專利名稱：：處理生物膜的方法和組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及處理生物膜的組合物和方法。所述組合物和方法是為了保存植物材料或植物的任何部分；和/或?yàn)榱酥委煛㈩A(yù)防或減少植物材料的微生物污染。所述組合物和方法還適合于治療或預(yù)防與植物材料接觸的任意表面(即，用于生產(chǎn)、操作、運(yùn)輸、儲(chǔ)存、加工或包裝的表面)上的微生物污染。所述組合物和方法包括至少一種高價(jià)銀離子。n.
背景技術(shù)：
：環(huán)境、醫(yī)學(xué)和工業(yè)微生物學(xué)家記載了微生物種群在其自然環(huán)境中通常不生長為孤立的或浮游生物的細(xì)胞，而生長為生物膜；即附著在表面上的復(fù)雜群落(Costerton等，1995;Davey和O'Toole,2003)。這些發(fā)現(xiàn)改變了治療廣泛多樣的微生物疾病和病癥，其包括但不限于植物病理學(xué)(Marques等,2002;Dow等，2002;Ramey等，2004)的概念范圍；廣泛多樣的農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)應(yīng)用；食品工業(yè)，具體地是食品加工表面；由食品傳播的疾病，具體地是沙門氏菌屬；食品污染和/或疾病，包括但不限于葡萄Pierce病、馬鈴薯環(huán)腐(ringrot)和儲(chǔ)存腐爛、褐變根腐、種子感染；乳和乳制品，大批人和動(dòng)物感染；醫(yī)學(xué)移植；和醫(yī)學(xué)裝置。在所有涉及農(nóng)業(yè)植物生產(chǎn)的產(chǎn)業(yè)中，植物疾病導(dǎo)致全世界的經(jīng)濟(jì)損失，所述農(nóng)業(yè)植物生產(chǎn)包括食品商品生產(chǎn)、園藝、花藝、保健食品、草皮、草料、苗圃農(nóng)作物、林產(chǎn)操作纖維作物生產(chǎn)和代用燃料。另外，病原體在收割后的儲(chǔ)存中攻擊植物材料。估計(jì)1988-19卯間全球由于植物疾病的經(jīng)濟(jì)損失是減少潛在產(chǎn)量的10%-15%，從而導(dǎo)致$761億損失(Orke等，1994;Pinstrup-Anderson,2001)。在植物和產(chǎn)品中的這些感染主要是由微生物諸如真菌、細(xì)菌、線蟲、原生生物和病毒引起的。當(dāng)涉及生物膜時(shí)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)去除微生物污染的常規(guī)商業(yè)清洗和消毒方法效果不佳。植物生產(chǎn)中的另一個(gè)主要問題是由土壤和種子傳播的疾病的發(fā)生。例如，細(xì)菌和真菌病原體能夠?qū)Ω鱾€(gè)農(nóng)業(yè)部門引起疾病和損失。真菌病原體諸如腐霉菌屬(尸;^"'Mmspp.)、疫霉菌屬(尸/z;;top/^oraspp.)、立枯絲核菌(i&zoctom'aso/am')、鐮刀菌屬(Fwsan'wnspp.)，能夠在一大批植物中引起立枯病、種子腐爛、秧苗枯萎、根腐。在許多農(nóng)作物包括世界范圍的干豆(菜豆(尸/z必eo/^vM/ga&))生產(chǎn)中，細(xì)菌病原體是主要問題(Hirano和Upper,1983;Singh和Munoz,1999)。如果疾病不得到控制，則病原體，諸如丁香假單胞菌丁香致病變禾中(尸sewfifomo"assjW"g"e/v.S,z'"gae)(褐斑病)，丁香假單胞菌菜豆致病變種(戶^n'"gae戶v.尸/zaeo"co/a)(環(huán)孔枯菱病)，地樓草黃單胞菌菜豆致病變禾中(^cmf/zomo"asaxo"o;oafopv.尸/zweo//)(常見枯萎病)和萎蔫短小桿菌萎蔫致病變種(CWto6ac&n^myZaccwm/ac/era/v.F/accwm/acz'era)(枯萎)導(dǎo)致豆田中的嚴(yán)重?fù)p失。使用合格的無疾病種子是預(yù)防感染防御中的第一關(guān)。一旦引入了疾病，則唯一的控制方法是應(yīng)用注冊的化學(xué)殺蟲劑。葉殺蟲劑能夠減少疾病壓力；然而，對患病田應(yīng)用的化學(xué)處理必須從癥狀開始重復(fù)應(yīng)用直到接近收割。種子病理學(xué)中的復(fù)雜因素是病原體細(xì)菌形成生物膜的能力，所述生物膜通常對去除和消毒具有高度抗性(Costerton等1999;Ceri等2001;Olson等2002)。作為結(jié)果，過去和當(dāng)前實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能巨大地高估了作為抗微生物清潔劑、殺蟲劑或消毒劑使用的化學(xué)制品的功效。證明了鐮刀菌屬和以上列出的4種干豆細(xì)菌病原體能夠并且的確在體外或種子內(nèi)形成生物膜(未發(fā)表)。另外，這些細(xì)菌能夠在種子上形成生物膜，從而導(dǎo)致目前的種子處理無效或效果不佳。仍然存在對具有下列性質(zhì)的有效抗-生物膜試劑的需要便宜(或成本有效的)、廣譜功效、抗-生物膜試劑的持續(xù)釋放、去除或降解生物膜的能力、和低毒性水平。這將通過降低疾病管理成本，提高植物材料質(zhì)量經(jīng)濟(jì)價(jià)值，提高消費(fèi)者滿意度，增強(qiáng)消費(fèi)者信心和促進(jìn)農(nóng)業(yè)領(lǐng)域以及醫(yī)學(xué)和工業(yè)領(lǐng)域中的工業(yè)增長，而非常有益于特別容易腐爛的商品。同樣地，更有效的種子處理能夠在三個(gè)方面幫助生產(chǎn)者l.預(yù)防溫室和田間農(nóng)作物中由種子-傳播的植物疾病，這會(huì)隨后降低產(chǎn)量損失和昂貴葉殺蟲劑的應(yīng)用。