專利名稱：食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)方法、設(shè)備和自動(dòng)化無(wú)菌接種機(jī)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種可以普及應(yīng)用的食用菌液體栽培菌種產(chǎn)品的生產(chǎn)方法、真空無(wú)菌灌裝設(shè)備和該產(chǎn)品應(yīng)用時(shí)必備的自動(dòng)化無(wú)菌接種機(jī)械，尤其是能讓食用菌液體栽培菌種的生產(chǎn)和普及應(yīng)用達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化、規(guī)模化的設(shè)備；技術(shù)背景目前，在食用菌液體菌種應(yīng)用方面，只是以提供制造液體菌種的生產(chǎn)設(shè)備為主，由菇農(nóng)自行生產(chǎn)液體栽培菌種，這種方式制約了液體菌種的普及應(yīng)用和食用菌工業(yè)化生產(chǎn)目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)，因?yàn)?、食用菌液體菌種的制種設(shè)備投資巨大；例如，一個(gè)一萬(wàn)袋栽培種培養(yǎng)袋的生產(chǎn)過(guò)程，需投入購(gòu)買相應(yīng)制種量270L的制種設(shè)備的資金是55800,00元人民幣，而固體菌種的生產(chǎn)只需投入500·00元人民幣，液體菌種的生產(chǎn)周期7-15天，雖然比固體菌種的生產(chǎn)周期30-40天，減少了3-4.8倍，但資金投入量確增加了111·6倍；投資比例嚴(yán)重失恒；即使增加生產(chǎn)周期，也只是一個(gè)生產(chǎn)周期遞減1倍，至使成本回收時(shí)間長(zhǎng)；2、液體菌種的生產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)大；液體菌種的生產(chǎn)需要有清潔的培養(yǎng)環(huán)境和良好的專業(yè)技術(shù)水平，才能保證菌種不污染；目前廣大菇農(nóng)還是以傳統(tǒng)固體菌種為首選；3、液體制種設(shè)備在實(shí)際應(yīng)用中與實(shí)際生產(chǎn)不能協(xié)調(diào)一致；如上例購(gòu)買的制種設(shè)備，其產(chǎn)量是恒定的270L/10000袋，但在菇農(nóng)擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模，一個(gè)生產(chǎn)周期增加二萬(wàn)或三萬(wàn)袋栽培種培養(yǎng)袋時(shí)，這套設(shè)備就不能滿足生產(chǎn)要求，只能增加制種生產(chǎn)2-3次，每次7-15天，這樣就延長(zhǎng)了栽培生產(chǎn)過(guò)程，至使菌齡難以保持一致，大大降低了液體菌種的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)；如選用相應(yīng)制種量的制種設(shè)備，又將增大投資；4 、現(xiàn)有自動(dòng)化接種設(shè)備難以普及應(yīng)用；如大連全禾菌業(yè)生產(chǎn)的自動(dòng)化接種機(jī)，其價(jià)格在5萬(wàn)元人民幣以上，接種量為2160袋/小時(shí)，并需配備液體菌種發(fā)酵罐；另外山東曹縣天星液體菌種發(fā)酵設(shè)備廠生產(chǎn)的自動(dòng)接種機(jī)價(jià)格是2·98萬(wàn)元人民幣，是目前國(guó)產(chǎn)機(jī)價(jià)格最低的，但其接種量?jī)H為1000袋/小時(shí)；并且這兩種機(jī)型都需要在無(wú)菌環(huán)境中使用，所以受價(jià)格昂貴、結(jié)構(gòu)復(fù)雜、接種環(huán)境要求嚴(yán)格等因素影響，現(xiàn)有機(jī)型難以普及應(yīng)用；5、現(xiàn)有食用菌液體菌種的灌裝生產(chǎn)過(guò)程易污染，液體菌種的貯藏時(shí)間短；

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是公開一種食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)方法、設(shè)備和自動(dòng)化無(wú)菌接種機(jī)；克服現(xiàn)有技術(shù)所造成的食用菌液體栽培菌種不能普及應(yīng)用的不足，不僅能為廣大菇農(nóng)提供優(yōu)質(zhì)廉價(jià)、綠色安全的液體栽培菌種和與之配套的簡(jiǎn)單、實(shí)用、高效的自動(dòng)化元菌接種機(jī)械，而且還將液體菌種的制種工序從食用菌栽培的整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程中分離出來(lái)，專業(yè)技術(shù)單位可按本發(fā)明從事生產(chǎn)，把優(yōu)質(zhì)的液體栽培菌種產(chǎn)品和高效自動(dòng)化無(wú)菌接種機(jī)產(chǎn)品，供應(yīng)給菇農(nóng)從事后期栽培生產(chǎn)使用；也就是將食用菌生產(chǎn)一分為二，即形成了食用菌制種行業(yè)和栽培行業(yè)兩個(gè)獨(dú)立且相關(guān)連的新的生產(chǎn)模式，從根本上簡(jiǎn)化了食用菌生產(chǎn)鏈，改變了食用菌的傳統(tǒng)生產(chǎn)模式，并可使食用菌的制種業(yè)和栽培業(yè)都具備了成為工業(yè)化產(chǎn)業(yè)的發(fā)展優(yōu)勢(shì)；本發(fā)明一種食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)方法是1-1.種子的制備種子質(zhì)量的好壞對(duì)發(fā)酵影響很大；決定于菌種本身和種子培養(yǎng)條件；食用菌深層發(fā)酵所用的種子要求(1)菌體生長(zhǎng)旺盛，活力強(qiáng)種子的菌齡通常是控制在菌體的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期；種子菌齡以48-96小時(shí)為好；(2)菌球直徑小、數(shù)量多培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組分對(duì)菌球的形狀有一定的影響；一般地，含糖分多的培養(yǎng)基，培養(yǎng)出的菌球直徑小，培養(yǎng)基黏度大的，菌球也較??；此外，用旋轉(zhuǎn)式搖床比用往復(fù)式搖床，菌球直徑較小；在搖瓶?jī)?nèi)加幾粒玻璃珠或一個(gè)小彈簧進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，也可使菌球直徑變?。?
(3)純度高食用菌深層發(fā)酵用的種子，要求高純度，不能有任何污染；1-2、斜面菌種制備用于深層發(fā)酵的原始菌株需經(jīng)嚴(yán)格的提純與鑒定；培養(yǎng)基葡萄糖2.0％，酵母膏0.5％，磷酸二氫鉀0.1％，硫酸鎂0.1％，瓊脂2.0％，pH自然；滅菌在120-126℃的條件下，滅菌30分鐘；培養(yǎng)條件25℃，7-10天；1-3、搖瓶種子制備培養(yǎng)基土豆20％、紅糖1.0-1.5％、葡萄糖1.0-1.5％、麩皮3％、蛋白胨0.15-0.3％、磷酸二氫鉀0.2％、硫酸鎂0.1％、維生素VB110毫克/升，余量為水，PH值6.5-7.0.
