(對(duì)羥基苯甲酸酯)(E214-219)作用模式由于表面活性而損傷細(xì)菌膜，由于蛋白質(zhì)變性而對(duì)原生質(zhì)有毒性作用。
有效范圍主要抑制酵母和真菌，但在pH范圍3.0-8.0之間也抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。
有效濃度在濃度超過(guò)約0.08％時(shí)有感官影響。二氧化硫(E220-224；E226-227)作用模式在很大程度上取決于pH，事實(shí)上二氧化硫僅在酸性pH值(＜4，0)時(shí)有效。機(jī)制非常復(fù)雜。
有效范圍主要抗細(xì)菌，尤其抗革蘭氏陰性需氧細(xì)菌。
有效濃度250-500ppm可抑制需氧革蘭氏陰性細(xì)菌，800-2000ppm可抗革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌、酵母和霉菌。
食品中的最大許可量用于家庭葡萄酒釀造的干果、葡萄汁濃縮物中最大2000ppm，在某些情況下，最大許可量?jī)H為20-30ppm。
對(duì)于更為特殊的應(yīng)用，本發(fā)明化合物也可以與以下防腐劑聯(lián)合使用聯(lián)苯、二苯、鄰苯基苯酚、噻苯噠唑、乳鏈菌肽、那他霉素、六亞甲基四胺、二碳酸二甲酯、硼酸、四硼酸鈉、亞硝酸鹽、丙酸和丙酸鹽以及溶菌酶。這些防腐劑的作用模式以及它們的有效范圍和具體應(yīng)用如下所述。聯(lián)苯、二苯(E230)有效范圍抑制霉菌。
用于處理水果的物質(zhì)表面處理柑桔類(lèi)水果。
最大許可量70ppm鄰苯基苯酚(E231/E232)與E230一樣，限于處理水果，如表面處理柑桔類(lèi)水果。噻苯噠唑(E233)表面處理柑桔類(lèi)水果和香蕉。乳鏈菌肽(E234)作用模式擾亂膜功能。
有效范圍革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌無(wú)影響。
食品中的最大許可量(EU)粗面粉布丁和類(lèi)似產(chǎn)品3ppm，成熟干酪和加工干酪12.5ppm(＝12.5IU/g)，凝結(jié)奶油10ppm，馬斯卡朋10ppm。那他霉素(海松素)(E235)作用模式特異性地攻擊細(xì)胞膜，其中一般而言與甾醇相互作用，從而增加膜的通透性。
有效范圍霉菌和酵母，對(duì)細(xì)菌無(wú)效。有效劑量率低于約50mg/l。表面最大濃度為1mg/dm2，最大穿透5mm。
應(yīng)用表面處理硬質(zhì)干酪、半硬質(zhì)干酪和半軟干酪以及干臘腸。六亞甲基四胺(E239)六亞甲基四胺通過(guò)將氨加入至甲醛水溶液中而形成。殺微生物作用由于甲醛所致。
僅許可用于意大利波羅伏洛干酪(25ppm殘留量)。二碳酸二甲酯(E242)僅許可用于非酒精飲料、無(wú)醇果汁酒和液體濃縮物。硼酸、四硼酸鈉(E284/E285)僅許可用于魚(yú)子醬。亞硝酸鹽(E249和E250)許可以亞硝酸鹽腌制用鹽形式用于處理肉制品(“紅色制品”)。用于腌制的不能加熱處理的干燥肉制品以及用于其它腌制的肉制品，按照指南固定添加150ppm。這些濃度顯示起不到防腐作用。主要由于它們的技術(shù)特性(構(gòu)成顏色、味道)以及由于它們的抗氧化作用而將其加入。丙酸和丙酸鹽(E280、E281、E282和E283)作用模式與山梨酸相似，最適pH＜4.5。
在細(xì)胞內(nèi)積累導(dǎo)致抑制各種酶。
抑制范圍在pH5.5、濃度為125-12500ppm時(shí)抑制霉菌，為了抑制細(xì)菌，必需更高的濃度(＞16000ppm)。
應(yīng)用切片包裝面包。
最大許可量3000ppm。溶菌酶(E1105)僅許可用于成熟干酪。
最大許可量適量。
申請(qǐng)人通過(guò)對(duì)本發(fā)明化合物抑制效應(yīng)進(jìn)行研究，在近中性pH(pH6.8)的培養(yǎng)基(Elliker肉湯)中進(jìn)行了測(cè)試，已顯示可有效抵抗革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌。上述多種防腐劑顯示抑制效應(yīng)主要在低pH，顯然應(yīng)用本發(fā)明化合物擴(kuò)大了潛在的應(yīng)用范圍。
原則上，化學(xué)防腐物質(zhì)的應(yīng)用取決于下列因素(a)毒理學(xué)上無(wú)害·所述物質(zhì)當(dāng)短期、中期和長(zhǎng)期應(yīng)用時(shí)的效應(yīng)。
·測(cè)試急性毒性(LD50)、動(dòng)力學(xué)和代謝、藥理學(xué)作用、生殖毒性等。
(b)技術(shù)/食品化學(xué)方面·水溶解性因?yàn)槲⑸镌谒嘀猩L(zhǎng)，所以防腐劑必須為水溶性的·與食品成分的反應(yīng)，異味問(wèn)題(感官接受性)·干擾食品成分(例如硫酸破壞維生素B1)因此，一系列不同因素決定化學(xué)物質(zhì)在食品和飼料中的抗微生物效應(yīng)。其中，微生物組成、食品組成(成分、pH、水活度、含鹽量等)、包裝、時(shí)間-溫度-條件等都是影響抗微生物劑的抑制活性的關(guān)鍵因素。
