專利名稱：純化萬壽菊含油樹脂的方法
背景技術：
1.發(fā)明領域本發(fā)明涉及純化萬壽菊含油樹脂的方法以及根據(jù)該方法獲得的純化的萬壽菊含油樹脂。
2.現(xiàn)有技術描述近來科學研究者已經(jīng)報道，黃體素為一種類葫蘿卜素，與由氧化損傷視網(wǎng)膜黃斑區(qū)(例如，參照非專利文獻1)導致的老年性黃斑病變(AMD)的危險性降低有關，而且黃體素可以有效防止動脈硬化，防止白內(nèi)障或抑制癌癥的發(fā)生等(例如參照非專利文獻2，3和4)。因此這種黃體素可用作保健食品，膳食補充劑，食品顏料，藥用顏料，以及醫(yī)用藥。
黃體素以黃體素-脂肪酸酯的形式存在于例如橙，桃，番木瓜，梅干和芒果的水果中，也存在于很多花朵和蔬菜中，在萬壽菊的花瓣中尤其顯著。用烴類溶劑如己烷，石油醚等，或氯化烴溶劑例如二氯甲烷等提取干燥和研磨的萬壽菊花朵，然后從提取物中移去溶劑，以這種方式可以獲得萬壽菊含油樹脂。大多數(shù)市售萬壽菊含油樹脂為固態(tài)或糊狀，在室溫下有較高粘度，在含油樹脂中，黃體素脂肪酸酯的含量通常為酯的14-20％(例如參照專利文獻1)。
為了使用黃體素作為保健食品和膳食補充劑，制備了用明膠膜包裹上述萬壽菊含油樹脂的軟膠囊。尤其是，當內(nèi)含物為油狀時，由于能夠包裹液體，保護和穩(wěn)定內(nèi)含物，勻質(zhì)化內(nèi)含物，掩蔽味道和氣味，以及高度增值印模，從操作容易的角度，據(jù)說軟膠囊是最好的形式(參照非專利文獻5等)。通常采用模切法(die-cutting method)制備軟膠囊，其中將灌注在兩片明膠之間的固定量的內(nèi)含物進行沖切。為了制備上述萬壽菊含油樹脂的軟膠囊，有必要進行加熱和熔化以液化上述萬壽菊含油樹脂，因為內(nèi)含物必須液體，其粘度能夠通過計量泵注射，例如根據(jù)旋轉(zhuǎn)模具的方法，不大于20,000cps(參照非專利文獻5等)。
但是，在生產(chǎn)軟膠囊的過程中，沒有在不低于40℃的溫度下加溫和加熱過程，因為，軟膠囊的原材料明膠在不低于40℃的溫度下就失去成形性(參照非專利文獻5等)。因此，很難加熱，熔化，和填充上述萬壽菊含油樹脂。
由于這個原因，采用在室溫下添加食用植物油稀釋和溶解上述萬壽菊含油樹脂的液化方法。但是這種方法的缺點在于因為減少了每個膠囊中黃體素的含量，每次或每天服用膠囊的數(shù)目增加。
除了上述產(chǎn)物，在室溫下形成漿狀并且含量不少于總類葫蘿卜素15％的產(chǎn)物是市售的，該產(chǎn)物通過懸浮由食用植物油自萬壽菊花朵抽提的黃體素脂肪酸酯產(chǎn)生。但是這個產(chǎn)物的缺點在于，除了黃體素脂肪酸酯的含量低，當在約80℃加熱和熔化滅菌然后冷卻到室溫時，其完全呈固態(tài)并且不可能填充到軟膠囊中。
發(fā)明概述本發(fā)明的目的是提供一種獲得萬壽菊含油樹脂的方法，該萬壽菊含油樹脂能夠填充到軟膠囊并且具有高的黃體素含量。
本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，作為勤奮研究解決上述問題的結果，通過把將含油樹脂進行超臨界流體提取的步驟和將含油樹脂溶解在酮溶劑，冷卻溶液并移去沉淀在溶液中的成分如磷脂等的步驟結合獲得低粘度和高黃體素含量的萬壽菊含油樹脂。本發(fā)明人在基于發(fā)現(xiàn)的進一步研究后已完成了本發(fā)明。
因此本發(fā)明涉及如下(1)-(14)。
(1)一種生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于實施了將萬壽菊含油樹脂進行超臨界流體提取的步驟以及將萬壽菊含油樹脂溶解在酮溶劑，冷卻溶液，并移去沉淀在溶液中的成分的步驟。
(2)上述(1)中生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于實施將萬壽菊含油樹脂進行超臨界流體提取的步驟以及將萬壽菊含油樹脂溶解在酮溶劑，冷卻溶液，并移去沉淀在溶液中的成分，從而分離出低粘度和高黃體素含量的純化萬壽菊含油樹脂的步驟。