配制好的培養(yǎng)基分裝于三角瓶?jī)?nèi)，并在三角瓶?jī)?nèi)放3-4玻璃珠，塞好棉塞，扎上防水紙；高壓滅菌，1.4千克/厘米2壓力、滅菌30分鐘、冷卻到30℃以下時(shí)，接入0.5厘米2大小的斜面菌種2-4塊，然后夾于搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，其頻率設(shè)計(jì)為80-120次/分；培養(yǎng)溫度在25℃，培養(yǎng)2-7天；一級(jí)搖瓶種子、二級(jí)搖瓶種子的制備方法相同；1-4.制備一級(jí)、二級(jí)種子制備播瓶種子必須進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖成一級(jí)種子，一級(jí)種子更擴(kuò)大繁殖成二種子；一級(jí)種子和二級(jí)種子是在種子罐中培養(yǎng)的，一級(jí)種子培養(yǎng)基選用搖瓶培養(yǎng)基，二級(jí)種子的培養(yǎng)基，選用搖瓶培養(yǎng)基，二級(jí)種子的培養(yǎng)基，選用發(fā)酵培養(yǎng)基；2-1.發(fā)酵罐發(fā)酵工藝參數(shù)控制原料及培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基土豆10-20％、麩皮2-5％、紅糖0.5-2.0％、蛋白胨0.1-0.3％、酵母膏0.1-0.3％、磷酸二氫鉀0.1-0.2％、硫酸鎂0.05-0.15％、維生素B110-20毫克/升、聚氧丙烯甘油0.03-0.035％、余量為水、PH值4.0-8.0％；培養(yǎng)基的配制按如下順序(1)制作土豆汗和麩皮汁新鮮土豆挖芽去皮，切成0.5-0.4厘米厚的片或條，加5倍水煮至酥不爛時(shí)用6-8層紗布過(guò)濾，取汁備用；新鮮無(wú)霉變的麩皮加10倍水煮沸至20分鐘，過(guò)濾取汁備用；(2)混合土豆汁和麩皮汁；(3)將磷酸二氫鉀、硫酸鎂溶水后加入混合汁中；(4)再將紅糖、葡萄糖、蛋白胨溶水后加入混合汁中；(5)再將維生素B1碾碎后加入混合汁中；(6)用濃度為10％的鹽酸或氫氧化鈉調(diào)整PH值；(7)滅菌將培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)罐內(nèi)，在溫度達(dá)121-126℃時(shí)維持30-35分鐘；(8)冷卻滅菌后，立即通入冷水降溫，使培養(yǎng)基溫度降到23-30℃；2-2、菌齡搖瓶種子菌齡控制在4-10天，一級(jí)種子和二級(jí)種子的菌齡為48-96小時(shí)；2-3、接種量食有菌深層發(fā)酵時(shí)的接種量為10％-20％；2-4、溫度食用菌深層發(fā)酵的溫度在22-30℃；2-5、食用菌深層發(fā)酵的通氣量以0.2-1.5通氣體積/培養(yǎng)液體積/分鐘為宜；2-6、攪拌速度食用菌深層發(fā)酵的攪拌速度一般是180-500轉(zhuǎn)/分；2-7、酸堿度最適pH為5.0-7.2，平菇為5.0-6.5；在發(fā)酵過(guò)程中需定時(shí)取樣，測(cè)定酸堿度，并進(jìn)行調(diào)整；2-8、罐壓在發(fā)酵過(guò)程中要維持一定的罐壓，通常為0.2-0.7千克/厘米2；
2-9、泡沫控制3.機(jī)械消泡依靠裝于罐內(nèi)的消泡漿強(qiáng)烈機(jī)械振蕩和壓力的變化來(lái)破壞氣泡的表面張力；降低泡沫的穩(wěn)定性，促使泡沫破裂；；4.化學(xué)消泡常用的消泡劑有天然油脂和合成消泡劑兩類；用于消泡的天然油脂有花生油、豆油、棉油等；常用的合成消泡劑有泡敵；目前大多數(shù)是使用泡敵做消泡劑，加入量約為0.006％；5.發(fā)酵終點(diǎn)合理的放罐時(shí)間應(yīng)參考產(chǎn)物濃度、過(guò)濾速度、氨基氮含量、殘?zhí)橇?、菌絲形態(tài)、pH、發(fā)酵液的外觀和黏度等因素才能決定；在發(fā)酵過(guò)程中間測(cè)定；6.菌絲量測(cè)定常用的測(cè)定方法有兩種a)離心法量取一定體積的樣品液，經(jīng)3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘，傾棄上清液，稱菌泥重量；b)過(guò)濾去根據(jù)菌絲球的大小，選用適當(dāng)規(guī)格篩子，樣品液用篩子過(guò)濾，再用20-30倍體積水沖洗，把夾帶的培養(yǎng)液組成沖洗去，濾得的菌絲體在80℃下烘干，再用105℃烘至恒重，稱重；7.菌絲球大小測(cè)量樣品先經(jīng)過(guò)濾、沖洗干凈，取少量菌絲球于培養(yǎng)皿中，加少許蒸流水使菌球散開與充分伸展，用游標(biāo)卡尺在培養(yǎng)皿底對(duì)著菌絲球測(cè)量；8.純度檢查檢查是滯有雜菌污染；檢查方法可用平板培養(yǎng)或酚紅肉湯培養(yǎng)，24-28小時(shí)后檢查有否細(xì)菌污染；亦可通過(guò)顯微鏡檢查，要用油鏡才能看清楚有否細(xì)菌存在；
9.酸堿度測(cè)量通過(guò)檢查發(fā)現(xiàn)酵液的pH變化，可以了解發(fā)酵的進(jìn)程并間接了解污染情況；一般地說(shuō)，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，pH又出現(xiàn)回升現(xiàn)象，這是由于菌體自溶的結(jié)果；10.含糖量①發(fā)酵液總糖的測(cè)定；②發(fā)酵液還原糖的測(cè)定；11.氨基酸的測(cè)定；12.發(fā)酵液氣味檢查發(fā)酵液的氣體檢查可在發(fā)酵罐的排氣口檢查；13.罐裝生產(chǎn)當(dāng)發(fā)酵罐內(nèi)的液體栽培菌種達(dá)到發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)，經(jīng)嚴(yán)格檢驗(yàn)合格后，通過(guò)無(wú)菌管路輸送到真空無(wú)菌灌裝生產(chǎn)線的分液箱內(nèi)，由真空無(wú)菌灌裝機(jī)構(gòu)把液體菌種在真空狀態(tài)下，灌裝在PET聚脂桶內(nèi)，并用一次性塑料聰明蓋在真空狀態(tài)下將PET聚脂桶的桶口密封起來(lái)，然后，將其進(jìn)行預(yù)冷到5℃以下，在1-5℃的冷藏庫(kù)內(nèi)貯藏并通過(guò)連鎖直銷的形式銷售；真空無(wú)菌灌裝生產(chǎn)線由傳送機(jī)構(gòu)，真空灌裝機(jī)構(gòu)，理蓋送蓋機(jī)、真空泵、電機(jī)、變速器、離合器組成；其特征在于傳送機(jī)構(gòu)包括鏈板輸送機(jī)、撥輪，鏈板輸送機(jī)并列在真空灌裝機(jī)構(gòu)中的環(huán)形旋轉(zhuǎn)平臺(tái)外側(cè)，真空灌裝機(jī)構(gòu)下方；在真空無(wú)菌灌裝機(jī)構(gòu)箱體中，右下方是方形雙作用液壓缸，其活塞固定在下方的環(huán)形旋轉(zhuǎn)平臺(tái)軸輥上的鏈板上，鏈板右端固定有內(nèi)嚙齒輪，內(nèi)嚙齒輪與直齒輪相嚙合，直齒輪又通過(guò)傳動(dòng)軸、錐形齒輪與下方的電機(jī)、變速器、離合器相連接；方形液壓缸的活塞左側(cè)設(shè)有碰撞開關(guān)，而液壓缸缸體則設(shè)置在機(jī)箱內(nèi)，其上方是油箱和與液缸缸體之相連的三位電磁換向閥及壓力開關(guān)、管路，左側(cè)是松閘器，松閘器連接有半圓形密封瓦塊，與之相對(duì)的左側(cè)機(jī)箱壁上固定有另一半圓形密封瓦塊，這個(gè)瓦塊內(nèi)設(shè)置有碰撞開關(guān)；油箱左側(cè)是電動(dòng)油泵，其出口管路處設(shè)有壓力開關(guān)，油泵上方是兩個(gè)三位電磁換向閥，分別與橫向固定在機(jī)箱右側(cè)頂部的液壓缸