現(xiàn)在僅通過(guò)實(shí)施例并參考附圖來(lái)描述本發(fā)明，附圖中


圖1顯示一幅用以下試劑處理的藤黃微球菌(上面1個(gè)平板)、蠟狀芽孢桿菌(中間2個(gè)平板)和生孢梭菌(下面2個(gè)平板)的孔擴(kuò)散試驗(yàn)照片上面右邊部分3％ C8脫水果糖酯；中間右邊部分0.3％ C8脫水果糖酯；下面右邊部分3％ C12脫水果糖酯；下面左邊部分0.3％ C12脫水果糖酯；中間左邊部分25％甲醇的等量甲醇對(duì)照；上面左邊部分2.5％甲醇的等量甲醇對(duì)照。
圖2顯示一幅用以下試劑處理的藤黃微球菌的孔擴(kuò)散試驗(yàn)照片部分13％ C8脫水果糖酯；部分20.3％ C8脫水果糖酯；部分33％ C12脫水果糖酯；部分40.3％ C12脫水果糖酯；部分525％甲醇的等量甲醇對(duì)照；部分62.5％甲醇的等量甲醇對(duì)照。
對(duì)于肉湯培養(yǎng)物和Bioscreen試驗(yàn)，讓大多數(shù)細(xì)菌在腦心浸液(BHI，Oxoid，pH7.4)中生長(zhǎng)。讓清酒乳桿菌A10在de Man，Rogosa，Sharpe培養(yǎng)基(MRS，Oxoid)中生長(zhǎng)。讓酵母在沙氏液體培養(yǎng)液(SabouraudLiquid medium)(SLM，Oxoid)中生長(zhǎng)。大多數(shù)細(xì)菌于30℃培養(yǎng)。讓乳酸細(xì)菌在富含CO2的環(huán)境下在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。讓梭菌在強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基(RCM)中在無(wú)氧條件下于37℃生長(zhǎng)。讓熱殺索絲菌和酵母于25℃生長(zhǎng)。Rioscreen試驗(yàn)采用自動(dòng)化微生物讀數(shù)儀Bioscreen C測(cè)量在有和無(wú)試驗(yàn)樣品的情況下所述菌株的生長(zhǎng)曲線(xiàn)。Bioscreen C可通過(guò)縱向光度測(cè)定法同時(shí)測(cè)量200孔蜂窩狀微量滴定板中的動(dòng)力學(xué)濁度(即生長(zhǎng))。所述系統(tǒng)由Bioscreen C分析儀(它有一個(gè)培養(yǎng)箱和測(cè)量裝置)、集成PC、軟件(BioLink v 5.30)、打印機(jī)和‘Honeycomb 2’比色杯式多孔板組成?？梢杂肂ioLink軟件分析生長(zhǎng)曲線(xiàn)數(shù)據(jù)或?qū)⑺鰯?shù)據(jù)輸出到諸如Excel的程序中。方案向14mg樣品中加入50μl 100％甲醇。然后加入66.7μl IMS(工業(yè)含甲醇酒精，96％乙醇)，以制備12％(w/v)溶液。
對(duì)于所述試驗(yàn)，然后該溶液用無(wú)菌蒸餾水以1∶4進(jìn)行稀釋。這一步是必需的，因?yàn)闃悠分械囊掖紳舛葧?huì)抑制所述試驗(yàn)微生物。這制成3％(w/v)的終溶液。
所述試驗(yàn)樣品不能進(jìn)行過(guò)濾除菌，因?yàn)閾p失會(huì)太大，僅可得到約470μl。對(duì)樣品進(jìn)行無(wú)菌操作，希望該樣品是無(wú)菌的。由于相同原因未測(cè)量樣品的pH。
然后在Bioscreen中在0.3％濃度下測(cè)試所述樣品。然而，立刻會(huì)認(rèn)識(shí)到，這可能有問(wèn)題，因?yàn)锳F酯1試驗(yàn)樣品是渾濁的乳白色。遺撼的是，當(dāng)將其加入到Bioscreen各孔中時(shí)，原始濁度太高，以致無(wú)法分辯任何微生物的生長(zhǎng)。因此，為了確證是否發(fā)生任何抑制，必需對(duì)接種物進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，然后在Bioscreen中于30℃培養(yǎng)24小時(shí)后，直接取樣測(cè)試Bioscreen板中的樣品。然后可通過(guò)將其與含有2.5％乙醇的對(duì)照孔最終活細(xì)胞數(shù)進(jìn)行比較來(lái)評(píng)價(jià)抑制。Bioscreen BS021100結(jié)果AF酯1＝脫水果糖的C8酯(權(quán)利要求32中所示結(jié)構(gòu)-LHS)。表1
