專利名稱：外科手術(shù)隔離器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及外科手術(shù)隔離器與托架，適用于有關(guān)從家禽摘除早熟 的蛋的外科手術(shù)方法，以便生產(chǎn)無菌的蛋和家禽。
背景技術(shù)：
開發(fā)的第一個(gè)外科手隔離器用于無菌動(dòng)物的研究中，其中通過由 剖腹產(chǎn)部門從其雙親生產(chǎn)這類動(dòng)物直接進(jìn)入無菌環(huán)境獲得無菌實(shí)驗(yàn)室 動(dòng)物。
歐洲專利申請(qǐng)No. 016501109涉及特定的無污染狀態(tài)伺養(yǎng)家禽的方 法。此申請(qǐng)的方法包括收容一只家禽作為母禽，在將蛋送到母禽的泄 殖腔之前從母禽以外科手術(shù)摘除其殼中的蛋，孵化蛋并孵出雛禽以生 產(chǎn)產(chǎn)蛋家禽。該申請(qǐng)還涉及特定無污染狀態(tài)禽的蛋的生產(chǎn)。
本發(fā)明關(guān)注用于無菌過程以獲得特定無菌狀態(tài)的蛋和禽的外科手 術(shù)隔離器和托架。
在此說明書中，非常廣泛地使用術(shù)語"無污染/無菌并涉及許多能 由禽類特別是家禽，如雞和火雞，可能攜帶的病源菌和傳染病，如雞 和火雞的這些家禽廣泛用于生產(chǎn)商用產(chǎn)蛋的禽群并生產(chǎn)人們消費(fèi)的蛋 和肉。此外，這類蛋和禽在廣泛范圍的生物制品的生產(chǎn)中使用，包括 疫苗、抗體、單克隆抗體、纖維細(xì)胞和蛋白，在人和動(dòng)物的治療和預(yù) 防二者中使用。它們還廣泛地應(yīng)用于診斷試驗(yàn)和轉(zhuǎn)基因蛋和禽的生產(chǎn)。 這些用途的許多要求從它們生產(chǎn)的蛋和/或禽無全部的或特定的污染諸 如傳染病，包括各種寄生菌類、細(xì)菌、真菌原生質(zhì)、病毒、逆病毒、 朊病毒、DNA和RNA片段。有時(shí)，這些病毒可以是小病毒，包括picoma 和細(xì)小病毒。經(jīng)常污染蛋的某些細(xì)菌包括梭狀芽胞桿菌和腸桿菌。有 許多應(yīng)該控制的非病菌的有機(jī)物。類似地，許多包括寄生菌、需氧的 和厭氧的細(xì)菌、共生物和與腸相關(guān)的物質(zhì)的微有機(jī)物是不希望的。類 似地，真菌原生質(zhì)和包括逆病毒、朊病毒、真菌、酵母菌和霉菌的病 毒也是不希望的。
因此，術(shù)語"特定的無污染"或"無菌狀態(tài)，，可以包括這些的某一些或全部同時(shí)比僅無特定的細(xì)菌更廣泛。例如，傳統(tǒng)的特定無菌
(SPF)不是特定的無某些病毒以及實(shí)際上可能被細(xì)菌污染。因此，對(duì) 某些應(yīng)用，這些是足夠的。對(duì)于要處理的蛋和禽的使用將確定該蛋或 禽必須免于的污染。傳統(tǒng)的無菌和某些SPF蛋是通過用化學(xué)制品處理 新鮮的自然產(chǎn)下的蛋而得到，包括消毒劑和抗體，同時(shí)放置在隔離架 中。從選擇的貯存母禽得到這種自然產(chǎn)下的蛋。盡管在SPF蛋的生產(chǎn) 中這些方法比較成功，但在無污染蛋的生產(chǎn)中它們還有不真正是成功 的。但是，化學(xué)制品還不能消除，例如，在剛產(chǎn)下之后消毒之前進(jìn)入 蛋殼的小孔的細(xì)菌。蛋的污染，不論是SPF無菌、或只帶已知細(xì)菌的， 導(dǎo)致與規(guī)范一致性的損失，同時(shí)，在許多例子中，喪失商業(yè)價(jià)值和實(shí) 用性。
本發(fā)明的說明
根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供一種家禽的無菌外科手術(shù)隔離器和 托架，該隔離器和托架提供在其中進(jìn)行外科手術(shù)的無污染環(huán)境，它包 括
隔離器，由具有至少二個(gè)戴手套的口的壁、提供操作表面的堅(jiān)固 的底板以及在堅(jiān)固的隔禽器底板內(nèi)的外科手術(shù)口構(gòu)成；
在進(jìn)行無菌手術(shù)過程中接納和放置家禽的托架，具有打開的和關(guān) 閉的位置；
其中托架能夠相對(duì)于隔離器的操作表面穩(wěn)定定位家禽的操作表 面，這樣家禽的操作表面可以通過外科手術(shù)口進(jìn)行操作；以及
其中在關(guān)閉位置的托架提供要保持的在托架上的家禽與手術(shù)口之 間的完全和穩(wěn)定的氣體密封。
根據(jù)本發(fā)明的第二方面，提供使用根據(jù)前述權(quán)利要求任意一款的 外科手術(shù)隔離器和托架的方法，其中
使用無菌透明粘結(jié)薄膜的第一層密封外科手術(shù)口； 清潔并無菌化該家禽的操作表面同時(shí)家禽放在打開位置的托架
上；