和垂直固定在機(jī)箱左側(cè)腔體內(nèi)頂部的液壓缸相連接，右側(cè)頂部液壓缸的活塞上連接有推蓋密封擋板；左側(cè)頂部液壓缸的活塞上連接有蓋槽，蓋槽右側(cè)開口，內(nèi)置卡簧，與蓋槽開口相對(duì)應(yīng)的腔體上也有同樣大小的開口，開口下端，水平方向設(shè)置有桶蓋滑板，滑板上方，機(jī)箱箱體上開有桶蓋入口；密封檔塊內(nèi)設(shè)有滑板腔；在松閘器左側(cè)箱體下方外側(cè)設(shè)置有接近開關(guān)；松閘器上方，油泵左側(cè)的可以密封的腔體內(nèi)，右側(cè)設(shè)置有直線電機(jī)，其動(dòng)子頂端連接有流量控制器和限位開關(guān)及灌注口；流量控制器通過(guò)伸縮軟管與腔體外的導(dǎo)液管相連接，導(dǎo)液管另一端通過(guò)金屬管與分液箱相連；真空管與導(dǎo)液管并列在腔體外側(cè)上方中部，并開口在腔體壁是與腔體相通，另一端與箱體左側(cè)上端的真空繼電器，電磁閥相連接，電磁閥又通過(guò)金屬導(dǎo)管與吸氣箱相連，分液箱固定在吸氣箱上端，吸氣箱下端固定在支架上的滾動(dòng)軸承上；吸氣管通過(guò)旋轉(zhuǎn)密封活接與真空泵相連；分液箱頂部連接有密封旋轉(zhuǎn)導(dǎo)管與貯液罐相連；送蓋理蓋機(jī)除機(jī)頭上設(shè)有接近開關(guān)；一種食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)方法配套專用的自動(dòng)化無(wú)菌接種機(jī)；是由在機(jī)架內(nèi)部上方的接種機(jī)構(gòu)和下方的間歇傳送機(jī)構(gòu)及電機(jī)組成；其特征在于在接種機(jī)構(gòu)中，負(fù)離子凈化器設(shè)置在下端與機(jī)體相連，滑軸在其上方左右兩側(cè)，下端固定在機(jī)架梁上，上端與螺桿相連，螺桿上端固定在機(jī)架頂端，滑軸上通過(guò)滑塊連接有支架及滑板，連續(xù)注射器橫向排列在支架內(nèi)，其筒體固定在支架橫梁上，下端的吸液管與料斗機(jī)構(gòu)的伸縮軟管相連，其活塞則固定在滑板下方；接種針頭上端與注射器下端相連，下端位于負(fù)離子凈化器極柵間隙中，筒體支架頂端和滑板頂端在同一平面上與鏈桿相連接，筒體支架升降鏈桿及傳動(dòng)軸分列在滑板升降鏈朽及傳動(dòng)軸的左右兩側(cè)；傳動(dòng)軸都固定在螺桿上可以根據(jù)刻度尺上下用螺帽調(diào)節(jié)移動(dòng)位置的軸架上，注射器支架升降鏈桿及傳動(dòng)軸固定在軸架下方，活塞滑板升降鏈桿及傳動(dòng)軸固定在上方，它們用同步齒形帶、齒帶輪相連接，滑板升降鏈桿傳動(dòng)軸又通過(guò)同步齒形帶、齒帶輪與上方固定在機(jī)架橫梁上的主傳動(dòng)軸、張緊輪相連接，主傳動(dòng)軸后端是齒帶輪，通過(guò)同步齒形帶與下方的變速傳動(dòng)軸、同步齒形帶、齒形輪及電機(jī)相鏈接；間歇傳送機(jī)構(gòu)中，定向軸輥位于機(jī)架內(nèi)側(cè)左右兩端，其前后兩端的軸固定在機(jī)架上的滾動(dòng)軸承內(nèi)，支撐軸輥排列在機(jī)架上方，其上端邊緣與定向軸輥上端邊緣在同一平面上，附動(dòng)軸輥位于支撐軸輥下方，其下端邊緣與定向軸輥下端邊緣在同一平面上；傳送帶定位輪位于右側(cè)的附動(dòng)軸輥和定向軸輥之間，前后兩排，并通過(guò)軸座固定在機(jī)架上，傳送帶環(huán)繞在定向軸輥、支持軸輥、附動(dòng)軸輥及定位輪的外側(cè)，傳送帶表面設(shè)置有活動(dòng)齒柵，傳送帶邊緣上固定有卡簧，在傳送帶下方右側(cè)是滑套及滑塊，滑套固定在機(jī)架橫梁上，滑塊在滑套內(nèi)，滑塊左端與支架相連，前后兩組，用橫梁相連接，鏈桿一端固定在橫梁中部，另一端連接在變速傳動(dòng)軸上，通過(guò)同步齒形帶及帶輪與電機(jī)相連；料斗機(jī)構(gòu)設(shè)置在接種機(jī)構(gòu)機(jī)架右上方，通過(guò)支架與機(jī)架相連；支架上端是抑菌聰明座，內(nèi)置負(fù)離子凈化器，抑菌聰明座通過(guò)活接球閥與下面的貯液箱相連接，貯液箱上設(shè)有分流口，伸縮軟管上端接在貯液箱的分流口上，下端連接在接種機(jī)構(gòu)中的連續(xù)注射器吸液管上；電機(jī)及負(fù)離子凈化器開關(guān)固定在中部機(jī)架上；


圖1是本發(fā)明食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)工藝流程圖；圖2是本發(fā)明真空無(wú)菌灌裝機(jī)結(jié)構(gòu)示意圖；圖3是本發(fā)明真空無(wú)菌灌裝生產(chǎn)線結(jié)構(gòu)俯視示意圖；圖4是本發(fā)明松閘器密封結(jié)構(gòu)示意圖；圖5是本發(fā)明蓋槽及推進(jìn)密封擋板結(jié)構(gòu)示意圖；圖6是本發(fā)明真空無(wú)菌灌裝機(jī)構(gòu)控制電路圖；圖7是本發(fā)明自動(dòng)無(wú)菌接種機(jī)結(jié)構(gòu)示意圖；
圖8是本發(fā)明料斗機(jī)構(gòu)示意圖；圖9是圖7的側(cè)視圖；圖10是圖7的俯視圖；圖11是本發(fā)明第二實(shí)施例圖；圖12是本發(fā)明精密鏈桿結(jié)構(gòu)示意具體實(shí)施例方式如圖1所示食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)工藝種子的制備種子制備的目的是大最繁殖足夠數(shù)量的、健壯的、高純度的種子；種子質(zhì)量的好壞對(duì)發(fā)酵影響很大；種子質(zhì)量一方面決定于菌種本身，另一方面在很大程度上決定于種子培養(yǎng)條件；1、食用菌深層發(fā)酵所用的種子要求(1)菌體生長(zhǎng)旺盛，活力強(qiáng)種子的活力與培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)狀況及菌齡有關(guān)；應(yīng)選用營(yíng)養(yǎng)豐富的種子培養(yǎng)基，最好不用合成培養(yǎng)基；種子的菌齡通常是控制在菌體的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期；如金針菇，種子菌齡以48-96小時(shí)為好；(2)菌球直徑小、數(shù)量多培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組分對(duì)菌球的形狀有一定的影響；一般地，含糖分多的培養(yǎng)基，培養(yǎng)出的菌球直徑小，培養(yǎng)基黏度大的，菌球也較??；此外，用旋轉(zhuǎn)式搖床比用往復(fù)式搖床，菌球直徑較小；在搖瓶?jī)?nèi)加幾粒玻璃珠或一個(gè)小彈簧進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，也可使菌球直徑變?。?3)純度高食用菌深層發(fā)酵用的種子，要求高純度，不能有任何污染，特別是細(xì)菌污染；食用菌深層發(fā)酵失敗，絕大部分是由于細(xì)菌污染引起的；2、斜面菌種制備用于深層發(fā)酵的原始菌株需經(jīng)嚴(yán)格的提純與鑒定；培養(yǎng)基葡萄糖2.0％，酵母膏0.5％，磷酸二氫鉀0.1％，硫酸鎂0.1％，瓊脂2.0％，pH自然；
滅菌在120-126℃的條件下，滅菌30分鐘；培養(yǎng)條件25℃，7-10天；3、搖瓶種子制備培養(yǎng)基土豆20％、紅糖1.0-1.5％、葡萄糖1.0-1.5％、麩皮3％、蛋白胨0.15-0.3％、磷酸二氫鉀0.2％、硫酸鎂0.1％、維生素VB110毫克/升，余量為水，PH值6.5-7.0.
