專利名稱：生產(chǎn)株性穩(wěn)定的番木瓜組培苗的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過組織培養(yǎng)技術(shù)的植物再生方法，具體說是涉及番木瓜通過生物組培無性繁殖技術(shù)獲得株性穩(wěn)定的植株方法。
背景技術(shù)：
番木瓜是一種在熱帶、亞熱帶地區(qū)廣泛栽培的多年生果樹。由于番木瓜本身花性復(fù)雜，用常規(guī)種子繁殖無法保證植株的株性一致，在種播苗中兩性株(結(jié)長圓形瓜)占55％，雌性株(結(jié)圓形瓜)占45％，而長圓形兩性瓜的市場(chǎng)價(jià)格是雌性瓜的市場(chǎng)價(jià)格的2-3倍，所以能培育出株性穩(wěn)定的兩性株幼苗，將使種植番木瓜的產(chǎn)值可提高25-50％，從而可大大增加種植戶的收益。有文獻(xiàn)資料報(bào)道，采用扦插、嫁接等無性繁殖技術(shù)可以解決這一問題，但是，采用這種方法所獲得的種苗數(shù)量有限，無法在生產(chǎn)上大面積推廣。番木瓜的組織培養(yǎng)研究已有文獻(xiàn)報(bào)道，但這些研究只涉及到“番木瓜組織培養(yǎng)再生植株”技術(shù)，其培育出的組培苗與實(shí)生苗一樣無法區(qū)分兩性株與雌性株，因此，這些技術(shù)無法獲得株性一致的植株，在生產(chǎn)中無實(shí)用意義。為此，我們有必要尋找一套可生產(chǎn)株性穩(wěn)定的番木瓜組培苗的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是通過生物技術(shù)手段獲得株性穩(wěn)定的植株，建立一套可進(jìn)行工廠化生產(chǎn)的、株性穩(wěn)定的番木瓜組培苗的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明解決其株性穩(wěn)定的番木瓜組培苗方法所采用的技術(shù)方案是選株→外植體無菌消毒→接種于初代培養(yǎng)基上→誘導(dǎo)不定芽發(fā)生→切取不定芽轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中增植培養(yǎng)→不定芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不定根發(fā)生→形成具有根、莖、葉的完整番木瓜組培苗→假植→移植于營養(yǎng)杯→組培苗大田種植的方法。
在具體實(shí)施過程中外植體無菌消毒的方法，采用酒精先消毒后用次氯酸鈉消毒再用氯化汞消毒液消毒然后用無菌水沖洗的消毒效果為佳；所說的不定芽轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中增植培養(yǎng)的繼代培養(yǎng)基是采用在1/2～3/2的MS中添加6-芐氨基嘌呤0.1～1.0mg/L和赤霉素0.1～0.5mg/L和蔗糖3～5％組成的培養(yǎng)基為佳，所說的生根培養(yǎng)基是采用在MS中添加吲哚丁酸1～3mg/L和活性炭0.01～0.3％組成的培養(yǎng)基為佳，所說的假植是采用細(xì)沙床種植，并用70％遮蔭網(wǎng)和薄膜雙層覆蓋為佳。
采用了本發(fā)明所說的一種株性穩(wěn)定的番木瓜組培苗方法后的有益效果是1、所培育出的番木瓜植株株性穩(wěn)定率可達(dá)100％，即可按客戶要求生產(chǎn)100％的兩性株或100％的雌性株番木瓜組培苗。
2、所培育出的番木瓜植株，果實(shí)的品質(zhì)、大小、形狀均勻一致，為番木瓜的產(chǎn)業(yè)化、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)打下基礎(chǔ)，提高市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。
3、所培育出的番木瓜植株，與同期種播苗相比，平均生長量高5～10％，現(xiàn)蕾期和開花期提前8～10天，結(jié)果位低，座果率高。
下面結(jié)合具體實(shí)施例敘述本發(fā)明的技術(shù)方案。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1采用“美中紅”番木瓜成齡兩性株，取其側(cè)芽，依次在75％酒精、1％次氯酸鈉和0.2％氯化汞溶液中分別浸泡1分鐘、15分鐘、10分鐘，用無菌水沖洗5次，接種于通用的初代培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)出不定芽發(fā)生后，切取不定芽轉(zhuǎn)入3/2MS中添加6-芐氨基嘌呤0.5mg/L和赤霉素0.2mg/L和蔗糖4％組成的繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行增植培養(yǎng)，將不定芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不定根發(fā)生，其生根培養(yǎng)基采用在MS中添加吲哚丁酸2mg/L和活性炭0.2％的培養(yǎng)基，當(dāng)形成具有根、莖、葉的完整番木瓜組培苗，誘根率達(dá)75％后移植于細(xì)沙床假植，并用75％遮蔭網(wǎng)和薄膜雙層覆蓋，當(dāng)成活后的組培苗移栽定植于大田。大田種植試驗(yàn)結(jié)果100％為兩性植株，豐產(chǎn)且提前結(jié)果，果實(shí)的大小、形狀一致，達(dá)到了滿意的如期效果。