在家禽的無菌表面上放置透明的粘結(jié)薄膜的狹窄帶子； 在粘結(jié)薄膜的狹窄帶子上的頂面上放置無菌透明粘結(jié)薄膜的第二 層；和
5移動(dòng)托架進(jìn)入關(guān)閉位置以確保家禽，操作表面優(yōu)選腹部相對(duì)于外
科手術(shù)隔離器的操作表面的穩(wěn)定定位；
其中該第一粘結(jié)層與第二粘結(jié)層接觸同時(shí)在家禽和外科手術(shù)隔離 器之間產(chǎn)生完全的氣體密封。
本發(fā)明的詳述
概括地說，本發(fā)明提供外科手術(shù)隔離器和托架以及使用它們的裝 置，以提供在其中可以進(jìn)行外科手術(shù)過程的無污染環(huán)境。該外科手術(shù) 過程包括外科摘除來自家禽的在其殼中的早熟蛋。
在家禽內(nèi)泄殖腔是主要污染區(qū)域。該泄殖腔是聯(lián)結(jié)家禽的消化與 繁殖系統(tǒng)二者的腔，因此，蛋和排泄物可以同時(shí)出現(xiàn)在泄殖腔中。在 進(jìn)入泄殖腔之前蛋是無污染的。但是，由于蛋殼是多孔的所以當(dāng)?shù)皬?繁殖系統(tǒng)穿過泄殖腔時(shí)外部污染是一個(gè)主要問題。需要特定的方法以 從母禽摘除它同時(shí)保持無菌，同時(shí)由于其早熟，于是需要附加的特定 方法以便成功地和持久地孵化和孵小雞。
特定地，本發(fā)明指向用于外科手術(shù)過程中的手術(shù)隔離器和托架， 其中在蛋輸送到泄殖腔之前摘除母禽的在其殼中的早熟蛋。由于本發(fā) 明目的在于獲得無菌蛋，不可避免的是外科手術(shù)隔離器和托架要提供 在其中進(jìn)行手術(shù)過程的無菌環(huán)境。
優(yōu)選地，該外科手術(shù)隔離應(yīng)包括無菌的氣體氛圍。
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，適用于外科手術(shù)操作的隔離器由可能 是柔性的壁制成，它具有至少二個(gè)用于手術(shù)操作的戴手套口， 一個(gè)獨(dú) 立的進(jìn)入口和堅(jiān)固的在地面升起的隔離器底板。在隔離器底板中在戴 手套口的前面，有一個(gè)特殊的手術(shù)口。優(yōu)選地，該手術(shù)口可以是大約 200毫米x300毫米。
使用可調(diào)節(jié)的不銹鋼托架呈現(xiàn)并保持家禽以便手術(shù)，該托架樞轉(zhuǎn) 地連接或鉸接到手術(shù)口下面的隔離器底板的下邊。
使用包括加熱、濕潤(rùn)(蒸汽)、輻射和化學(xué)物品的方法的組合可 以無菌化外科手術(shù)隔離器和相關(guān)設(shè)備。諸如過氧化物和/或加酒精的有 機(jī)碘。應(yīng)該僅使用不損壞胚胎活力的無菌化方法。此外，為了最大化 抗菌和芽孢，應(yīng)該用伽瑪線照射全部外科手術(shù)設(shè)備。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，外科手術(shù)隔離器應(yīng)該徹底地清潔、干燥、噴酒精(暴露至少IO分鐘)以2.5% V/V過氧乙酸熏蒸(暴露至 少20分鐘)。
可以用無菌的、過濾的空氣凈化手術(shù)隔離器的環(huán)境以避免胚胎毒 性。電氣和其它不適用于蒸汽、照射或過氧乙酸無菌化的設(shè)備可以使 用商用乙烯氧化物無菌化系統(tǒng)無菌化，每24小時(shí)一次或優(yōu)選二次。
根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施例，可以使用粘結(jié)的、透明的、無菌的外 科手術(shù)塑料或粘結(jié)的薄膜以實(shí)現(xiàn)家禽的無菌化表面與隔離器之間的穩(wěn) 定氣體密封。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，優(yōu)選透明塑料或粘結(jié)薄膜密封手術(shù)口 以便能夠在家禽的無菌化表面與外科手術(shù)隔離器的開口之間形成完全 與穩(wěn)定的氣體密封。
根據(jù)最優(yōu)選的實(shí)施例，用無菌透明粘結(jié)薄膜的第一層密封手術(shù)口， 家禽放置在托架上并無菌化家禽的表面，在家禽的無菌表面上放置透 明粘結(jié)薄膜的狹窄帶，通常較大的無菌粘結(jié)薄膜的第二層放置在粘結(jié) 薄膜的狹窄帶的頂面上，同時(shí)樞轉(zhuǎn)托架進(jìn)入關(guān)閉位置以確保家禽的腹 部相對(duì)于外科手術(shù)隔離器的操作表面的穩(wěn)定的定位；其中第一粘結(jié)層 與第二粘結(jié)層接觸并在家禽與外科手術(shù)隔離器之間產(chǎn)生完全的氣體密 封。
在完全摘除羽毛之后應(yīng)將粘結(jié)薄膜施加到家禽的皮膚上，皮膚的 徹底準(zhǔn)備和無菌化并去除表面的角膜細(xì)胞和脂肪(使用去污劑、酒精 和有機(jī)喊)。