配制好的培養(yǎng)基分裝于三角瓶?jī)?nèi)，通常500毫升的三角瓶裝100-150毫升培養(yǎng)基，750毫升的三角瓶裝200-250毫升的培養(yǎng)基；并在三角瓶?jī)?nèi)放3-4玻璃珠(也可不放)，塞好棉塞，扎上防水紙(或牛皮紙)；高壓滅菌(1.4千克/厘米2壓力、滅菌30分鐘)、冷卻到30℃以下時(shí)，接入0.5厘米2大小的斜面菌種2-4塊，然后夾于搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，其頻率設(shè)計(jì)為80-120次/分；培養(yǎng)溫度在25℃，培養(yǎng)2-7天；一級(jí)搖瓶種子、二級(jí)搖瓶種子的制備方法相同；4、制備一級(jí)、二級(jí)種子制備在食用菌中除銀耳的芽孢外，一般生長(zhǎng)均較慢，為了縮短發(fā)酵時(shí)間，生產(chǎn)上需提高接種量，一般食用菌深層發(fā)酵的接種量是10％-20％，甚至更高；一個(gè)10噸的發(fā)酵罐，以裝量7噸計(jì)算，所需的種子就要700-1400千克，顯然，這樣的種子量，單靠搖瓶種子是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足的；為此，播瓶種子必須進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖成一級(jí)種子，一級(jí)種子更擴(kuò)大繁殖成二種子；一級(jí)種子和二級(jí)種子是在種子罐中培養(yǎng)的，一級(jí)種子罐通常為50-100升，二級(jí)種子罐為500-1000升；一級(jí)種子培養(yǎng)基可以選用搖瓶培養(yǎng)基，二級(jí)種子的培養(yǎng)基，為了降低成本，可以選用搖瓶培養(yǎng)基，二級(jí)種子的培養(yǎng)基，為了降低成本，可以選用發(fā)酵培養(yǎng)基；種子罐的培養(yǎng)技術(shù)請(qǐng)參見下面的發(fā)酵罐發(fā)酵工藝部分；三、發(fā)酵罐發(fā)酵工藝參數(shù)控制1、原料及培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基土豆10-20％、麩皮2-5％、紅糖0.5-2.0％、蛋白胨0.1-0.3％、酵母膏0.1-0.3％、磷酸二氫鉀0.1-0.2％、硫酸鎂0.05-0.15％、維生素B110-20毫克/升、聚氧丙烯甘油0.03-0.035％、余量為水、PH值4.0-8.0％；培養(yǎng)基的配制按如下順序(1)制作土豆汗和麩皮汁新鮮土豆挖芽去皮，切成0.5-0.4厘米厚的片或條，加5倍水煮至酥不爛時(shí)用6-8層紗布過(guò)濾，取汁備用；新鮮無(wú)霉變的麩皮加10倍水煮沸至20分鐘，過(guò)濾取汁備用；(2)混合土豆汁和麩皮汁；(3)將磷酸二氫鉀、硫酸鎂溶水后加入混合汁中；(4)再將紅糖、葡萄糖、蛋白胨溶水后加入混合汁中；(5)再將維生素B1碾碎后加入混合汁中；(6)用濃度為10％的鹽酸或氫氧化鈉調(diào)整PH值；(7)滅菌將培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)罐內(nèi)，在漫度達(dá)121-126℃時(shí)維持30-35分鐘；(8)冷卻滅菌后，立即通入冷水降溫，使培養(yǎng)基溫度降到23-30℃；2、菌齡菌齡與種子的活力密切相關(guān)；若菌齡太小，種子液中菌絲濃度低，延長(zhǎng)發(fā)酵周期；若菌齡太大，菌種老化，部分菌體自溶，種子的活力低，降低發(fā)酵產(chǎn)量；不同的食用菌，其適宜的菌齡不同；不同級(jí)別的種子，其菌齡也不同；通常，搖瓶種子菌齡控制在4-10天，一級(jí)種子和二級(jí)種子的菌齡為48-96小時(shí)；3、接種量一般地，食有菌深層發(fā)酵時(shí)的接種量為10％-20％；接種量的大小，直接影響到該菌種在發(fā)酵罐中生長(zhǎng)繁殖的速度；接種量大，可以縮短發(fā)酵周期；這是因?yàn)榉N子液中含有大量的胞外水解酶類，有利于對(duì)原料的水解利用；種子液中菌絲量大，發(fā)酵中菌體積累也快；同時(shí)，培養(yǎng)環(huán)境迅速被生長(zhǎng)的菌種所占據(jù)，雜菌污染受到控制；4、溫度食用菌深層發(fā)酵的溫度因種類而異；通常在22-30℃生長(zhǎng)最快，收得率(產(chǎn)量)最高；黑木耳以28℃為最好，金針菇為25℃；
5、通氣量的大小影響培養(yǎng)液中的溶解氧濃度，從而影響菌絲的生長(zhǎng)速度和菌絲體得率；此外，通氣量的大小還影響菌體的形態(tài)，如羊肚菌在通氣量充足時(shí)，菌體的球形，易過(guò)濾，但當(dāng)通氣量不足時(shí)，菌絲作擴(kuò)散狀態(tài)生長(zhǎng)，結(jié)果發(fā)酵液黏稠，過(guò)濾困難，收成大減；然而，通氣量也不能太大，否則培養(yǎng)液水分散失嚴(yán)重，食用菌深層發(fā)酵的通氣量以0.2-1.5通氣體積/培養(yǎng)液體積/分鐘為宜；例如黑木耳深層發(fā)酵的前24小時(shí)以0.25通氣體積/培養(yǎng)液體積/分鐘的通氣量，后24小時(shí)以0.5通氣積/培養(yǎng)液體積/分鐘為宜；金針菇則是前48小時(shí)以1.0通氣體積/培養(yǎng)液體積/分鐘，后48小時(shí)以1.5通氣體積/培養(yǎng)液體積/分鐘為宜；6、攪拌速度攪拌可促進(jìn)空氣中氧氣在培養(yǎng)液中的溶解；食用菌深層發(fā)酵的攪拌速度一般是180-500轉(zhuǎn)/分；黑木耳深層發(fā)酵所用的攪拌速度為500轉(zhuǎn)/分，金針菇是220-240轉(zhuǎn)/分；7、酸堿度不同種類的食用菌都有一個(gè)最適酸堿度，在適宜的酸堿度環(huán)境中，菌絲生長(zhǎng)快；例如黑木耳的最適pH為6.0-6.5，金針菇為6.3，香菇為4.5-6.5，草菇為6.8-7.2，平菇為5.0-6.5；在發(fā)酵過(guò)程中需定時(shí)取樣，測(cè)定酸堿度，并進(jìn)行調(diào)整；8、罐壓為了增加氧在發(fā)酵液中的溶解度，以及為防止因攪拌產(chǎn)生負(fù)壓而使外界空氣通過(guò)孔口進(jìn)入罐內(nèi)而造成污染，在發(fā)酵過(guò)程中要維持一定的罐壓，通常為0.2-0.7千克/厘米2；9、泡沫控制(3)機(jī)械消泡依靠裝于罐內(nèi)的消泡漿強(qiáng)烈機(jī)械振蕩和壓力的變化來(lái)破壞氣泡的表面張力；降低泡沫的穩(wěn)定性，促使泡沫破裂；這種消泡方法不甚徹底，有時(shí)還需借助化學(xué)消泡法；(4)化學(xué)消泡主要是借消泡劑降低泡沫的機(jī)械臺(tái)度而降低泡沫的表面張力，使泡沫因受力不均而破裂；常用的消泡劑有天然油脂和合成消泡劑兩類；用于消泡的天然油脂有花生油、豆油、棉油等；常用的合成消泡劑有泡敵；目前大多數(shù)是使用泡敵做消泡劑，加入量約為0.006％；9、發(fā)酵終點(diǎn)發(fā)酵終點(diǎn)是否準(zhǔn)確，對(duì)提高產(chǎn)物的生產(chǎn)量(單位/毫升·周期)有非常重要意義；合理的放罐時(shí)間應(yīng)參考產(chǎn)物濃度、過(guò)濾速度、氨基氮含量、殘?zhí)橇?、菌絲形態(tài)、pH、發(fā)酵液的外觀和黏度等因素才能決定；在發(fā)酵過(guò)程中間測(cè)定，可以了解發(fā)酵進(jìn)程，了解了酵是否正常，有否被污染，為發(fā)酵終點(diǎn)的確定提供資料；8.菌絲量測(cè)定常用的測(cè)定方法有兩種a)離心法量取一定體積的樣品液，經(jīng)3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘，傾棄上清液，稱菌泥重量；這種方法的準(zhǔn)確性依培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)是準(zhǔn)確的；如果營(yíng)養(yǎng)組成部分是不溶性的，如用麩皮、黃事粉等物，配制的培養(yǎng)液因經(jīng)發(fā)酵后還有一定的不溶的殘?jiān)?，?jīng)離心后也和菌絲一體一起沉淀下來(lái)，使測(cè)定結(jié)果偏高；若用蔗糖離心，那么結(jié)果是準(zhǔn)確的，但技術(shù)復(fù)雜，較難掌握；b)過(guò)濾去根據(jù)菌絲球的大小，選用適當(dāng)規(guī)格篩子(如土樣篩)，樣品液用篩子過(guò)濾，再用20-30倍體積水沖洗，把夾帶的培養(yǎng)液組成沖洗去，濾得的菌絲體在80℃下烘干，再用105℃烘至恒重，稱重；9.