專利名稱：一種橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物的無(wú)性繁殖方法，尤其涉及一種橡膠樹(shù)的無(wú)性系微體繁殖方法。
背景技術(shù)：
隨著橡膠制品在社會(huì)中應(yīng)用的日益廣泛，橡膠樹(shù)作為橡膠的產(chǎn)出樹(shù)在很大程度上影響橡膠的產(chǎn)量，雖然隨著社會(huì)科學(xué)的發(fā)展，出現(xiàn)了人造橡膠替代品，以滿足橡膠產(chǎn)量的不足，但在某些性能方面，人造橡膠替代品還不能與天然橡膠相比，這就需要橡膠樹(shù)具有干膠產(chǎn)量高、抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)。橡膠樹(shù)第一代種植材料為實(shí)生苗，由于實(shí)生苗存在基因分離重組，不能保持母本優(yōu)良性狀，故很快被第二代種植材料芽接苗取代?，F(xiàn)代生產(chǎn)上使用的橡膠樹(shù)種植材料基本上是芽接苗，目前在橡膠樹(shù)幼苗繁殖培養(yǎng)方法上是花藥培養(yǎng)方法走在前沿，來(lái)自花藥培養(yǎng)的自根無(wú)性系兼有實(shí)生苗和芽接苗的優(yōu)點(diǎn)，既保持了母本優(yōu)良形狀，又能克服芽接苗中砧木的不良影響，同時(shí)又能恢復(fù)其幼態(tài)特性，故與傳統(tǒng)的芽接苗相比，花藥植株具有生長(zhǎng)速度快、干膠產(chǎn)量高、抗逆性強(qiáng)的特點(diǎn)，同一品種已開(kāi)割的花藥植株與芽接苗對(duì)比莖圍增長(zhǎng)9-20％，產(chǎn)量增加20-30％，抗臺(tái)風(fēng)、抗寒害能力顯著增加。因此，橡膠樹(shù)花藥植株正在成為第三代種植材料。然而，由于花藥培養(yǎng)再生植株的技術(shù)復(fù)雜，再生植株的數(shù)量少，成本高，工廠化生產(chǎn)難度較大。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法，它是直接利用橡膠樹(shù)芽條經(jīng)過(guò)微體繁殖來(lái)獲得自根無(wú)性系植株。
本發(fā)明所采用的設(shè)計(jì)方案包括芽條的選取與處理過(guò)程、誘導(dǎo)芽的培養(yǎng)與增殖過(guò)程、生根過(guò)程。
芽條的選取與處理過(guò)程取橡膠樹(shù)芽條，切取頂芽或帶腋芽的莖段或芽條被摘除頂芽數(shù)周后剛萌發(fā)的腋芽，然后用乙醇溶液浸泡，再用升汞溶液或次氯酸鈉溶液進(jìn)行滅菌，接著用無(wú)菌水洗滌干凈。
誘導(dǎo)芽的培養(yǎng)與增殖過(guò)程將處理好的頂芽或帶腋芽的莖段或剛萌發(fā)的腋芽接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，以誘導(dǎo)出再生芽，然后切取再生芽并將再生芽放在增殖培養(yǎng)基上增殖，增殖進(jìn)行的代數(shù)由需要來(lái)定。所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以MS為基本培養(yǎng)基，并添加有BA，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基里還可以添加或不添加NAA和GA3；所述增殖培養(yǎng)基是以MS為基本培養(yǎng)基，并添加有BA。
生根過(guò)程把增殖好的再生芽放在生根培養(yǎng)基上生根，然后將生根的再生芽移植到苗床上種植即可。所述生根培養(yǎng)基是以所含無(wú)機(jī)鹽減少1/5-1/2之間的MS或SH為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加有NAA，在生根培養(yǎng)基里還可以添加或不添加KT。
本發(fā)明所提供的橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法工藝流程簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，其利用微體繁殖來(lái)獲得自根無(wú)性系，克服了花藥培養(yǎng)植株再生率低而難以推廣的缺點(diǎn)，也克服了花藥培養(yǎng)植株由于來(lái)自愈傷組織而可能發(fā)生遺傳變異的風(fēng)險(xiǎn)，避免了花藥培養(yǎng)再生植株的基因型障礙，因此具有很大的應(yīng)用價(jià)值。
具體實(shí)施例方式
下面對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
本發(fā)明所提供的一種橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法包括芽條的選取與處理過(guò)程、誘導(dǎo)芽的培養(yǎng)與增殖過(guò)程、生根過(guò)程。
1、芽條的選取與處理過(guò)程是取橡膠樹(shù)芽條，切取頂芽或帶腋芽的莖段或芽條被摘除頂芽1-3周后剛萌發(fā)的腋芽，然后用50-80％乙醇溶液浸泡3-10秒，再用0.1-0.2％升汞溶液進(jìn)行浸泡滅菌6-12分鐘，或用5-10％次氯酸鈉溶液進(jìn)行浸泡滅菌10-20分鐘，接著用無(wú)菌水洗滌3-6次。