結(jié)論表1中的結(jié)果顯示AF-酯1抑制所有被測(cè)微生物。抑制活性的順序如下革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌＞酵母＞革蘭氏陰性細(xì)菌。該樣品對(duì)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌特別有效，但對(duì)芽孢桿菌也非常有效。有針對(duì)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌殺菌活性的證據(jù)，并且可能對(duì)所述酵母有殺菌活性。脫水果糖酯1殺菌試驗(yàn)在Bioscreen中用活菌計(jì)數(shù)證實(shí)較早測(cè)試的樣品進(jìn)行初步殺菌實(shí)驗(yàn)。這顯示良好活性。對(duì)于所述殺菌實(shí)驗(yàn)，所選試驗(yàn)生物為單核細(xì)胞增生李斯特氏菌S23，因?yàn)樵摼谏L(zhǎng)抑制試驗(yàn)中顯示最高敏感性。方案等份3×890ml 10mM HEPES緩沖液，pH7。向一個(gè)試驗(yàn)對(duì)照中加入100ml水，向另一個(gè)試驗(yàn)對(duì)照中加入100ml等量乙醇對(duì)照，向試驗(yàn)樣品中加入100ml AF酯1。向所有試驗(yàn)中加入10ml過(guò)夜培養(yǎng)物。將樣品在環(huán)境保護(hù)溫度下靜置2小時(shí)。進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。請(qǐng)注意AF酯1會(huì)在試驗(yàn)期間沉淀出來(lái)。結(jié)果試驗(yàn)活菌計(jì)數(shù)(cfu/ml)對(duì)照/水 3.1×108對(duì)照/乙醇 2.0×107試驗(yàn)/AF酯12.4×107根據(jù)該結(jié)果得出的結(jié)論是，AF酯1不具有任何殺菌活性。新樣品的測(cè)試脫水果糖酯C8(AFC8)＝脫水果糖的C8酯(權(quán)利要求32中所示結(jié)構(gòu)-LHS)脫水果糖酯C12(AFC12)＝脫水果糖的C12酯(權(quán)利要求32中所示結(jié)構(gòu)-RHS)葡萄糖酯C8(GC8)-對(duì)照葡萄糖酯C12(GC12)-對(duì)照將AF酯通過(guò)于70℃加熱10-15分鐘或者于100℃加熱5-10分鐘而溶于水中。兩種方法均未取得成功，加熱后所述酯最終制成0.5％(w/v)的50∶50甲醇/水溶液。AFC8未溶解，但其它樣品較好溶解。結(jié)果未觀察等量甲醇對(duì)照區(qū)。表2
BS191200 Bioscreen試驗(yàn)結(jié)果表3
*AF C12顯示Bc204和Bc Campden在最低試驗(yàn)濃度0.0125％時(shí)的完全抑制。
該輪對(duì)照基于在等量甲醇濃度于30℃生長(zhǎng)18小時(shí)或24小時(shí)的終OD。根據(jù)細(xì)菌數(shù)目是否比甲醇對(duì)照細(xì)菌數(shù)目低來(lái)判斷所述AF酯的抑制作用。結(jié)論·孔擴(kuò)散結(jié)果顯示0.5％ AFC8和AFC12兩者均有抗梭菌活性，并且AFC12還有抗芽孢桿菌屬、索絲菌屬、微球菌屬的活性，也許還有抗酵母活性，但無(wú)抗單核細(xì)胞增生李斯特氏菌或革蘭氏陰性(GN)細(xì)菌的活性。
·Bioscreen結(jié)果得自0.05％樣品的試驗(yàn)。
·Bioscreen證實(shí)的活性順序如下AFC12＞AFC8。Bioscreen也證實(shí)抗芽孢桿菌屬的活性，但也觀察到抗單核細(xì)胞增生李斯特氏菌和清酒乳桿菌的活性以及一定抗革蘭氏陰性(GN)細(xì)菌的活性。Bioscreen分析的描述BS040101將0.3％ AF酯溶于2.5％甲醇中。制備連續(xù)稀釋液。測(cè)試以下濃度0.3％、0.15％、0.075％、0.038％和0％。將APP溶于水中。該樣品在30℃24小時(shí)后進(jìn)行分析(表4)。表4
BS040101的活菌計(jì)數(shù)通過(guò)在任一種AF酯存在下的終計(jì)數(shù)是否比在2.5％甲醇(對(duì)照)的終計(jì)數(shù)低來(lái)判斷抑制。結(jié)果示于表5中。表5
孔擴(kuò)散試驗(yàn)藤黃微球菌、蠟狀芽孢桿菌204、蠟狀芽孢桿菌Campden、生孢梭菌1.221和生孢梭菌Campden的結(jié)果示于
圖1和圖2和表6中。甲醇對(duì)照試驗(yàn)沒(méi)有得到任何擴(kuò)散區(qū)。各孔編號(hào)1＝3％ AFEC8，2＝0.3％AFEC8，3＝3％ AFEC12，4＝0.3％ AFEC12，5＝25％甲醇的等量甲醇對(duì)照，6＝2.5％甲醇的等量甲醇對(duì)照，表6
代碼(CODE)(酵母)E＝生長(zhǎng)增加；+＝觀察到抑制區(qū)。APP的進(jìn)一步試驗(yàn)3％時(shí)的孔擴(kuò)散區(qū)(相對(duì)于生孢梭菌Campden(4.72)和熱殺索絲菌7883(2.96))BS040101的活菌計(jì)數(shù)表7
