專利名稱：：精制的王漿的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種過敏原減少的王漿(在本文后面將其簡單地縮寫為“ARRJ”)，特別是其中水溶性蛋白質的量被減少到小于總蛋白質量的50％(w/w)的ARRJ、生產該王漿的方法及其用途。
背景技術：
：王漿是一種乳白色的體液，由工蜂的頭部腺體分泌并儲存在蜂巢的王室(蜂王的小室)中，是一種作為飼料給予幼體的凝膠，該幼體成長為蜂王。盡管王漿的化學組成根據其來源與季節(jié)在一定程度上是變化的，但據報道所述組成是65-75％(w/w)的水，15-20％(w/w)的蛋白質，10-15％(w/w)的碳水化合物，1.7-6％(w/w)的脂肪，和0.7-2％(w/w)的灰分。此外，王漿包含以10-羥基-2-壬烯二酸為代表的有機酸、各種維生素和礦物質。有報道王漿的蛋白質包括水溶性蛋白質和水不溶性蛋白質，前者與后者的量分別是總蛋白質的大約75％和25％(例如，參考TetsuoTakenaka，“MitsubachiKagaku(蜜蜂科學)”，第3卷第2期第69-74頁，1982年)。王漿長期被廣泛用作人類的保健食品，最近，許多報告揭示王漿具有對人體有益的藥理作用，例如抗菌作用、免疫增強作用、抗腫瘤作用、消炎作用和延長壽命作用。但是，由于王漿含有過敏性物質，在其被消費時它可能引起過敏癥狀。盡管過敏癥狀因人而異，但在某些情況下王漿導致重大的過敏性(anaphylatic)休克。為了克服王漿的這種缺陷，日本專利KokaiNo.112，715/2002公開了一種通過用糖降解酶和蛋白質降解酶處理王漿減少過敏原的方法。但是，在通過用等電點沉淀使過敏性水溶性蛋白質以及用糖降解酶和蛋白質降解酶降解得到的沉淀的步驟生產的這種王漿中，添加的酶它們本身將可能是過敏性物質。因此，上述王漿具有不是優(yōu)選作為保健用王漿的缺陷。
發(fā)明內容在這些情形下完成了本發(fā)明。本發(fā)明的目的是提供ARRJ、生產該ARRJ的方法、以及包含ARRJ的組合物用于食品、飼料、餌、寵物食品和化妝品的用途，通過減少過敏原該ARRJ具有更少的引起過敏癥狀的擔憂，并保留王漿有用的藥理作用。為了實現上述目的，本發(fā)明人對高質量的ARRJ和生產ARRJ的方法進行了深入研究，通過減少過敏原該ARRJ具有更少的引起過敏癥狀的擔憂，并保留王漿有用的藥理作用。結果，本發(fā)明人通過將水與作為原料的未處理的王漿(此后，在本說明書中“未處理的王漿”可能被簡單地縮寫為“王漿”或“新鮮王漿”。另外，在表格中它可能被縮寫為“RJ”。)混合，通過離心將所述混合物分離成上清液與沉淀，以及用新鮮王漿作為對照測定那些的過敏性活性的步驟，發(fā)現新鮮王漿中包含的大部分過敏性物質是水溶性的，并被包含在上清液中。本發(fā)明人還發(fā)現，作為獨創(chuàng)知識，通過一種方法可生產其中水溶性蛋白質的量被減少到小于總蛋白質量的50％(w/w)(此后，在本說明書中將“％(w/w)”簡單地縮寫為“％”)并且過敏原的量被減少的ARRJ，該ARRJ保留了新鮮王漿有用的藥理作用，所述方法通過如下過程進行構建使將水與新鮮王漿混合的過程與通過離心將所述混合物分離成上清液與沉淀的過程結合(此后，在本說明書中該過程被縮寫為“水分級的過程”)；通過用超濾或凝膠過濾色譜法從得到的上清液中除去包含水溶性蛋白質的高分子物質收集低分子物質(此后，在本說明書中該過程被縮寫為“高分子物質除去的過程”)；以及將得到的低分子物質與前面所說的沉淀混合(此后，在本說明書中該過程被縮寫為“混合的過程”)。具體地說，本發(fā)明通過提供其中水溶性蛋白質的量被減少到小于總蛋白質量的50％的ARRJ、生產該ARRJ的方法、包含ARRJ的組合物、以及所述組合物用于食品、飼料、餌、寵物食品和化妝品的用途，實現了上述目的。實施本發(fā)明的最佳方式本發(fā)明涉及其中水溶性蛋白質的量被減少到小于總蛋白質量的50％的ARRJ。可用作本發(fā)明ARRJ原料的新鮮王漿，不局限于分泌它的蜜蜂的種、來源和其供應形式(原狀或冷凍形式)?？捎糜诒景l(fā)明中的王漿是由意大利蜜蜂(Apismellifera)、中華蜜蜂(Apiscerana)、大蜜蜂(Apisdorsata)、小蜜蜂(Apisflorae)等分泌的那些?？捎糜诒景l(fā)明中的王漿由在日本、南美洲、北美洲、澳大利亞、中國、歐洲等的來源獲得。盡管所有那些王漿都可被用作本發(fā)明ARRJ的原料，但還是優(yōu)選使用盡可能新鮮的王漿或在相對低溫度下保存的王漿。在本發(fā)明的ARRJ中，由于水溶性蛋白質的量被減少到小于總蛋白質量的50％，優(yōu)選地，小于40％，更優(yōu)選地，小于20％，最優(yōu)選地，小于10％，因此過敏性被減少。在本發(fā)明中，用Lowry方法(O.H.Lowryetal.，JournalBiologicalChemistry，第193卷第265頁，1951年)測定蛋白質的量，它是一種使用牛血清白蛋白作為標準蛋白質，在本領域中通常使用的蛋白質測定的方法。但是，用下面實驗中描述的方法可以測定王漿的過敏性。本發(fā)明的ARRJ很好地保留了具有王漿有用藥理作用的10-羥基-2-壬烯二酸，同時減少了高分子物質，即蛋白質，它是過敏性的原因?？偟鞍踪|與10-羥基-2-壬烯二酸的重量比，以游離脂肪酸為基礎，可被用作ARRJ的生理化學指數；以及本發(fā)明ARRJ的該生理化學指數小于6。