通過使用托架提高薄膜整體性的保持和外科手術(shù)方法的便利，該 托架能使家禽的腹部相對(duì)于外科手術(shù)隔離器的操作表面的穩(wěn)定定位。
還是根據(jù)本發(fā)明的另 一 實(shí)施例密封整體性的確認(rèn)可以使用流體試 驗(yàn)材料，諸如無菌地釋放無菌氦氣到外科手術(shù)隔離器中通過使用氦氣 監(jiān)測(cè)器從外面監(jiān)測(cè)泄漏。此外，可以使用無菌指示器液體(諸如捵溶 液)并通過目測(cè)檢查來監(jiān)測(cè)。
優(yōu)選地，蛋的外科手術(shù)摘除最好快速完成，從安樂死時(shí)大約少于 30分鐘，以避免胚胎活力的損壞。母禽安樂死與蛋的摘除之間麻醉的 過長(zhǎng)使用或過份的延遲將負(fù)面影響胚胎活力。
還是根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施例，從家禽的子宮摘除早熟的蛋的外 科手術(shù)程序包括經(jīng)過粘結(jié)薄膜的切口、家禽皮膚的切口、經(jīng)家禽皮下、肌肉和腹膜層的處理。可以從家禽完整密封的(例如夾住的)子宮中 或者直接地通過子宮切口摘除蛋。應(yīng)避免無菌溶液的流體形式之間的 所有直接的接觸，以便減少胚胎活力損害的任何風(fēng)險(xiǎn)。
另一方面，外科手術(shù)摘除包括
實(shí)施剖腹切口并在縫合的二端避免家禽的輸卵管；
;f黃切輸卯管遠(yuǎn)端到每個(gè)接縫；
摘除包在輸管中的蛋；
無菌化輸卵管；
摘除蛋；以及
無菌化該蛋。
使用的外科手術(shù)程序確保家禽的腸不被廢棄材料污染同時(shí)蛋不被 損害。必須徹底使用無菌技術(shù)。
優(yōu)選地，在摘除其殼中的蛋之前用安樂死或宰殺犧牲家禽。另一 方面，家禽可以安樂死。母家禽既可以是活的也可以是新近宰殺的。 為了符合倫理、法律和動(dòng)物福利的考慮，活的家禽可以是完全有意識(shí) 的、鎮(zhèn)靜的或麻醉的。蛋和卵可以是受精或非受精有意識(shí)的、鎮(zhèn)靜的 或麻醉的。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，托架包括二根基本上平行的桿限定一 空間以容納家禽。在使用中，該托架是打開的并將家禽放在托架中。 優(yōu)選地，該二桿基本上是相同的并在隔離器底板下面形成弧形角。首 先將家離放在托架的頭部，這樣家禽的操作表面(子宮和腹部)平行 于隔離器的底板。家禽的尾端落在托架桿上，這樣正確地定位子宮和 腹部。然后關(guān)閉托架上的釋放機(jī)構(gòu)于是家禽的下邊平行于隔離器的底 板和手術(shù)口。然后進(jìn)行摘除早熟蛋的手術(shù)程序。隔離器壁上的戴手套 的允許進(jìn)入的家禽的下邊和操作表面。
外科手術(shù)隔離器通常包括包圍具有戴手套的口的工作區(qū)域表面、 觀察區(qū)域和手術(shù)口形式的進(jìn)入操作盤。還有另一個(gè)進(jìn)入操作盤，該操 作盤能使手術(shù)得到的蛋從手術(shù)隔離器無菌傳送到傳送單元以便后繼的 傳送到孵化隔離器。
優(yōu)選地，蛋的摘除要先于并盡可能接近傳送時(shí)間的時(shí)間，當(dāng)?shù)皩?自然地傳送到母禽的泄殖腔的時(shí)間。
然后手術(shù)摘除的蛋可以放入無菌容器中并密封。該容器應(yīng)允許蛋冷卻并且是適當(dāng)?shù)脑O(shè)計(jì)和定尺寸以便蛋的貯存。 一個(gè)無菌容器是蛋的
容積的大約10倍的容器，并由塑料框架支撐并保護(hù)該蛋。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例，可以確認(rèn)整個(gè)手術(shù)程序的無菌性。 這包括諸如顯微生物拭子(取濕拭子并立即放在輸送介質(zhì)中)的樣品 的收集與評(píng)估，這些樣品從蛋和為顯微生物體的隔離的繁殖系統(tǒng)取的， 使用對(duì)細(xì)菌、真菌原生質(zhì)、病毒和真菌合適的細(xì)菌培養(yǎng)基，包括液體 培養(yǎng)基濃縮培養(yǎng)基，在需氧的、厭氧的和微嗜氣的環(huán)境中。
一旦獲得無菌地用手術(shù)取得的早熟蛋，然后可以將該蛋在無菌環(huán) 境中孵化并孵出和飼養(yǎng)出雛禽以生產(chǎn)產(chǎn)蛋家禽。
根據(jù)本發(fā)明，為了來自顯微生物體的最大可能性，最好在蛋進(jìn)入 泄殖腔之前(除非它們也無菌或是無菌動(dòng)物)從母禽無菌地得到蛋同
時(shí)生命周期應(yīng)該完全在無菌隔離器中。當(dāng)生產(chǎn)SPF蛋和家禽時(shí)生命周 期可在隔離器外面完成。