(3)上述(1)或(2)所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于在稀釋劑存在下實施超臨界流體提取的步驟。
(4)上述(1)-(3)中任一項所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于采用了選自二氧化碳，乙烷，乙烯，丙烷，甲苯和氧化二氮的超臨界流體。
(5)上述(1)-(4)中任一項所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于酮溶劑為丙酮，甲基乙基酮或二乙基甲酮。
(6)上述(1)-(5)中任一項所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其中實施超臨界流體提取的步驟是采用二氧化碳超臨界流體在二氧化碳壓力為(980-2940)×104Pa(＝N/m2)和溫度為80℃臨界溫度的條件下進行的。
(7)上述(1)-(5)中任一項所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其中實施超臨界流體提取的步驟是采用二氧化碳超臨界流體在二氧化碳壓力為(1470-2450)×104Pa(＝N/m2)和溫度為40-60℃的條件下進行的。
(8)一種可通過上述(1)-(7)中任一項所述的方法獲得的純化的萬壽菊含油樹脂。
(9)上述(8)所述的純化的萬壽菊含油樹脂具有低粘度和高黃體素含量。
(10)一種純化的萬壽菊含油樹脂，其含有不少于20％的黃體素脂肪酸酯，且30℃時粘度不高于20,000mPa.s。
(11)上述(10)所述的純化的萬壽菊含油樹脂，其含有不少于30％的黃體素脂肪酸酯，且30℃時粘度不高于20,000mPa.s。
(12)上述(11)所述的純化的萬壽菊含油樹脂，其30℃時粘度不高于10,000mPa.s。
(13)上述(12)所述的純化的萬壽菊含油樹脂，其30℃時粘度不高于5,000mPa.s。
(14)一種軟膠囊，其含有上述(8)-(13)中任一項所述的純化的萬壽菊含油樹脂。
如上所述生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法也是純化萬壽菊含油樹脂的方法。
發(fā)明的詳細描述本發(fā)明使用的萬壽菊含油樹脂的制備方法是將一種菊科成員(Tagetes erecta WILLD.)，萬壽菊的花朵干燥，研磨干燥產(chǎn)物，任選轉(zhuǎn)化為丸粒，用有機溶劑，通常用己烷提取，然后從提取物中移去溶劑。在室溫下產(chǎn)物為固體或糊狀物，并且有特殊的氣味。其含有黃體素脂肪酸酯作為主要成分，通常還一起包含玉米黃質(zhì)和隱黃素的脂肪酸酯。因此，本發(fā)明所用的術語黃體素脂肪酸酯應解釋為涵蓋所有類胡蘿卜素酯包括上述的類胡蘿卜素酯的通用術語。
在本發(fā)明的方法中，使用高壓二氧化碳對萬壽菊含油樹脂進行超臨界流體提取。在臨界點(溫度31.3℃，壓力72.9atm)以上二氧化碳呈超臨界狀態(tài)，并且表現(xiàn)良好的溶解性。此外，通過調(diào)整供給提取容器的超臨界流體的壓力可用此種超臨界流體進行選擇性提取，因為超臨界流體的溶解力可以通過改變壓力和溫度來調(diào)整。本發(fā)明超臨界提取步驟中使用的提取容器可以是本發(fā)明領域眾所周知的。例如，可以使用日本專利公開S63-112659的官方公報第6頁圖2中所示的提取容器。