由于新鮮王漿的所述比一般在7-15的范圍內，該數值與本發(fā)明ARRJ的數值可被清楚地鑒別。用下面實驗中描述的方法可以測定10-羥基-2-壬烯二酸的量。此外，通過如下步驟可以鑒別本發(fā)明的ARRJ在8M尿素的存在下使ARRJ的蛋白質進行pH3-10范圍內的等電聚焦，并且測定顯示等電點小于5的蛋白質與等電點為5或更高的蛋白質的量比。由于本發(fā)明ARRJ的所述值是1或更高，可鑒別ARRJ與顯示所述值小于1的新鮮王漿。可任意使用純化王漿的各種方法，只要它們能減少過敏性而不實質上喪失王漿有用的藥理作用。具體地說，其中水溶性蛋白質的量被減少到小于總蛋白質量的50％，優(yōu)選地，小于40％，更優(yōu)選地，小于20％，最優(yōu)選地，小于10％的方法是理想的。至于具體的純化方法，可以任意采用本領域中通常使用的純化包含蛋白質的物質的一種或多種方法，例如用水稀釋、離心、用膜過濾、過濾、濃縮、分離沉淀、鹽析、透析、離子交換色譜法、凝膠過濾色譜法、吸附色譜法、層析聚焦、疏水色譜法、反相色譜法、親和色譜法、凝膠電泳和等電聚焦。通過水分級的過程、高分子物質除去的過程和混合的過程的結合構建生產本發(fā)明ARRJ的方法。在上述純化方法中，用水稀釋和離心被用在水分級的過程中。盡管在高分子物質除去的過程中可使用膜分級和凝膠過濾色譜法，但膜分級更優(yōu)選因為它方便。在本發(fā)明中，通過水分級的過程獲得的上清液中包含水溶性蛋白質，水分級的過程包括將水摻入新鮮王漿并離心的步驟。因此，可將它們與水不溶性沉淀分離。本發(fā)明中所提到的總蛋白質的量是指如用方程式1計算的，上清液中蛋白質的量(水溶性蛋白質的量)與沉淀中蛋白質的量的總和。本發(fā)明中提到的水溶性蛋白質在總蛋白質中的含量(％)是指用方程式2計算的值。方程式1總蛋白質＝上清液中的蛋白質(水溶性蛋白質)+沉淀中的蛋白質方程式2水溶性蛋白質在總蛋白質中的含量(％)＝(水溶性蛋白質/總蛋白質)×100下面解釋本發(fā)明純化王漿的每一種過程。水分級的過程如前所述，本發(fā)明人發(fā)現王漿中的過敏性主要由高分子物質引起，該高分子物質存在于通過王漿的水分級獲得的上清液中。該過程是通過水分級將王漿分離成上清液和沉淀。與王漿混合的水不受限制，以及選擇性地，可使用任何水，例如超純水、去離子水、蒸餾水、磁化水、礦泉水、自來水和深海水。選擇性地，可使用緩沖液以使pH保持在其中王漿被懸浮或溶解的水溶液的規(guī)定范圍內。由于其中王漿被懸浮或溶解了的水溶液的pH通常在3.5-4.5的范圍內，所以不需要控制溶液的pH。但是，在pH低于3.5的情況下，所述溶液顯示相對強的酸度，不方便作為食品加工。此外，在pH高于4.5的情況下，所述溶液不優(yōu)選進行水分級，因為水溶性蛋白質可能內在地通過等電點沉淀形成沉淀。使其中王漿被懸浮或溶解的水溶液的pH保持在3.5-4.5的范圍內是理想的。為使王漿中包含的有效組分穩(wěn)定，使用相對低溫度的無菌水是理想的。盡管與王漿混合的水的量依據水分級的重復次數而不同，通常是，所用新鮮王漿重量的1-1000倍，優(yōu)選地，1-100倍的水。在僅用少量水的情況下，水溶性蛋白質的溶解將不充分并且新鮮王漿分離成上清液和沉淀也將不充分。在使用太大量水的情況下，它導致有效組分的變質，從工作效率的角度看不是優(yōu)選的，因為它需要更長的生產時間。通過使用相對大量的水并一次離心，或者使用相對少量的水并多次離心可以完成水分級。為了將水溶性蛋白質在總蛋白質中的含量減少到小于50％的目的，理想的是應用水分級至少一次，優(yōu)選兩次或更多次。離心的方法不受限制只要它們能令人滿意地將懸浮液分離成上清液和沉淀，分批模式和連續(xù)的模式都可以被有利地使用。盡管離心的條件根據離心力和運行時間而不同，理想的是離心，通常，3,000×g10分鐘或更長，優(yōu)選地，5,000×g10分鐘或更長，更優(yōu)選地，10,000×g10分鐘或更長。除去高分子物質的過程上述上清液，顯示過敏性，通過水分級獲得，包含作為高分子物質的水溶性蛋白質。所述上清液還包含有低分子物質例如有機酸，包括10-羥基-2-壬烯二酸、氨基酸、糖類和維生素。實施所述方法用于將存在于上清液中的物質分離成高分子物質和低分子物質。除去包含水溶性蛋白質的高分子物質，和收集有用的低分子物質。通過使用超濾膜的膜分離可以有效地除去作為高分子物質的水溶性蛋白質，所述超濾膜具有不允許水溶性蛋白質穿過的孔徑。關于這類超濾膜，具有1,000-10,000道爾頓的分子量切割值(cutoff)，是優(yōu)選的。在使用具有低于1,000道爾頓的分子量切割值的膜的情況下，存在被除去低分子物質的擔憂。在使用具有高于10,000道爾頓的分子量切割值的膜的情況下，存在傳染作為高分子物質的一部分水溶性蛋白質。由于通過凝膠過濾色譜法分離成低分子物質和高分子物質是可能的，還可以將這類方法應用到除去本發(fā)明高分子的方法。但是，考慮到工作效率和工業(yè)實用性，理想的是使用超濾膜?；旌系倪^程通過將用除去高分子物質的過程收集的有用的低分子物質與前面所說的沉淀混合實施本過程用于生產本發(fā)明的ARRJ。與原料中包含的那些相比，通過超濾或凝膠過濾獲得的低分子物質被相當地稀釋了。在這種情況下，可選擇性地濃縮所述低分子物質并將其與沉淀混合。選擇性地，將低分子物質與前面所說的沉淀混合后，濃縮得到的混合物。用于這類濃縮的方法可任意選自加熱、減壓濃縮和使用反滲透膜的技術。在這些方法中，減壓濃縮和使用反滲透膜的方法是優(yōu)選的，因為它們具有更少的王漿中包含的有效組分熱變性的擔憂。