專利名稱：新花型菊花的選育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種選育菊花新花型品種的方法。
背景技術(shù)：
菊花(Zfe/^rs/j"e歷s /7 onYb7i，)屬于菊科菊屬的植物，原產(chǎn)我國，是我國十大傳統(tǒng) 名花和世界四大名花之一，也是集文化意義和經(jīng)濟(jì)價值于一體的名品花卉，并有食用和藥 用價值。菊花在我國具有豐富的品種資源、深厚的文化內(nèi)涵和廣泛的群眾基礎(chǔ)，菊花在我 國的花丼生產(chǎn)中占有非常重要的地位，其產(chǎn)業(yè)效益在我國花丼交易額中占有很大的比例 (李辛雷，陳發(fā)棣.菊花種質(zhì)資源與遺傳改良研究進(jìn)展.植物學(xué)通報，2004， 21 (4): 392-401)。培育新異的花卉品種一直是花卉市場競爭的焦點，而花型是花卉最重要的觀賞性狀， 花型改良是花卉育種的主要目標(biāo)之一。在花型上，人們也不滿足現(xiàn)有的傳統(tǒng)菊花的花型， 希望不斷追求新、奇、異等不同的花型。隨著人們生活水平的提高，花丼市場需求逐漸多 樣化，菊花育種向著更高層次要求的方向發(fā)展，名貴的菊花多以花型奇特、稀少取勝。因 此，創(chuàng)造新異的菊花花型，將有利于花卉經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，并將產(chǎn)生很大的社會和經(jīng)濟(jì)效益， 其市場開發(fā)前景廣闊。在菊花花型和株形的研究方面，雖然有報道從金魚草中克隆了控制花瓣形態(tài)對稱性的 基因CY和DICH (羅達(dá).花發(fā)育的分子遺傳(許智宏，劉春明主編).植物發(fā)育的分子機(jī)理，北 京科學(xué)出版社，1997， 89-106)，但未見其進(jìn)一步應(yīng)用的研究報道。另一方面，植物組 織培養(yǎng)再生的植株中，存在著廣泛的變異即體細(xì)胞無性系變異。植物組織培養(yǎng)無性系變異 應(yīng)用于菊花育種研究，國內(nèi)最早見于裘文達(dá)和李曙軒的研究報道，他們利用菊花花瓣進(jìn)行 組織培養(yǎng)，培育出了3個新的品種(裘文達(dá)，李曙軒.利用菊花花瓣組織培養(yǎng)獲得新類型(初 報).浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1983， 9: 243-246)。柳建軍等、耿立格、司懷軍等、白麗榮和 何聰芬先后報道通過菊花的組織培養(yǎng)獲得了有價值的變異體(柳建軍，于洪欣.菊花外植 體分化誘導(dǎo)及植株再生的初步研究.山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，1994, (5): 37-38。耿立格.切花菊 試管苗形態(tài)變異的研究.北方園藝，1996， (4) :30-31。司懷軍，戴朝曦于品華，王蒂，王 清.菊花幼嫩花瓣愈傷組織的誘導(dǎo)和植株再生.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1998， 33(2): 175-177。白麗榮，何聰芬.菊花變異株染色體數(shù)目變異現(xiàn)象及分析.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報， 2003, 26(4): 62-67)。在國外，Broertjes和Lock對菊花輻射后進(jìn)行組織培養(yǎng)，而后將再 生植株移栽到溫室內(nèi)進(jìn)行低溫處理，獲得了耐低溫的植株(Broertjes C， Lock CAM. Radiation-induced low—temperature tolerant solid mutants of Chrysanthemum morifolium Ram. Euphytica， 1985， 34(1): 97-103)。 Huttema等用X射線照射菊花細(xì)胞， 共得到95株耐低溫的變異株(Huttema JBM, Preil W， Gussenhoven GC, Schneiderr M. Methods for selection of low_te,erature tolerance mutants of Chrysanthemm morifolium Ramat. using irradiated cell suspension cultures. Plant Breeding, 1991， 102: 140-147)。 