更具體而言，將萬壽菊含油樹脂放在提取容器中或者和可食用油和脂肪一起放在提取容器中。此處使用的食用油和脂肪，作為例子列出的有植物油和脂肪如油菜籽油，玉米油，豆油，棉籽油，葵子油，紅花油，棕櫚油，椰子油等；動物油和脂肪如魚油等；或者中鏈飽和脂肪酸甘油三酯等。添加食用油和脂肪使得提取物的粘度降低而且抑制泡沫產(chǎn)生，其結果是簡化了提取過程。作為調(diào)節(jié)提取物粘度的稀釋劑，除了所有上述的食用油和脂肪，還可使用，例如乙醇，乙烷，丙酮，甘油，丙二醇等。這些稀釋劑的添加量可以占萬壽菊含油樹脂100重量份的約10-100重量份，優(yōu)選為約15-50重量份。
乙烷，乙烯，丙烷，甲苯，一氧化二氮等可用作超臨界流體施加到提取容器，雖然二氧化碳是最普遍的。由超臨界狀態(tài)的二氧化碳提取的組分通過蒸發(fā)二氧化碳同時減少分離器中的壓力回收，然后將組分移走。
在進行超臨界提取時，雖然沒必要限制，但是在臨界條件為(980-2940)×104Pa(＝N/m2)，優(yōu)選(1470-2450))×104Pa(＝N/m2)，臨界溫度80℃下進行完臨界提取后，從溶劑中分離二氧化碳的操作優(yōu)選在(490-588)×104Pa(＝N/m2)，溫度為40-60℃下進行。除了有氣味的成分，提取的組分包括殘余有機溶劑，游離脂肪酸和殘余物包含只能在一定程度加以鑒定的伴隨物質(zhì)。作為稀釋劑添加的食用油和脂肪在1176×104Pa(＝N/m2)，不低于40℃的條件下被幾乎完全提取和移去。提取時間為，例如1小時-約30小時，優(yōu)選大約3小時-約20小時，但是并不限于此。
因為很難鑒定影響萬壽菊含油樹脂粘度的組分，所以用提取率作為標準來確定提取結束的時間。雖然提取率為提取物和待提取物質(zhì)的比例，而且其改變依賴于待提取物質(zhì)的質(zhì)量，但提取通常在提取率不低于10％，優(yōu)選不低于15％，更優(yōu)選不低于20％的條件下進行提取。
然后，將進行超臨界流體提取的萬壽菊含油樹脂溶于酮溶劑。此處使用的酮溶劑的例子有丙酮，甲基乙基酮，二乙基甲酮等，優(yōu)選為丙酮。丙酮的量占含油樹脂1重量份的0.5-10重量份，優(yōu)選2-3重量份。
含油樹脂和丙酮的混合物在40-55℃，優(yōu)選在45-50℃下攪拌約0.5-1小時，同時保持適度回流?；旌衔锫鋮s到10-30℃，優(yōu)選冷卻到15-25℃，時間通常為2-4小時。冷卻的混合物如果需要在助濾劑，例如硅藻土的幫助下，用濾紙或過濾織物進行過濾。通過減壓下濃縮濾液，并從中取出丙酮，而獲得純化的萬壽菊含油樹脂。在不超過50℃，減壓，優(yōu)選在氮氣氣氛的條件下移去純化的萬壽菊含油樹脂中的殘余溶劑。
本發(fā)明的方法的組成是將含油樹脂進行超臨界流體提取的步驟和將含油樹脂溶解在酮溶劑，冷卻溶液，移去沉淀在溶液中的成分的步驟的組合。雖然，兩步都可以首先進行，但是優(yōu)選首先實施將含油樹脂進行超臨界流體提取的步驟，然后進行將提取物溶解在酮溶劑，冷卻溶液，移去沉淀在溶液中的成分的步驟。
本發(fā)明獲得的純化的萬壽菊含油樹脂在室溫下為低粘度的液態(tài)或糊狀物，其中黃體素脂肪酸酯的含量不低于20％，有時不低于30％。上述粘度不高于于20,000mPa.s，優(yōu)選不高于10,000mPa.s，更優(yōu)選不高于5,000mPa.s的純化萬壽菊含油樹脂很容易獲得。結果，生產(chǎn)含有高濃縮的黃體素脂肪酸酯的軟膠囊成為可能。
通過本發(fā)明獲得的萬壽菊含油樹脂的軟膠囊，可通過已知的方法，例如浸漬法，沖壓法，液滴法等制備。軟膠囊的形狀沒有特殊限制，可以選用任何形狀，例如橢圓形，長方形，球形，三角形，淚珠形，菱形等，其中通常優(yōu)選橢圓形。每個軟膠囊中本發(fā)明的純化的萬壽菊含油樹脂的含量為大約50-5,000mg，優(yōu)選大約250-300mg。軟膠囊中的純化的萬壽菊含油樹脂可以穩(wěn)定存在很長時間。萬壽菊含油樹脂軟膠囊可用作保健食品，膳食補充劑，食用顏料，藥用顏料，醫(yī)用藥。
實施例以下實施例將更具體地說明本發(fā)明。
