專利名稱：霍霍巴組培快速繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到本發(fā)明涉及霍霍巴的組培快速繁殖方法，屬于植物的人工繁殖和栽培方法技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
霍霍巴(Simmondisa Chinesis)，英文名Jojoba，霍霍巴科，霍霍巴屬。原產(chǎn)墨西哥和美國(guó)加州，雌雄異株。種子中的霍霍巴油含量達(dá)50％以上，主要成分是不飽和高級(jí)醇和脂肪酸，有良好的穩(wěn)定性，極易與皮膚融合。具有抗氧化、耐高溫等特性，是高科技領(lǐng)域的高級(jí)潤(rùn)滑油和制造醫(yī)藥和化妝品的原料，被稱為“二十一世紀(jì)可再生資源”和“植物黃金”。霍霍巴在我國(guó)主要依靠進(jìn)口種子繁殖，而且繁殖力很低。目前廣西、廣東、云南等省、區(qū)有少數(shù)引種，關(guān)于霍霍巴成年植株和實(shí)生苗的莖尖繁殖的報(bào)道很少，并且存在很多問(wèn)題，主要表現(xiàn)在多芽率低、玻璃苗嚴(yán)重、易褐化、難以生根以及生根時(shí)間長(zhǎng)。因而嚴(yán)重制約了霍霍巴在我國(guó)的大面積推廣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種霍霍巴組培快速繁殖方法，進(jìn)行工廠化生產(chǎn)以滿足市場(chǎng)需求。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的這種霍霍巴組培快速繁殖方法，其主要特點(diǎn)是A、莖尖消毒取霍霍巴植物莖尖，用流水沖洗8-12小時(shí)，用濾紙吸取多余水分，然后用二氯化汞0.1％消毒3-5分鐘，無(wú)菌水沖洗至清；
B、啟動(dòng)培養(yǎng)將沖洗至清的材料修剪至0.3厘米以上，接種到如下比例的啟動(dòng)培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)基4736.43毫克/升、水解乳蛋白200毫克/升，植物生長(zhǎng)激素0.5-4毫克/升，食用糖15-40克/升，水余量；放置接種室，培養(yǎng)溫度22-26℃，光照強(qiáng)度1000-3000勒克司，進(jìn)行光照培養(yǎng)；C、增殖培養(yǎng)將培育3厘米以上的試管苗分別剪成0.5厘米以上的莖段，按照如下比例接種到增殖培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)基4736.43毫克/升、肌醇200-500毫克/升，水解乳蛋白200-500毫克/升，植物生長(zhǎng)激素0.5-4毫克/升，聚乙烯醇1-3克/升，食用糖15-40克/升，水余量；進(jìn)行增殖培養(yǎng)30-40天；D、生根培養(yǎng)剪取3厘米左右的健壯試管苗，按照如下比例接種到生根培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)基2368.22毫克/升、添加植物生長(zhǎng)激素0.5-4毫克/升，活性炭0.5-1‰，食用糖20克/升，水余量；進(jìn)行生根培養(yǎng)20-30天。
所述的霍霍巴組培快速繁殖方法的延伸技術(shù)方案包括步驟B、C、D中霍霍巴組培所述的培養(yǎng)基中涉及的植物生長(zhǎng)激素包括6-糠基嘌呤，6-芐基嘌呤，赤霉素、吲哚丁酸，吲哚乙酸，萘乙酸其中一種或幾種。
所述的霍霍巴組培快速繁殖方法的延伸技術(shù)方案還包括步驟B、中霍霍巴組培所述的啟動(dòng)培養(yǎng)基中涉及的植物生長(zhǎng)激素包括6-糠基嘌呤1-2毫克/升，6-芐基嘌呤0.5-4.0毫克/升。所述的霍霍巴組培快速繁殖方法的延伸技術(shù)方案還包括步驟C中霍霍巴組培所述的增殖培養(yǎng)基中涉及的植物生長(zhǎng)激素包括6-芐基嘌呤0.5-3毫克/升，赤霉素0.5-1毫克/升。
所述的霍霍巴組培快速繁殖方法延伸技術(shù)方案還包括步驟D中霍霍巴組培所述的生根培養(yǎng)基中涉及的植物生長(zhǎng)激素包括吲哚丁酸0.5-3毫克/升，吲哚乙酸0.5毫克/升，萘乙酸0.5毫克/升。
采用植物組織培養(yǎng)的方法繁殖霍霍巴，不僅可以節(jié)約大量外匯，而且不受外界條件的影響，四季皆可進(jìn)行，節(jié)約育苗占地，降低生產(chǎn)成本。植物組織培養(yǎng)技術(shù)是利用細(xì)胞的全能性，采取植物體上的細(xì)胞團(tuán)或一塊組織，通過(guò)人為條件的控制，使這些組織形成千百萬(wàn)植株，并且保存了母體的全部?jī)?yōu)良性狀，且遺傳性狀穩(wěn)定。這種方法可在短期內(nèi)形成大量?jī)?yōu)良試管苗，進(jìn)行規(guī)?；?、工廠化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合霍霍巴組培的繁殖實(shí)例說(shuō)明本發(fā)明的具體實(shí)施方式