可能由本發(fā)明控制的感染生物體包括可能是有關(guān)種類的病菌或非 病菌的。這些包括禽的種類(典型的雞、鳥、火雞)、人類和其它哺 乳動(dòng)物(典型的狗、貓、馬、牛、豬、綿羊、山羊、老鼠和田鼠)。 為了本發(fā)明的目的，顯微生物體包括寄生菌、細(xì)菌(包括厭氧的和需 氧的類、共生類和與腸相關(guān)的類)、真菌原生質(zhì)、病毒(包括逆病毒)、 朊病毒、真菌、酵母菌、霉菌和DNA&RNA片段。
母禽就是從它獲得用手術(shù)取得蛋的家禽。然后孵化該用手術(shù)取得 的蛋并孵出雛禽以形成產(chǎn)蛋的家禽。該用手術(shù)取得的蛋以及后續(xù)的產(chǎn) 蛋的家禽是無菌的。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中從全都在相同條件下飼養(yǎng)的類似家禽群 中選擇母禽。
在本發(fā)明的另一實(shí)施例中，母禽是在無菌環(huán)境中從相同無污染狀 態(tài)的家禽群自然孵化的。
在本發(fā)明的另一實(shí)施例中母禽是家禽群中的一個(gè)，該家禽群是另 一種無污染狀態(tài)的，由適當(dāng)選擇和在可控制條件下天然飼養(yǎng)方法生產(chǎn) 的，同時(shí)使用該方法以提拱不同的無污染狀態(tài)的家禽。
優(yōu)選地，產(chǎn)蛋的禽構(gòu)成禽群的一部分同時(shí)在孵出產(chǎn)蛋的家禽之后， 提取產(chǎn)蛋禽的樣品并對(duì)特定的污染做試驗(yàn)以提供家禽群無污染狀態(tài)的
手段。理想地當(dāng)在產(chǎn)蛋雞中得不到特定的無污染狀態(tài)時(shí)，在該方法中使用產(chǎn)蛋雞作為母禽。
優(yōu)選地選擇母禽作為初生的家禽。
在一個(gè)實(shí)施例中從無菌環(huán)境提出產(chǎn)蛋家禽以便產(chǎn)蛋，轉(zhuǎn)而，孵化 該蛋以產(chǎn)生另外的產(chǎn)蛋家禽。
在另一實(shí)施例中從無菌環(huán)境提取產(chǎn)蛋家禽并喂以包含正常腸內(nèi)菌 叢的食物。用此方法生產(chǎn)的家禽，(具有正常的腸內(nèi)菌叢，最好沒有 禽的和動(dòng)物傳染病病菌)，適于在食品工業(yè)中消費(fèi)或使用。
典型的家禽是雞。
當(dāng)從具有特定無污染狀態(tài)的產(chǎn)蛋家禽孵化雛禽且不是產(chǎn)蛋禽時(shí)， 這樣孵化的家禽在無菌環(huán)境中伺養(yǎng)以便相同或較低無污染狀態(tài)的產(chǎn)蛋 家禽的后續(xù)無菌化。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明還提供一種方法，該方法提供包
括在無菌環(huán)境中的特定無污染狀態(tài)的蛋
蛋家禽；
使用產(chǎn)蛋家禽以產(chǎn)蛋； 取出蛋到另一無菌環(huán)境中。
然后可使用該產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋，該蛋可能是自身的最終產(chǎn)物或者該蛋 可孵化為雛禽，該雛禽可以形成無菌狀態(tài)的家禽群或者如果它不是產(chǎn) 蛋家禽，可以用于無菌化產(chǎn)蛋家禽以達(dá)到較低的污染狀態(tài)。
如果使用無菌蛋以生產(chǎn)后代或衍生的家禽，于是可孵化、飼養(yǎng)、 保存該蛋并在傳統(tǒng)的飼養(yǎng)系統(tǒng)、SPF系統(tǒng)或在隔離器中繁殖以控制微 生物體的進(jìn)入。
應(yīng)該理解，在某些環(huán)境中，當(dāng)取選擇的家禽作為母禽時(shí)，生產(chǎn)的 產(chǎn)蛋禽實(shí)際上不是足夠的無污染以生產(chǎn)合適質(zhì)量的產(chǎn)蛋家禽。然后可 能必需使用從這種產(chǎn)蛋家禽生產(chǎn)的蛋再執(zhí)行相同的步驟并且人工地從 這些產(chǎn)蛋家禽摘除蛋以提供另外的希望是無污染的下蛋家禽。
事實(shí)上，通過在無菌環(huán)境中，以包括正常腸內(nèi)菌叢的食物或無菌 食物喂養(yǎng)下蛋家禽能進(jìn)一步改進(jìn)無菌性。優(yōu)選地，在無菌環(huán)境中給家 禽以無菌食物和水。此外，可以對(duì)預(yù)孵化雛禽控制正常的腸內(nèi)菌叢或 者在孵化之后在任何價(jià)段經(jīng)口給家禽。正常的腸內(nèi)菌從可以是一種無 病菌的。應(yīng)該理解，當(dāng)孵化不是產(chǎn)蛋禽的家禽時(shí)，于是將保留它們以便產(chǎn)蛋家禽的后續(xù)無菌化。這樣，整個(gè)群可能是無菌的。