2.當(dāng)種子處理提高發(fā)芽和突出速度時(shí)，預(yù)防由土壤-傳播的疾病和霜凍損害(在短季區(qū)域內(nèi))。3.更安全的殺蟲劑將降低對自然和農(nóng)業(yè)環(huán)境的生態(tài)破壞。種子處理還能夠幫助減小由食品-傳播的人感染諸如與苗芽相關(guān)的那些的風(fēng)險(xiǎn)。本領(lǐng)域中己知使用包括銀作為抗微生物試劑的方法和組合物。然而，現(xiàn)有技術(shù)教導(dǎo)了使用銀作為針對孤立的或浮游生物的細(xì)胞的抗微生物試劑，而不是作為針對生長為生物膜的微生物的抗-生物膜試劑。己知用硝酸銀覆蓋生長的植物提供抗微生物作用，其幫助保護(hù)植物免患疾病。然而，傳統(tǒng)的理解是盡管銀處理能夠保護(hù)種子免患疾病，但是所述處理在實(shí)踐中可能無效，因?yàn)樗赡軐ΨN子的發(fā)芽或種子的發(fā)育是有害的，這歸因于對植物激素/發(fā)信號的干擾。而且，現(xiàn)有技術(shù)教導(dǎo)了使用一價(jià)銀作為抗微生物試劑，但是沒有教導(dǎo)使用任何更高價(jià)的銀?，F(xiàn)有技術(shù)中不存在這樣的方法和組合物，其包括使用高價(jià)銀離子作為抗微生物和/或抗-生物膜試劑，從而治療、預(yù)防或減輕種子的微生物污染，所述微生物包括但不限于在種子上作為生物膜生長的微生物，其中所述方法和組合物不抑制種子發(fā)芽。還存在對所述方法和組合物的需要，以幫助提高種子的發(fā)芽率和發(fā)芽速度，并改善避免由土壤-傳播的疾病和霜凍損害。發(fā)明概述存在對這樣的方法和組合物的需要，所述方法和組合物用于保存植物材料和/或治療、預(yù)防或減輕植物材料的微生物污染，包括但不限于保存種子和/或治療、預(yù)防或減輕在植物材料上作為生物膜的微生物。本發(fā)明的組合物和方法包括作為抗-生物膜試劑的高價(jià)銀離子。本發(fā)明的組合物和方法在廣泛多樣的農(nóng)業(yè)、工業(yè)和醫(yī)療環(huán)境中具有實(shí)用性，例如延長或改善植物材料的生命，消毒任何表面，具體地是消毒工作或加工表面(例如，桌子)和種子或植物表面；在抗微生物涂層中；和在治療人、植物、和動(dòng)物疾病和病癥中。發(fā)明詳述本發(fā)明包括利用抗-生物膜試劑處理生物膜的組合物和方法，所述抗-生物膜試劑包括銀離子，優(yōu)選地是高價(jià)銀離子。所述組合物和方法還可以包括一種或多種其它活性試劑。所述組合物和方法是抗微生物的，例如針對生物膜、類似結(jié)構(gòu)，或由細(xì)菌、真菌、病毒、藻類、或寄生蟲、酵母和其他微生物形成的前體。如下文中更加詳細(xì)描述地，當(dāng)可以形成生物膜或類似結(jié)構(gòu)，包括但不僅限于在液體環(huán)境中生長和/或漂浮的微生物時(shí)，可以使用本發(fā)明的方法和組合物。所述方法包括治療、預(yù)防或減輕種子的微生物污染，這是通過使所述種子與包括至少一種形式的高價(jià)銀的抗微生物試劑接觸而實(shí)現(xiàn)的。所述組合物包括至少一種形式的高價(jià)銀。該方法和組合物可以用于處理種子以針對浮游微生物。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述組合物和方法可以用于處理或防止--種或多種生物膜。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述組合物和方法可以用于治療和/或預(yù)防人、動(dòng)物、或植物疾病、病癥、感染、或污染中的一種或多種。典型地，這些疾病和感染，等，是由與生物膜相關(guān)或存在于生物膜中的微生物引起的。本發(fā)明還包括利用至少一種形式的高價(jià)銀，諸如例如但不限于具有Ag(ii)和Ag(m)價(jià)態(tài)的銀離子處理、防止或減少一種或多種在植物材料上生長的生物膜的組合物和方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括通過使植物材料與包括至少一種形式的高價(jià)銀的抗-生物膜試劑接觸，來處理、防止或減少植物材料上的一個(gè)或多個(gè)生物膜。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物可以包括抗-生物膜試劑，所述抗-生物膜試劑包括至少一種形式的高價(jià)銀。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明包括用于保持生物材料的健康、生命、或質(zhì)量的組合物和方法，其包括通過使植物材料與包括一種或多種高價(jià)銀離子的組合物接觸，針對細(xì)菌、真菌、藻類、生物膜、病毒、和寄生蟲進(jìn)行處理?？?生物膜試劑包括一種或多種高價(jià)銀離子。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述組合物和方法可以用于保存和/或消毒植物、植物材料、或其部分，最優(yōu)選地是種子。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述組合物和方法可以用于延長保存期或保存植物材料。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述抗-生物膜試劑減少或消除表面污染。所述組合物和方法還可以包括一種或多種其它活性試劑和/或添加劑。所述組合物和方法可以進(jìn)一步包括使所述種子和一種或多種另外的抗-生物膜試劑、防腐劑和/或另外的抗微生物試劑接觸，其中每種可以包括至少一種形式的高價(jià)銀，或包括-一些其它的活性試劑或組合。本發(fā)明包括任何與抗-生物膜試劑接觸的方法。