在用反滲透膜濃縮時，使用能夠將王漿中包含的水溶性低分子物質收集到濃縮物級分中的膜，是優(yōu)選的。理想的是使用通常為75％或更高，優(yōu)選地，90％或更高，更優(yōu)選地，95％或更高的氯化鈉切割率的反滲透膜。通過利用所述步驟調整濃度可以獲得具有理想濃度的本發(fā)明的ARRJ。在通過上述步驟獲得的本發(fā)明ARRJ中，水溶性蛋白質在總蛋白質中的含量被減少到小于50％，伴隨所述減少，過敏性物質的量被減少但有用的藥理作用例如消炎作用和延長壽命作用，王漿中內在地表現出的那些，并未喪失。因此，本發(fā)明的ARRJ可以有利地被用作為保持與促進健康目的的健康食品。雖然如上所述可以完整使用本發(fā)明的ARRJ，但它還可以呈組合物的形式被有利地使用，通過將它摻入其它的成分中生產所述組合物。本發(fā)明也提供了這類組合物。本發(fā)明的組合物通常包含一種或多種成分，它們被允許口服或透皮應用或皮膚外用應用于包括人類的哺乳動物。因此，這類組合物可被有利地用于食品、飲料、飼料、餌、寵物食品、化妝品等領域中?？煽诜蛲钙没蚱つw外用應用于包括人類的哺乳動物的成分，包括本發(fā)明各組合物各領域中常用的物質，例如水、醇、含淀粉的物質、氨基酸、纖維、糖類、脂肪、脂肪酸、維生素、礦物質、香味劑、著色劑、甜味劑、調味料、香料、防腐劑、乳化劑、去污劑等。包含上述成分的本發(fā)明組合物的形式不受限制。因此，可以理想的形式，例如粉末、顆粒、片劑、糊劑、乳劑和液體，提供本發(fā)明的組合物。包含本發(fā)明ARRJ的組合物可通過如下步驟生產基于按照所述目的的各自含量，即，基于根據目標哺乳動物和服用方法選擇的任意組合物，將上述成分與ARRJ混合；應用任意處理例如稀釋、濃縮、干燥、過濾、離心等；以及選擇性地定型成理想的形式。摻入每種成分的順序和應用不同處理的時間選擇不受限制，只要它們不引起ARRJ的變質。例如，優(yōu)選的是將剛制備后的或制備后保存在低溫下的ARRJ摻入所述成分中，然后選擇性地將其應用到不同的處理。為了防止在生產過程中ARRJ的變質，在室溫下，優(yōu)選地，在30℃或更低的條件下實施上述所有過程是優(yōu)選的。通過將它摻入無水糖中并干燥可以將包含本發(fā)明ARRJ的組合物加工成固體形式。進一步地，可以將ARRJ加工成粉末、顆粒、片劑等形式。至于無水糖，可以使用無水α，α-海藻糖、無水麥芽糖、無水環(huán)四糖等。通過日本專利No.3,168,550中所述的方法，由“TREHA”，商品化可得的海藻糖二水合物晶體，它由日本岡山HayashibaraShoji公司商品化，可以輕易地生產無水α，α-海藻糖，并將其應用于上述目的。商品化可得的無水麥芽糖晶體，“FINETOSE”，由日本岡山HayashibaraShoji公司商品化，可被用作無水麥芽糖。另外，可有利地使用WO02/057,011中所公開的無水環(huán)四糖。通過將ARRJ摻入無水糖生產的本發(fā)明的組合物，可以通過如下步驟獲得將ARRJ與無水糖混合，選擇性地，進一步將其它成分與得到的混合物混合，通過允許吸收水分至無水糖干燥得到的混合物，和選擇性地進一步經歷一般干燥過程例如減壓干燥、真空干燥和加熱。更具體地說，通常將ARRJ與按重量計ARRJ量的四倍或更多量，優(yōu)選地，按重量計八倍或更多量的晶體或無定形的無水糖混合，和選擇性地進一步將得到的混合物與其它的成分混合。接著，通過保持在室溫或更低溫度下，優(yōu)選地，30℃或更地溫度下達，通常，四個小時或更長，優(yōu)選地，八個小時或更長，將得到的混合物脫水并干燥。選擇性地，這樣制備的呈固體形式的ARRJ被進一步干燥。通過使用粉碎機、制粒機和制片機可以有利地將呈固體形式的ARRJ加工成理想的形式，例如粉末、顆粒和片劑。選擇性地，在填充到膠囊中后，可以有利地使用得到的的粉末或顆粒。選擇性地，可以將商品化可得的糖轉移的維生素C(別名L-抗壞血酸2葡糖苷)與上面所述的本發(fā)明組合物混合。眾所周知，L-抗壞血酸有增強活體中膠原蛋白產生的功能。但是，L-抗壞血酸具有不穩(wěn)定和輕易被氧化降解的缺點。然而，糖轉移的維生素C是一種化學穩(wěn)定的物質并在活體內水解釋放L-抗壞血酸。通過將抗氧化物質摻入本發(fā)明的組合物可以進一步穩(wěn)定ARRJ中包含的有效組分。因此，根據應用的對象或地區(qū)可以有利地使用抗氧化物質，例如，在通過船等不控制溫度運輸組合物或在高溫地區(qū)中使用組合物的情況下?？捎糜诒景l(fā)明中的抗氧化物質不受特別限制。但是，在將組合物用作包括人類的哺乳動物可食用組合物的情況下，優(yōu)選選擇食品領域中可食用的抗氧化物質。具體的可食用抗氧化物質，在食品領域常用的，包括類黃酮、多酚類、維生素E和維生素C。類黃酮包括蕓香甙、橙皮甙、柚皮苷、槲皮素，以及通過轉移葡萄糖或其聚合物(寡糖)生產的那些衍生物，例如糖轉移的蕓香甙、糖轉移的橙皮甙、糖轉移的柚皮苷和糖轉移的槲皮素。兒茶素和五倍子酸可以被用作為多酚類。進一步地，在本發(fā)明中植物的提取物例如槐樹(SophorajaponicL.)提取物、迷迭香提取物和桉樹提取物可以被用作為抗氧化物質。這些抗氧化物質在組合物中的含量不受限制。但是，在將組合物用作食品的情況下，優(yōu)選按照食品領域中常用的量或小于所述量使用它。