有可能在本發(fā)明中，簡(jiǎn)單地生產(chǎn)后續(xù)使用的蛋。當(dāng)要求蛋為無菌 狀態(tài)時(shí)，要做的第一件事就是通過使用要求的母禽孵化該蛋。然后， 當(dāng)母禽已經(jīng)經(jīng)受特定的污染試驗(yàn)以提供無菌狀態(tài)的方法時(shí)，收容該產(chǎn) 蛋禽在另一無菌狀態(tài)中并使用產(chǎn)下蛋禽以產(chǎn)下具有無菌狀態(tài)的蛋。
還是本發(fā)明的另一實(shí)施例提供孵化和孵出經(jīng)手術(shù)得到的蛋的方 法，然后飼養(yǎng)并從后續(xù)家禽繁殖。
經(jīng)手術(shù)得到的蛋是早熟的同時(shí)它們的發(fā)育，例如原腸胚形成，可 能延遲。還有，該蛋可能缺少全程自然產(chǎn)的蛋的某些特征，例如可能 減少殼上的曱上皮同時(shí)可能損壞殼中的微孔形態(tài)。該殼，其微孔和甲 上皮調(diào)節(jié)呼吸氣體交換和發(fā)育胚胎的水合作用。對(duì)于正常產(chǎn)的蛋的標(biāo) 準(zhǔn)孵化處的實(shí)踐對(duì)優(yōu)化生存性可能不適合并可能需要修改以達(dá)到從經(jīng) 手術(shù)得到的蛋持久高地孵化健康的家禽。當(dāng)從母禽摘除時(shí)要求的特定 條件，例如，隨禽種和發(fā)育階段變化。在健康和多產(chǎn)的狀態(tài)中同時(shí)保 持在特定的無污染或無菌環(huán)境中祠養(yǎng)和繁殖衍生的家禽需要對(duì)食物的 營(yíng)養(yǎng)素調(diào)節(jié)，特別是有機(jī)的微營(yíng)養(yǎng)素如維生素，以對(duì)出現(xiàn)在食物無菌 化過程中的損失和從共生的微生物供給的缺失加以補(bǔ)償。
優(yōu)選地，蛋在從母禽摘除這后應(yīng)該允許冷卻。然后貯存它們，在
雞的情況，至少24小時(shí)且不超過72小時(shí)不發(fā)送。貯存條件可以具有 HEPA過濾的空氣，同時(shí)對(duì)于雞蛋溫度在15和23t:之間、50-75%的相 對(duì)濕度以及無振動(dòng)或突然的顫動(dòng)。
根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施例，對(duì)于第一個(gè)24小時(shí)可以使用蛋種的標(biāo) 準(zhǔn)孵化條件。此后，應(yīng)該仔細(xì)監(jiān)測(cè)每個(gè)蛋的重量損失、孵化溫度、相 對(duì)濕度，以及是否適當(dāng)?shù)暮粑鼩怏w交換特別是二氧化碳和氧在空氣中 的濃度。根據(jù)本發(fā)明可以調(diào)節(jié)孵化和孵出的條件。理想地，對(duì)于55克 的經(jīng)手術(shù)得到的早熟蛋希望大約0.4克/日的目標(biāo)重量損失。優(yōu)選的是 大約37.2匸的孵化溫度，在孵化初始的0天直到18天，然后要求大約 36.5。C的溫度直到孵出，相對(duì)濕度初始可以設(shè)定在大約40°/。，但是當(dāng) 相對(duì)濕度應(yīng)該增加到大約65%時(shí)應(yīng)該才艮據(jù)每日的才艮據(jù)排風(fēng)率和蛋的重 量損失調(diào)節(jié)直到18天。
對(duì)于孵出的家禽、飼養(yǎng)家禽、產(chǎn)蛋和多產(chǎn)地活化的家禽適當(dāng)?shù)沫h(huán) 境是剛性的飄浮隔離器，具有HEPA過濾的空氣。該空氣保持在正壓力并在一定頻率間隔交換(例如，對(duì)成年家禽10次/小時(shí)，考慮隔離 器的立方容量和貯存密度)，0.2-0.4米2/家禽的底板面積，保護(hù)被家 禽損壞的進(jìn)口上的手套，以及空氣的溫度和控制的光亮以提供類似于 同類傳統(tǒng)家禽的那些條件和生命周期的階段。
在健康的和多產(chǎn)的狀態(tài)中祠養(yǎng)和繁殖家禽同時(shí)保持在特定的無污 染或無菌環(huán)境需要特殊食物以補(bǔ)償某種營(yíng)養(yǎng)素的缺少，該營(yíng)養(yǎng)素通常， 例如，由在腸道中或在傳統(tǒng)環(huán)境中在家禽的皮膚上發(fā)現(xiàn)的污染物產(chǎn)生 的。
應(yīng)該理解本發(fā)明應(yīng)用到所有的禽和爬行動(dòng)物類，包括，但不局限 于，雞、火雞、鵪鵓、鴨、鵝、珍珠雞、雉雞、山鵓、鷚鵪和爭(zhēng)>雞。 從以下附圖和實(shí)例的描述將更清楚理解本發(fā)明。 圖l表示根據(jù)本發(fā)明的外科手術(shù)隔離和托架。 圖2是使用


圖1的外科手術(shù)隔離器和托架的本發(fā)明方法的示意表示。