菌絲球大小測(cè)量樣品先經(jīng)過(guò)濾、沖洗干凈，取少量菌絲球于培養(yǎng)皿中，加少許蒸流水使菌球散開與充分伸展(注意加少量，不宜過(guò)多或過(guò)少)，用游標(biāo)卡尺在培養(yǎng)皿底對(duì)著菌絲球測(cè)量；(3)純度檢查主要是檢查是滯有雜菌污染；檢查方法可用平板培養(yǎng)或酚紅肉湯培養(yǎng)，24-28小時(shí)后檢查有否細(xì)菌污染；這種方法得出結(jié)果所需時(shí)間較長(zhǎng)；亦可通過(guò)顯微鏡檢查，要用油鏡才能看清楚有否細(xì)菌存在；10.酸堿度測(cè)量通過(guò)檢查發(fā)現(xiàn)酵液的pH變化，可以了解發(fā)酵的進(jìn)程并間接了解污染情況；一般地說(shuō)，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，pH又出現(xiàn)回升現(xiàn)象，這是由于菌體自溶的結(jié)果；另外，若是出現(xiàn)細(xì)菌污染，由于細(xì)菌的繁殖速度非?？?，并且產(chǎn)生許多機(jī)酸，12小時(shí)內(nèi)就能使發(fā)酵液的pH迅速下降到5.0以下；(5)含糖量測(cè)定①發(fā)酵液總糖的測(cè)定 發(fā)酵液總糖的測(cè)定方法可參照中山大學(xué)生物系生化微生物教研室編寫的《生化技術(shù)導(dǎo)論》(人民教育出版社)第二十二至二十四頁(yè)的介紹的測(cè)定方法進(jìn)行；②發(fā)酵液還原糖的測(cè)定發(fā)酵液經(jīng)4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘，取上清液用DNS法測(cè)定還原糖含量；(6)氨基酸的測(cè)定發(fā)酵液中氨基酸的測(cè)定方法可參照朱儉編寫的《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》(上海科學(xué)技術(shù)出版社)第六十一至六十三頁(yè)介紹的方法進(jìn)行測(cè)定；(7)發(fā)酵液氣味檢查發(fā)酵液的氣體檢查可在發(fā)酵罐的排氣口檢查；若發(fā)酵正常，在排氣口處可聞到一股菇香或培養(yǎng)液原先的氣味，在發(fā)酵后期，氣味可能傳動(dòng)略帶酸味；若有細(xì)菌污染，發(fā)酵12小時(shí)后，在排氣口處則可聞到酸臭味；五、罐裝生產(chǎn)當(dāng)發(fā)酵罐內(nèi)的液體栽培菌種達(dá)到發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)，經(jīng)嚴(yán)格檢驗(yàn)合格后，通過(guò)無(wú)菌管路輸送到真空無(wú)菌灌裝生產(chǎn)線的分液箱內(nèi)，由真空無(wú)菌灌裝機(jī)構(gòu)把液體菌種在真空狀態(tài)下，灌裝在PET聚脂桶內(nèi)，并用一次性塑料聰明蓋在真空狀態(tài)下將PET聚脂桶的桶口密封起來(lái)，然后，將其進(jìn)行預(yù)冷到5℃以下，在1-5℃的冷藏庫(kù)內(nèi)貯藏并通過(guò)連鎖直銷的形式銷售；其保存期最長(zhǎng)可達(dá)6個(gè)月，其產(chǎn)品質(zhì)量、性能不變；如圖2-圖6所示食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)設(shè)備運(yùn)動(dòng)方式為
打開電源開關(guān)(DK)，引入電源，電動(dòng)機(jī)(1-46)與真空泵(1-55)通電工作，電機(jī)動(dòng)通過(guò)變速器將轉(zhuǎn)速降到設(shè)定范圍內(nèi)，并通過(guò)錐形齒輪(1-45)、傳動(dòng)軸(1-44)把動(dòng)能傳遞給內(nèi)嚙齒輪組(1-41)，使固定在內(nèi)嚙齒輪上和旋轉(zhuǎn)平臺(tái)(1-42)中的鏈板上的真空灌裝機(jī)構(gòu)和輸送機(jī)左側(cè)撥輪(1-1)一同運(yùn)動(dòng)起來(lái)；當(dāng)灌裝機(jī)構(gòu)運(yùn)行到送蓋機(jī)(1-25)的機(jī)頭下方，機(jī)頭上的傳感器(1-26)檢測(cè)到桶蓋入口(1-28)邊上的標(biāo)點(diǎn)(1-27)時(shí)，點(diǎn)動(dòng)開關(guān)(1-25ZJ)閉合，送蓋機(jī)(1-25)點(diǎn)動(dòng)運(yùn)行一次，將桶蓋送入真空灌裝機(jī)構(gòu)上的桶蓋入口(1-28)內(nèi)；落在滑板(1-30)上，推蓋密封檔板(1-17)的左側(cè)；在運(yùn)動(dòng)中，傳感器(1-3)測(cè)到撥輪(1-1)把傳送帶上的菌液桶(1-2)送到真空灌裝機(jī)構(gòu)的閘片(1-5)和(1-7)形成的桶口入口的正下方時(shí)，同時(shí)閉合電動(dòng)油泵(1-33)的開關(guān)(1-33ZJ)、電磁三位換向閥(1-31)(1-38)的左位開關(guān)(JCI)(JC2)及松閘器(1-4)的開關(guān)(HKI)，使松閘器(1-4)開啟，閘片(1-5)(1-7)分開；液壓缸(1-29)的活塞帶動(dòng)其頂部的推蓋密封檔板(12-17)向左運(yùn)行，將桶蓋(1-19)延滑板(1-30)送入到蓋槽(1-18)內(nèi)，蓋槽(1-18)右側(cè)腔體(1-13)上的開口被密封起來(lái)，當(dāng)液壓缸(1-29)內(nèi)的壓力達(dá)到設(shè)定壓力時(shí)，壓力開關(guān)(YKI)斷開，使電磁三位換向閥(1-31)斷電中位保壓；液壓缸(1-39)帶動(dòng)整個(gè)機(jī)構(gòu)下降，使菌液桶(1-2)的桶口端進(jìn)入到閘片(1-5)(1-7)之間，當(dāng)液壓缸(1-39)下降到最低位置時(shí)，碰撞開關(guān)(1-35)也就是HK1換向使松閘器(1-4)斷電，將菌液桶(1-2)的桶口密封在真空灌裝機(jī)構(gòu)中的左側(cè)腔體(1-13)內(nèi)；同時(shí)使真空管(1-14)管路上的電磁閥(1-22)通電開啟，對(duì)腔體(1-13)進(jìn)行吸真空；真空繼電器(1-24)獲電工作；當(dāng)腔體(1-13)內(nèi)達(dá)到設(shè)定真空度(3000-4000Pa)時(shí)，真空繼電器(1-24)上控制開關(guān)(KI)閉合，使流量控制器(1-10)獲電開啟，把液體菌經(jīng)灌注口(1-8)灌注到菌液桶(1-2)內(nèi)；當(dāng)達(dá)到設(shè)定流量時(shí)開關(guān)(HK2)換向，使流量控制器(1-10)斷電關(guān)閉；并接通直線電機(jī)(1-11)的倒退線圈(FC)的開關(guān)(FC)和電磁三位換向閥(1-16)的右位開關(guān)(JC7)使直線電機(jī)(1-11)帶動(dòng)流量控制器(1-10)向右運(yùn)動(dòng)；到達(dá)設(shè)定位置時(shí)，限位開關(guān)(FC)斷電，使直線電機(jī)停止；液壓缸(1-22)的活塞及蓋槽(1-18)向下運(yùn)動(dòng)，將蓋槽(1-18)內(nèi)的桶蓋(1-19)壓在菌液桶(1-2)的桶口上，將菌液桶(1-2)密封；至此，液缸(1-22)的活塞達(dá)到最大行程，使碰撞開關(guān)(1-6)也就是K2閉合，同時(shí)讓松閘器(1-4)通過(guò)延時(shí)開關(guān)(JC3)獲電開啟；電磁換向閥(1-16)(1-31)(1-38)獲電左位，液壓缸(1-22)(1-29)返回到初始位置，蓋槽(1-18)將檔塊(1-20)上的碰撞開關(guān)(1-21)也就是K3閉合；接通直線電機(jī)(1-11)的正向給進(jìn)線圈(XC)，直線電機(jī)(1-11)將流量控制器(1-10)向左送到指定位置，限位開關(guān)(XC)斷電，直線電機(jī)停止；液壓缸(1-39)的缸體升起，開關(guān)(1-40)也就是HKI復(fù)位電磁閥(1-23)斷電；同時(shí)延時(shí)開關(guān)(JC3)斷電，松閘器獲電；液壓缸(1-35)繼續(xù)升起，使真空灌裝機(jī)構(gòu)與菌液桶(1-2)分離，菌液桶(1-2)延輸送機(jī)(1-44)去往下道工序，當(dāng)液壓缸(1-22)(1-29)(1-39)內(nèi)達(dá)到設(shè)定壓力時(shí)，