典型的接觸機(jī)制包括但不限于以液體、粉末或其他遞送形式(例如，注射劑、片劑、清洗真空或口服)涂布、噴射、浸沒、擦拭、和擴(kuò)散。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述組合物和方法可以包括向植物和植物材料的任何部分施用抗-生物膜試劑。此外，可以利用本發(fā)明的抗-生物膜試劑清潔、消毒、浸漬、或涂布任何結(jié)構(gòu)或硬表面(例如，與收割、運(yùn)輸、操作、包裝或加工相關(guān)的工具或機(jī)器表面)。此外，可以用本發(fā)明的抗-生物膜試劑浸漬任何儲(chǔ)存、或溫室設(shè)備或運(yùn)輸容器，以便所述抗-生物膜試劑防止表面污染，并與植物或其部分進(jìn)行接觸。本發(fā)明的組合物可以用于處理植物或其部分，從而消除或減少一種或多種不需要的和/或有害的微生物。本發(fā)明的組合物可以用于防止一種或多種不需要的或有害的微生感染植物或其部分。在本發(fā)明的這些實(shí)施方案中，該防腐組合物和方法可以是抗微生物試劑。本發(fā)明的組合物可以用于處理植物或其部分，從而消除或減少一種或多種不需要的和/或有害的生物膜。本發(fā)明的組合物可以用于防止一種或多種不需要的或有害的生物膜感染植物或其部分。在本發(fā)明的這些實(shí)施方案中，該防腐組合物和方法可以是抗-生物膜試劑。本發(fā)明說明了穩(wěn)定緩慢釋放銀離子化合物能夠用作針對細(xì)菌和真菌病原體的抗生物劑，所述病原體包括在植物表面或更廣義地任何與細(xì)菌和真菌污染相關(guān)的表面，例如木材、混凝土、金屬、橡膠或塑料、牙科植入物、和導(dǎo)管上生長的生物膜。按照本發(fā)明的一些實(shí)施方案，可以使用任何使種子與抗微生物和/或抗-生物膜試劑接觸的方法。接觸種子的典型機(jī)制包括但不限于以液體、凝膠、粉末或其他遞送形式涂布、噴射、浸沒、和擴(kuò)散。本發(fā)明的一些實(shí)施方案包括本發(fā)明的組合物，及其保存并延長植物或植物材料保存期的應(yīng)用。本發(fā)明的組合物包括產(chǎn)生高價(jià)銀種類的任何含銀化合物，典型地，是通過組合銀化合物和Ag氧化物形成的。這些組合物表現(xiàn)出針對多種微生物，包括細(xì)菌和真菌的抗微生物活性和/或抗-生物膜活性，并提供銀離子從銀化合物中的持續(xù)釋放。術(shù)語"氧化銀種類"用于本文時(shí)可以涉及但不限于銀的化合物，其中所述銀處于+1,+11或+111價(jià)態(tài)或其任意組合。這些氧化的銀種類包括，例如氧化銀(I)、氧化銀(n)、氧化銀(III)或其混合物、所有具有高于10-20溶度積的銀鹽(諸如例如Ag2S04、AgCl、Ag2S208、Ag2S03、Ag2S203、Ag3P04，等)、和銀的含氧鹽諸如Ag708X，其中X可以包括但不限于NO3—,CIO4—,S042—,F-等。這些活性銀種類可以包括但不限于氧化銀種類，諸如銀鹽、氧化銀(Ag20),更高價(jià)的氧化銀即Ag(II)和Ag(III)(AgO,Ag203，Ag304等)，具有通式Ag708X的銀的含氧鹽其中X可以包括一種酸性陰離子，諸如硫酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、草酸鹽等。所述組合物還可以包括元素銀，優(yōu)選是少量的，作為生產(chǎn)氧化過程的副產(chǎn)品。本發(fā)明優(yōu)選的組合物包括任何產(chǎn)生高價(jià)的銀種類的銀形式的水性混懸液。這些活性銀種類可以包括至少一種形式的高價(jià)銀，其包括至少一種形式的可溶性銀離子，所述銀離子選自由Ag+、Ag+十和八§+++組成的組。銀離子，如本文所用，指含有銀離子的組合物，所述銀離子具有高于1的價(jià)態(tài)，諸如例如Ag(II)和Ag(ni)價(jià)態(tài)。優(yōu)選的組合物是水性混懸液。本發(fā)明的組合物和方法可以包括具有大于1價(jià)態(tài)的銀離子，因此氧化的銀種類可以包括多價(jià)物質(zhì)。最后，認(rèn)為本發(fā)明的組合物可以包括含銀物質(zhì)或多種含銀物質(zhì)，其隨著時(shí)間起反應(yīng)形成其他的含銀物質(zhì)，所述其它含銀物質(zhì)可以表現(xiàn)出不同的抗微生物性質(zhì)。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，抗微生物性質(zhì)可以通過在物質(zhì)諸如植物材料內(nèi)部或表面處接觸抗微生物活性的銀種類或高價(jià)銀離子獲得。高價(jià)銀離子可以通過生成高價(jià)銀離子的任何方法或反應(yīng)生成。優(yōu)選的方法是產(chǎn)生高價(jià)銀離子水性混懸液的那些。這些工藝是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的。見，例如，J,A.MacMillan,化學(xué)綜述(Chem.Rev.),62,65(1962);禾口S.S.Djokic,電化學(xué)學(xué)會(huì)雜志(J.Electrochemical.Soc.)151,(6)C359(2004)。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，高價(jià)銀離子可以通過首先提供單價(jià)銀鹽或銀絡(luò)合物，諸如硝酸銀、高氯酸銀或二氨基銀絡(luò)合物的水溶液而生成。如果該反應(yīng)是在酸性條件或接近中性條件下(即在pH低于7)進(jìn)行的，則硝酸銀是更優(yōu)選的。如果該反應(yīng)是在堿性條件下(即在pH高于7)進(jìn)行的，則二氨基銀絡(luò)合物，(即，[Ag(NH3)2—]+)是更優(yōu)選的。