專利名稱：利用二/四倍體嵌合體鮑進行多倍體育種的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鮑魚多倍體的育種方法，具體說是利用二倍體/四倍體嵌合體鮑進行多倍體育種的方法。
背景技術(shù)：
鮑魚的多倍體育種具有重要的生物學意義和生產(chǎn)意義。貝類三倍體具有生長優(yōu)勢、肉質(zhì)好特點。培育鮑魚多倍體的主要目的是產(chǎn)生不育的三倍體以供水產(chǎn)養(yǎng)殖之用，并可用于轉(zhuǎn)基因研究以防止外源基因擴散進入野生種群。
目前人工直接誘導貝類三倍體的方法通常有化學方法(如細胞松弛素B、6-DMAP)和物理方法(如溫度休克、水靜壓等)抑制第一或第二極體的釋放。在生產(chǎn)中需要大量三倍體苗種，難以完全依靠人工誘導產(chǎn)生，并且誘導產(chǎn)生的三倍體比例不可能達到100％。產(chǎn)生三倍體的最佳方案是培育出四倍體親本，然后通過四倍體與二倍體雜交產(chǎn)生100％的三倍體苗種，供應(yīng)養(yǎng)殖生產(chǎn)。在上述物理或化學方法人工誘導鮑四倍體的研究，獲得的四倍體胚胎或幼蟲，數(shù)量很少，并且大都發(fā)生畸變死亡，不能發(fā)育到變態(tài)，雖然過程中會產(chǎn)生一定數(shù)量的二四倍體嵌合體，但傳統(tǒng)誘導四倍體就認為是失敗了。因此在誘導鮑魚四倍體的研究中迄今尚無成功報道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是充分利用前述各種方法中產(chǎn)生的二/四倍體嵌合體(以下簡稱為嵌合體)，提供一種鮑魚多倍體育種的新方法，以解決長期以來鮑魚三倍體育種的難題。
本發(fā)明的方法，通過繼續(xù)培養(yǎng)或利用前述各種方法中產(chǎn)生的嵌合體，養(yǎng)成到成體鮑。該方法首先將各種物理或化學誘導產(chǎn)生的嵌合體繼續(xù)培養(yǎng)至性成熟(通常需要24～36個月)，并使其雌雄兩兩相互雜交，然后通過對子代進行倍性檢測，并選取子代中是四倍體的親鮑；或?qū)⑿猿墒斓那逗象w鮑魚與普通二倍體鮑進行雜交，選取子代中是三倍體的嵌合體親鮑。這些鮑是性腺組織含有四倍體性母細胞的嵌合體鮑。同時子代中產(chǎn)生了完全可育的四倍體鮑。完全可育的四倍體鮑與正常的二倍體鮑進行雜交，產(chǎn)生100％的三倍體鮑魚用于生產(chǎn)。另外將選出的性腺組織含有四倍體性母細胞的嵌合體鮑與普通二倍體鮑進行雜交，也可得到三倍體鮑魚。
具體實施例方式
將利用包括水靜壓，6-DMAP，CB，咖啡因，溫度休克，細胞移植法或核移植法等物理化學方法誘導產(chǎn)生的二四倍體嵌合體，不要丟棄，作為嵌合體的來源。
一、選種首先將各種物理或化學誘導產(chǎn)生的嵌合體繼續(xù)培養(yǎng)至其性成熟的嵌合體鮑魚，并選取性腺組織含有四倍體性母細胞的嵌合體鮑；二、雜交育種可選取兩種方法方法A.是將上述成熟的嵌合體鮑魚雌雄兩兩相互雜交，然后對子代進行倍性檢測，并選取子代是可育的完全四倍體作為親鮑，最后將可育的完全四倍體親鮑與正常的二倍體鮑進行雜交，即可產(chǎn)生三倍體鮑魚而用于生產(chǎn)。
方法B.是將上述成熟的嵌合體鮑魚與普通二倍體鮑進行雜交，子代中產(chǎn)生三倍體鮑。其中三倍體鮑在子代中的比例達到25％以上，因此也有相當?shù)慕?jīng)濟價值，可直接用于生產(chǎn)。
綜上所述，本方法能解決目前鮑魚三倍體育種和生產(chǎn)需要的三倍體種苗，有望促進我國鮑魚養(yǎng)殖業(yè)的良種化和多倍體優(yōu)良品種的推廣。
權(quán)利要求
1 利用二/四倍體嵌合體鮑進行多倍體育種的方法，其特征是首先將各種物理或化學誘導產(chǎn)生的嵌合體繼續(xù)培養(yǎng)至其性成熟的嵌合體鮑魚，并選取性腺組織含有四倍體性母細胞的嵌合體鮑；將上述成熟的嵌合體鮑魚雌雄兩兩相互雜交，然后對子代進行倍性檢測，并選取子代是可育的完全四倍體作為親鮑，最后將可育的完全四倍體親鮑與正常的二倍體鮑進行雜交，即可產(chǎn)生三倍體鮑魚而用于生產(chǎn)。
2 利用二/四倍體嵌合體鮑進行多倍體育種的方法，其特征是將上述成熟的嵌合體鮑魚直接與普通二倍體鮑進行雜交，即可產(chǎn)生三倍體鮑魚而用于生產(chǎn)。
全文摘要
一種利用二/四倍體嵌合體鮑進行多倍體育種的方法。首先將各種物理或化學誘導產(chǎn)生的二四倍體嵌合體繼續(xù)培養(yǎng)至性成熟的嵌合體鮑魚，并使其雌雄兩兩相互雜交，然后對子代進行倍性檢測，并選取子代是四倍體的親鮑，確定性腺組織含有四倍體性母細胞的嵌合體鮑。最后將這種完全可育的四倍體鮑與正常的二倍體鮑進行雜交，即可產(chǎn)生100％的三倍體鮑魚而用于生產(chǎn)；也可將上述成熟的嵌合體鮑魚直接與普通二倍體鮑進行雜交，獲得三倍體的子代鮑。本方法能解決目前鮑魚三倍體育種的生產(chǎn)需要的三倍體種苗，有望促進我國鮑魚養(yǎng)殖業(yè)的良種化和多倍體優(yōu)良品種的推廣。
文檔編號A01K61/00GK1596627SQ200410024549
公開日2005年3月23日 申請日期2004年8月13日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月13日
發(fā)明者汪小龍, 包振民, 胡景杰, 陳剛, 張全啟 申請人:中國海洋大學