本發(fā)明的所述方法和系統(tǒng)在不偏離本發(fā)明的范圍和精神的情況下的各種修改和變化對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。因此對(duì)實(shí)施本發(fā)明的所述方式進(jìn)行相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的修改屬于下列權(quán)利要求書(shū)范圍。
權(quán)利要求
1.一種抗微生物組合物，所述組合物包含式I環(huán)狀化合物， 其中R1和R2獨(dú)立選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基；其中R3選自-OH、＝O、包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基；其中R4和R5各自獨(dú)立選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基，或者其中R4和R5為與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中所述化合物包含至少一個(gè)酯基。
2.一種防止和/或抑制某種物質(zhì)中微生物生長(zhǎng)和/或殺死所述微生物的方法，所述方法包括將所述物質(zhì)與式I環(huán)狀化合物接觸的步驟， 其中R1和R2獨(dú)立選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基；其中R3選自-OH、＝O、包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基；其中R4和R5各自獨(dú)立選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基，或者其中R4和R5為與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中所述化合物包含至少一個(gè)酯基。
3.式I化合物在防止和/或抑制某種物質(zhì)中微生物生長(zhǎng)和/或殺死所述微生物方面的應(yīng)用， 其中R1和R2獨(dú)立選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基；其中R3選自-OH、＝O、包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基；其中R4和R5各自獨(dú)立選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基，或者其中R4和R5為與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中所述化合物包含至少一個(gè)酯基。
4.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述物質(zhì)是食品或飼料。
5.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述環(huán)狀化合物是式II化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5同前述權(quán)利要求定義。
6.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述環(huán)狀化合物是式III化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5同前述權(quán)利要求定義。
7.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述環(huán)狀化合物為式IV化合物， 其中R1和R2獨(dú)立選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基；其中R3選自-OH、＝O、包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基；其中R4和R5各自獨(dú)立選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基，或者其中R4和R5為與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中R6和R7各自獨(dú)立選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基，或者其中R4和R5為與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；其中所述化合物包含至少一個(gè)酯基。
8.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述環(huán)狀化合物為式V化合物， 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7同權(quán)利要求7定義。