圖1表示根據(jù)本發(fā)明的家禽的無菌外科手術(shù)隔離和托架。此隔離 器提供在其中進(jìn)行外科手術(shù)的無污染環(huán)境。該隔離器(1)包括由具有 至少二個(gè)戴手套口(未表示)的柔性壁制成的隔離器，堅(jiān)固的隔離器 底板(2)，該底板提供一個(gè)操作表面和在堅(jiān)固隔離器底板內(nèi)的外科手 術(shù)口 (3)。該外科手術(shù)口提供一個(gè)孔，進(jìn)行手術(shù)的人通過該孔可以接 近家禽的操作表面。連接到隔離器底板的是托架(4)用以在無菌手術(shù) 的過程中接納并定位家禽。該托架樞轉(zhuǎn)地連接或鉸接到手術(shù)口下面的 隔離器底板的下邊，如由鉸鏈(5)所示的。該手術(shù)口適用于在托架中 接納家禽并在托架上的家禽與手術(shù)口之間在手術(shù)過程中提供要保持的 完全的和穩(wěn)定的氣密封。優(yōu)選以無菌粘結(jié)薄膜(陰影線表示的)覆蓋 手術(shù)口的孔。此無菌粘結(jié)薄膜提供穩(wěn)定的氣密封。該托架也提供便利， 它能使家禽腹部相對(duì)于外科手術(shù)隔離器的操作表面穩(wěn)定定位。
圖2表示使用根據(jù)本發(fā)明的托架的方法的示意表示。
圖2a表示尚未使用并處于關(guān)閉位置的外科手術(shù)隔離器(1)，它 包括隔離器底板(2)、手術(shù)口和粘結(jié)薄膜(3)、托架(4)和鉸鏈(5)。 該托架處于關(guān)閉位置。用無菌透明粘結(jié)薄膜的第一層密封手術(shù)口 (3)。
圖2b表示處在打開位置的外科手術(shù)隔離器，這樣可將雞放在托架 中。首先將雞的頭放入托架中同時(shí)去掉家禽操作表面的羽毛并無菌化。在手術(shù)之前和之后可以使用無菌流體測(cè)試材料測(cè)試家禽隔離器間的氣 體密封，將該測(cè)試材料釋放到外科手術(shù)隔離器中以便能檢測(cè)外部泄漏。
圖2c表示放在雞的無菌下側(cè)上的第二無菌粘結(jié)薄膜。優(yōu)選地，將 透明粘結(jié)薄膜(未表示)的狹窄帶子放在家禽的無菌表面上，將無菌 透明粘結(jié)薄膜的第二層放在粘結(jié)薄膜的狹窄帶子的頂面上。在此階段 將托架樞轉(zhuǎn)到關(guān)閉位置，以確保家禽有腹部相對(duì)于外科手術(shù)隔離器的 操作表面的穩(wěn)定定位。家禽的腹部應(yīng)該平行于外科手術(shù)隔離器的底板， 以方便手術(shù)的操作，腿應(yīng)該保持在完全彎曲且泄殖腔被密封。
圖2d表示托架處于關(guān)閉的位置，這樣手術(shù)口的無菌粘結(jié)薄膜和家 禽上的薄膜進(jìn)入接觸以形成外科手術(shù)隔離器內(nèi)的穩(wěn)定的氣體密封并且 提供要在其上操作的無菌表面。當(dāng)(手術(shù))口上的第一粘結(jié)層與家禽 上的第二粘結(jié)層接觸時(shí)，在家禽與外科手術(shù)隔離器之間產(chǎn)生完全的氣 體密封。
在手術(shù)之前和之后可以使用無菌流體材料檢測(cè)家禽與外科手術(shù)隔 離器之間的氣體密封，該流體材料釋放到外科手術(shù)隔離器中以便能夠 監(jiān)測(cè)泄漏。
例1
方 法
已知SPE狀態(tài)的50只成年母雞和5只成年>^雞以選擇的食物#1維 持并允許自然地繁殖。在兩周的時(shí)間間隔對(duì)每只母雞個(gè)別地記錄下產(chǎn) 蛋的時(shí)間。當(dāng)產(chǎn)一個(gè)蛋時(shí)對(duì)每只母雞計(jì)算天的平均時(shí)間(時(shí)間，L)。 計(jì)算對(duì)于L-3h的天的時(shí)間同時(shí)從L-3到L的間隔被指定為導(dǎo)出的間 隔。此間隔就是在其中進(jìn)行無菌的手術(shù)剖腹產(chǎn)以摘除在每只家禽中的 最發(fā)育的蛋的時(shí)間。
對(duì)于程序，通過頸部的錯(cuò)位和短時(shí)間準(zhǔn)備之后使家禽安樂死。將 家禽浸在消毒劑溶液中5分鐘。從腹的胸廓和腹部去除羽毛并且使用 加熱到370C的50%酒精碘溶液無菌化暴露的皮膚。然后將每只家禽放 置在特殊采用的以5。/o的過氧乙酸溶液無菌化的外科手術(shù)隔離器下面 并包含無菌器械和盛碘酒的500毫升的瓶子。用無菌布覆蓋家禽同時(shí) 隔離器的無菌進(jìn)口然后放在該布上。做一個(gè)剖腹產(chǎn)切口同時(shí)使用縫合 材料避免輸卯管(典型的是子宮)在蛋的兩側(cè)。然后橫切輸卵管的遠(yuǎn) 端到距蛋的每個(gè)接縫同時(shí)從母雞腹部摘除包含蛋的輸卵管。然后將輸卵管包圍的蛋放置在碘/酒精溶液中5分鐘，之后通過進(jìn)口從外科手術(shù) 隔離器輸送輸卵管包圍的蛋到接納隔離器。在接納隔離器中，切開輸 卵管、取出蛋、用消毒溶液擦拭并傳送到用作孵化隔離器的隔離器中。