壓力開關(guān)(YK2)斷開，使電磁三位換向閥(1-16)(1-31)(1-38)斷電中位；溢流閥(1-36)在壓力作用下打開使油流回到油缸；到此整個(gè)系統(tǒng)完成一次灌裝過(guò)程；如圖7所示，本發(fā)明自動(dòng)接種機(jī)傳動(dòng)方式為首先打開負(fù)離子凈化器(1-2)的開關(guān)(1-36)，凈化接種空間，并將培養(yǎng)袋縱向排列在傳送帶(2-25)上的齒槽內(nèi)，然后打開電機(jī)(2-34)的開關(guān)(2-38)，使整個(gè)機(jī)構(gòu)運(yùn)動(dòng)起來(lái)，通過(guò)齒帶輪(2-35)將轉(zhuǎn)速降到1.5r/min，并經(jīng)過(guò)同步齒形帶、齒帶輪(2-16)(2-14)(2-10)(2-35)分別將動(dòng)能傳送到鏈桿(2-33)(2-18)(2-9)，使鏈桿隨傳動(dòng)軸順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)；當(dāng)接種機(jī)構(gòu)中的鏈桿(2-9)、(2-18)轉(zhuǎn)到最高點(diǎn)時(shí)連續(xù)注射器(2-4)的支架(2-5)和活塞(2-7)的滑板(2-8)通過(guò)其邊緣的滑塊(2-6)延滑軸(2-3)升到最高位置，使連續(xù)注射器(2-4)完成通過(guò)吸液管(2-24)、伸縮軟管(2-23)吸進(jìn)從抑菌聰明座(2-20)上的菌液桶(2-19)內(nèi)，經(jīng)活接球閥(2-21)流入貯液箱內(nèi)的5mL液體菌種，當(dāng)鏈桿(2-9)(2-18)轉(zhuǎn)到右側(cè)水平位置時(shí)，連續(xù)注射器(2-4)的支架(2-5)活塞(2-7)滑板(2-8)隨之下降，鏈桿(2-33)已向右運(yùn)動(dòng)，推動(dòng)支架(2-32)，使滑塊(2-31)延滑套(2-30)推動(dòng)傳送帶(2-25)邊緣的卡簧(2-29)延定位輪(2-28)向右作直線運(yùn)動(dòng)；使傳送帶(2-25)延軸輥(2-26)(2-27)(2-37)向左轉(zhuǎn)動(dòng)；將一組4袋培養(yǎng)袋送到接種針頭(2-1)的下方，鏈桿(2-33)繼續(xù)向下運(yùn)動(dòng)使滑塊(2-31)向左移動(dòng)，傳送帶(2-25)在定向軸輥(2-27)的作用下，停在接種針頭(2-1)的下方；這時(shí)，鏈桿(2-9)(2-18)已由水平位置繼續(xù)向下轉(zhuǎn)動(dòng)，連續(xù)注射器(2-4)的支架(2-5)和活塞(2-7)的滑板(2-8)也隨之下降，使接種針頭(2-1)刺入培養(yǎng)袋并開始注射菌種，當(dāng)鏈桿(2-9)(2-18)帶動(dòng)連續(xù)注射器(2-4)的支架(2-5)和活塞(2-7)的滑板(2-8)運(yùn)動(dòng)到最低點(diǎn)時(shí)注射完畢，鏈桿(2-9)(2-18)繼續(xù)運(yùn)動(dòng)到左側(cè)水平位置時(shí)，連續(xù)注射器(2-4)的支架(2-2)和活塞(2-7)的滑板(2-8)升起使接種針頭(2-1)完全從培養(yǎng)袋內(nèi)撥出，這時(shí)鏈桿(2-33)已運(yùn)到到左端最左行程位置，至此，整個(gè)機(jī)構(gòu)完成了一次接種過(guò)程，如是往復(fù)，達(dá)到了連續(xù)、無(wú)菌接種的目的，接種量為每小時(shí)3600袋；另外，可以根據(jù)培養(yǎng)袋(瓶)的不同規(guī)格，按刻度尺(2-12)用螺母(2-17)調(diào)節(jié)軸架(2-14)在螺桿(2-13)上的住置，使接種針頭(2-1)處在最佳的接種位置，同時(shí)用螺桿(2-4)調(diào)節(jié)張緊輪 (2-15)使同步齒形帶保持在一定的張力狀態(tài)下工作，實(shí)現(xiàn)一機(jī)多用的功能；本發(fā)明的有益效果是可以提供大量貯運(yùn)方便、優(yōu)質(zhì)廉價(jià)、綠色安全的液體栽培菌種產(chǎn)品和簡(jiǎn)單、實(shí)用、成本低、自動(dòng)化程度高的自動(dòng)接種機(jī)產(chǎn)品，菇農(nóng)只需按照食用菌培養(yǎng)袋生產(chǎn)規(guī)模，購(gòu)買相應(yīng)數(shù)量的液體菌種產(chǎn)品和自動(dòng)無(wú)菌接種機(jī)，即可實(shí)施生產(chǎn)，實(shí)現(xiàn)了食用菌液體菌種的普及應(yīng)用和接種生產(chǎn)過(guò)程的無(wú)污染自動(dòng)化、規(guī)?；瑥亩岣吡耸秤镁耘嗌a(chǎn)的質(zhì)量和效率，并使菇農(nóng)的有限資金能充分利用在食用菌培養(yǎng)袋生產(chǎn)環(huán)節(jié)上，真正意義上的減輕了菇農(nóng)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和勞動(dòng)強(qiáng)度，縮短食用菌生產(chǎn)周期，提高菌品質(zhì)量，實(shí)現(xiàn)增產(chǎn)增收的目的；同時(shí)充分發(fā)揮了食用菌液體菌種的生理特性和生產(chǎn)優(yōu)勢(shì)，促進(jìn)食用菌制種業(yè)和栽培業(yè)實(shí)現(xiàn)規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化、工廠化的產(chǎn)業(yè)目標(biāo)；

在圖2中撥輪1-1；菌液桶1-2；傳感器1-3；松閘器1-4；密封閘片1-5；碰撞開關(guān)1-6；密封閘片1-7；灌注口1-8；限位開關(guān)1-9；流量控制器1-10；直線電機(jī)1-11；伸縮軟管1-12；腔體1-13；真空管1-14；導(dǎo)液管1-15；電磁換向閥及管路1-16；推蓋密封檔板1-17；蓋槽1-18；桶蓋1-19；檔塊1-20；碰撞開關(guān)1-21；液壓缸1-22；電磁閥1-23；真空繼電器1-24；送蓋機(jī)1-25；傳感器1-26；標(biāo)點(diǎn)1-27；桶蓋入口1-28；液壓缸1-29；滑板1-30；電磁換向閥及管路1-31；壓力開關(guān)1-32；電動(dòng)油泵1-33；壓力開關(guān)1-34；油箱1-35；溢流閥1-36；壓力開關(guān)1-37；電磁換向閥及管路1-38；液壓缸1-39；碰撞開關(guān)1-40；內(nèi)嚙齒輪組1-41；旋轉(zhuǎn)平臺(tái)1-42；輸送機(jī)1-43；傳動(dòng)軸1-44；錐形齒及潤(rùn)滑箱1-45；電動(dòng)機(jī)變速器離合器1-46；輸液管1-47；密封旋轉(zhuǎn)活接1-48；分液箱1-49；吸氣箱1-50；滾動(dòng)軸承1-51；旋轉(zhuǎn)密封活接1-52；支架1-53；吸氣管1-54；真空泵1-55；排氣管1-56；在圖7中接種針頭2-1負(fù)離子凈化器2-2；滑軸2-3；連續(xù)注射器2-4；支架2-5；滑塊2-6；活塞2-7；滑板2-8；鏈桿及傳動(dòng)軸2-9；同步齒形帶及帶輪2-10；抽架2-11；刻度尺2-12；螺桿2-13；同步齒形帶及帶輪2-14、張緊輪2-15；螺稈2-16；螺母2-17；鏈桿及傳動(dòng)軸2-18；菌液桶2-19；抑菌聰明座及支架2-20；球閥及活接2-21；貯液箱2-22；伸縮軟管2-23；吸液管2-24；傳送帶2-25；支撐軸輥2-26；定向軸輥2-27；定位輪2-28；卡簧2-29；固定滑套2-30；滑塊2-31；支架2-32；鏈桿及傳動(dòng)軸2-33；電機(jī)2-34；同步齒形帶及帶輪2-35；凈化器開關(guān)2-36；附動(dòng)軸滾2-37；電機(jī)開關(guān)2-38；在圖12中鏈槽3-1；軸轂3-2、片干體3-3；連接軸3-4；滾動(dòng)軸承3-5；傳動(dòng)軸3-6；連接座3-7；螺栓3-8；在圖11所示的另一實(shí)施例中，傳動(dòng)軸轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，滑板(2-8)的鏈桿(2-18)和支架(2-5)的鏈桿(2-9)在A1的位置和鏈桿(2-33)在CZ的住置是整個(gè)機(jī)構(gòu)的運(yùn)動(dòng)的起使位置；AZ是支架(2-5)上升的終點(diǎn)和活塞(2-7)的滑板(2-8)上升使注射器(2-4)吸滿液體菌種的位置；A2、A3、C1、C3位置是協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)過(guò)程，是使滑板(2-8)的鏈稈(2-18)、支架(2-5)的鏈朽(2-9)和鏈桿(2-33)的相對(duì)運(yùn)動(dòng)達(dá)到一致，C4位置是鏈桿(2-33)、滑塊(2-31)推動(dòng)卡簧(2-29)，使傳送帶將食用菌培養(yǎng)袋送到接種針頭(2-1)的下方指定接種位置的終點(diǎn)；A4仁置是接種針頭(2-1)完成刺進(jìn)培養(yǎng)袋，注射菌種的過(guò)程，A1是撥出接種針頭(2-1)的位置，CZ是鏈稈(2-33)帶動(dòng)滑塊(2-31)向左運(yùn)動(dòng)到最大行程位置，至此又是下一次接種過(guò)程的開始。