Mandal等對輻射處理的莖節(jié)進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得了404棵再生植株，產(chǎn)生的 各種變異中，花色變異一般大于花型和花瓣變異(MandalAKA， Chakrabarty D， Datta SK. Application of in vitro techniques in mutation breeding of Chrysanthemum. Plant Cell Tiss Org Cult, 2000, 69: 33-3)。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種新花型菊花的選育方法，采用本發(fā)明方法培育的 菊花為輪傘花序。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種新花型菊花的選育方法，包括以下步驟1) 、從自然生長的小紫菊菊花植株上剪取直徑在0.45 0.55 cm的幼小花蕾作為外植體；2) 、將上述花蕾首先用肥皂水沖洗1 3次，再用濃度為60 80。/。酒精浸泡25 35s; 接著放入濃度為0.5 1.0%的次氯酸鈉溶液內(nèi)滅菌15 25 min，最后用無菌的蒸餾水沖洗 1 3次；3) 、將上述消毒處理后的花蕾吸干水分，在培養(yǎng)瓶內(nèi)進(jìn)行如下誘導(dǎo)分化處理 將花蕾剝除外萼后均勻地切割成4塊接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.5 mg/L，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度為2000 Lux，光照時間為12 h/d， 溫度22土2。C;每30 40 d繼代l次，每次繼代時需要更換新鮮的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，繼代1 2 次即可分化出綠芽；當(dāng)出現(xiàn)的綠芽長1.8 2.2cm時，再放入生根培養(yǎng)基上培育，所述生根 培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.1-0.5 mg/L，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度為2000 Lux，光照時間為12 h/d， 溫度22土2。 C; 4)、待上述分化出的試管苗長至4.5 5.5cm時，打開培養(yǎng)瓶蓋練苗3 5 d，練苗條件 為光照強(qiáng)度為2000 Lux，光照時間為12h/d，溫度22土2。C;練苗后得可以在自然條件下 生長的幼苗；5) 、將上述幼苗移栽到內(nèi)裝培養(yǎng)泥的盆缽中，在所述培養(yǎng)泥由質(zhì)量比為3: 1: l的泥 炭、礱糠灰和珍珠巖組成；移栽開始的7d要求遮光處理、溫度22士2。 C， 7d后幼苗生長 條件為光照強(qiáng)度為2000 Lux，光照時間為12h/d，溫度22土2。 C;6) 、在移栽成活的植株中，選擇長大后葉為卵披針形、莖為四棱形、花序為輪傘花序 的植株，即為變異體04M;7) 、變異體04M通過有性雜交或無性嫁接，即得新花型菊花。作為本發(fā)明的選育方法的改進(jìn)有性雜交為突變體04M作為親本之一，與其他菊花品 種進(jìn)行有性雜交；無性嫁接為突變體04M作為接穗或砧木，與其他菊花品種進(jìn)行嫁接等無 性繁殖。在本發(fā)明的選育方法中，濃度為0.5 1.0%的次氯酸鈉溶液可用稀釋5倍的市售安替福 民(即市售的安替福民加入4倍體積的水稀釋后所得)。在本發(fā)明的選育方法中，本發(fā)明人首先通過植物組織培養(yǎng)的方法獲得了一種菊花突 變體，該突變體及其后代均稱為04M。該突變體04M的葉具有異形葉性，即在苗期時葉具 長柄、葉大、呈卵圓形(如圖2所示)，隨后葉變?yōu)槁雅樞?；莖為四棱形(如圖4所示)； 花序由親本的頭狀花序轉(zhuǎn)變?yōu)檩唫慊ㄐ?，該輪傘花序由幾個至十幾個不等的唇形花組成 (如圖6所示)。變異體04M能正常開花結(jié)實，其形態(tài)特征一直到第4代依然穩(wěn)定不變，并且 能和普通菊花品種進(jìn)行有性雜交結(jié)實。為了獲得上述突變體04M，發(fā)明人在發(fā)明過程中進(jìn)行了如下的對比實驗1、 首先在眾多的菊花品種中確定了以小紫菊菊花作為最佳研究對象。2、 在外植體的選取上，分別選用了0.45 0.55 cm的幼小花蕾、長、寬分別為0.45 0.55cm的葉片、長0.9 1.1 cm的莖作為外植體。3、 在誘導(dǎo)分化處理時，分別選用了以下3種誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1) MS+6-BA3 mg/L+NAA0.1 mg/L， (2)MS+6-BA3mg/L+NAA0.5mg/L， (3)MS+2， 4陽D2mg/L。經(jīng)過了大量交叉對比的實驗，最終獲得了本發(fā)明的選育方法，所得的變異體04M為輪 傘花序，其中輪傘花序由幾個至十幾個不等的唇形花組成。利用該突變體通過有性雜交或 者無性嫁接可以創(chuàng)造新的菊花品種資源，在菊花的育種中具有重要的應(yīng)用價值。