在孵化的一天以內(nèi)，將活雞從孵化隔離器取出傳送到適合于飼養(yǎng) 小雞群二個(gè)大尺寸的伺養(yǎng)隔離器。用經(jīng)輻射無菌化的商用食物伺養(yǎng)雞。 在雞令的18天時(shí)，從每個(gè)飼養(yǎng)隔離器取出5只雞安樂死并取樣用于需 氧和厭氧的細(xì)菌培養(yǎng)。樣品包括肝、脾、心臟血、陰道/泄殖腔、盲 腸的和小腸的消化物和糞便。
結(jié)果
從人工衍生的蛋成功地孵化出有活力的雞(孵化率>50%，更通 ?！?0%)無厭氧的或需氧的細(xì)菌與^f羊品雞隔離。 結(jié)論
建立了安全和高效的人工生產(chǎn)無菌雞蛋的方法。該蛋是有活力的 并生產(chǎn)有活力的無菌雞，該雞成功地保持在隔離器中。 例2
根據(jù)例1導(dǎo)出一系列的進(jìn)一步研究。在此例中評(píng)價(jià)影響手術(shù)得到 的蛋的無菌性和活性的預(yù)期變化因素。研究中進(jìn)行的評(píng)價(jià)和獲得結(jié)果 在以下提供。
鑒別是關(guān)鍵控制點(diǎn)的變化因素的結(jié)果對(duì)持續(xù)生產(chǎn)高活性的無菌蛋 是需要的。高活性定義成大約> 50%的孵化率和大約> 80%達(dá)到繁殖的 成熟程度。
例2A
對(duì)無菌化設(shè)備的不同技術(shù)影響包括外科手術(shù)隔離器和器械。評(píng)價(jià) 包括類型、數(shù)量和輻射時(shí)間，和對(duì)不同溫度和時(shí)間的處于液體和蒸汽 形式的化學(xué)殺菌劑(過氧化物類、鹵素液體、酒精)，
具有和沒有蛋清洗去垢劑對(duì)胚胎活性及菌性的影響。
結(jié)果
手術(shù)摘除的蛋在20、 32或370C暴露到酒精、酒精與有機(jī)碘，和 過氧乙酸溶液(2-5%V/V)降低孵化率從60-100% (控制)到13-89%。 暴露到過氧乙酸蒸汽中5分鐘降低孵化率0-28%。暴露到碘溶液中降 低孵化率50%。
例2B安樂死與蛋摘除之間的時(shí)間(0-180分鐘)對(duì)活性和手術(shù)操作容易 程度、孵化率和無菌性的影響。 結(jié)果
無菌性100%; 30分鐘之后手術(shù)越發(fā)困難； 60分鐘之后孵化率< 30%。 例2c
應(yīng)用粘結(jié)薄膜(以在母禽外科手術(shù)隔離器之間產(chǎn)生氣體密封)的 不同類型和方法的影響；測(cè)試密封的方法；手術(shù)過程中定位家禽以優(yōu) 化密封形式和手術(shù)操作的裝置。
結(jié)果
對(duì)于獲得薄膜與家禽皮膚之間的持久密封去脂和皮膚的無菌化是 重要的。
需要使用至少二層薄膜， 一層粘結(jié)到家禽，而另一層在外科手術(shù) 隔離器的手術(shù)口中以粘結(jié)層鄰近家禽。
家禽的腹部應(yīng)平行于外科手隔離器的底板以方便手術(shù)操作，腿應(yīng) 保持完全彎曲位置，泄殖腔封閉。
在手術(shù)之前/之后使用氦氣和/或碘指示器溶液測(cè)試密封的整體性， 保持正壓和無菌的氣體。
例3 例3A
期望的蛋位置與從母禽手術(shù)摘除蛋之間的時(shí)間差別對(duì)蛋活性與無 菌性及手術(shù)操作容易程度的影響。 結(jié)果 孵化能力
控制(自然產(chǎn)蛋)85-100%孵化，80-100%無菌； 在麻醉安樂死或的30分鐘以內(nèi)從子宮摘除的蛋，13-40%孵化， 80-100%無菌；
安樂死之后60分鐘從子宮摘除的蛋14%孵化，80-92無菌。 手術(shù)操作容易度
控制不可應(yīng)用；
30分鐘，好，組織容易提起；60分鐘，困難，組織難以提起/較早僵硬mortis。 例3B
定時(shí)的蛋位置對(duì)抖動(dòng)對(duì)這些技術(shù)的組合對(duì)具有完全的殼與軟殼蛋 的比例、生育力(通?；铍u在孵化的時(shí)間)和對(duì)手術(shù)操作的容易度的 影響。
結(jié)果
單獨(dú)定時(shí)、軟殼和沒有合適的摘除蛋，8-71%、活力13-50%、無 菌性75-100%、操作的容易度、變數(shù)；
單獨(dú)抖動(dòng)、軟殼和沒有合適的摘除蛋13-71%、活力13-54%、無 菌性89-100%、手術(shù)操作的容易度，好；
與抖動(dòng)組合的定時(shí)，軟殼和沒有合適的蛋對(duì)摘除的蛋10-23%、活 力14-57%、無菌性92-100%、手術(shù)操作的容易度，好。
例3c
抗體(例如，用口控制的fluroguinolones )對(duì)經(jīng)卵巢的細(xì)菌和真菌 原生質(zhì)感染的影響以及對(duì)活力和胚胎與后繼的雞的無菌性影響。 結(jié)果
沒有抗體，活力22-60%，無菌性66-92%; 有抗體，活力13-57%，無菌性89-100%。 例3d
預(yù)孵化貯存時(shí)間(0到5天)和條件(溫度、濕度、蛋的方位、振 動(dòng)、通風(fēng))，孵化條件(溫度、濕度、通風(fēng)、方法、重量損失)、處 理和孵化條件對(duì)胚胎活力的影響。