權(quán)利要求
1.一種食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)方法1-1.種子的制備種子質(zhì)量的好壞對(duì)發(fā)酵影響很大；決定于菌種本身和種子培養(yǎng)條件；食用菌深層發(fā)酵所用的種子要求(1)菌體生長(zhǎng)旺盛，活力強(qiáng)種子的菌齡通常是控制在菌體的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期；種子菌齡以48-96小時(shí)為好；(2)菌球直徑小、數(shù)量多培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組分對(duì)菌球的形狀有一定的影響；一般地，含糖分多的培養(yǎng)基，培養(yǎng)出的菌球直徑小，培養(yǎng)基黏度大的，菌球也較小；此外，用旋轉(zhuǎn)式搖床比用往復(fù)式搖床，菌球直徑較??；在搖瓶?jī)?nèi)加幾粒玻璃珠或一個(gè)小彈簧進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，也可使菌球直徑變?。?3)純度高食用菌深層發(fā)酵用的種子，要求高純度，不能有任何污染；1-2、斜面菌種制備用于深層發(fā)酵的原始菌株需經(jīng)嚴(yán)格的提純與鑒定；培養(yǎng)基葡萄糖2.0％，酵母膏0.5％，磷酸二氫鉀0.1％，硫酸鎂0.1％，瓊脂2.0％，pH自然；滅菌在120-126℃的條件下，滅菌30分鐘；培養(yǎng)條件25℃，7-10天；1-3、搖瓶種子制備培養(yǎng)基土豆20％、紅糖1.0-1.5％、葡萄糖1.0-1.5％、麩皮3％、蛋白胨0.15-0.3％、磷酸二氫鉀0.2％、硫酸鎂0.1％、維生素VB110毫克/升，余量為水，PH值6.5-7.0.配制好的培養(yǎng)基分裝于三角瓶?jī)?nèi)，并在三角瓶?jī)?nèi)放3-4玻璃珠，塞好棉塞，扎上防水紙；高壓滅菌，1.4千克/厘米2壓力、滅菌30分鐘、冷卻到30℃以下時(shí)，接入0.5厘米2大小的斜面菌種2-4塊，然后夾于搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，其頻率設(shè)計(jì)為80-120次/分；培養(yǎng)溫度在25℃，培養(yǎng)2-7天；一級(jí)搖瓶種子、二級(jí)搖瓶種子的制備方法相同；1-4.制備一級(jí)、二級(jí)種子制備播瓶種子必須進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖成一級(jí)種子，一級(jí)種子更擴(kuò)大繁殖成二種子；一級(jí)種子和二級(jí)種子是在種子罐中培養(yǎng)的，一級(jí)種子培養(yǎng)基選用搖瓶培養(yǎng)基，二級(jí)種子的培養(yǎng)基，選用搖瓶培養(yǎng)基，二級(jí)種子的培養(yǎng)基，選用發(fā)酵培養(yǎng)基；2-1.發(fā)酵罐發(fā)酵工藝參數(shù)控制原料及培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基土豆10-20％、麩皮2-5％、紅糖0.5-2.0％、蛋白胨0.1-0.3％、酵母膏0.1-0.3％、磷酸二氫鉀0.1-0.2％、硫酸鎂0.05-0.15％、維生素B110-20毫克/升、聚氧丙烯甘油0.03-0.035％、余量為水、PH值4.0-8.0％；培養(yǎng)基的配制按如下順序(1)制作土豆汗和麩皮汁新鮮土豆挖芽去皮，切成0.5-0.4厘米厚的片或條，加5倍水煮至酥不爛時(shí)用6-8層紗布過(guò)濾，取汁備用；新鮮無(wú)霉變的麩皮加10倍水煮沸至20分鐘，過(guò)濾取汁備用；(2)混合土豆汁和麩皮汁；(3)將磷酸二氫鉀、硫酸鎂溶水后加入混合汁中；(4)再將紅糖、葡萄糖、蛋白胨溶水后加入混合汁中；(5)再將維生素B1碾碎后加入混合汁中；(6)用濃度為10％的鹽酸或氫氧化鈉調(diào)整PH值；(7)滅菌將培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)罐內(nèi)，在溫度達(dá)121-126℃時(shí)維持30-35分鐘；(8)冷卻滅菌后，立即通入冷水降溫，使培養(yǎng)基溫度降到23-30℃；2-2、菌齡搖瓶種子菌齡控制在4-10天，一級(jí)種子和二級(jí)種子的菌齡為48-96小時(shí)；2-3、接種量食有菌深層發(fā)酵時(shí)的接種量為10％-20％；2-4、溫度食用菌深層發(fā)酵的溫度在22-30℃；2-5、食用菌深層發(fā)酵的通氣量以0.2-1.5通氣體積/培養(yǎng)液體積/分鐘為宜；2-6、攪拌速度食用菌深層發(fā)酵的攪拌速度一般是180-500轉(zhuǎn)/分；2-7、酸堿度最適pH為5.0--7.2，平菇為5.0-6.5；在發(fā)酵過(guò)程中需定時(shí)取樣，測(cè)定酸堿度，并進(jìn)行調(diào)整；2-8、罐壓在發(fā)酵過(guò)程中要維持一定的罐壓，通常為0.2-0.7千克/厘米2；2-9、泡沫控制(1)機(jī)械消泡依靠裝于罐內(nèi)的消泡漿強(qiáng)烈機(jī)械振蕩和壓力的變化來(lái)破壞氣泡的 表面張力；降低泡沫的穩(wěn)定性，促使泡沫破裂；；(2)化學(xué)消泡常用的消泡劑有天然油脂和合成消泡劑兩類；用于消泡的天然油脂有花生油、豆油、棉油等；常用的合成消泡劑有泡敵；目前大多數(shù)是使用泡敵做消泡劑，加入量約為0.006％；3-1.發(fā)酵終點(diǎn)合理的放罐時(shí)間應(yīng)參考產(chǎn)物濃度、過(guò)濾速度、氨基氮含量、殘?zhí)橇?、菌絲形態(tài)、pH、發(fā)酵液的外觀和黏度等因素才能決定；在發(fā)酵過(guò)程中間測(cè)定；(1)菌絲量測(cè)定常用的測(cè)定方法有兩種①離心法量取一定體積的樣品液，經(jīng)3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘，傾棄上清液，稱菌泥重量；②過(guò)濾去根據(jù)菌絲球的大小，選用適當(dāng)規(guī)格篩子，樣品液用篩子過(guò)濾，再用20-30倍體積水沖洗，把夾帶的培養(yǎng)液組成沖洗去，濾得的菌絲體在80℃下烘干，再用105℃烘至恒重，稱重；(2)菌絲球大小測(cè)量樣品先經(jīng)過(guò)濾、沖洗干凈，取少量菌絲球于培養(yǎng)皿中，加少許蒸流水使菌球散開與充分伸展，用游標(biāo)卡尺在培養(yǎng)皿底對(duì)著菌絲球測(cè)量；(3)純度檢查檢查是滯有雜菌污染；檢查方法可用平板培養(yǎng)或酚紅肉湯培養(yǎng)，24-28小時(shí)后檢查有否細(xì)菌污染；亦可通過(guò)顯微鏡檢查，要用油鏡才能看清楚有否細(xì)菌存在；(4)酸堿度測(cè)量通過(guò)檢查發(fā)現(xiàn)酵液的pH變化，可以了解發(fā)酵的進(jìn)程并間接了解污染情況；一般地說(shuō)，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，pH又出現(xiàn)回升現(xiàn)象，這是由于菌體自溶的結(jié)果；(5)含糖量①發(fā)酵液總糖的測(cè)定；②發(fā)酵液還原糖的測(cè)定；(6)氨基酸的測(cè)定；(7)發(fā)酵液氣味檢查發(fā)酵液的氣體檢查可在發(fā)酵罐的排氣口檢查；4-1、罐裝生產(chǎn)當(dāng)發(fā)酵罐內(nèi)的液體栽培菌種達(dá)到發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)，經(jīng)嚴(yán)格檢驗(yàn)合格后，通過(guò)無(wú)菌管路輸送到真空無(wú)菌灌裝生產(chǎn)線的分液箱內(nèi)，由真空無(wú)菌灌裝機(jī)構(gòu)把液體菌種在真空狀態(tài)下，灌裝在PET聚脂桶內(nèi)，并用一次性塑料聰明蓋在真空狀態(tài)下將PET聚脂桶的桶口密封起來(lái)，然后，將其進(jìn)行預(yù)冷到5℃以下，在1-5℃的冷藏庫(kù)內(nèi)貯藏并通過(guò)連鎖直銷的形式銷售；其保存期最長(zhǎng)可達(dá)6個(gè)月，其產(chǎn)品質(zhì)量、性能不變。