。
實(shí)施例11、取霍霍巴植物材料的莖尖，用流水沖洗8-12小時(shí)，用濾紙吸取多余水分，然后用二氯化汞0.1％消毒3-5分鐘，無(wú)菌水沖洗至清。
2、將沖洗至清的材料修剪至0.3厘米以上，接種到本發(fā)明的啟動(dòng)培養(yǎng)基中，啟動(dòng)培養(yǎng)基的組成比例是在4736.43毫克/升MS基本培養(yǎng)基中加入水解乳蛋白200毫克/升，6-糠基嘌呤2毫克/升，6-芐基嘌呤0.5毫克/升，食用糖2500毫克/升，水余量。放置接種室，進(jìn)行光照培養(yǎng)。
3、將培育3厘米以上的試管苗分別剪成0.5厘米以上的莖段，接種到本發(fā)明的增殖培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)基的組成比例包括在4736.43毫克/升MS基本培養(yǎng)基中加入肌醇200毫克/升，水解乳蛋白500毫克/升，6-芐基嘌呤3毫克/升，赤霉素0.5毫克/升，聚乙烯醇1-3克/升，食用糖3000毫克/升，水余量。進(jìn)行增殖培養(yǎng)，盡快達(dá)到所需數(shù)量。一般5天以后芽開(kāi)始萌動(dòng)，20天左右芽分化數(shù)達(dá)到8.5±2。該培養(yǎng)基玻璃化現(xiàn)象明顯降低，與對(duì)照相比，一般可以降低50％以上。待試管苗長(zhǎng)至3厘米以上，進(jìn)行生根培養(yǎng)。
4、剪取3厘米左右的健壯試管苗接種到本發(fā)明的生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基中是以2368.22MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加吲哚丁酸2毫克/升，吲哚乙酸0.5毫克/升，萘乙酸0.5毫克/升，活性炭0.5-1‰，食用糖20克/升，水余量，進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)5-8天左右，基部膨大。培養(yǎng)25天左右，生根率100％。根數(shù)達(dá)3-5條，根長(zhǎng)0.5厘米左右即可移栽。在正常管理?xiàng)l件下，一般移栽成活率90％以上。
本發(fā)明組培的培養(yǎng)基中由于使用了聚乙烯醇、活性碳等保護(hù)性組分，并且根據(jù)不同培養(yǎng)需求選擇性地使用植物生長(zhǎng)激素，多芽率大幅度提高，可達(dá)8.5±2，最多達(dá)18芽/塊；玻璃化苗10％以下；褐化率為0；生根率100％，生根時(shí)間在25天左右。本發(fā)明試管苗增殖系數(shù)8以上，一年可繼代10次。在廠房面積為50平方米的條件下，每一外植體可年產(chǎn)試管苗500萬(wàn)株以上。并且遺傳性狀穩(wěn)定，完全可以進(jìn)行工廠化生產(chǎn)。
實(shí)施例21、取霍霍巴植物材料的莖段，用流水沖洗12-24小時(shí)，用濾紙吸取多余水分，然后用二氯化汞0.1％常規(guī)消毒后，無(wú)菌水沖洗至清。
2、將沖洗至清的材料修剪至0.3厘米以上，接種到本發(fā)明的啟動(dòng)培養(yǎng)基中，啟動(dòng)培養(yǎng)基的組成比例是在4736.43毫克/升MS基本培養(yǎng)基中加入水解乳蛋白200毫克/升，6-糠基嘌呤1毫克/升，6-芐基嘌呤0.5毫克/升，食用糖2500毫克/升，水余量，放置接種室，進(jìn)行光照培養(yǎng)。
3、將培育3厘米以上的試管苗分別剪成0.5厘米以上的莖段，接種到本發(fā)明的增殖培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)基的組成比例是在4736.43毫克/升MS基本培養(yǎng)基中加入肌醇500毫克/升，水解乳蛋白200毫克/升，6-芐基嘌呤0.5-2毫克/升，赤霉素1毫克/升，聚乙烯醇1-3克/升，食用糖40克/升，水余量，進(jìn)行增殖培養(yǎng)。待試管苗長(zhǎng)至5厘米左右時(shí)，進(jìn)行生根培養(yǎng)。該培養(yǎng)玻璃化現(xiàn)象明顯降低，與對(duì)照相比，一般可以降低50％以上。待試管苗長(zhǎng)至3厘米以上，進(jìn)行生根培養(yǎng)。