綜上所述，本發(fā)明利用突變體04M花型奇異的特性，通過有性雜交，即突變體04M作 為親本之一 (父本或母本)，與其他菊花品種進(jìn)行有性雜交；或者通過無性嫁接，即突變 體04M作為接穗或砧木，與其他菊花品種進(jìn)行嫁接等無性繁殖；進(jìn)而選育出花型新異的菊 花后代，獲得新的菊花品種，用于菊花的育種生產(chǎn)，具有重要的應(yīng)用價值。


下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的具體實施方式
作進(jìn)一步詳細(xì)說明。
圖l是普通菊花的葉片；圖2是變異體04M的葉片；圖3是普通菊花的莖；圖4是變異體04M的莖；圖5是普通菊花的花序；圖6是變異體04M的花序；圖7是變異體04M和普通菊花的植株對比圖；其中左圖為變異體04M的完整植株，右圖為普通菊花品種的完整植株。
具體實施例方式
實施例l、變異體04M的培育方法，依次進(jìn)行以下步驟1) 、從自然生長的小紫菊菊花植株上剪取直徑在0.45 0.55 cm的幼小花蕾作為外植體；2) 、將上述花蕾首先用肥皂水沖洗2次，再用濃度為70 %酒精浸泡30 s;接著放入濃 度為0.7M的次氯酸鈉溶液內(nèi)滅菌20min，最后用無菌的蒸餾水沖洗2次；3) 、將上述消毒處理后的花蕾吸干水分，在培養(yǎng)瓶內(nèi)進(jìn)行如下誘導(dǎo)分化處理 將花蕾剝除外萼后均勻地切割成4塊接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA3mg/L+NAA0.5mg/L，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度為2000 Lux，光照時間為12h/d， 溫度22土2。C;每30 40 d繼代l次，每次繼代時需要更換新鮮的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，繼代1 2 次即可分化出綠芽；當(dāng)出現(xiàn)的綠芽長1.8 2.2cm時，再放入生根培養(yǎng)基上培育，生根培養(yǎng) 基為1/2MS+NAA0.1-0.5mg/L，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度為2000 Lux，光照時間為12h/d， 溫度22土2。 C;4) 、待上述分化出的試管苗長至4.5 5.5cm時，打開培養(yǎng)瓶蓋練苗3 5 d，練苗條件 為光照強(qiáng)度為2000Lux，光照時間為12h/d，溫度22士2。C;練苗后得可以在自然條件下
生長的幼苗；5) 、將上述幼苗移栽到內(nèi)裝培養(yǎng)泥的盆缽中，在所述培養(yǎng)泥由質(zhì)量比為3: 1: l的泥 炭、礱糠灰和珍珠巖組成；移栽開始的7d要求遮光處理、溫度22士2 ° C; 7d后幼苗的生 長條件為光照強(qiáng)度為2000Lux，光照時間為12h/d，溫度22土2。 C;6) 、在移栽成活的植株中，選擇長大后葉為卵披針形、莖為四棱形、花序為輪傘花序 的植株，即為變異體04M。實施例2、 一種新花型菊花的選育方法以實施例1所得的變異體04M作為父本，以普 通菊花品種杭白菊為母本，人工除去杭白菊的花粉，將突變體04M的花粉授粉到杭白菊的 雌蕊的柱頭，獲得種子，種子播種后生長出植株，獲得花型發(fā)生變異的單株，進(jìn)而獲得新 的菊花育種材料。實施例3、 一種新花型菊花的選育方法利用突變體04M作為母本，以普通菊花品種 杭白菊為父本，人工除去突變體04M的花粉，將杭白菊的花粉授粉到突變體04M的雌蕊 的柱頭，獲得種子，種子播種后生長出植株，獲得花型發(fā)生變異的單株，進(jìn)而獲得新的菊 花育種材料。實施例4、 一種新花型菊花的選育方法利用突變體04M作為砧木，以普通菊花品種 杭白菊為接穗，進(jìn)行嫁接。嫁接可以采用劈接法，即選普通菊花品種杭白菊5-7厘米長的 菊苗頂梢作為接穗，去掉下部較大葉片，頂端留兩三片葉，將接穗削成1.5厘米左右長的 楔形。從嫁接部位剪斷突變體04M作為砧木，用刀從砧木正中劈開，深度比接穗削面稍長 或等長(1.5-2厘米)。將接穗插入劈口，兩者形成層對齊，用塑料條將接口自上而下纏繞 嚴(yán)密，并在砧木橫切面抹泥保濕，最后套上塑料袋，捆好袋口。 一個月左右獲得一個植株 上能同時開出兩種花型的新異育種材料。實施例5、 一種新花型菊花的選育方法利用突變體04M作為接穗，以普通菊花品種 杭白菊為砧木，進(jìn)行嫁接。