檢測黃體素脂肪酸酯含量的方法準確稱量大約0.1g測試樣品，并溶于己烷中產(chǎn)生100ml溶液。用己烷稀釋，以使所得溶液的吸光度范圍從0.3-0.7，用分光光度計在大約445nm處檢測稀釋溶液的最大吸收。用以下公式計算黃體素脂肪酸酯的含量。
含量(％)＝((吸光度÷樣品的重量)×稀釋率)÷1,394×100注1,394是445nm納米處的吸光系數(shù)。
粘度測定根據(jù)第7版《日本食品添加劑的規(guī)格和標準(THE JAPAN′SSPECIFICATIONS AND STANDARDS FOR FOOD ADDITIVES)》提及的“28.粘度測定方法”中的“方法2旋轉(zhuǎn)粘度測定”，測定粘度。為了測定，使用4號轉(zhuǎn)子，轉(zhuǎn)數(shù)的選擇依賴于假定的粘度。此外，固定測定時間為30秒。
實施例1將100g萬壽菊含油樹脂(黃體素脂肪酸酯16.9wt％)置于1-L提取容器中，然后在50℃，給容器提供1764×104Pa(＝N/m2)的超臨界二氧化碳后進行提取。在減壓為490×104Pa(＝N/m2)和升溫為60℃下在分離器中分離得到的提取溶液。結果，獲得24.4g提取物。
隨后，約75g提取殘留物與190ml的丙酮混合并溶解，同時混合物加熱到50℃。大約3小時內(nèi)將溶液緩慢冷卻到20℃，通過過濾移去所產(chǎn)生的不溶物，在減壓條件下濃縮濾液。結果獲得了大約71g純化萬壽菊含油樹脂(黃體素脂肪酸酯23.8wt％)。
實施例2將100g萬壽菊含油樹脂(黃體素脂肪酸酯23.3wt％)和30g油菜籽油置于1-L提取容器中，然后在50℃，給容器提供1764×104Pa(＝N/m2)的超臨界二氧化碳后，進行提取。在減壓為490×104Pa(＝N/m2)和升溫為60℃下在分離器中分離得到的提取溶液。結果，獲得50.1g提取物。
隨后，79.9g提取殘留物與210ml丙酮混合并溶解，同時混合物加熱到50℃。大約3小時內(nèi)將溶液緩慢冷卻到20℃，通過過濾移去所產(chǎn)生的不溶物，并在減壓條件下濃縮濾液。結果獲得了大約76g純化萬壽菊含油樹脂(黃體素脂肪酸酯30.5wt％)。
實施例3將100g萬壽菊含油樹脂(黃體素脂肪酸酯26.9wt％)與210ml丙酮混合并通過溫熱到50℃進行溶解。大約3小時內(nèi)將溶液緩慢冷卻到20℃，并通過過濾移去所產(chǎn)生的不溶物。在減壓條件下濃縮濾液，結果獲得了94.8g提取物。
隨后，將94.8g提取物和30g油菜籽油置于1-L提取容器中，然后在50℃，給容器提供1764×104Pa(＝N/m2)的超臨界二氧化碳后，進行提取。在減壓為490×104Pa(＝N/m2)和升溫為60℃下在分離器中分離得到的提取溶液，結果，獲得45.5g提取物。作為提取殘留物獲得了大約79g純化萬壽菊含油樹脂(黃體素脂肪酸酯32.9wt％)。
實施例1-3中萬壽菊含油樹脂(原材料)和純化的萬壽菊含油樹脂(本發(fā)明的產(chǎn)物)的粘度顯示在表1中。
表1萬壽菊含油樹脂的粘度(30℃，單位mPa.s)
*測定條件4號轉(zhuǎn)子，6轉(zhuǎn)，30秒。
**測定條件4號轉(zhuǎn)子，60轉(zhuǎn)，30秒。
工業(yè)實用性根據(jù)本發(fā)明，通過把將含油樹脂進行超臨界流體提取的步驟和將含油樹脂溶解在酮溶劑，冷卻溶液并移去沉淀在溶液中的成分，如磷脂等的步驟結合獲得低粘度和高黃體素含量的萬壽菊含油樹脂。根據(jù)本發(fā)明純化的萬壽菊含油樹脂可被填充到軟膠囊中用作保健食品，膳食補充劑，食用顏料，藥用顏料，和醫(yī)用藥。
參考文獻(專利文獻1)國際公開No.99/54408小冊子(第2頁，第24行)
