專利名稱：菊科植物揮發(fā)油作為殺蚊蟲劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及菊科植物揮發(fā)油的用途，尤其涉及作為殺蚊蟲劑的應(yīng)用。
蚊蟲吸食人血、傳播疾病，嚴重危害人類健康。長期以來，人們使用多種方法控制蚊蟲，各類化學(xué)殺蟲劑對蚊蟲防制效果好且持續(xù)時間長，在某些地區(qū)的蚊媒病控制中起到了舉足輕重的作用。目前在人們?nèi)粘Ｉ钪幸财鹬豢商娲淖饔茫怯袡C合成殺蟲劑在高效殺蟲的同時，也遺留了許多問題。實踐證明，隨著殺蟲劑大量和長期地使用，特別是加上防治農(nóng)業(yè)害蟲的殺蟲劑，蚊蟲的抗藥性程度越來越嚴重，且擴散迅速，殺蟲劑的污染環(huán)境問題及其對自然生態(tài)平衡的影響，也有增無減。它們都成為現(xiàn)代蚊蟲防治中的突出問題(陸寶麟，1999)。這些因素促使人們尋求對環(huán)境安全、易于降解、并具有選擇毒性的殺蟲劑。近年來，國內(nèi)外研究者投入大量的人力、物力嘗試從天然產(chǎn)物中尋找生物活性物質(zhì)以替代化學(xué)殺蟲劑。
植物揮發(fā)油是植物體內(nèi)的一類次生性代謝物質(zhì)，主要成分為單萜、倍半萜和芳香烴衍生物，多通過水蒸氣蒸餾法從植物的葉、果皮、花、種子中提取。
植物揮發(fā)油和其成分的單體對蚊蟲的毒性受到了眾多學(xué)者專家的關(guān)注，目前植物揮發(fā)油對蚊蟲毒殺作用的研究主要集中在對蚊蟲幼蟲階段的毒殺作用上。
“The Journal of Communicable Diseases”文獻報道，Dongre等(1980)發(fā)現(xiàn)尖齒艾納香(Blumea oxyodonta)等3種艾納香屬植物的揮發(fā)油能殺滅尖音庫蚊(Culex pipiens pipiens)幼蟲，其中Blumea eriantha的揮發(fā)油在0.02％濃度下可導(dǎo)致其幼蟲死亡100％；
“International Pest Control”文獻報道，Namrata等(2000)研究了幾種植物揮發(fā)油對3種蚊子(斯氏按蚊Anopheles stephensi、致倦庫蚊Cx.pipiens quinquefasciatus和埃及伊蚊Aedes aegypti)幼蟲的作用，發(fā)現(xiàn)萬壽菊葉的揮發(fā)油對幼蟲顯示出很強的活性；“Pest Management Science”文獻報道，Traboulsi等(2002)研究了幾種芳香植物的揮發(fā)油對騷擾庫蚊(Culex pipiens molestus)四齡幼蟲的毒殺作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Myrtus communis L的毒性最強；“Entomology”文獻報道，Thomas等(2000)研究發(fā)現(xiàn)Cannabis sativa對幾種蚊蟲的幼蟲均具有一定的毒殺作用，其中對三帶喙庫蚊(Cx.tritaeniorhynchus)的毒性最強，并有結(jié)果顯示水蒸汽蒸餾得到的產(chǎn)物比乙醇萃取的產(chǎn)物毒性高。“Nature”文獻報道Saxena等(1977)發(fā)現(xiàn)香芹酚、香茅醇、丁香酚、法呢醇和牻牛兒醇能阻止埃及伊蚊的卵孵化；“Bioresource Technology”文獻報道，Ezeonu等(2001)研究了兩種蕓香科植物果皮提取的植物揮發(fā)油對蚊蟲、蜚蠊和家蠅的殺蟲活性，發(fā)現(xiàn)在室內(nèi)噴灑60min后的殺蟲效果比30min后的效果好。