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述氧化劑是過硫酸鉀(KPS)。當(dāng)所述方法或組合物包括至少一種釋放八§++的銀化合物時(shí)，該化合物可以選自由但不僅限于下列各項(xiàng)組成的組氧化銀(II)(AgO),高價(jià)銀鹽(Ag(Ag304)X其中X=N03,C104,F或HS04,(Ag304)2S04，硫酸銀(II)(AgS04)，二氟銀(AgF》，高碘酸銀(II);有機(jī)絡(luò)合物諸如，但不僅限于，(Agpy4S208,鄰二氮雜菲銀，Agdipy2,Agdipy2(X)2,其中X=N03,C104,Agdipy3,Agdipy3(X)2,其中X=N03,C104，Agdipy2(N03)2.N03.HN03,(AgtripyN03)N03,喹啉酸銀(II),3,4-吡啶二羧酸銀(11),2,5-吡啶二羧酸銀(11)，2,4-吡啶二甲酸銀(n),吡啶二羧酸銀(II),煙酸銀(n)(silver(II)niconate),異煙酸銀(II)(silver(II)isoniconate),吡啶-2，4,6-3羧酸銀(II)(黑色)，吡啶-2，4,6-3羧酸銀(II)(棕色)，吡啶-2,4,5-3羧酸銀(II),雙胍銀(II)，氯化苯甲烴銨銀(n),溴化十六烷基二甲基乙銨銀(n),乙烯雙胍銀(n)。在所述方法或組合物包括至少一種釋放八8+++的銀化合物的情況下,該化合物可以選自但不僅限于下列各項(xiàng)組成的組中銀(III)的氟化物[(BaAgF5，MAgF4(M=K，Rb,Cs，N)],高碘酸銀(III)[Na5H2Ag(m)(I06)2.H20],碲酸銀(III),乙烯二(雙胍)銀(III)[Ag(enbigH)2X，其中X=S04,N03,C104或OH],雙胍銀(III)。在其他實(shí)施方案中，所述方法或組合物可以包括過氧化銀(i,ii，ni)、膠質(zhì)銀、納米結(jié)晶銀或銀沸石。生成高價(jià)銀離子的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的?？梢砸匀魏蜗铝行问绞褂勉y沉積化合物銀沉積涂層、液體、粉末、膠囊、片劑、涂層、和類似的構(gòu)造。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，直接引入活性試劑，或可以通過向植物材料連續(xù)添加活性試劑的組分或前體，并使活性試劑的前體處于涂層中或涂層上，來引入活性試劑。其他形式還包括薄膜、薄片、纖維、噴霧和凝膠。引入到組合物中的防腐劑可以用在多種應(yīng)用中，在這些應(yīng)用中需要存在防腐劑。優(yōu)選的應(yīng)用是在農(nóng)業(yè)部門中處理和保存植物材料，包括但不僅限于食用和纖維農(nóng)作物、農(nóng)產(chǎn)品、裝飾植物、苗圃植物、樹苗、纖維植物、草皮和草料、含油種子、谷物、豆類、蔬菜、藥用植物、保健植物、和溫室農(nóng)作物。所述組合物還可以包括另外的抗微生物試劑，包括但不僅限于抗真菌試劑、抗細(xì)菌試劑、抗病毒試劑和抗寄生蟲試劑、生長因子、血管生成因子、麻醉劑、粘多糖、和金屬、消毒劑、抗生素、清潔劑、和其他化學(xué)品?？梢栽诒景l(fā)明中使用的抗微生物試劑的實(shí)例包括，但不僅限于8-羥基喹啉硫酸鹽、8-羥基喹啉檸檬酸鹽、硫酸鋁、季銨、異煙肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺、鏈霉素、氯法齊明、利福布丁、氟喹諾酮類、氧氟沙星、司帕沙星、利福平、阿奇霉素、克拉霉素、氨苯砜、四環(huán)素、紅霉素、環(huán)丙沙星、多西環(huán)素、氨節(jié)西林、兩性霉素B、酮康唑、氟康唑、乙胺嘧啶、磺胺嘧啶、克林霉素、林可霉素、噴他脒(pentamidine)、阿托夸酮(atovaquone)、巴龍霉素、雙氯腈索利(diclazaril)、阿昔洛韋、三氟尿苷、磷酸膽堿鈣(foscarnet)、青霉素、慶大霉素、更昔洛韋(ganciclovir)、iatroconazole、咪康唑、Zn-吡硫鐵，重金屬包括，但不僅限于，金、鉑、銀、鋅和銅，和它們的組合形式，包括鹽，諸如氯化物、溴化物、碘化物和高碘酸鹽，和具有載體的絡(luò)合物，和其他形式。優(yōu)選的抗微生物試劑是雙胍。所述組合物還可以包括己知的植物或種子處理和真菌產(chǎn)品，諸如Vitaflo280、Apron-MaxxRTA、雙硫胺甲酰(thiram)。所述組合物還可以包括種子涂料、增強(qiáng)劑、乳化劑、增稠劑、溶劑、消泡劑、防腐劑、香料、著色劑、軟化劑、填充劑，等?？梢匀芜x地將多種非活性成分引入到該制劑中。所述成分的實(shí)例是乳化劑、增稠劑、溶劑、消泡劑、防腐劑、香料、著色劑、軟化劑、填充劑，本發(fā)明的組合物和方法可以用于在寬范圍的環(huán)境和場所內(nèi)處理生物膜。處理生物膜，如本文所用，意指在可以存在、預(yù)期存在、或假定存在生物膜時(shí)，使生物膜或類似結(jié)構(gòu)與抗-生物膜試劑接觸。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該容易地理解本發(fā)明可適用的領(lǐng)域和行業(yè)是大量的加工、產(chǎn)品、和場所。引入到本發(fā)明的基質(zhì)和裝置中的防腐劑可以用于多種應(yīng)用，在這些應(yīng)用中存在著對活性試劑的需要。特別優(yōu)選的應(yīng)用是在農(nóng)業(yè)和園藝部門中處理和保存植物材料。例如，本發(fā)明的組合物和方法可以有效地或有益地用于保存和/或消毒植物種子。例舉性種子包括，但不僅限于干豆、豆類作物(例如，豌豆，兵豆、鷹嘴豆、和蠶豆(fababeans))、來自谷類的種子，例如，玉米、小麥和大麥；油類種子作物諸如菜籽油種子；保健食品作物植物種子，諸如人參，和植物諸如馬鈴薯種子。