本發(fā)明的組合物作為食品的理想形式包括，例如，冰凍甜食如冰淇淋、冰糖果(icecandy)和冰凍果汁水；糖漿如“Korimitsu”(一種用于刨冰的糖漿)；涂味品和醬如黃油奶酪、乳蛋糕奶酪、面醬、花生醬和果醬；糖果點心類如巧克力、透明凍膠、糖果、樹膠凍(gummyjelly)、果味塊糖(caramel)、口香糖、乳蛋布丁、奶油松餅、海綿蛋糕等；加工的水果或蔬菜如果醬、橘子果醬、“syrup-zuke”(水果腌制品)和“toka”(蜜餞)等；日本糖果點心類如“manju”(填充有azuki豆的小圓面包)、“uiro”(甜米凍)、“an”(azuki豆醬)、“yokan”(甜豆凍)、“mizuyohkan”(軟甜豆凍)、長崎蛋糕(paodeCastella)、“amedama”(日本奶油太妃糖)等；和調味品如醬油、粉末化醬油、“miso”(大豆醬)、粉末狀“miso”、蛋黃醬、填料(dressing)、醋、“sanbai-zu”(糖、醬油和醋的調味汁)、精糖(tablesugar)、咖啡糖等。作為本發(fā)明組合物的飲料的理想形式包括，例如，含酒精的飲料如合成的日本清酒(sake)、發(fā)酵的酒、果酒和日本清酒；和軟飲料如果汁、含有礦物質的飲料、碳酸化的飲料、酸奶飲料、含有乳酸菌的飲料、等滲飲料、營養(yǎng)飲料、綠茶、茶、烏龍茶、咖啡、可可茶等。還可有利地完整使用或以包含其它成分的組合物的形式使用本發(fā)明的ARRJ，所述其它成分用于動物例如家養(yǎng)動物、家禽、寵物、蜜蜂、蠶(silkwarms)、昆蟲和魚類的飼料、餌、寵物食品。至于可被摻入具有這類形式的組合物中的其它成分，可以使用在飼料、餌和寵物食品各自領域中常用的一種或多種成分，例如，谷物、含淀粉的物質、淀粉廢糖蜜(starchhydrol)、糖類、脂肪、堅果、豆類、魚和貝類、肉、蛋、奶、植物蛋白的提取物、水果、蘑菇、藻、維生素、礦物質、氨基酸、酵母、草、蔗渣、玉米芯、稻草(ricestraw)、干草、油餅(oilcakes)、麩、大豆麩、以及各種發(fā)酵的麩。組合物可呈固體形式例如粉末、顆粒、片劑、糊劑、樹膠劑(gummy)等，和液體形式例如乳劑和飲料，被有利地使用。本發(fā)明的組合物作為化妝品的理想形式包括基礎皮膚護理化妝品、用于清洗的化妝品、用于洗浴的化妝品、頭發(fā)護理化妝品、曬黑和防曬化妝品、化妝化妝品、頭發(fā)生長刺激劑和頭發(fā)生長增強劑。為生產呈上述形式的本發(fā)明組合物，可按照常規(guī)方法在生產目標產品的過程中以任意時間選擇將本發(fā)明的ARRJ摻入所述組合物中。摻入ARRJ的時間選擇不受特別限制。但是，在通過加熱方法生產目標產品的情況下，通過在加熱處理后將產品冷卻到室溫，優(yōu)選地，30℃或更低后，將ARRJ摻入所述產品中可以防止生產過程中ARRJ的有用藥理作用的降低。上述本發(fā)明的組合物包含本發(fā)明的ARRJ，通常，0.001-20％，優(yōu)選地，0.01-10％，以產品的重量為基礎。在上述本發(fā)明的組合物中，由于過敏性被減少了和各種有用的藥理作用被穩(wěn)定了，所以有用的藥理作用在活體中被有效地表達并且所述組合物可被用于增強活體的抵抗力、迅速改進不良狀況和保持良好健康。因此，本發(fā)明的組合物作為食品、飲料、飼料、餌、寵物食品、化妝品等非常有用。下面的實驗詳細解釋本發(fā)明實驗1巴西王漿和中國王漿的水分級以及過敏性測試實驗1-1巴西王漿和中國王漿的水分級將被冷凍并保存的那些巴西新鮮王漿(含水量62.5％)和中國新鮮王漿(含水量65.7％)解凍并稱量各12克。將48克無菌去離子水，按重量計為所稱量的王漿的四倍，與上述王漿混合并攪拌至均勻。在證實均勻分散后，將得到的懸浮液以5,000×g離心10分鐘，分別收集得到的上清液和沉淀。作為對照，將12克新鮮王漿與48克水混合，然后與上述類似地攪拌和分散。實驗1-2過敏性測試在評價實驗1-1中由巴西王漿和中國王漿制備的上清液和沉淀中包含的過敏性時，通過調整相當于新鮮王漿的量使用所有樣品的量。在本發(fā)明中提到的相當于新鮮王漿的量是指被轉化為原料新鮮王漿重量的樣品的量，以及在上清液或沉淀的各自情況下，由一克固有的新鮮王漿產生的樣品的量被表示相當于新鮮王漿一克。按照Hagita等人的方法(TadaatsuHagita和HiroshiMizushima，“IgakunoAyumi(醫(yī)學科學進展)”，第100卷第814頁，1977年)用小鼠抗原性試驗實施過敏性測試。具體地說，每隔一周分三次向每組五只雌性BALB/c小鼠(9周齡，由日本神奈川的CharlesRiverJapan公司商品化)的腹膜腔施用相當于新鮮王漿1.5mg的每個樣品和2.5mg氫氧化鋁凝膠(Alum)。第三次施用后一周，從每只小鼠的尾靜脈采血，然后用離心管收集血清并進行PCA方法。具體地說，將被用鹽水稀釋至100或200倍的0.1ml各小鼠血清，皮內注射應用到SD小鼠的脫毛背部。注射24小時后，將與給予小鼠的制備物相同的相當于新鮮王漿7.5mg的制備物和1ml的0.5％伊文藍(Evan′sblue)溶液用于靜脈注射，并測量在注射血清位置觀察到的藍點的大小。將顯示具有平均直徑5mm或更大的點的小鼠判定為“陽性”。當試驗組中的所有五只小鼠都是“陽性”時，將過敏性的強度評估為“+++++”，當所有五只小鼠都是“陰性”時，評估為“-”。在表1和表2中分別為巴西王漿和中國王漿的上清液、沉淀以及對照的結果。表1表2如從表1和表2中結果明顯的是，在巴西王漿和中國王漿兩種情況下的上清液中檢測到了相對強的過敏性。相反，沉淀中的過敏性是相對弱的。推測水溶性蛋白質是主要的過敏性物質。