9.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R1選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基。
10.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R2選自-OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為烴基。
11.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R3選自包含-OH基團(tuán)的取代基和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基。
12.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R3為-OC(O)R’，其中R’為H或烴基。
13.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R3為-OC(O)R’，其中R’為烴基。
13.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R3為-OC(O)R’，其中R’為R”基團(tuán)。
14.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R’和/或R”為支鏈或直鏈、取代或未取代的烷基。
15.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R’和/或R”為(CH2)pCH3，其中p為1-24。
16.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R’和/或R”為C8烷基。
17.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R’和/或R”為C12烷基。
18.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，R3為式-(CH2)n-OC(O)-(CH2)pCH3，其中n和p各自獨(dú)立為1-24。
19.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，R3為式-(CH2)n-OC(O)-(CH2)7CH3，其中n和p各自獨(dú)立為1-24。
20.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，R3為式-(CH2)n-OC(O)-(CH2)11CH3，其中n和p各自獨(dú)立為1-24。
21.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R4選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基。
22.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R4選自烴基、H、OH和＝O。
23.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R5選自烴基、H、OH、＝O和-OC(O)R’，其中R’為H或烴基。
24.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R5選自烴基、H、OH和＝O。
25.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中R4和R5為與所述環(huán)狀化合物環(huán)上相鄰原子的化學(xué)鍵；
25.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述化合物為酯化脫水果糖，其中脫水果糖的至少一個(gè)OH基團(tuán)酯化形成-OC(O)R基團(tuán)，其中R為烴基。
26.權(quán)利要求25的本發(fā)明，其中R為支鏈或直鏈、取代或未取代的烷基。
27.權(quán)利要求25的本發(fā)明，其中R為(CH2)pCH3，其中p為1-24。
28.權(quán)利要求25的本發(fā)明，其中R為C8烷基。
29.權(quán)利要求25的本發(fā)明，其中R為C12烷基。
30.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述環(huán)狀化合物為下式化合物
31.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述環(huán)狀化合物為下式化合物
32.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述環(huán)狀化合物選自以下化合物