2.如權(quán)利要求1所述的一種食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)方法專用的一種食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)設(shè)備真空無(wú)菌灌裝生產(chǎn)線由傳送機(jī)構(gòu)，真空灌裝機(jī)構(gòu)，理蓋送蓋機(jī)、真空泵、電機(jī)、變速器、離合器組成；其特征在于傳送機(jī)構(gòu)包括鏈板輸送機(jī)、撥輪，鏈板輸送機(jī)并列在真空灌裝機(jī)構(gòu)中的環(huán)形旋轉(zhuǎn)平臺(tái)外側(cè)，真空灌裝機(jī)構(gòu)下方；在真空無(wú)菌灌裝機(jī)構(gòu)箱體中，右下方是方形雙作用液壓缸，其活塞固定在下方的環(huán)形旋轉(zhuǎn)平臺(tái)軸輥上的鏈板上，鏈板右端固定有內(nèi)嚙齒輪，內(nèi)嚙齒輪與直齒輪相嚙合，直齒輪又通過(guò)傳動(dòng)軸、錐形齒輪與下方的電機(jī)、變速器、離合器相連接；方形液壓缸的活塞左側(cè)設(shè)有碰撞開關(guān)，而液壓缸缸體則設(shè)置在機(jī)箱內(nèi)，其上方是油箱和與液缸缸體之相連的三位電磁換向閥及壓力開關(guān)、管路，左側(cè)是松閘器，松閘器連接有半圓形密封瓦塊，與之相對(duì)的左側(cè)機(jī)箱壁上固定有另一半圓形密封瓦塊，這個(gè)瓦塊內(nèi)設(shè)置有碰撞開關(guān)；油箱左側(cè)是電動(dòng)油泵，其出口管路處設(shè)有壓力開關(guān)，油泵上方是兩個(gè)三位電磁換向閥，分別與橫向固定在機(jī)箱右側(cè)頂部的液壓缸和垂直固定在機(jī)箱左側(cè)腔體內(nèi)頂部的液壓缸相連接，右側(cè)頂部液壓缸的活塞上連接有推蓋密封擋板；左側(cè)頂部液壓缸的活塞上連接有蓋槽，蓋槽右側(cè)開口，內(nèi)置卡簧，與蓋槽開口相對(duì)應(yīng)的腔體上也有同樣大小的開口，開口下端，水平方向設(shè)置有桶蓋滑板，滑板上方，機(jī)箱箱體上開有桶蓋入口；密封檔塊內(nèi)設(shè)有滑板腔；在松閘器左側(cè)箱體下方外側(cè)設(shè)置有接近開關(guān)；松閘器上方，油泵左側(cè)的可以密封的腔體內(nèi)，右側(cè)設(shè)置有直線電機(jī)，其動(dòng)子頂端連接有流量控制器和限位開關(guān)及灌注口；流量控制器通過(guò)伸縮軟管與腔體外的導(dǎo)液管相連接，導(dǎo)液管另一端通過(guò)金屬管與分液箱相連；真空管與導(dǎo)液管并列在腔體外側(cè)上方中部，并開口在腔體壁是與腔體相通，另一端與箱體左側(cè)上端的真空繼電器，電磁閥相連接，電磁閥又通過(guò)金屬導(dǎo)管與吸氣箱相連，分液箱固定在吸氣箱上端，吸氣箱下端固定在支架上的滾動(dòng)軸承上；吸氣管通過(guò)旋轉(zhuǎn)密封活接與真空泵相連；分液箱頂部連接有密封旋轉(zhuǎn)導(dǎo)管與貯液罐相連；送蓋理蓋機(jī)除機(jī)頭上設(shè)有接近開關(guān)。
3.如權(quán)利要求1所述的一種食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)方法配套專用的自動(dòng)化無(wú)菌接種機(jī)；是由在機(jī)架內(nèi)部上方的接種機(jī)構(gòu)和下方的間歇傳送機(jī)構(gòu)及電機(jī)組成；其特征在于在接種機(jī)構(gòu)中，負(fù)離子凈化器設(shè)置在下端與機(jī)體相連，滑軸在其上方左右兩側(cè)，下端固定在機(jī)架梁上，上端與螺桿相連，螺桿上端固定在機(jī)架頂端，滑軸上通過(guò)滑塊連接有支架及滑板，連續(xù)注射器橫向排列在支架內(nèi)，其筒體固定在支架橫梁上，下端的吸液管與料斗機(jī)構(gòu)的伸縮軟管相連，其活塞則固定在滑板下方；接種針頭上端與注射器下端相連，下端位于負(fù)離子凈化器極柵間隙中，筒體支架頂端和滑板頂端在同一平面上與鏈桿相連接，筒體支架升降鏈桿及傳動(dòng)軸分列在滑板升降鏈朽及傳動(dòng)軸的左右兩側(cè)；傳動(dòng)軸都固定在螺桿上可以根據(jù)刻度尺上下用螺帽調(diào)節(jié)移動(dòng)位置的軸架上，注射器支架升降鏈桿及傳動(dòng)軸固定在軸架下方，活塞滑板升降鏈桿及傳動(dòng)軸固定在上方，它們用同步齒形帶、齒帶輪相連接，滑板升降鏈桿傳動(dòng)軸又通過(guò)同步齒形帶、齒帶輪與上方固定在機(jī)架橫梁上的主傳動(dòng)軸、張緊輪相連接，主傳動(dòng)軸后端是齒帶輪，通過(guò)同步齒形帶與下方的變速傳動(dòng)軸、同步齒形帶、齒形輪及電機(jī)相鏈接；間歇傳送機(jī)構(gòu)中，定向軸輥位于機(jī)架內(nèi)側(cè)左右兩端，其前后兩端的軸固定在機(jī)架上的滾動(dòng)軸承內(nèi)，支撐軸輥排列在機(jī)架上方，其上端邊緣與定向軸輥上端邊緣在同一平面上，附動(dòng)軸輥位于支撐軸輥下方，其下端邊緣與定向軸輥下端邊緣在同一平面上；傳送帶定位輪位于右側(cè)的附動(dòng)軸輥和定向軸輥之間，前后兩排，并通過(guò)軸座固定在機(jī)架上，傳送帶環(huán)繞在定向軸輥、支持軸輥、附動(dòng)軸輥及定位輪的外側(cè)，傳送帶表面設(shè)置有活動(dòng)齒柵，傳送帶邊緣上固定有卡簧，在傳送帶下方右側(cè)是滑套及滑塊，滑套固定在機(jī)架橫梁上，滑塊在滑套內(nèi)，滑塊左端與支架相連，前后兩組，用橫梁相連接，鏈桿一端固定在橫梁中部，另一端連接在變速傳動(dòng)軸上，通過(guò)同步齒形帶及帶輪與電機(jī)相連；料斗機(jī)構(gòu)設(shè)置在接種機(jī)構(gòu)機(jī)架右上方，通過(guò)支架與機(jī)架相連；支架上端是抑菌聰明座，內(nèi)置負(fù)離子凈化器，抑菌聰明座通過(guò)活接球閥與下面的貯液箱相連接，貯液箱上設(shè)有分流口，伸縮軟管上端接在貯液箱的分流口上，下端連接在接種機(jī)構(gòu)中的連續(xù)注射器吸液管上；電機(jī)及負(fù)離子凈化器開關(guān)固定在中部機(jī)架上。
全文摘要
本發(fā)明公開一種食用菌液體栽培菌種商品化生產(chǎn)方法、設(shè)備和自動(dòng)化無(wú)菌接種機(jī)；克服現(xiàn)有技術(shù)所造成的食用菌液體栽培菌種不能普及應(yīng)用的不足，不僅能為廣大菇農(nóng)提供優(yōu)質(zhì)廉價(jià)、綠色安全的液體栽培菌種和與之配套的簡(jiǎn)單、實(shí)用、高效的自動(dòng)化元菌接種機(jī)械，而且還將液體菌種的制種工序從食用菌栽培的整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程中分離出來(lái)，專業(yè)技術(shù)單位可按本發(fā)明從事生產(chǎn)，把優(yōu)質(zhì)的液體栽培菌種產(chǎn)品和高效自動(dòng)化無(wú)菌接種機(jī)產(chǎn)品，供應(yīng)給菇農(nóng)從事后期栽培生產(chǎn)使用；也就是將食用菌生產(chǎn)一分為二，即形成了食用菌制種行業(yè)和栽培行業(yè)兩個(gè)獨(dú)立且相關(guān)連的新的生產(chǎn)模式，從根本上簡(jiǎn)化了食用菌生產(chǎn)鏈，改變了食用菌的傳統(tǒng)生產(chǎn)模式，并可使食用菌的制種業(yè)和栽培業(yè)都具備了成為工業(yè)化產(chǎn)業(yè)的發(fā)展優(yōu)勢(shì)。
文檔編號(hào)A01G1/04GK1742543SQ20051001012
公開日2006年3月8日 申請(qǐng)日期2005年10月29日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月29日
發(fā)明者付嶸 申請(qǐng)人:付嶸