專利名稱：銀荊的組培快繁方法
技術領域：
本發(fā)明涉及植物苗木的培養(yǎng)技術，尤其是一種銀荊的組織培養(yǎng)快速繁殖的方法。
背景技術：
銀荊(Acacia dealbata Link.)，別名圣誕樹、白粉金合歡、魚骨松、銀栲皮樹、銀荊、澳洲白色金合歡、是含羞草科，金合歡屬，是世界著名的速生高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)鞣料樹種。銀荊原產(chǎn)澳大利亞東南部維多利亞、新南威爾土和塔斯馬尼亞洲。我國分布區(qū)包括浙江、廣西、四川、貴州、云南等南方11個省區(qū)有引種栽?；ㄆ?第一次1月-4月)、果期(第一次5月-6月)、樹高(1500.00cm)、樹高年生長量(160.00cm)、胸徑年生長量(2.54cm)。銀荊是常綠喬木，有速生、萌芽性強、較耐寒的特性；花黃色、枝條細長、羽狀葉片色澤優(yōu)雅，枝葉為上等插花素材。為優(yōu)良用材、水土保持、栲膠、鞣料、庭院樹、行道樹、四旁綠化等多用途樹種。利用組培技術繁殖銀荊具高快速、保持母本優(yōu)良種性等優(yōu)點，具有很大的經(jīng)濟效益。
苗木的組培快繁方法主要涉及溫度、濕度、光照、基質(zhì)的成份、及其透氣性能和瓶苗的木質(zhì)化程度。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種銀荊的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，為銀荊的規(guī)?；缣峁┮粭l有效途徑。
本發(fā)明是通過對銀荊的離體培養(yǎng)，建立起銀荊的快速繁殖體系，其步驟依序為進行材料選擇、洗凈、進行初代接種、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽，其中，材料選擇銀荊，系采集半木質(zhì)化新枝條為外植體，將莖段與頂芽去除葉片；所述初代接種系將外植體剪成3-4cm長度，消毒后切成1cm大小帶1至2個腋芽或頂芽的植物材料，吸干表面水分，平放或斜插在誘導培養(yǎng)基上，每瓶接種一個外植體，散射光下培養(yǎng)7天左右，再放在培養(yǎng)架上光照培養(yǎng)；所述增殖培養(yǎng)系待誘導出的不定芽長至1.5-3cm，切下，接入增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)；所述的生根培養(yǎng)系將增殖培養(yǎng)所得的2cm以上的有效苗切割下來，轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基以1/2MS為基本培養(yǎng)基，培養(yǎng)25天后統(tǒng)計生根率；所述移栽是當小苗的根長至1-2cm，并有2-4條側(cè)根時，即可煉苗移栽。
本發(fā)明的優(yōu)越性在于成活率高達90％，為銀荊的規(guī)模化育苗提供了一條有效途徑。
具體實施例方式
1 材料與方法1.1 試驗材料銀荊。
1.2 試驗方法1.2.1 材料處理于晴朗上午，采集半木質(zhì)化新枝條為外植體，帶回實驗室，將莖段與頂芽去除葉片，用軟毛刷在0.5％洗潔精溶液中仔細刷去表面灰塵，流水沖洗1小時備用。
1.2.2 初代接種將沖洗干凈的外植體材料置于超凈工作臺上，剪成3-4cm長度，放在三角瓶內(nèi)用75％酒精消毒30秒，無菌水淋洗4次，再用0.1％升汞消毒10-15分鐘，無菌水淋洗5-6次。然后，用鋒利的手術刀切成1cm大小帶1-2個腋芽或頂芽的植物材料，用無菌濾紙吸干表面水分，平放或斜插在誘導培養(yǎng)基(1)1/2MS0；(2)1/2MS+6-BA(0.1-0.3)mg/L，每瓶接種一個外植體。散射光下培養(yǎng)7天左右，再放在培養(yǎng)架上光照培養(yǎng)。
1.2.3 增殖培養(yǎng)待誘導出的不定芽長至1.5-3cm，切下接入增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)。增殖培養(yǎng)基以MS基本培養(yǎng)基，附加不同種類、濃度的激素配比。
1.2.4 生根培養(yǎng)將增殖培養(yǎng)所得的2cm以上的有效苗切割下來，轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基以1/2MS基本培養(yǎng)基，以不添加激素的培養(yǎng)基為對照，培養(yǎng)25天后統(tǒng)計生根率。
1.2.5 培養(yǎng)條件初代培養(yǎng)基與增殖培養(yǎng)基均加入3.0％蔗糖和0.6％瓊脂，生根培養(yǎng)基加入2.0％蔗糖和0.6％瓊脂，pH5.8。培養(yǎng)室溫度為24±1℃，光照強度為1500-20001x，光照時間14小時/天。
1.2.6 移栽當小苗的根長至1-2cm并有2-4條側(cè)根時，即可煉苗移栽。
結果與分析2.1 外植體誘導結果將滅菌的材料接種到芽誘導培養(yǎng)基(1)、(2)上，15d左右芽點開始萌動并生長，腋芽及頂芽有新的綠點出現(xiàn)，30d左右莖段在(2)號培養(yǎng)基上的腋芽長成2-3片葉的不定芽，節(jié)間短、葉色綠且健壯；(1)號培養(yǎng)基上的芽生長緩慢，且葉色發(fā)黃。
2.2 芽的增殖與生長情況將上述無菌芽轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，繼代繁殖過程3-4周次，經(jīng)試驗觀察，最初轉(zhuǎn)入增殖時，嫩莖增加的倍數(shù)較低，形成叢生芽的數(shù)量少，經(jīng)過2-3次繼代，增值率會提高。為探索銀荊最佳分化培養(yǎng)基，進行了試驗，分化最佳培養(yǎng)基組合為MS+6-BA(1-3)mg/L+NAA(0.1-0.8)mg/L。