在本發(fā)明的這個(gè)方面中，所述組合物和方法適合于針對一種或多種微生物感染處理，其包括但不僅限于由下列各項(xiàng)引起的疾病或病癥假單胞菌屬(Pseudomonads)、黃單胞菌屬(Xanthomonads)、短小桿菌屬(Curtobacterium)、核盤菌屬(Sclerotinia.)、腐霉菌屬(Pythium)、鐮刀菌屬(Fusarium)灰葡萄孢(Botrytiscinerea)、立枯長蠕孢(Helminthosporiumsolani)鏈霉菌菌株(Streptomycesspp.),疫霉菌屬(Phytophthoraspp.)、立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)、歐文氏菌屬(Erwinia)、和棍狀桿菌屬(Clavibacter)，僅列舉一些。例舉性疾病或病癥包括，但不僅限于細(xì)菌枯萎病、褐斑病、常見枯蔞病、脈管枯萎、白霉菌、根腐、頭枯(headblight)、銀屑(silverscurf)、干枯、常見瘡痂病、環(huán)腐、軟腐、腐敗、種子枯萎病、種子腐爛、和細(xì)菌性潰瘍。本發(fā)明的組合物和方法還有效地或有益地用于凈化、消毒、或保護(hù)廣泛種類的表面。例舉性表面包括，但不僅限于農(nóng)業(yè)表面，例如，溫室、灌溉系統(tǒng)、儲(chǔ)存設(shè)備、和籃和箱；農(nóng)業(yè)工具和設(shè)備，包括收割、播種、修剪、耕作中涉及的生產(chǎn)設(shè)備，和加工/處理設(shè)備諸如傳送帶、采摘器、和切割機(jī)；食品加工廠、中心、或設(shè)備，包括乳制品廠、家禽廠、屠宰場、海產(chǎn)品加工廠，新鮮農(nóng)產(chǎn)品加工中心、和飲料加工中心。本發(fā)明的組合物和方法還有效地或有益地用作保護(hù)涂層和/或用作保護(hù)涂層的成分。例舉性區(qū)域包括但不僅限于建筑、環(huán)境、醫(yī)療、牙醫(yī)、和工業(yè)表面。例舉性表面包括但不僅限于醫(yī)院、溫室、農(nóng)業(yè)儲(chǔ)存設(shè)備、水系統(tǒng)、船(例如，生物腐蝕)、電纜(例如，生物腐蝕)、和管道(例如，生物腐蝕);和涂料自身，例如，油漆、染料、和灰漿；醫(yī)療裝置，例如，導(dǎo)管和透析機(jī)、或其部分；和牙科植入物和涂料。本發(fā)明的組合物和方法還有效地或預(yù)期有效地用作植物基化妝品的防腐劑，所述植物基化妝品包括但不僅限于化妝品的，或引入到化妝品包裝中的成分。定義如本文所用，植物材料意指任何植物或蔬菜,或其部分，包括花、果實(shí)、產(chǎn)物、種子、莖、根、匍匐莖、根莖、葉、導(dǎo)管系統(tǒng)、苗芽、切花，等。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解生物膜可以由單一種類，可以由多-種類、同源的，異源的組成，和/或還可以包括其他與生物膜相關(guān)或受生物膜保護(hù)的生物體。生物膜用于本文時(shí)還意指生物膜發(fā)育或形成的一個(gè)或多個(gè)階段。用于本文時(shí)，抗-生物膜試劑意指任何有效針對生物膜的元素、化學(xué)品、生物化學(xué)品等。典型的抗-生物膜試劑是具有抗微生物、抗-細(xì)菌、抗-真菌或抗-藻類特性的那些。金屬和金屬化合物，優(yōu)選地高價(jià)銀離子，通常顯示出具有抗-細(xì)菌和乙烯抑制特性，并且是按照本發(fā)明的優(yōu)選抗-生物膜試劑。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，抗-生物膜試劑是廣譜試劑，例如，具有針對多于一種微生物物種的效力。用于本文時(shí)，防腐劑或類似的詞包括任何能夠用于保存或延長植物材料諸如切花保存期的元素，化學(xué)品或生物化學(xué)品。防腐劑可以是抗-生物膜試劑,或可以與抗-生物膜試劑組合使用，或可以在抗-生物膜試劑被除去或降解生物膜后使用。"持續(xù)釋放"或"可持續(xù)的基礎(chǔ)"用于定義在以小時(shí)或天測量的時(shí)間過程中持續(xù)的原子、分子、離子或貴金屬簇的釋放，和由此從大量金屬中，和從貴金屬的高度可溶性鹽，諸如硝酸銀中區(qū)分所述金屬的釋放，所述大量金屬以太低以至于無效的速率和濃度釋放所述種類，所述硝酸銀與醇或電解液相接觸時(shí)實(shí)際上立即而非持續(xù)釋放銀離子。浮游生物的作為漂浮的、單細(xì)胞生長的微生物，其為它們生命周期的一部分。持續(xù)釋放在以小時(shí)或天測量的時(shí)間過程中的持續(xù)的原子、分子、離子或抗微生物或貴金屬簇的釋放。表面污染，用于本文時(shí)，意指在表面上生長或被轉(zhuǎn)移到表面的微生物。與表面污染相關(guān)的微生物可以活躍地生長或休眠，但表現(xiàn)能夠再引發(fā)感染、疾病或其它不受歡迎病癥的可生存接種體。農(nóng)業(yè)包括所有與植物和食品生產(chǎn)相關(guān)的部門、商品和表面，所述植物和食品生產(chǎn)包括但不僅限于園藝、田間生產(chǎn)、溫室生產(chǎn)、苗圃作物、草皮和草料、纖維農(nóng)作物、代用燃料、和關(guān)于生產(chǎn)、運(yùn)輸、加工和包裝植物來源商品的所有階段的林業(yè)，所述植物來源商品用于食品、纖維、景觀美化和娛樂。另外，農(nóng)業(yè)包括生產(chǎn)、運(yùn)輸、加工和包裝用作食品或其他的動(dòng)物來源商品的所有方面。該定義包括與生產(chǎn)、運(yùn)輸、處理、加工和包裝植物-和動(dòng)物-來源的商品相關(guān)的任何天然或人造表面。參考下列實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明。