4、剪取3厘米左右的健壯試管苗接種到本發(fā)明的生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基的組成比例是2368.22MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加吲哚丁酸3毫克/升，吲哚乙酸0.5毫克/升，活性炭0.5-1‰，食用糖20克/升，水余量，進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)5-8天左右，基部膨大。培養(yǎng)25天以上即可生根，生根率100％，根數(shù)3-5條，根長(zhǎng)0.5厘米左右。在正常管理?xiàng)l件下，移栽成活率90％以上。
權(quán)利要求
1.霍霍巴組培快速繁殖方法，其特征在于A、莖尖消毒取霍霍巴植物莖尖，用流水沖洗8-12小時(shí)，用濾紙吸取多余水分，然后用二氯化汞0.1％消毒3-5分鐘，無(wú)菌水沖洗至清；B、啟動(dòng)培養(yǎng)將沖洗至清的材料修剪至0.3厘米以上，接種到如下比例的啟動(dòng)培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)基4736.43毫克/升、水解乳蛋白200毫克/升，植物生長(zhǎng)激素0.5-4毫克/升，食用糖15-40克/升，水余量；放置接種室，培養(yǎng)溫度22-26℃，光照強(qiáng)度1000-3000勒克司，進(jìn)行光照培養(yǎng)；C、增殖培養(yǎng)將培育3厘米以上的試管苗分別剪成0.5厘米以上的莖段，按照如下比例接種到增殖培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)基4736.43毫克/升、肌醇200-500毫克/升，水解乳蛋白200-500毫克/升，植物生長(zhǎng)激素0.5-4毫克/升，聚乙烯醇1-3克/升，食用糖15-40克/升，水余量；進(jìn)行增殖培養(yǎng)30-40天；D、生根培養(yǎng)剪取3厘米左右的健壯試管苗，按照如下比例接種到生根培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)基2368.22毫克/升、添加植物生長(zhǎng)激素0.5-4毫克/升，活性炭0.5-1‰，食用糖20克/升，水余量；進(jìn)行生根培養(yǎng)20-30天。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的霍霍巴組培快速繁殖方法，其特征在于步驟B、C、D中霍霍巴組培所述的培養(yǎng)基中涉及的植物生長(zhǎng)激素包括6-糠基嘌呤，6-芐基嘌呤，赤霉素、吲哚丁酸，吲哚乙酸，萘乙酸其中一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的霍霍巴組培快速繁殖方法，其特征在于步驟B、中霍霍巴組培所述的啟動(dòng)培養(yǎng)基中涉及的植物生長(zhǎng)激素包括6-糠基嘌呤1-2毫克/升，6-芐基嘌呤0.5-4.0毫克/升。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的霍霍巴組培快速繁殖方法，其特征在于步驟C中霍霍巴組培所述的增殖培養(yǎng)基中涉及的植物生長(zhǎng)激素包括6-芐基嘌呤0.5-3毫克/升，赤霉素0.5-1毫克/升。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的霍霍巴組培快速繁殖方法，其特征在于步驟D中霍霍巴組培所述的生根培養(yǎng)基中涉及的植物生長(zhǎng)激素包括吲哚丁酸0.5-3毫克/升，吲哚乙酸0.5毫克/升，萘乙酸0.5毫克/升。
全文摘要
本發(fā)明提供一種霍霍巴組培快速繁殖方法，進(jìn)行工廠化生產(chǎn)以滿足市場(chǎng)需求?；艋舭偷慕M培步驟包括A.莖尖消毒,B.啟動(dòng)培養(yǎng),C.增殖培養(yǎng),D.生根培養(yǎng)。采用植物組織培養(yǎng)的方法繁殖霍霍巴，不僅可以節(jié)約大量外匯，而且不受外界條件的影響，四季皆可進(jìn)行，節(jié)約育苗占地，降低生產(chǎn)成本，并且保存了母體的全部?jī)?yōu)良性狀，遺傳性狀穩(wěn)定。這種方法可在短期內(nèi)形成大量?jī)?yōu)良試管苗，進(jìn)行規(guī)?；?、工廠化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A01H4/00GK1541517SQ20031010964
公開(kāi)日2004年11月3日 申請(qǐng)日期2003年11月6日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月6日
發(fā)明者王玉珍, 羅景蘭, 徐進(jìn) 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所