(非專利文獻1)The Japan Health Industry News，Co.，Ltd.FOODPROCESSING & INGREDIENTS，第4卷，第35期，第70頁(2000)(非專利文獻2)Metamor Publishing Co.，Ltd.，Hoyoku Nishino and Khachik Frederic，NAZE MULTICAROTENE GA GAN WO YOKUSEI SURUNOKA(為何多胡蘿卜素抑制癌癥？)，第80頁(1998)(非專利文獻3)Food Chemicals News Paper Inc.，F(xiàn)OOD STYLE 21，第3卷，第3期，第52頁(1999)(非專利文獻4)FF1 Journal Editorial Committee，F(xiàn)OODS & FOOD INGREDIENTSJOURNAL OF JAPAN，第191期，第75-76頁(2001年3月)(非專利文獻5)The Japan Health Industry News Co.，Ltd.，F(xiàn)OOD PROCESSING &INGREDIENTS，第12卷，第30期，第16-18頁(1995)
權利要求
1.一種生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于實施將萬壽菊含油樹脂進行超臨界流體提取的步驟以及將萬壽菊含油樹脂溶解在酮溶劑，冷卻溶液，并移去沉淀在溶液中的成分的步驟。
2.權利要求1中所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于具有低粘度和高黃體素含量的純化萬壽菊含油樹脂得到分離。
3.權利要求1或2中所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于在稀釋劑存在下實施超臨界流體提取的步驟。
4.權利要求1-3中任一項所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于采用選自二氧化碳，乙烷，乙烯，丙烷，甲苯和一氧化二氮的超臨界流體。
5.權利要求1-4中任一項所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其特征在于酮溶劑為丙酮，甲基乙基酮或二乙基甲酮。
6.權利要求1-5中任一項所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其中超臨界流體提取的實施是采用二氧化碳超臨界流體在二氧化碳壓力為(980-2940)×104Pa(＝N/m2)以及溫度為80℃臨界溫度的條件下進行的。
7.權利要求6中所述的生產(chǎn)萬壽菊含油樹脂的方法，其中超臨界流體提取的實施是采用二氧化碳超臨界流體在二氧化碳壓力為(1470-2450)×104Pa(＝N/m2)以及溫度為40-60℃的條件下進行的。
8.一種純化的萬壽菊含油樹脂，其可由權利要求1-7中任一項所述的方法獲得。
9.權利要求8中所述的純化的萬壽菊含油樹脂，其具有低粘度和高黃體素含量。
10.權利要求8或9中所述的純化的萬壽菊含油樹脂，其含有不少于20％的黃體素脂肪酸酯，并在30℃時粘度不高于20,000mPa.s。
11.權利要求10中所述的純化的萬壽菊含油樹脂，其含有不少于30％的黃體素脂肪酸酯，并在30℃時粘度不高于20,000mPa.s。
12.權利要求11中所述的純化的萬壽菊含油樹脂，其在30℃時粘度不高于10,000mPa.s。
13.權利要求12中所述的純化的萬壽菊含油樹脂，其在30℃時粘度不高于5,000mPa.s。
14.一種軟膠囊，其包含權利要求8-13中任一項所述的純化的萬壽菊含油樹脂。
全文摘要
根據(jù)本發(fā)明的方法能獲得可被填充到軟膠囊中的低粘度和高黃體素含量的萬壽菊含油樹脂，其特征在于將含油樹脂進行超臨界流體提取的步驟以及將含油樹脂溶解在酮溶劑，冷卻溶液，并移去沉淀在溶液中的成分的步驟進行組合。
文檔編號C05F11/00GK1495250SQ0312492
公開日2004年5月12日 申請日期2003年9月19日 優(yōu)先權日2002年9月20日
發(fā)明者定野晉, 廣, 藤原和廣, 一, 原田浩一 申請人:理研維他命株式會社