菊科植物為青海省海北地區(qū)入侵人工草場的主要雜草類，研究表明其揮發(fā)油中成分的協(xié)同作用，可以有效地抑制垂穗披堿草種子的萌發(fā)及幼苗生長過程中正常的生理生化作用，導(dǎo)致發(fā)育受阻，甚至大量死亡，加速人工草場的退化。該植物揮發(fā)油未見報告有毒殺蚊蟲的效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是公開菊科植物揮發(fā)油作為殺蚊蟲劑的應(yīng)用。
為了能夠更好的理解本發(fā)明的實質(zhì)，以下將通過菊科植物揮發(fā)油的毒殺蚊蟲的試驗和結(jié)果來說明其作為殺蚊蟲劑的應(yīng)用。
材料
將菊科植物通過水蒸汽蒸餾法制得揮發(fā)油，因見光遇熱易分解，保存于低溫避光處備用；所說的水蒸汽蒸餾法在一般的技術(shù)手冊上均有描述，如張繼杰主編的《天然藥物化學(xué)》的方法；所說的菊科植物(Compositae)，優(yōu)選包括萬壽菊、細桿沙蒿或細葉亞菊中的一種；致倦庫蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)又稱家蚊，為全世界分布，是最常見的蚊蟲種類，是我國農(nóng)業(yè)部藥檢所確認為國家標準用衛(wèi)生殺蟲劑藥效評價昆蟲；將菊科植物揮發(fā)油與有機溶劑和水，以以下的體積比例混合，作為待測樣品菊科植物揮發(fā)油1％，有機溶劑1％，水98％；所說的有機溶劑選自丙酮、乙醇、二甲基亞砜、丙三醇或吐溫20；殺蚊蟲試驗熏蒸方法參照“農(nóng)藥學(xué)學(xué)報”江志利等(2002)公開的方法，“三角瓶密閉熏蒸法”，將10-15只2-3d齡致倦庫蚊的雌蟲接入250mL三角瓶內(nèi)，三角瓶以包有紗布的軟木塞密閉。在軟木塞上固定一塊濾紙條(1cm×3cm)，用微量移液器向濾紙條上滴加50μL供試揮發(fā)油后，迅速蓋好軟木塞；每種溶劑重復(fù)3次，每重復(fù)用同批次試蟲，同時設(shè)以等量的各溶劑作為空白對照，觀察6h和24h試蟲死亡率。全部熏蒸測試在養(yǎng)蟲室進行，溫度26℃±1℃，相對濕度65％±5％。
熏蒸毒力和熏蒸時間效應(yīng)的測定將待測揮發(fā)油制備成一定比例(V/V)的丙酮母液，再用丙酮按等比例稀釋到以下5個體積濃度梯度0.2％、0.4％、0.8％、1.6％、3.2％；使蚊蟲的死亡率在5％-90％之間。參照江志利等的方法(三角瓶密閉熏蒸法)并進行測試，于持續(xù)熏蒸0.5h、1h、2h、4h、6h、24h后分別檢查和記錄死蟲數(shù)。每濃度梯度組處理重復(fù)3次，同時設(shè)空白對照。采用概率值分析法計算LC50值、毒力回歸方程，并對毒力回歸方程進行x2檢驗，同時計算0.5h的LC95值(吳文君等，1998)。以精油的LC95劑量(0.5h)處理致倦庫蚊，每隔1min檢查和記錄死蟲數(shù)，并記錄24h死蟲數(shù)，采用概率值分析法計算揮發(fā)油對致倦庫蚊的LT50值、毒力回歸方程，且對毒力回歸方程進行x2檢驗(亢秀敏，1994)。
試驗結(jié)果所說的植物揮發(fā)油具有十分優(yōu)良的毒殺蚊蟲的效果，可以用作毒殺蚊蟲劑。具體結(jié)果見表1。
表1不同溶劑的菊科揮發(fā)油溶液6h和24h蚊蟲的死亡率比較

毒性菊科揮發(fā)油對致倦庫蚊的熏蒸毒力在不同的時間段有差異，空白對照均無死亡。在0.5h、1h、2h、4h、6h和24h時，供試揮發(fā)油對致倦庫蚊的LC50在1h是最小(0.203)，而24h時最大(1.711)(表2)。經(jīng)x2(f＝3，P＝0.05)檢驗各毒力回歸方程均符合實際情況。
表2菊科揮發(fā)油對致倦庫蚊的熏蒸效果