結(jié)果
0、 1-3、 4-5天的貯存時(shí)間，孵化率分別為90、 90和60%;對(duì)于 貯存3天的溫度、通風(fēng)/振動(dòng).250C并具有通風(fēng)/振動(dòng)和無振動(dòng)/通風(fēng)，大約 200C;孵化率分別為60%和80%。
蛋方位和重量損失:蛋平放在側(cè)邊上、重量損失7.8%;蛋架一端在 上面，重量損失10.2-13.1%;孵化率分別是30%和80-90%。
結(jié)論
如期望給出的不同研究的寬廣范圍，獲得對(duì)活力和無菌性的許多 結(jié)果。鑒別變數(shù)的結(jié)果是要求的關(guān)鍵控制點(diǎn)以持久地生產(chǎn)高活力的無 菌蛋。高活力定義成大約>50%的孵化率和大約>80%達(dá)到繁殖的成熟度。
權(quán)利要求
1、一種家禽的無菌外科手術(shù)隔離器和托架，提供在其中進(jìn)行手術(shù)程序的無污染環(huán)境，它包括隔離器，由具有至少二個(gè)戴手套口的壁、提供操作表面的堅(jiān)固隔離器底板和在堅(jiān)固隔離器底板內(nèi)的手術(shù)口構(gòu)成；在無菌手術(shù)過程中接納和定位家禽的托架，具有打開和關(guān)閉的位置；其中該托架能夠相對(duì)于隔離器的操作表面穩(wěn)定定位家禽的操作表面，這樣可以通過手術(shù)口操作家禽的操作表面；以及其中在關(guān)閉位置的托架提供要保持的托架上的家禽與手術(shù)口之間的穩(wěn)定的氣體密封。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1的無菌手術(shù)隔離器與托架，其中在使用過程 中用透明薄膜密封手術(shù)口。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的無菌外科手術(shù)隔離器和托架， 適合的外科手術(shù)包括從家禽的子宮摘除早熟蛋。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1-3的任一款的無菌外科手術(shù)隔離器和托架， 其中該托架樞轉(zhuǎn)連接或鉸接到手術(shù)口下面的隔離器底板的下邊。
5、 根據(jù)前述權(quán)利要求任一款的無菌外科手術(shù)隔離器，其中用樞 軸或鉸鏈裝置將托架在一端連接到隔離器底板的一端處。
6、 使用根據(jù)前述權(quán)利要求任一款的外科手術(shù)隔離器和托架的方 法，其中用無菌透明的粘結(jié)薄膜的第一層密封手術(shù)口； 清潔并無菌化家禽的操作表面同時(shí)將家禽放在處于打開位置的托 架上；在家禽的無菌表面上放置透明粘結(jié)薄膜的狹窄帶子； 在該粘結(jié)薄膜的狹窄帶子的頂面上放置無菌透明粘結(jié)薄膜的第二 層；以及移動(dòng)該托架到關(guān)閉位置以確保家離的操作表面的穩(wěn)定定位，優(yōu)選 腹部相對(duì)于外科手術(shù)隔離器的操作表面；其中該第一粘結(jié)層與第二粘結(jié)層接觸并在家禽與外科手術(shù)隔離器 之間產(chǎn)生完全的氣體密封。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中家禽與外科手術(shù)隔離器之間的氣體密封使用無菌的流體測(cè)試材料測(cè)試，該測(cè)試材料釋放到外科手術(shù) 隔離器中以便能監(jiān)測(cè)外部的泄漏。
8、 根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中流體測(cè)試材料是無菌氦氣。
9、 為從家禽摘除在其殼中的早熟蛋的外科手術(shù)方法，包括以下 步驟穿過家禽的皮膚做一切口；將家禽的子宮取到表面；在子宮做一切口并取出蛋和子宮或者夾緊子宮并取出蛋。
10、 根據(jù)權(quán)利要求9的方法還包括修復(fù)子宮。
11、 根據(jù)權(quán)利要求9或IO的方法，其蛋從子宮摘除之后立刻無菌
全文摘要
本發(fā)明涉及外科手術(shù)隔離器與托架，適用于有關(guān)從家禽摘除早熟的蛋的外科手術(shù)方法，以便生產(chǎn)無菌的蛋和家禽。特別是，該手術(shù)隔離器用于特定的無菌狀態(tài)家禽的生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61D3/00GK101420921SQ200680054238
公開日2009年4月29日 申請(qǐng)日期2006年2月23日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月23日
發(fā)明者L·莫蘭 申請(qǐng)人:奧瓦根國(guó)際有限公司