進一步地，從由血清稀釋倍數100倍和200倍獲得的結果的比較，顯示中國王漿的過敏性強于巴西王漿的過敏性。實驗2水分級的重復次數對通過水分級在沉淀中回收的總蛋白質中水溶性蛋白質的含量和過敏性減少的影響。實驗2-1水分級的重復次數對通過水分級在沉淀中回收的總蛋白質中水溶性蛋白質的含量的影響為了研究水分級的重復次數對在沉淀中回收的總蛋白質中水溶性蛋白質的含量的影響，將12克巴西王漿(含水量62.5％)用作為原料。與實驗1-1的情況相似，將四倍重量(48克)的水與所述原料混合并通過5,000×g離心10分鐘并將得到的混合物分離成上清液和沉淀。對得到的沉淀，重復相同的水分級步驟兩次以制備沉淀。為了計算由第一、第二、第三次水分級得到的各沉淀中包含的水溶性蛋白質的含量，與上面水分級相似地將四倍重量的水與各沉淀混合。離心后，通過Lowry等人的方法，用牛血清白蛋白作為標準蛋白質，測定上清液中和沉淀中蛋白質的量。將上清液中蛋白質的量定義為水溶性蛋白質的量。作為對照，將如在實驗1-1的情況中制備的新鮮王漿懸浮液離心，并用與上述沉淀相同的方式測定蛋白質的量。從每次水分級次數回收的沉淀中包含的總蛋白質和水溶性蛋白質的試驗數據以及由這些數據計算的總蛋白質中水溶性蛋白質的含量在表3中。表3*，水溶性蛋白質**，王漿如從表3中結果明顯的是，在新鮮王漿中總蛋白質中水溶性蛋白質的含量為65.8％。然而，通過第一次和第二次水分級得到的沉淀的數值分別被減少至約40％和約6％。實驗2-2通過水分級得到的沉淀與其過敏性之間的關系通過實驗1-2的相同方法，但將血清稀釋倍數改變?yōu)?0倍和100倍除外，測定了通過在實驗2-1中第一次、第二次和第三次水分級得到的沉淀的過敏性。通過實驗1-1的相同方法制備的新鮮王漿的懸浮液被用作對照。結果在表4中。表4*，王漿從上述結果中，顯示通過應用一次水分級，可以將沉淀的總蛋白質中水溶性蛋白質的含量減少到小于約40％并顯著地減少過敏性。實驗3來自王漿的不同制備物和ARRJ的制備將60克作為原料的中國新鮮王漿與240克4℃的去離子水混合并攪拌以得到均勻的分散體。接著，將所述懸浮液離心(5,000×g10分鐘)并分離成上清液和沉淀。再將得到的沉淀與240克4℃的去離子水混合并如上處理得到的懸浮液以得到沉淀。通過將由第一次水分級得到的上清液與第二次水分級得到的上清液混合制備了水分級的上清液并使用“AIP0013”進行超濾(UF)，“AIP0013”是一種具有6,000道爾頓分子量切割值的筆型超濾膜，由日本東京AsahiKasei公司商品化。將得到的上清液分離成UF過濾液和UF濃縮液。最后，通過將得到的UF過濾液和前面所說的沉淀混合制備ARRJ。測定了每個制備步驟的樣品中包含的10-羥基-2-壬烯二酸、蛋白質和糖類的量。10-羥基-2-壬烯二酸是王漿中的一種特有組分，作為有效組分的指標，并且據報道參與糖代謝和衰老的預防。通過Lowry等人的方法，用牛血清白蛋白作為標準蛋白質測定了蛋白質的量。通過用葡萄糖作為標準糖的蒽酮-硫酸方法測定了糖類的量。通過用下面條件的HPLC方法測定了10-羥基-2-壬烯二酸的量。測定10-羥基-2-壬烯二酸的HPLC條件柱YMC-PackAQ-303-ODS(φ4.6mm×250mm，YMC有限公司)柱溫40℃檢測UV210nm流動相50％甲醇(用磷酸調pH至2.2)流速0.6ml/分鐘進樣體積20μl通過用20、50和100μg/ml的標準10-羥基-2-壬烯二酸溶液制備的標準曲線測定了10-羥基-2-壬烯二酸的量。各制備步驟的每一組分的回收率(％)分別用原料新鮮王漿中包含的它們的量作為100％進行計算。它們的結果在表5中。表5*，王漿**，超濾***，本發(fā)明的過敏原減少的王漿****，10-羥基-2-壬烯二酸如從表5明顯的是，水溶性蛋白質，占王漿中包含的蛋白質的主要部分，6,605克，通過水分級被移到上清液中，并且顯示5,830克水溶性蛋白質，總水溶性蛋白質的約90％，可作為UF濃縮液被清除。還顯示原料新鮮王漿中包含的糖類和以10-羥基-2-壬烯二酸為代表的有用的低分子物質與具有相對強過敏性的水溶性蛋白質一起被移到上清液中，并且可回收到本發(fā)明的ARRJ中，ARRJ是通過將所述沉淀與UF過濾液混合進行生產的，所述UF過濾液的回收率為約90％或更高和80％或更高，所述混合是通過如下步驟進行的使所述上清液進行UF過濾，收集得到的過濾液，以及將所述過濾液與所述沉淀混合?？偟鞍踪|與10-羥基-2-壬烯二酸的重量比，以游離脂肪酸為基礎，是大約2.7。該數值明顯不同于約7.2的原料新鮮王漿的數值。實驗4來自王漿的不同制備物和ARRJ的過敏性與有用的藥理作用研究了在實驗3中從王漿中獲得的不同制備物和ARRJ的過敏性和抑制腫瘤壞死因子-α(TNF-α)產生的活性，該活性是消炎作用的指標。實驗4-1抑制腫瘤壞死因子-α(TNF-α)產生的活性的測定將1.5ml的4％巰基乙酸(thioglycolate)培養(yǎng)基注射到BALB/c小鼠的腹腔中。3天后，從腹腔中收集在BALB/c小鼠中誘導的腹膜巨噬細胞。接著，將在實驗3-1中得到的各制備物添加到培養(yǎng)基中，將所述量調節(jié)至相當于原料新鮮王漿的量，以及分別將脂多糖(LPS)、干擾素-γ(IFN-γ)和BALB/c小鼠腹膜巨噬細胞與所述培養(yǎng)基混合以得到1μg/ml、10IU/ml和5×105細胞/孔的最終濃度，并將所述混合物放入孔中。培養(yǎng)48小時后，收集得到的培養(yǎng)物上清液并用固相酶聯免疫溶劑試驗(ELISA)測量所產生的TNF-α的量。