注意，然而，本發(fā)明不受這些實(shí)施例的限制。實(shí)施例實(shí)施例l:制備高價(jià)銀離子。利用己知技術(shù)制備高價(jià)銀離子，如下通過硝酸銀(AgN03)和過硫酸鉀(K2S20s)水溶液的反應(yīng)而制備硝酸銀(Ag(Ag204)2N03)，產(chǎn)生純硝酸銀的黑色沉淀(參見以下化學(xué)反應(yīng))。通過過濾回收沉淀，并干燥粉末。7AgN03(水溶液)+K2S208(水溶液)+8H20—Ag(Ag204)2N03(沉淀)+6HN03(水溶液)+6H2S04(水溶液)+K2S04(水溶液)+41€2(氣體)原材料說明硝酸銀(AgN03)工業(yè)級過硫酸鉀(K2S208)工業(yè)級水蒸餾的A.干凈的1000LSS反應(yīng)器系統(tǒng)，裝備了高架攪拌器，用去離子水(750L)填充。B.開始攪動(dòng)和手動(dòng)填充30kg過硫酸鉀(KPS，110M)。C.攪動(dòng)該混合物，直到KPS溶解。D.在干凈的250L桶(塑料或不銹鋼)中制備去離子水(150L)和硝酸銀(17.85kg,105M)的混合物。攪動(dòng)直至溶解。E.在維持周圍溫度和利用計(jì)量泵的條件下，將硝酸銀溶液轉(zhuǎn)移到包含在IOOOL反應(yīng)器中的KPS溶液中。立即開始形成黑色沉淀。F.在加入過程中維持?jǐn)噭?dòng)(大約30-45分鐘)。G.繼續(xù)將反應(yīng)混合物再攪動(dòng)1小時(shí)。停止攪動(dòng)10-20分鐘，并將大部分上清液虹吸至1500L桶中；保留以用于隨后的處理。H.向IOOOL反應(yīng)器的內(nèi)容物中，加入去離子水(300L)。在準(zhǔn)備過濾的同時(shí)攪動(dòng)混合物。I.將氧化硝酸銀水漿轉(zhuǎn)移到適當(dāng)準(zhǔn)備的過濾吸濾器(壓力/攪動(dòng)的或箱)上，并抽干。檢查濾出液的pH。J.用約15-20L水漿洗濾餅，并抽干。如果濾出液仍是酸性的(pfK4)，則重復(fù)。K.將濾餅排出到合適的干燥器(盤式干燥器或攪拌盤式干燥器)中；確定濕料的重量，并在空氣流下干燥12小時(shí)。確定干重，并取樣分析。L.將該干燥的產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到聚乙烯袋中，并保存該產(chǎn)物，避免濕氣和光。實(shí)施例2:與納米晶體(nanocrystalline)銀粉相比，高價(jià)銀針對胡蘿卜軟腐歐文氏菌胡蘿卜軟腐亞禾中(五nw'w'acaratovorasubsp.carotovora(Ecc))，即蔬菜軟腐病原體的抗微生物活性。表1.在24小時(shí)接觸時(shí)間時(shí)，Ecc生物膜對高價(jià)銀和納米晶體粉末Ag30禾PAg100(納米技術(shù)公司(Nanotechnologies,Inc.))的易感性。以loglO表示細(xì)胞計(jì)數(shù)，以百萬分率表示銀化合物的濃度。Ag30Ag100Oxy500ppm0000000000.000.000.00200ppm000000002.110.000.000.70100ppm000000001.950.000.000.6550ppm01.301.601.600.001.001.001.482.000.870.931.530ppm3.853.703.483.783.603.903,603.603.903.743.633.76表2.在24小時(shí)接觸時(shí)間時(shí)，用高價(jià)銀(Oxy1)和納米晶體粉末Ag30和AglOO處理的Ecc生物膜的對數(shù)減少。Ag30AglOOOxy1500ppm3.743.633.76200ppm3.743.633.06100ppm3.743.633.1150ppm2.872.72.23結(jié)論作為針對植物病原體歐文氏菌株的抗微生物劑，高價(jià)銀與納米晶體銀一樣有效。實(shí)施例3:與其他種子處理產(chǎn)物諸如硫酸銅相比，高價(jià)銀針對丁香假單胞菌菜豆致病變禾中HB-9(尸se"(iomowas^n'"gaepv./^oseo/Zco/aHB-9)，艮卩旦類環(huán)孔枯萎病病原體的生物膜和浮游生物的抗微生物活性。表3.丁香假單胞菌菜豆致病變種HB-9的生物膜和浮游生物對高價(jià)銀和基于銅的種子處理產(chǎn)物的易感性。以loglO表示細(xì)胞計(jì)數(shù)，以百萬分率表示銀化合物的濃度?；衔?濃度細(xì)菌/生長細(xì)菌/生物膜生長高價(jià)銀PspHB-9浮游生物PspHB-9生物膜100ppm00500ppm001000ppm00硫酸銅PspHB-9浮游生物PspHB-9生物膜1250ppm2.955.152900ppm004600ppm00H20(0ppm)PspHB-9浮游生物PspHB-9生物膜5.666.055.755.975.756.675.726.23表4.用高價(jià)銀和硫酸銅處理2小時(shí)的丁香假單胞菌菜豆致病變種(PspHB-9)浮游生物和生物膜的log減少?；衔?濃度細(xì)菌/生長細(xì)菌/生物膜生長高價(jià)銀PspHB-9浮游生物PspHB-9生物膜100ppm5.726.23500ppm5.726.231000ppm5.726.23硫酸銅PspHB-9浮游生物PspHB-9生物膜5,000ppm2.771.0811,460ppm5.726.2318,300ppm5.726.23H20(0ppm)PspHB-9浮游生物PspHB-9生物膜5.666.055.755.975.756.675.726.23結(jié)論-高價(jià)銀在最低濃度(是測試的最低銅濃度的50分之一，其確實(shí)導(dǎo)致生物膜的減少)時(shí)導(dǎo)致浮游生物和生物膜100%的根除。