2.3 生根培養(yǎng)芽分化增殖2-3cm高時，采用IBA不同濃度生長素進行生根試驗，以不添加激素的培養(yǎng)基為對照，生根培養(yǎng)時生長素最佳濃度為1/2MS+IBA(0.2-0.6)mg/L。
2.4 移裁生根苗高3-4cm，根長至1-2cm，并且有2-4cm條側(cè)根時，移栽到裝有已滅菌基質(zhì)的育苗杯中?；|(zhì)成分為泥土∶泥炭土∶沙∶珍珠巖＝4∶3∶3∶1，蓋農(nóng)用薄膜保濕50％-70％，培養(yǎng)10天左右后，逐漸揭開薄膜，銀荊即可萌發(fā)新根，成活率高達90％。
權利要求
1，一種銀荊的組培快繁方法，通過對銀荊的離體培養(yǎng)，建立起銀荊的快速繁殖體系，其步驟依序為進行材料選擇、洗凈、進行初代接種、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽，其中，材料選擇銀荊，系采集半木質(zhì)化新枝條為外植體，將莖段與頂芽去除葉片；所述初代接種系將外植體剪成3-4cm長度，消毒后切成1cm大小帶1至2個腋芽或頂芽的植物材料，吸干表面水分，平放或斜插在誘導培養(yǎng)基上，每瓶接種一個外植體，散射光下培養(yǎng)7天左右，再放在培養(yǎng)架上光照培養(yǎng)；所述增殖培養(yǎng)系待誘導出的不定芽長至1.5-3cm，切下，接入增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)；所述的生根培養(yǎng)系將增殖培養(yǎng)所得的2cm以上的有效苗切割下來，轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基以1/2MS為基本培養(yǎng)基，培養(yǎng)25天后統(tǒng)計生根率；所述移栽是當小苗的根長至1-2cm，并有2-4條側(cè)根時，即可煉苗移栽。
2，根據(jù)權利要求1所述的銀荊的組培快繁方法，其特征在于培養(yǎng)條件為初代培養(yǎng)基與增殖培養(yǎng)基均加入3.0％蔗糖和0.6％瓊脂，生根培養(yǎng)基加入2.0％蔗糖和0.6％瓊脂，pH5.8，培養(yǎng)室溫度為24±1℃，光照強度為1500-2000lx，光照時間14小時/天。
3，根據(jù)權利要求1或2所述的銀荊的組培快繁方法，其特征在于將初選外植體洗凈方法系用軟毛刷在0.5％洗潔精溶液中仔細刷去表面灰塵，流水沖洗1小時。
4，根據(jù)權利要求1或2所述的銀荊的組培快繁方法，其特征在于在初代接種中其消毒方法為將剪成3-4cm長度的外植體材料放在三角瓶內(nèi)用75％酒精消毒30秒，無菌水淋洗4次，再用0.1％升汞消毒10-15分鐘無菌水淋洗5-6次。
5，根據(jù)權利要求1或2所述的銀荊的組培快繁方法，其特征在于在初代接種中選用的誘導培養(yǎng)基為1/2MS0或1/2MS+6-BA(0.1-0.3)mg/L。
6，根據(jù)權利要求4所述的銀荊的組培快繁方法，其特征在于在初代接種中選用的誘導培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA(0.1-0.3)mg/L。
7，根據(jù)權利要求1或2所述的銀荊的組培快繁方法，其特征在于所述的增殖培養(yǎng)中其增殖培養(yǎng)基以MS基本培養(yǎng)基，附加激素，分化最佳培養(yǎng)基組合為MS+6-BA(1-3)mg/L+NAA(0.1-0.8)mg/L。
8，根據(jù)權利要求1所述的銀荊的組培快繁方法，其特征在于所述的生根培養(yǎng)中，生根培養(yǎng)時生長素最佳濃度為1/2MS+IBA(0.2-0.6)mg/L。
9，根據(jù)權利要求1所述的銀荊的組培快繁方法，其特征在于所述的移栽系在生根苗高3-4cm，根長至1-2cm并有2-4cm條側(cè)根時，移栽到裝有已滅菌基質(zhì)的育苗杯中，基質(zhì)成分為泥土∶泥炭土∶沙∶珍珠巖＝4∶3∶3∶1，蓋農(nóng)用薄膜保濕至50％-70％，培養(yǎng)10天左右逐漸揭開薄膜，銀荊萌發(fā)新根。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種銀荊的組培快繁方法。本發(fā)明通過對銀荊的離體培養(yǎng)，建立起銀荊的快速繁殖體系，其步驟依序為材料選擇、洗凈、進行初代接種、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽，其中，材料選擇銀荊，系采集半木質(zhì)化新枝條為外植體；所述初代接種系將外植體剪成3－4cm長度，消毒后切成1cm大小帶1至2個腋芽或頂芽的植物材料，吸干表面水分，平放或斜插在誘導培養(yǎng)基上，每瓶接種一個外植體，散射光下培養(yǎng)7天左右，再放在培養(yǎng)架上光照培養(yǎng)；所述增殖培養(yǎng)系待誘導出的不定芽長至1.5－3cm，切下，接入增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；所述的生根培養(yǎng)系將增殖培養(yǎng)所得的2cm以上的有效苗切割下來，轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)。本發(fā)明組培苗成活率高達90％。
文檔編號A01H4/00GK1586171SQ200410053519
公開日2005年3月2日 申請日期2004年8月6日 優(yōu)先權日2004年8月6日
發(fā)明者宋學孟, 龐瑞華, 王凌健, 何燕紅, 董舉文, 樓文阜, 陳權 申請人:上海光兆植物速生技術有限公司