作為對照1，通過用磷酸緩沖鹽溶液替代來自王漿的不同制備物的相同的方法實施了所述測量。作為對照2，通過使用相同濃度的新鮮王漿的相同的方法實施了所述測量。通過百分比，用對照1和對照2的TNF-α活性的差異作為100，表示抑制TNF-α產生的相對活性。按照實驗1-2中的方法評價了來自王漿的各制備物和ARRJ的過敏性。結果在表6中。表6*，王漿**，超濾***，本發(fā)明的過敏原減少的王漿如從表6中結果明顯的是，通過水分級和膜分離，具有過敏性的物質被移到UF濃縮液中。與原料新鮮王漿的過敏性相比，通過將水分級的沉淀與UF過濾液混合而制備的ARRJ的過敏性被減少至1/3。進一步地，顯示在來自原料新鮮王漿的本發(fā)明ARRJ中恢復了大約90％的抑制TNF-α產生的活性，該活性是王漿固有表現出的消炎作用的指標。如上所述，可以得出結論，本發(fā)明的ARRJ適用于保持與增強健康，因為王漿中固有的過敏性被減少了并且其有用的藥理作用被很好地保持。實驗5用凝膠等電聚焦比較ARRJ和新鮮王漿中包含的蛋白質為了比較通過實驗3的方法制備的ARRJ中包含的蛋白質和原料中國王漿中包含的蛋白質，將二者樣品都進行凝膠等電聚焦。將ARRJ和新鮮王漿各40mg放入試管中并真空干燥。將生成物溶解到100μl用于等電聚焦的溶液中，該溶液包含8M尿素、4％(w/v)CHAPS和0.5％(w/v)“Pharmalyte”，一種由日本東京AmershamBiosciencesK.K.公司商品化的載體兩性電解質，然后與150μl溶液混合，該溶液包含8M尿素、4％(w/v)CHAPS、50mM二硫蘇糖醇和1％的IPG緩沖液，由日本東京AmershamBiosciencesK.K.公司商品化，以制備電泳樣品。接著，將樣品放入一個專用容器中，并將由日本東京AmershamBiosciencesK.K.公司商品化的用于等電聚焦的預制凝膠，“IMMOBILINEDryStrip，pH3-10，13cm”浸入所述樣品溶液中。通過在室溫下保持16小時允許吸收樣品，所述凝膠被膨脹。用所得凝膠進行等電聚焦，條件是100V兩小時，300V五小時和3,500V12小時。等電聚焦后，通過將凝膠浸在包含0.025％(w/v)考馬斯亮藍(CBB)R-250、40％(v/v)甲醇和7％(v/v)醋酸的溶液中對凝膠中分離的蛋白質染色。接著，通過在室溫下在包含40％(v/v)甲醇和7％(v/v)醋酸的溶液中攪拌30分鐘和在包含5％(v/v)甲醇和7％(v/v)醋酸的溶液中攪拌5小時將染色的凝膠脫色。將ARRJ中或新鮮王漿中包含的蛋白質粗分成具有邊界等電點5的的兩個蛋白質組。因此，通過如下步驟比較了顯示等電點低于5和等電點為5或更高的蛋白質的百分比(％)用由日本東京島津(Shimadzu)公司商品化的凝膠掃描儀，“DUAL-WAVELENGTHCHROMATOSCANNERCS-930”分析脫色的凝膠，和測定600nm處吸收峰的面積比。關于ARRJ和新鮮王漿的四次獨立試驗的平均結果分別在表7中。表7*，四次獨立試驗的平均值**，等電點如從表7中所示結果明顯的是，在通常的新鮮王漿中，顯示等電點為5或更高的蛋白質的百分比為總蛋白質的大約42％。然而，本發(fā)明ARRJ的該百分比是大約57％。該結果提示，水溶性蛋白質，具有強過敏性，通過水分級被減少，包含相對大量的具有等電點低于5的蛋白質。本發(fā)明ARRJ的特征是這一事實以凝膠等電聚焦時，顯示等電點為5或更高的蛋白質與等電點小于5的蛋白質的比是1或更高，如在本說明書中描述的，所述凝膠等電聚焦是在8M尿素和pH3-10的范圍內進行的。盡管以下實施例具體地解釋了本發(fā)明，但本發(fā)明不被它們限制實施例A-1ARRJ的制備將10千克巴西新鮮王漿與40千克4℃的去離子水混合并攪拌以得到均勻的分散體。接著，用離心分離機“ModelKT-2000G”，由日本東京Kubota制造公司商品化，將得到的懸浮液以10,000×g和10L/小時的流速連續(xù)離心以得到上清液和沉淀。用“AIP2013”，一種UF膜，它具有6,000道爾頓的分子量切割值，由日本東京AsahiKasei公司商品化，將得到的上清液進行超濾。用少量的去離子水作為稀釋溶劑將所述上清液分離成UF過濾液和UF濃縮液。用“HOLLOSEP”，一種反滲透膜，由日本Osaka的Toyobo公司商品化，在50kgf/cm2的壓力下，將大約40L的所得UF過濾液濃縮以得到大約5千克的重量。將得到的濃縮液與前面提到的通過離心得到的沉淀混合并攪拌至均勻以生產ARRJ。在ARRJ中，總蛋白質與10-羥基-2-壬烯二酸的重量比，以游離脂肪酸為基礎，是3.7。通過用凝膠等電聚焦分析，顯示等電點為5或更高的蛋白質與等電點低于5的蛋白質的量比是大約1.3。實施例A-2ARRJ的制備將20千克中國新鮮王漿與80千克4℃的去離子水混合并攪拌以得到均勻的分散體。接著，用離心分離機“ModelKT-2000G”，由日本東京Kubota制造公司商品化，以10,000×g和10L/小時的流速，將得到的懸浮液連續(xù)離心以得到上清液和沉淀。再將得到的沉淀與80千克4℃的去離子水混合并用上述相同的方式處理以得到沉淀。將通過上述水分級得到的第一次和第二次上清液混合，并用“AIP2013”，一種UF膜，它具有6,000道爾頓的分子量切割值，由日本東京AsahiKasei公司商品化，將得到的溶液進行超濾。用少量的去離子水作為稀釋溶劑將所述溶液分離成UF過濾液和UF濃縮液。