-硫酸銅在最低濃度(5000ppm)時(shí)，~48%浮游生物減少，禾B17%生物膜減少。為了有效，需要濃度為11460ppm。-高價(jià)銀比硫酸銅至少>50-114倍更有效于根除浮游生物細(xì)胞和生物膜PspHB-9。實(shí)施例4:評估高價(jià)銀對干豆種子發(fā)芽和突出-在溫室中進(jìn)行的初步毒性分析在利用表5中列出的化合物處理并種植在固體瓊脂培養(yǎng)基上5-和10-天后，對50個(gè)來自各種處理的種子，直接測量發(fā)芽。還以從20個(gè)種子突出的秧苗，對各種處理間接測量發(fā)芽，所述20個(gè)種子在溫室中被播種在4個(gè)花盆中的，5個(gè)/花盆。平板上的發(fā)芽結(jié)果顯示在表6和7中。利用單變量ANOVA的發(fā)芽數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較揭示來自任何處理的種子的發(fā)芽中不存在顯著差異。這些結(jié)果顯示應(yīng)用于干豆種子，包括實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品的處理對種子的發(fā)芽沒有顯著的有害影響。表5.測試的產(chǎn)品和化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表6.在KingB瓊脂培養(yǎng)皿中用高價(jià)銀處理的干豆CP/^化o/ww/gan:Lev.Othello)種子的發(fā)芽。_<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表7.在KingB瓊脂培養(yǎng)皿中用高價(jià)硝酸銀處理的干豆(尸/zo^o/wv，譜'sLcv.ACPolaris)種子的發(fā)芽。___<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>實(shí)施例5:溫室中秧苗的突出表8.在初步溫室實(shí)驗(yàn)中用高價(jià)銀處理的干豆(尸/^eo/Mvw/gan'sLcv.Othello)秧苗，在種植后3周時(shí)的突出。實(shí)驗(yàn)1:關(guān)于'Othello'溫室實(shí)驗(yàn)M的突出數(shù)據(jù)重復(fù)無菌滑石Ag-鏈水中高水中高滑石中滑石中水粉霉素價(jià)銀價(jià)銀高價(jià)銀高價(jià)銀1%0.05%0.1%0.05%0.1%13455444234443343444總和16181419151816平均值44.54.753.754.54實(shí)驗(yàn)2-關(guān)于'Othello'溫室實(shí)驗(yàn)^2的突出數(shù)據(jù)重復(fù)無菌滑石Ag-鏈水中高水中高滑石中滑石中水粉霉素價(jià)銀價(jià)銀高價(jià)銀高價(jià)銀1%0.05%0.1%0.05%0.1%14455454244445444總和18141920191917平均值4.53.54.7554.754.754.25實(shí)驗(yàn)1和2關(guān)于'Othello'秧苗突出的總數(shù)和平均值重復(fù)無菌滑石Ag-鏈水中高水中高滑石中滑石中水粉霉素價(jià)銀價(jià)銀高價(jià)銀高價(jià)銀1%0.05%0.1%0.05%0.1%總數(shù)34323339343733平均值4.2544.1254.8754.254.6254.125表9.在初步溫室實(shí)驗(yàn)中用高價(jià)銀處理的"AC北極星(Polaris)"秧苗,在種植后3周時(shí)的突出。<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>實(shí)施例5:與未處理的種子相比，來自用高價(jià)銀處理的干豆(P/2""0/wvw/ga^Lcvs.Othello和AC北極星)種子的微生物回收。這些實(shí)驗(yàn)中使用的干豆種子栽培種樣品說明1.'Othello'-斑豆-在分類或清潔前，直接從田間收割機(jī)中收集這些種子。它們包括在商業(yè)種子處理設(shè)備中的加工過程中通常丟棄的種子-損壞的、褪色的、干癟的或小的種子。由于它們沒有被清洗的事實(shí)，它們?nèi)匀话寥馈⒒覊m、植物碎片等。因此，認(rèn)為這些種子批次為高度天然微生物攻擊提供良好的模型，其具有預(yù)期的良好微生物多樣性和高度微生物回收。如對該最小加工的種子所預(yù)期地，這些種子總體上更加難于處理，產(chǎn)生更多可變的結(jié)果。2.AC北極星-白豆-在商業(yè)種子處理設(shè)備中加工和清洗這些種子。加工導(dǎo)致拒絕小的、損壞的和/或褪色的種子，并由此是總體上較健康的種子批次。加工后，清洗并清潔種子，由此引起土壤、灰塵或碎片的顯著減少。由于這些加工步驟，預(yù)期從這些種子回收較低的微生物多樣性和數(shù)量，特別是與在該研究中使用的高度攻擊'Othello'種子批次相比。"AC北極星"種子批次是測試人工接種的種子的優(yōu)異來源。種子微生物污染的分類通過用表10中所述的攻擊處理"Othello"和"AC北極星"種子堆，而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將種子分別置于12-孔微滴定板的孔中，并用銀和/或水處理1小時(shí)。處理后，通過滴入到新鮮的磷酸鹽緩沖液中而沖洗種子，并隨后將其轉(zhuǎn)移到新的裝有新鮮磷酸鹽緩沖液的12-孔微滴定板中，并聲波降解15-30分鐘。聲波降解容許從種子表面去除存活的細(xì)菌和真菌，并回收到液體中。