2、誘導(dǎo)芽的培養(yǎng)與增殖過(guò)程是將處理好的頂芽或帶腋芽的莖段或芽條被摘除頂芽1-3周后剛萌發(fā)的腋芽接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)25-60天，以誘導(dǎo)出再生芽，然后切取再生芽并將再生芽放在增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖和繼代培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)的代數(shù)由需要來(lái)定。所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以MS為基本培養(yǎng)基，并添加有BA0.5-4.0mg/L，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基里還可以添加或不添加NAA和GA3，所添加的NAA在3.0mg/L以下，所添加的GA3在4.0mg/L以下；所述增殖培養(yǎng)基是以MS為基本培養(yǎng)基，并添加有BA0.5-4.0mg/L。
3、根過(guò)程是把增殖好的再生芽放在生根培養(yǎng)基上生根，培養(yǎng)溫度在20℃-30℃之間，每天光照在12-16小時(shí)之間，然后將生根的再生芽移植到苗床上種植即可。所述生根培養(yǎng)基是以所含無(wú)機(jī)鹽減少1/5-1/2之間的MS或SH為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加有NAA0.1-2.0mg/L，在生根培養(yǎng)基里還可以添加或不添加KT，所添加的KT在4.0mg/L以下。
權(quán)利要求
1.一種橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法，其特征在于它包括芽條的選取與處理過(guò)程、誘導(dǎo)芽的培養(yǎng)與增殖過(guò)程、生根過(guò)程；所說(shuō)的芽條的選取與處理過(guò)程是取橡膠樹(shù)芽條，切取頂芽或帶腋芽的莖段或芽條被摘除頂芽1-3周后剛萌發(fā)的腋芽，然后用50-80％乙醇溶液浸泡3-10秒，再用0.1-0.2％升汞溶液進(jìn)行浸泡滅菌6-12分鐘，或用5-10％次氯酸鈉溶液進(jìn)行浸泡滅菌10-20分鐘，接著用無(wú)菌水洗滌3-6次；所說(shuō)的誘導(dǎo)芽的培養(yǎng)與增殖過(guò)程是將處理好的頂芽或帶腋芽的莖段或芽條被摘除頂芽1-3周后剛萌發(fā)的腋芽接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)25-60天，以誘導(dǎo)出再生芽，然后切取再生芽并將再生芽放在增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖和繼代培養(yǎng)；所說(shuō)的生根過(guò)程是把增殖好的再生芽放在生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度在20℃-30℃之間，每天光照在12-16小時(shí)之間，然后將生根的再生芽移植到苗床上種植即可；所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以MS為基本培養(yǎng)基，并添加有BA0.5-4.0mg/L；所述增殖培養(yǎng)基是以MS為基本培養(yǎng)基，并添加有BA0.5-4.0mg/L；所述生根培養(yǎng)基是以所含無(wú)機(jī)鹽減少1/5-1/2之間的MS或SH為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加有NAA0.1-2.0mg/L。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法，其特征在于在誘導(dǎo)培養(yǎng)基里還可以添加NAA，所添加的NAA在3.0mg/L以下。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法，其特征在于在誘導(dǎo)培養(yǎng)基里還可以添加GA3，所添加的GA3在4.0mg/L以下。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法，其特征在于在生根培養(yǎng)基里還可以添加KTO，所添加的KTO在4.0mg/L以下。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法，它是直接利用橡膠樹(shù)芽條經(jīng)過(guò)微體繁殖獲得自根無(wú)性系的方法，其工藝過(guò)程包括芽條的選取與處理過(guò)程、誘導(dǎo)芽的培養(yǎng)與增殖過(guò)程、生根過(guò)程。本發(fā)明所提供的橡膠樹(shù)無(wú)性系微體繁殖方法工藝流程簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，其利用微體繁殖來(lái)獲得自根無(wú)性系，克服了花藥培養(yǎng)植株再生率低而難以推廣的缺點(diǎn)，也克服了花藥培養(yǎng)植株由于來(lái)自愈傷組織而可能發(fā)生遺傳變異的風(fēng)險(xiǎn)，避免了花藥培養(yǎng)再生植株的基因型障礙，因此具有很大的應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號(hào)A01G7/00GK1663342SQ20051006541
公開(kāi)日2005年9月7日 申請(qǐng)日期2005年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月30日
發(fā)明者張家明, 譚德冠, 孫雪飄 申請(qǐng)人:中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所