專利名稱：白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)的快速繁苗方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及白首烏的繁苗方法，尤其是一種白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)的快速繁苗方法技術(shù)背景白首烏(Cynanch auriculatum Royle ex wight)為蘿蘑科鵝絨藤屬多年生草本植物。白首烏為常用中藥何首烏的地區(qū)品種之一，何首烏始載于宋《開寶本草》。馬志曰“有赤、白二種，赤者雄，白者雌……”“春秋采其根，雌雄并用”。明李中梓指出“白者入氣，赤者入血，赤白合用，氣血交培?！薄侗静菥V目》收載的以何首烏為主藥的補(bǔ)益方，均按赤白何首烏各半的原則炮制和配伍?？梢?jiàn)自古以來(lái)何首烏就有赤白之分，并有赤白合用的傳統(tǒng)。白首烏主要有效成分為磷脂類及C21甾甙，還含有豐富的淀粉、蛋白質(zhì)、多種維生素和多種礦物質(zhì)等。白首烏味甘、微苦，性微溫。具安神補(bǔ)血、收斂精氣、養(yǎng)陰補(bǔ)虛、健脾益氣的功效；可用于失眠健忘、神經(jīng)衰弱、陽(yáng)萎、遺精、筋骨不健、消化不良及少白頭等癥。近代研究認(rèn)為表明白首烏含有人體必須各種氨基酸微量元素、無(wú)機(jī)鹽、維生素和其他營(yíng)養(yǎng)成分，且無(wú)毒，具補(bǔ)血、補(bǔ)氣、抗衰老、降血脂、降膽固醇及促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的作用，并且對(duì)體外癌細(xì)胞有一定的殺傷作用，體內(nèi)試驗(yàn)證實(shí)對(duì)艾氏實(shí)體瘤有一定抑制作用?？墒辜?xì)胞免疫和體液免疫逐步恢復(fù)正常。
白首烏野生于河北、河南、江蘇、安徽、山東等十多個(gè)省(自治區(qū))，在香港及東南亞等地深受歡迎，產(chǎn)量供不應(yīng)求。近年來(lái)，在江蘇、山東等省已開始人工栽培。2002年下半年以來(lái)，韓國(guó)客商開始從我國(guó)進(jìn)口大量鮮品，無(wú)論是家栽產(chǎn)品，還是野生產(chǎn)品均供不應(yīng)求。此外，我國(guó)江蘇濱海等地也有以白首烏為原料的保健品廠，其原料的供應(yīng)也是供不應(yīng)求，因此擴(kuò)大白首烏的生產(chǎn)勢(shì)在必行。
傳統(tǒng)的自首烏繁殖方法主要采用藤蔓扦插和種子播種的繁殖方法，繁殖周期長(zhǎng)、繁殖系數(shù)較低，不能滿足生產(chǎn)快速發(fā)展的需要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)傳統(tǒng)的白首烏繁殖方法存在的問(wèn)題，提供一種通過(guò)組織培養(yǎng)的快速繁苗方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)的快速繁苗方法，其特征在于白首烏接種在生芽培養(yǎng)基上萌發(fā)小植株；將白首烏萌發(fā)小植株的莖尖、莖段在增殖培養(yǎng)基上繼代增殖；白首烏繼代增殖后的小苗在生根培養(yǎng)基上生根；將具有4～7條根的白首烏幼苗移栽于由珍株巖、泥炭土和園土三者按體積比1∶1∶1的比例配制的基質(zhì)中，移栽成活的幼苗定植于大田中。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于應(yīng)用組織培養(yǎng)的手段，克服白首烏常規(guī)育苗周期長(zhǎng)、繁殖系數(shù)低等缺點(diǎn)，達(dá)到工廠化快速育苗，以適應(yīng)生產(chǎn)上對(duì)白首烏的大量需求。同時(shí)，由于組織培養(yǎng)時(shí)直接選取白首烏的根、莖段、莖尖，拓寬了白首烏組培快繁的取材范圍，組織培養(yǎng)中能對(duì)每個(gè)環(huán)節(jié)實(shí)施監(jiān)控，大大提高了繁殖速度和移栽成活率。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一將白首烏塊根在自來(lái)水下沖洗干凈，將塊根切成5cm左右長(zhǎng)度的根段，置于1升的燒杯中，用75％酒精浸泡1分鐘，無(wú)菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無(wú)菌水水洗六次。用無(wú)菌濾紙汲干表面水分，然后將塊根切成0.2cm2左右大小的帶皮小塊，帶皮面朝上接種于MS培養(yǎng)基上。約半個(gè)月左右白首烏小植株從根塊上萌發(fā)。
實(shí)施例二將白首烏莖段在自來(lái)水下沖洗干凈，將莖段切成5cm左右長(zhǎng)的大小，置于1升的燒杯中，用75％酒精浸泡30秒，無(wú)菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無(wú)菌水水洗五次。用無(wú)菌濾紙汲干表面水分，莖段切成每節(jié)一小莖段后接種于MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養(yǎng)基上，1周左右小莖段的側(cè)芽萌發(fā)形成小植株。
實(shí)施例三將白首烏莖尖在自來(lái)水下沖洗干凈，置于1升的燒杯中，用75％酒精浸泡30秒，無(wú)菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無(wú)菌水水洗四次。用無(wú)菌濾紙汲干表面水分，剝?nèi)デo尖外部葉片后接種于MS+ZT2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養(yǎng)基上，1周左右莖尖萌發(fā)形成小植株。