用“HOLLOSEP”，一種反滲透膜，由日本大阪Toyobo公司商品化，在50kgf/cm2的壓力下，將大約160L的所得UF過濾液濃縮以得到大約12千克的重量。將得到的濃縮液與前面提到的通過離心得到的沉淀混合并攪拌至均勻以生產ARRJ。在ARRJ中，總蛋白質與10-羥基-2-壬烯二酸的重量比，以游離脂肪酸為基礎，是4.2。通過用凝膠等電聚焦分析，顯示等電點為5或更高的蛋白質與等電點低于5的蛋白質的量比是大約1.2。實施例A-3ARRJ的制備將5重量份中國新鮮王漿與20重量份4℃的去離子水混合并攪拌以得到均勻的分散體。接著，用離心分離機“ModelKT-2000G”，由日本東京Kubota制造公司商品化，以10,000×g和10L/小時的流速將得到的懸浮液連續(xù)離心以得到上清液和沉淀。再將得到的沉淀與20重量份4℃的去離子水混合并用上述相同的方式處理以得到沉淀。將通過上述水分級得到的第一次和第二次上清液混合，并用“TOYOPEARLHW-40F”凝膠，一種用于凝膠過濾的凝膠，由日本東京Tosoh公司商品化，將得到的溶液進行凝膠過濾層析。通過用去離子水洗脫，將所述組分分離成高分子級分與低分子級分。在40℃下，用“ModelRE-10E-100”，一種減壓蒸發(fā)器，由日本東京的Shibata科技公司商品化，將得到的低分子級分濃縮以得到8重量份。將得到的濃縮液與前面提到的通過離心得到的沉淀混合并攪拌至均勻以生產ARRJ。在ARRJ中，總蛋白質與10-羥基-2-壬烯二酸的重量比，以游離脂肪酸為基礎，是4.9。通過用凝膠等電聚焦分析，顯示等電點為5或更高的蛋白質與等電點低于5的蛋白質的量比是大約1.25。參考實施例無水α，α-海藻糖的制備用具有套層的旋轉真空干燥器，在90℃和-300到-350mmHg氣壓的條件下，將“TREHA”，一種由日本岡山HayashibaraShoji公司商品化的含水α，α-海藻糖產品，減壓干燥大約7個小時。干燥后，通過將所述溫度降低到室溫、氣壓恢復到大氣狀況和收集產物的步驟得到了無水α，α-海藻糖。實施例B-1健康食品用“ModelMDR-60”，一種由日本東京Dalton公司商品化的多用途混合器，將5重量份的通過參考實施例的方法得到的無水α，α-海藻糖與1重量份的通過實施例A-1的方法得到的ARRJ混合至均勻達15分鐘。在40℃下真空干燥所得混合物過夜后，用“POWERMILLP-3”，一種由日本東京Dalton公司商品化的粉碎機，濾網孔徑0.5毫米，將產物粉碎。用制片機將得到的粉末狀組合物形成每片大約200mg的片。該產品是一種易于使用的組合物并具有顯著的效能。由于該產品表現出輕微的甜度和適度的酸度，所以它是一種供每日應用的有益健康食品。實施例B-2健康食品通過以下列比例混合下列成分并按照實施例B-1中的步驟處理得到的混合物的步驟，制備了包含呈粉末狀形式的本發(fā)明的ARRJ的組合物。制備后，按照實驗1的實驗證實，該組合物具有減少的過敏性。通過參考實施例的方法得到的無水α，α-海藻糖8.5重量份通過實施例A-2的方法得到的ARRJ0.5重量份“αG-桔皮苷PS”，一種由日本岡山HayashibaraShoji公司商品化的糖轉移的桔皮苷0.5重量份“PULLULANPF-20”，一種由日本岡山HayashibaraShoji公司商品化的普魯蘭產品0.5重量份用制片機將包含ARRJ的所述組合物形成每片大約300mg的片。該產品是一種過敏性被減少的組合物并具有顯著的功效。由于該產品具有輕微的甜度和適度的酸度，所以它是一種供每日應用的有益健康食品。實施例B-3健康食品通過以下列比例混合下列成分并按照實施例B-1中的步驟處理得到的混合物的步驟，制備了包含呈粉末狀形式的本發(fā)明ARRJ的組合物。制備后，按照實驗1的實驗證實，該組合物具有減少的過敏性。參考實施例的方法得到的無水α，α-海藻糖7.5重量份實施例A-3的方法得到的ARRJ1.0重量份麥芽糖醇1.3重量份L-色氨酸0.2重量份該產品是一種包含ARRJ的組合物，其中過敏性被減少并具有顯著的功效。由于該產品顯示好的口味，具有輕微的甜度和適度的酸度，所以它是一種供每日應用的有益健康食品。實施例B-4冰淇淋將18重量份的新鮮奶油(脂肪含量大約46％(w/w))、7重量份的脫脂牛奶、51重量份的牛奶、10重量份的蔗糖、4重量份的“NYUKAOLIG0”，一種包含乳蔗糖(lactosucrose)粉末狀產品、2重量份的普魯蘭和2重量份的阿拉伯膠混合并溶解。通過在70℃保持30分鐘使所述混合物滅菌后，用均化器將產物乳化并分散，然后快速冷卻到3-4℃，并與4重量份的通過實施例A-2方法得到的ARRJ混合。使混合物老化一個晚上后，通過冷凍在冰箱中得到了冰淇淋。該產品是一種具有適度的甜度和好口味并有益于保持與增強健康的冰淇淋。實施例B-5日式糙米糖漿(“Amazake”)按照常規(guī)方法將10重量份的拋光大米與水混合并煮沸。接著，將煮沸的大米冷卻到55℃，并與30重量份的通過常規(guī)方法制備的“koji”及0.1重量份的氯化鈉混合，然后在50-55℃下放置8小時。用混合器將混合物均化并冷卻到大約25℃后，將2重量份的通過實施例A-1的方法得到的ARRJ與得到的勻漿混合、攪拌、打包到包裝以產生“amazake”。該產品是高質量的“amazake”，有令人滿意的色澤與口味，此外它還是一種有益于保持與促進健康的飲料。