實(shí)施例2采集“美中紅”番木瓜成齡雌性株的側(cè)芽，用實(shí)施例1相同的消毒方法和培養(yǎng)條件所獲得的組培苗定植于大田，結(jié)果表現(xiàn)為100％雌性植株。
實(shí)施例3采集“穗中紅”番木瓜成齡兩性株的側(cè)芽，依次在75％酒精、1％次氯酸鈉和0.2％升汞溶液中分別浸泡2分鐘、20分鐘、10分鐘，用無菌水沖洗5次后，接種于通用的初代培養(yǎng)基，誘導(dǎo)出不定芽發(fā)生后，切取不定芽轉(zhuǎn)入3/2MS添加6-芐氨基嘌呤0.6mg/L和赤霉素0.4mg/L和蔗糖4％組成的繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行增植培養(yǎng)，將不定芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不定根發(fā)生，其生根培養(yǎng)基采用在MS中添加吲哚丁酸2.5mg/L和活性炭0.2％的培養(yǎng)基，當(dāng)形成具有根、莖、葉的完整番木瓜組培苗，誘根率達(dá)85％后移植于細(xì)沙床假植，并用75％遮蔭網(wǎng)和薄膜雙層覆蓋，當(dāng)成活后的組培苗移栽定植于大田。大田試驗(yàn)結(jié)果兩性株為100％，豐產(chǎn)且提前結(jié)果，果實(shí)的大小、形狀一致。
實(shí)施例4采集高酶品種“黃08”番木瓜成齡雌性株的側(cè)芽，用實(shí)施例3相同的消毒方法和培養(yǎng)條件所獲得的組培苗定植于大田，結(jié)果表現(xiàn)為100％雌性植株。
權(quán)利要求
1.一種生產(chǎn)株性穩(wěn)定的番木瓜組培苗方法，其特征在于；采用選株→外植體無菌消毒→接種于初代培養(yǎng)基上→誘導(dǎo)不定芽發(fā)生→切取不定芽轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中增植培養(yǎng)→不定芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不定根發(fā)生→形成具有根、莖、葉的完整番木瓜組培苗→假植→移植于營養(yǎng)杯→組培苗大田種植的方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所說的一種生產(chǎn)株性穩(wěn)定的番木瓜組培苗方法，其特征在于所說的外植體無菌消毒的方法，采用酒糖先消毒后用次氯酸鈉消毒再用氯化汞消毒然后用無菌水沖洗。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所說的一種生產(chǎn)株性穩(wěn)定的番木瓜組培苗方法，其特征在于所說的不定芽轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中增值培養(yǎng)的繼代培養(yǎng)基是采用在1/2～3/2的MS中添加6-芐氨基嘌呤0.1～1.0mg/L和赤霉素0.1～0.5mg/L和蔗糖3～5％組成的培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所說的一種生產(chǎn)番木瓜株性穩(wěn)定的組培苗方法，其特征在于所說的生根培養(yǎng)基是采用在MS中添加吲哚丁酸1～3mg/L和活性炭0.01～0.3％組成的培養(yǎng)基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所說的一種生產(chǎn)番木瓜株性穩(wěn)定的組培苗方法，其特征在于所說的假植是采用細(xì)沙床種植，并用70％遮蔭網(wǎng)和薄膜雙層覆蓋。
全文摘要
一種生產(chǎn)株性穩(wěn)定的番木瓜組培苗方法，涉及通過組織培養(yǎng)技術(shù)的植物再生方法。它是采用選株→外植體無菌消毒→接種于初代培養(yǎng)基上→誘導(dǎo)不定芽發(fā)生→切取不定芽轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中增植培養(yǎng)→不定芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不定根發(fā)生→形成具有根、莖、葉的完整番木瓜組培苗→假植→移植于營養(yǎng)杯→組培苗大田種植的方法，本方法培育出的番木瓜植株株性穩(wěn)定率可達(dá)100％，即可按客戶要求工廠化生產(chǎn)出100％的兩性株或100％的雌性株番木瓜組培苗。
文檔編號(hào)A01H4/00GK1481674SQ0213470
公開日2004年3月17日 申請(qǐng)日期2002年9月11日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月11日
發(fā)明者陳健, 陳國華, 游愷哲, 吳坤林, 林冠雄, 黃常華, 陳春鋒, 曾宋君, 李衛(wèi)紅, 張奕奇, 陳 健 申請(qǐng)人:廣州市果樹科學(xué)研究所, 中國科學(xué)院華南植物研究所