實(shí)施例四把實(shí)施例1～3培養(yǎng)形成的小植株的莖段切成每節(jié)一小莖段和莖尖后，將小莖段及莖尖接種于MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L增殖培養(yǎng)基上，白首烏的小莖段及莖尖在此增殖培養(yǎng)基上快速繼代增殖，形成白首烏小苗。白首烏小莖段及莖尖在增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，平均月增殖倍數(shù)可達(dá)4.14倍以上。
將具有4片葉的白首烏小苗接種在MS+IBA 0.05mg/L的生根培養(yǎng)基上，10天左右開始有不定根萌發(fā)，30天左右平均每株根數(shù)達(dá)到7.95條左右，形成白首烏幼苗，即可進(jìn)行移栽。
將苗高8cm左右，具有4～7條根的白首烏幼苗移栽于由珍株巖、泥炭土和園土三者按體積比1∶1∶1的比例配制的基質(zhì)中，移栽成活率可以達(dá)到95％。移栽1個(gè)月左右即可將白首烏幼苗移植于大田。
權(quán)利要求
1.一種白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)的快速繁苗方法，其特征在于a)白首烏接種在生芽培養(yǎng)基上萌發(fā)小植株；b)將白首烏萌發(fā)小植株的莖尖、莖段在增殖培養(yǎng)基上繼代增殖；c)白首烏繼代增殖后的小苗在生根培養(yǎng)基上生根；d)將具有4～7條根的白首烏幼苗移栽于由珍株巖、泥炭土和園土三者按體積比1∶1∶1比例配制的基質(zhì)中，移栽成活的幼苗定植于大田中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)的快速繁苗方法，其特征在于生芽培養(yǎng)基選擇MS基本培養(yǎng)基，所述的白首烏接種在生芽培養(yǎng)基上萌發(fā)小植株，是將白首烏的根塊接種在MS基本培養(yǎng)基上萌發(fā)小植株。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)基的快速繁苗方法，其特征在于所述的將白首烏的根塊接種在MS基本培養(yǎng)基上，是將白首烏塊根在自來(lái)水下沖洗干凈，將塊根切成4～6cm長(zhǎng)度的根段，用75％酒精浸泡1分鐘，無(wú)菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無(wú)菌水水洗后，用無(wú)菌濾紙汲干表面水分，然后將塊根切成0.15～0.25cm2的帶皮小塊，帶皮面朝上接種于MS培養(yǎng)基上。
4.據(jù)權(quán)利要求1所述的白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)的快速繁苗方法，其特征在于生芽培養(yǎng)基選擇MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養(yǎng)基，所述的白首烏接種在生芽培養(yǎng)基上萌發(fā)小植株，是將白首烏的莖尖或莖段接種在MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養(yǎng)基上萌發(fā)小植株。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)的快速繁苗方法，其特征在于所述的將白首烏的莖尖或莖段接種在MS+ZT 2.0mg/L+NAA0.01mg/L培養(yǎng)基上，是將白首烏莖尖或切成2～6cm的莖段在自來(lái)水下沖洗干凈，置于1升的燒杯中，用75％酒精浸泡30秒，無(wú)菌水沖洗一次，再用0.1％升汞消毒15分鐘，無(wú)菌水水洗后，用無(wú)菌濾紙汲干表面水分；莖尖剝?nèi)ネ獠咳~片后接種于MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養(yǎng)基上，或?qū)?～6cm的莖段再切成每節(jié)一小莖段接種于MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L培養(yǎng)基上。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)基的快速繁苗方法，其特征在于所述的增殖培養(yǎng)基為MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.01mg/L，所述的生根培養(yǎng)基為MS+IBA 0.05mg/L。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種白首烏通過(guò)組織培養(yǎng)的快速繁苗方法。白首烏接種在生芽培養(yǎng)基上萌發(fā)小植株；將白首烏萌發(fā)小植株的莖尖、莖段在增殖培養(yǎng)基上繼代增殖；白首烏繼代增殖后的小苗在生根培養(yǎng)基上生根；將具有4～7條根的白首烏幼苗移栽于由珍株巖、泥炭土和園土配制的基質(zhì)中，移栽成活的幼苗定植于大田中。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于應(yīng)用組織培養(yǎng)的手段，克服白首烏常規(guī)育苗周期長(zhǎng)、繁殖系數(shù)低等缺點(diǎn)，達(dá)到工廠化快速育苗，以適應(yīng)生產(chǎn)上對(duì)白首烏的大量需求。同時(shí)，由于組織培養(yǎng)時(shí)直接選取白首烏的根、莖段、莖尖，拓寬了白首烏組培快繁的取材范圍，組織培養(yǎng)中能對(duì)每個(gè)環(huán)節(jié)實(shí)施監(jiān)控，大大提高了繁殖速度和移栽成活率。
文檔編號(hào)A01H4/00GK1559193SQ200410014110
公開日2005年1月5日 申請(qǐng)日期2004年2月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月20日
發(fā)明者余桂紅, 馬鴻翔, 周淼平, 陸維忠, 張大棟, 黃益洪, 任麗娟, 張旭 申請(qǐng)人:江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院