實施例B-6健康飲料通過將500重量份的“FINETOSE”，一種無水麥芽糖晶體產品、100重量份的通過實施例A-1的方法得到的ARRJ、190重量份的粉末化的蛋黃、200重量份的脫脂牛奶、2重量份的“AA2G”，一種由日本岡山HayashibaraBiochemicalLaboratories公司商品化的糖轉移的維生素C、4.4重量份的氯化鈉、1.85重量份的氯化鉀、4重量份的硫酸鎂、0.01重量份的硫胺素、0.1重量份的L-抗壞血酸鈉鹽、0.6重量份的醋酸維生素E和0.04重量份的煙酰胺混合，生產了一種組合物。將25重量份的上述組合物與150重量份的純凈水混合，溶解以得到均勻的分散體，并在棕色玻璃瓶中各裝150克。由于該產品具有減少的過敏性并補充有營養(yǎng)物，所以它有利地被用作為保持健康、促進生長、預防疾病、促進治愈、促進運動后從痛苦中恢復目的的健康飲料。該產品可被有利地用作供動物例如家養(yǎng)動物以及人類口攝取或經管施用的組合物。實施例B-7寵物食品(樹膠狀)將30重量份的蔗糖與8重量份的水混合并加熱溶解。將產物與50重量份的淀粉糖漿混合并煮沸以得到85-90°的白利值后，使混合物冷卻到80℃或更地。接著，將通過混合7重量份的明膠與10重量份的水并加熱溶解而制備的溶液與上述糖溶液混合。接著，將得到的混合物進一步與2重量份的牛肉提取物、3重量份的50％(w/w)檸檬酸水溶液、1重量份的通過實施例A-1的方法得到的ARRJ以及合適量的香味劑混合并攪拌至均勻。將如此得到的組合物倒入淀粉鑄模中，通過保存一個晚上使其固化后以產生呈樹膠狀的寵物食品。由于該產品包含了過敏性被減少的ARRJ并補充有營養(yǎng)物，所以它可被有利地用作為保持健康、促進生長、預防疾病、促進寵物治愈目的的寵物食品。該產品可被有利地用作為供動物例如各種寵物和家養(yǎng)動物以及貓和狗口攝取的組合物。實施例B-8外用的皮膚霜劑按照以下比例將下列成分常規(guī)地加熱混合。聚氧乙烯(polyoxyethlene)甘油單硬脂酸酯2.0重量份自乳化甘油單硬脂酸酯5.0重量份Eicosanylbehenoate1.0重量份液體石蠟1.9重量份Trimethyrolpropanetrioctanoate10.0重量份按照下列比例將除ARRJ以外的下列成分與上述混合物混合并冷卻到30℃或更地。進一步地，按下列比例將ARRJ與所得產物混合并用均化器乳化以產生外用的皮膚霜劑。1，3-丁二醇5.0重量份乳酸鈉水溶液10.0重量份對羥苯甲酸甲酯(Methylparaoxybenzoate)0.1重量份桃樹葉提取物1.5重量份純凈水62.2重量份通過實施例A-3的方法得到的ARRJ1.0重量份由于該霜劑具有令人滿意的水分保留能力并且王漿的過敏性被減少了，所以沒有引起過敏癥狀的擔憂。因此，該霜劑適用作用于保持皮膚清爽的基礎化妝品。工業(yè)實用性如從上明顯的是，本發(fā)明是基于原創(chuàng)性知識，即水溶性蛋白質在總蛋白質中的含量被減少到小于50％的ARRJ顯示出顯著低的過敏性并保留王漿的有益的藥理作用。由于ARRJ沒有引起嚴重過敏癥狀的擔憂，所以它可以被包括人類在內的哺乳動物容易和舒適地用于保持和增強他們的健康。此外，本發(fā)明的ARRJ，具有上述優(yōu)點，通過與其它成分摻合，可被有利地用作各種組合物，例如食品、飲料、飼料、餌、寵物食品和化妝品。本發(fā)明具有上述顯著的效果并且是對本
技術領域：
有重大貢獻的非常重要的發(fā)明。權利要求1.一種過敏原減少的王漿，其中水溶性蛋白質的量被減少至小于總蛋白質的量的50％(w/w)。2.權利要求1的過敏原減少的王漿，其中過敏原被消除而不本質上喪失王漿的有益的藥理作用。3.權利要求1或2的過敏原減少的王漿，其中所述總蛋白質與10-羥基-2-壬烯二酸的重量比，以游離脂肪酸為基礎，小于6。4.生產過敏原減少的王漿的方法，該方法包括如下步驟通過添加水并離心將王漿分離成沉淀和包含水溶性蛋白質的上清液；通過用超濾或凝膠過濾色譜法從得到的上清液中除去包含水溶性蛋白質的高分子物質而收集低分子物質；以及將得到的低分子物質與前面所說的沉淀混合。5.權利要求1至3中任一項的過敏原減少的王漿，它可通過權利要求4的方法獲得。6.一種包含權利要求1至3中任一項或權利要求5的過敏原減少的王漿的組合物。7.一種通過將權利要求1至3中任一項或權利要求5的過敏原減少的王漿摻入無水糖而生產的組合物。8.權利要求7的組合物，其中所說的無水糖是無水海藻糖、無水麥芽糖和無水環(huán)四糖中的任意一種。9.權利要求6至8中任一項的組合物，該組合物進一步包含糖轉移的維生素C。10.權利要求6至9中任一項的組合物，該組合物進一步包含一種或多種抗氧化物質。11.權利要求10的組合物，其中所說的抗氧化物質是類黃酮、多酚類、維生素E和維生素C。12.權利要求6至11中任一項的組合物，它呈食品、飼料、餌、寵物食品或化妝品的形式。全文摘要本發(fā)明旨在提供精制的王漿、生產該王漿的方法及其應用，該王漿具有減少的過敏性但保留了王漿固有的有益藥理學作用。在上述精制的王漿中，基于總蛋白質含量，水溶性蛋白質的含量被減少到50％重量或更低。生產該王漿的方法其特征在于包括以下步驟往王漿中添加水并離心由此使混合物分離成沉淀與含有水溶性蛋白質的上清液，將得到的上清液進行超濾或凝膠過濾由此除去含有水溶性蛋白質的高分子量物質并收集低分子量物質，以及將如此得到的低分子量物質與上述沉淀混合。文檔編號A23K1/18GK1688209SQ0382376公開日2005年10月26日申請日期2003年9月4日優(yōu)先權日2002年9月6日發(fā)明者澀谷孝,福田惠溫,三宅俊雄申請人:林原健