33.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述環(huán)狀化合物選自以下化合物
34.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述化合物為殼二孢吡喃酮P、殼二孢吡喃酮M、殼二孢吡喃酮T、殼二孢吡喃酮T1、殼二孢吡喃酮T2、殼二孢吡喃酮T3的衍生物和它們的混合物。
35.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述化合物選自酯化殼二孢吡喃酮P、酯化殼二孢吡喃酮M、酯化殼二孢吡喃酮T、酯化殼二孢吡喃酮T1、酯化殼二孢吡喃酮T2、酯化殼二孢吡喃酮T3和它們的混合物。
36.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述化合物選自以下化合物或其酯化衍生物
37.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述式I環(huán)狀化合物具有針對(duì)選自以下的微生物的抗微生物效應(yīng)李斯特氏菌屬(Listeria)、沙門(mén)氏菌屬(Salmonella)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、酵母屬(Saccharomyces)、假單胞菌屬(pseudomonas)、梭菌屬(Clostridium)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、索絲菌屬(Brochothrix)、微球菌屬(Micrococcus)、耶爾森氏菌屬(Yersinia)、腸桿菌屬(Enterobacter)和接合酵母屬(Zygosaccharomyces)、葡萄球菌屬(Staphylococcus)和埃希氏菌屬(Escherichia)。
38.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述式I環(huán)狀化合物具有針對(duì)選自以下的微生物的抗微生物效應(yīng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、大腸桿菌(E.coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、無(wú)害李斯特氏菌(Listeria innocua)、鼠傷寒沙門(mén)氏菌(Salmonella Typhimurium)、沙門(mén)氏菌(Salmonella sp.)、蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、枯草桿菌(Bacillus subtilis)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、釀酒酵母奇異變種(Saccharomycescerevisiae var.paradoxus)、卡爾酵母(Saccharomyces carlsbergensis)、熒光假單胞菌(Pseudomonas，uorescens)、生孢梭菌(Clostridiumsporogenes)、清酒乳桿菌(Lactobacillus sake)、熱殺索絲菌(Brochothrixthermosphacta)、藤黃微球菌(Micrococcus luteus)、小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌(Yersinia enterocolitica)、產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes)和拜耳接合酵母(Zygosaccharomyces bailii)。
39.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中所述式I環(huán)狀化合物具有針對(duì)選自以下的微生物的抗微生物效應(yīng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、大腸桿菌、蠟狀芽孢桿菌、釀酒酵母、卡爾酵母、熒光假單胞菌、生孢梭菌、清酒乳桿菌、熱殺索絲菌和藤黃微球菌。
40.任一前述權(quán)利要求的本發(fā)明，其中將所述式I化合物與一種或多種抗氧化劑、防腐劑和/或螯合劑聯(lián)合使用。
全文摘要
本發(fā)明提供一種包含具有式I的環(huán)狀化合物的抗微生物組合物，其中R
文檔編號(hào)A23K1/16GK1466423SQ0181630
公開(kāi)日2004年1月7日 申請(qǐng)日期2001年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月27日
發(fā)明者D·埃澤爾, A·J·莫甘, L·V·托馬斯, 于書(shū)坤, D 埃澤爾, 托馬斯, 莫甘 申請(qǐng)人:丹尼斯科有限公司