專利名稱：雙態(tài)微生物液體培養(yǎng)菌絲體的兩次發(fā)酵法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種雙態(tài)微生物液體培養(yǎng)菌絲體的兩次發(fā)酵法。
背景技術(shù)：
目前，微生物發(fā)酵是獲取微生物菌體的重要手段之一，世界上有三種微生物發(fā)酵的方法，第一種固體斜面菌種——固體發(fā)酵——菌絲體產(chǎn)品；第二種固體斜面菌種——液體菌種——液體發(fā)酵——菌絲體產(chǎn)品；第三種固體斜面菌種——液體菌種——固體發(fā)酵——菌絲體產(chǎn)品。此三種方法對獲取微生物菌體的收益率均只有1～1.5％，且投資大周期長，質(zhì)量不穩(wěn)定，很難工業(yè)化大生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種雙態(tài)微生物液體培養(yǎng)菌絲體的兩次發(fā)酵法，主要經(jīng)過雙態(tài)兩次發(fā)酵法的互補(bǔ)作用，集兩者優(yōu)勢為一體從而提高了菌體的質(zhì)量，解決了目前常規(guī)發(fā)酵技術(shù)中，生產(chǎn)產(chǎn)出率低的難題，可使深層培養(yǎng)物在質(zhì)量穩(wěn)定的前提下，使收率翻幾倍，無需加設(shè)備和生產(chǎn)成本，便可工業(yè)化大生產(chǎn)。
本發(fā)明是提供一種雙態(tài)微生物液體培養(yǎng)菌絲體的兩次發(fā)酵法，其特征的制作步驟是
一、半固體菌種，在常規(guī)固體培養(yǎng)基中，減半凝固劑的用量制成半固體培養(yǎng)基，再加入三分之一的玻璃球，然后，按固定常規(guī)接種培養(yǎng)方法封口滅菌，菌絲萌發(fā)后，用力搖動使培養(yǎng)基成液體狀，即形成液體菌種；二、擴(kuò)大液體菌種，接入常規(guī)液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)束再轉(zhuǎn)入常規(guī)固體培養(yǎng)基2～3天；三、固態(tài)發(fā)酵，再轉(zhuǎn)入常規(guī)固體培養(yǎng)基2～3天；四、再液態(tài)發(fā)酵，將上述固體菌種的2～6％作為增粘劑或添加劑，加入擴(kuò)大培養(yǎng)的發(fā)酵罐內(nèi)，進(jìn)行再次液態(tài)發(fā)酵而成為菌絲體產(chǎn)品。
本發(fā)明是提供一種雙態(tài)微生物液體培養(yǎng)菌絲體的兩次發(fā)酵法，上述凝固劑是瓊脂。
本發(fā)明產(chǎn)出量高而獲取率為3～8％；生產(chǎn)周期縮短到7～10天，并可工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的典型實(shí)施例的制作步驟如下1、半固體菌種在常規(guī)固體培養(yǎng)基中，減半凝固劑(瓊脂)的用量制成半固體培養(yǎng)基，再加入三分之一的玻璃球，然后封口滅菌(按固定常規(guī)接種培養(yǎng)方法)，菌絲萌發(fā)后，用力搖動使培養(yǎng)基成液體狀，即形成液體菌種；2、擴(kuò)大液體菌種接入常規(guī)液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)束再轉(zhuǎn)入常規(guī)固體培養(yǎng)基，2～3天后；3、固態(tài)發(fā)酵，再轉(zhuǎn)入常規(guī)固體培養(yǎng)基，2～3天；4、再液態(tài)發(fā)酵將上述固體菌種的2～6％作為增粘劑或添加劑，加入擴(kuò)大培養(yǎng)的發(fā)酵罐內(nèi)，進(jìn)行再次液態(tài)發(fā)酵既成為菌絲體產(chǎn)品。
綜上所述本發(fā)明的工藝流程半固體菌種——液體菌種——固態(tài)發(fā)酵——再液態(tài)發(fā)酵。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)1、有效控制污染問題；由于半固體培養(yǎng)基便于檢查污染，而現(xiàn)有技術(shù)的液體培養(yǎng)基，在接種時(shí)菌種被液體沉沒，而無法檢查出是否被污染。
2、由于又有固態(tài)發(fā)酵，常規(guī)固體發(fā)酵中含有的有益物質(zhì)，填補(bǔ)液體發(fā)酵中有益物質(zhì)含量低，而液體發(fā)酵中的有益物質(zhì)又填補(bǔ)了固體發(fā)酵中物質(zhì)含量低，兩者經(jīng)過雙態(tài)兩次發(fā)酵法的互補(bǔ)作用，集兩者優(yōu)勢為一體從而提高了菌體的質(zhì)量；3、再液態(tài)發(fā)酵，由于在發(fā)酵過程中加入了2～6％的固體菌種作為增粘劑或添加劑，該增粘劑或添加劑也形成了純的菌絲體，使液體培養(yǎng)基的粘度增高，營養(yǎng)更全面，因此，產(chǎn)出量高而獲取率為3～8％；生產(chǎn)周期由常規(guī)15～20天，縮短到7～10天，并可工業(yè)化生產(chǎn)；另外設(shè)備投資是常規(guī)的一半；又技術(shù)含量低，無需專業(yè)技術(shù)人員操作。
權(quán)利要求
1.一種雙態(tài)微生物液體培養(yǎng)菌絲體的兩次發(fā)酵法，其特征的制作步驟是一、半固體菌種，在常規(guī)固體培養(yǎng)基中，減半凝固劑的用量制成半固體培養(yǎng)基，再加入三分之一的玻璃球，然后，按固定常規(guī)接種培養(yǎng)方法封口滅菌，菌絲萌發(fā)后，用力搖動使培養(yǎng)基成液體狀，即形成液體菌種；二、擴(kuò)大液體菌種，接入常規(guī)液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)束再轉(zhuǎn)入常規(guī)固體培養(yǎng)基2～3天；三、固態(tài)發(fā)酵，再轉(zhuǎn)入常規(guī)固體培養(yǎng)基2～3天；四、再液態(tài)發(fā)酵，將上述固體菌種的2～6％作為增粘劑或添加劑，加入擴(kuò)大培養(yǎng)的發(fā)酵罐內(nèi)，進(jìn)行再次液態(tài)發(fā)酵而成為菌絲體產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雙態(tài)微生物液體培養(yǎng)菌絲體的兩次發(fā)酵法，其特征是上述凝固劑是瓊脂。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種雙態(tài)微生物液體培養(yǎng)菌絲體的兩次發(fā)酵法。其工藝流程半固體菌種、液體菌種、固態(tài)發(fā)酵，以及再液態(tài)發(fā)酵，將上述液體菌種的2～6％作為增粘劑或添加劑，加入擴(kuò)大培養(yǎng)的發(fā)酵罐內(nèi)，進(jìn)行再次液態(tài)發(fā)酵而成為菌絲體產(chǎn)品。從而，產(chǎn)出量高，獲取率為3～8％；生產(chǎn)周期縮短到7～10天，并可工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A01G1/04GK1644011SQ20051000746
公開日2005年7月27日 申請日期2005年2月22日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月22日
發(fā)明者余兆豐, 黃偉, 余蓓蓓, 沈承歡 申請人:余兆豐