嫁接可以采用劈接法，即選突變體04M植株5-7厘米長的菊苗 頂梢作為接穗，去掉下部較大葉片，頂端留兩三片葉，將接穗削成1.5厘米左右長的楔形。 從嫁接部位剪斷普通菊花品種杭白菊作為砧木，用刀從砧木正中劈開，深度比接穗削面稍 長或等長(1.5-2厘米)。將接穗插入劈口，兩者形成層要對齊，用塑料條將接口自上而 下纏繞嚴(yán)密，并在砧木橫切面抹泥保濕，最后套上塑料袋，捆好袋口。 一個月左右獲得一 個植株上能同時開出兩種花型的育種材料。最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個具體實施例。顯然，本發(fā)明 不限于以上實施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直 接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1、一種新花型菊花的選育方法，其特征是包括以下步驟1)、從自然生長的小紫菊菊花植株上剪取直徑在0.45～0.55cm的幼小花蕾作為外植體；2)、將上述花蕾首先用肥皂水沖洗1～3次，再用濃度為60～80％酒精浸泡25～35s；接著放入濃度為0.5～1.0％的次氯酸鈉溶液內(nèi)滅菌15～25min，最后用無菌的蒸餾水沖洗1～3次；3)、將上述消毒處理后的花蕾吸干水分，在培養(yǎng)瓶內(nèi)進(jìn)行如下誘導(dǎo)分化處理將花蕾剝除外萼后均勻地切割成4塊接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA3mg/L+NAA0.5mg/L，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度為2000Lux，光照時間為12h/d，溫度22±2℃；每30～40d繼代1次，每次繼代時需要更換新鮮的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，繼代1～2次即可分化出綠芽；當(dāng)出現(xiàn)的綠芽長1.8～2.2cm時，再放入生根培養(yǎng)基上培育，所述生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.1-0.5mg/L，培養(yǎng)條件為光照強(qiáng)度為2000Lux，光照時間為12h/d，溫度22±2℃；4)、待上述分化出的試管苗長至4.5～5.5cm時，打開培養(yǎng)瓶蓋練苗3～5d，練苗條件為光照強(qiáng)度為2000Lux，光照時間為12h/d，溫度22±2℃；練苗后得可以在自然條件下生長的幼苗；5)、將上述幼苗移栽到內(nèi)裝培養(yǎng)泥的盆缽中，在所述培養(yǎng)泥由質(zhì)量比為3∶1∶1的泥炭、礱糠灰和珍珠巖組成；移栽開始的7d要求遮光處理、溫度22±2℃，7d后幼苗的生長條件為光照強(qiáng)度為2000Lux，光照時間為12h/d，溫度22±2℃；6)、在移栽成活的植株中，選擇長大后葉為卵披針形、莖為四棱形、花序為輪傘花序的植株，即為變異體04M；7)、變異體04M通過有性雜交或無性嫁接，即得新花型菊花。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的新花型菊花的選育方法，其特征是所述有性雜交為突變體04M 作為親本之一，與其他菊花品種進(jìn)行有性雜交。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的新花型菊花的選育方法，其特征是所述無性嫁接為突變體04M 作為接穗或砧木，與其他菊花品種進(jìn)行嫁接等無性繁殖。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種新花型菊花的選育方法，包括以下步驟1)從自然生長的小紫菊菊花植株上剪取直徑在0.45～0.55cm的幼小花蕾作為外植體；2)將上述花蕾依次進(jìn)行肥皂水沖洗、酒精浸泡、放入次氯酸鈉溶液內(nèi)滅菌，最后用無菌蒸餾水沖洗；3)將上述消毒處理后的花蕾吸干水分，在培養(yǎng)瓶內(nèi)進(jìn)行誘導(dǎo)分化處理；4)將上述分化出的試管苗培育成幼苗；5)將上述幼苗移栽到內(nèi)裝培養(yǎng)泥的盆缽中培育；6)在移栽成活的植株中，選擇長大后葉為卵披針形、莖為四棱形、花序為輪傘花序的植株，即為變異體04M；7)變異體04M通過有性雜交或無性嫁接，即得新花型菊花。采用本發(fā)明方法培育的菊花為輪傘花序。
文檔編號A01H1/06GK101156550SQ20071015664
公開日2008年4月9日 申請日期2007年11月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月12日
發(fā)明者向太和, 龐基良, 王利琳 申請人:杭州師范大學(xué)