殺死速度用菊科揮發(fā)油的LC95劑量，2％(0.5h)熏蒸處理致倦庫蚊，LT50為8.226min(6.302-10.737，95％CI)。毒力回歸方程y＝2.1690+1.3434x，經(jīng)x2(f＝3，P＝0.05)檢驗毒力回歸方程(y＝2.1690+1.3434x)均符合實際情況。
本發(fā)明在具體使用時，為了使用方便，可將菊科揮發(fā)油加入有機溶劑、或乳化劑等，采用共知的方法制備成為溶劑或乳劑等，其中，菊科揮發(fā)油的重量含量優(yōu)選0.01％～99.9％。
上述結(jié)果表明，提示菊科揮發(fā)油對蚊具有較好的熏殺活性和一定的殺蟲速度，所說的蚊包括致倦庫蚊、斯氏按蚊、中華按蚊或雷氏按蚊，本發(fā)明的優(yōu)點在于，本發(fā)明開拓了菊科揮發(fā)油的新用途，發(fā)掘了其一個新的應(yīng)用領(lǐng)域，預(yù)示著很好的應(yīng)用前景，對菊科揮發(fā)油的毒性較小，對人體無害，原材料來源方便，制備容易，便于推廣使用。
具體實施例方式
實施例1將100克菊科植物萬壽菊的粉碎品，置于500mL蒸餾水中，用揮發(fā)油提取器水蒸氣蒸餾5小時，收集提取物，離心去水層，靜置，收集油相，即為菊科揮發(fā)油。
實施例2將100克菊科植物細桿沙蒿的粉碎品，置于500mL蒸餾水中，用揮發(fā)油提取器水蒸氣蒸餾5小時，收集提取物，離心去水層，靜置，收集油相，即為菊科揮發(fā)油。
實施例3將實施例1的菊科揮發(fā)油以如下的體積比例與丙酮混合菊科揮發(fā)油1％，丙酮1％和水98％，然后裝入容器中，獲得產(chǎn)品。
實施例4將實施例1的菊科揮發(fā)油以如下的重量比例與無臭煤油混合，然后裝入容器中，獲得產(chǎn)品菊科揮發(fā)油2％，無臭煤油98％。
實施例5將實施例2的菊科揮發(fā)油5％，吐溫202％，水93％，50℃攪拌乳化0.5小時，獲得乳劑。
權(quán)利要求
1.菊科植物揮發(fā)油作為殺蚊蟲劑的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所說的菊科植物包括萬壽菊、細桿沙蒿或細葉亞菊。
3.根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于，菊科植物揮發(fā)油是將菊科植物通過水蒸汽蒸餾法制得揮發(fā)油。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所說的蚊蟲為致倦庫蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)、斯氏按蚊(Anopheles stephensi)、中華按蚊(Anopheles sinensis)或雷氏按蚊(Anopheles lesteri)。
全文摘要
本發(fā)明涉及菊科植物揮發(fā)油的用途，公開了一種菊科植物揮發(fā)油作為殺蚊蟲劑的應(yīng)用。試驗結(jié)果表明，所說的植物揮發(fā)油具有十分優(yōu)良的毒殺蚊蟲的效果，可以用作毒殺蚊蟲劑。本發(fā)明開拓了菊科揮發(fā)油的新用途，發(fā)掘了其一個新的應(yīng)用領(lǐng)域，預(yù)示著很好的應(yīng)用前景，對菊科揮發(fā)油的毒性較小，對人體無害，原材料來源方便，制備容易，便于推廣使用。
文檔編號A01P7/04GK101049110SQ200610025440
公開日2007年10月10日 申請日期2006年4月4日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月4日
發(fā)明者鄭澤坤 申請人:鄭澤坤