6天后，基于下列二者，給每個(gè)容納種子的孔打分-第6天時(shí)，最初浸沒它們進(jìn)行處理的液體的濁度。-也在第6天時(shí)，由細(xì)菌和/或真菌建群(colonization)覆蓋的種子表面積。分?jǐn)?shù)在下列范圍中變化(0)-6天后，在種子表面上沒有觀察到微生物，并且沒有濁度證據(jù)(1)-最小濁度和/或不大于20%的種子外部面積明顯被微生物覆蓋。(2)-多過20%但少于50%的種子表面被微生物覆蓋，和/或高于對(1)觀察到的濁度，但遠(yuǎn)不能與McFarland濁度標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)度為0.5相匹配。(3)-至少50%的種子表面被微生物建群和較重的濁度，所述濁度接近McFarland標(biāo)度的最低標(biāo)準(zhǔn)-0.5的濁度(4)-多于50%種子表面被細(xì)菌和/或真菌建群，和/或重度濁度(12-孔板的底部幾乎不可見)。(5)-種子表面完全被微生物包被，和/或最大濁度，"乳狀"樣子的液體培養(yǎng)物。表10.實(shí)驗(yàn)說明<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>在每個(gè)實(shí)驗(yàn)中給6個(gè)種子打分，并獨(dú)立地將每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。表11、13和15中出現(xiàn)的數(shù)字代表6個(gè)分?jǐn)?shù)的平均值?；趯?xì)菌、真菌的總分測量高價(jià)銀在減少種子上微生物群方面的功效。總微生物分?jǐn)?shù)(細(xì)菌和真菌一起)和在表12、14和16中被表示為殺死百分比。實(shí)驗(yàn)1'Othello'種子從'Othello'種子回收到具有4種不同菌落形態(tài)學(xué)的真菌，主要在非-接種的處理時(shí)。視覺鑒定包括具有鐮刀菌屬孢子染色指示的那些。從非-接種的'Othello'種子還回收了5-6種類型的細(xì)菌菌落。當(dāng)用環(huán)孔枯萎病病原體接種種子時(shí)，真菌的出現(xiàn)和數(shù)量減少，由于通常由來自假單胞菌(Pseudomonas)屬的細(xì)菌產(chǎn)生的抗生素的廣譜性，所以這并不意外。這些抗生素在群集表面時(shí)能夠提供比其他微生物顯著的競爭優(yōu)勢。'AC北極星'種子已經(jīng)在商業(yè)種子清潔設(shè)備中預(yù)清潔了'AC北極星'種子，并且回收數(shù)據(jù)證實(shí)了前述關(guān)于在非-接種時(shí)來自這些種子的較低微生物回收的預(yù)期。有趣地是，當(dāng)用丁香假單胞菌菜豆致病變種接種這些種子時(shí)，未處理的種子上的細(xì)菌計(jì)數(shù)異乎尋常地高。這些可能歸因于當(dāng)不施加額外的壓力時(shí)，表面上競爭優(yōu)勢和物種連續(xù)性的降低。數(shù)據(jù)總結(jié)在下表11和12中。表ll.基于評分系統(tǒng)，與高價(jià)銀-處理的種子表面相比，估計(jì)從未處理的'Othello'和'AC北極星'種子表面回收的細(xì)菌和真菌種群。_<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>OthelloH204.03.837.83Othello高價(jià)銀(0.1%)0.831.161.99AC北極星H202.01.53.5AC北極星高價(jià)銀(0.1%)0.6600.66種子品種接種的w/細(xì)細(xì)菌真菌總微生物分?jǐn)?shù)_^_OthelloH203.661.55.16Othello高價(jià)銀(0.1%)1.50.331.83AC北極星H205.005AC北極星高價(jià)銀(0.1%)000表12.高價(jià)銀化合物減少種子的微生物感染的功效，顯示了估計(jì)的細(xì)菌和真菌種群的減少，以及作為在未處理的種子上觀察到的百分比的總微生物負(fù)荷(細(xì)菌和真菌)。_高價(jià)銀處理細(xì)菌減少真菌減少總微生物減少Othello,非-接種的80%70%75%AC北極星，非-接種的67%100%81%Othello，接種的41%78%65%AC北極星，接種的100%不適用100%實(shí)驗(yàn)2在實(shí)驗(yàn)2中觀察到與在實(shí)驗(yàn)1中觀察到的相同的趨勢。'Othello'種子基于初步視覺鑒定，從'Othello'種子回收到具有3種不同菌落形態(tài)學(xué)的真菌，主要在非-接種的處理上。從非-接種的'Othello'種子回收了5種類型的細(xì)菌菌落。當(dāng)用環(huán)孔枯萎病病原體接種種子時(shí)，真菌的出現(xiàn)減少，回收的生物體主要是假單胞菌。'AC北極星'種子回收數(shù)據(jù)顯示來自在天然、非-接種種子上的這些種子的較低微生物回收。當(dāng)用環(huán)孔枯萎病病原體接種種子時(shí)，在未處理種子上的細(xì)菌計(jì)數(shù)高。數(shù)據(jù)總結(jié)在表13和14中。表13.基于評分系統(tǒng)，與高價(jià)銀-處理的種子表面相比，估計(jì)從未處理的'Othello'和'AC北極星'種子表面回收的細(xì)菌和真菌種群。<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>表14.高價(jià)銀化合物減少種子的微生物感染的功效，顯示了估計(jì)的細(xì)菌和真菌種群的減少，以及作為在未處理的種子上觀察到的百分比的總微生物負(fù)荷(細(xì)菌和真菌)。_高價(jià)銀處理細(xì)菌減少真菌減少總微生物減少Othello，非-接種的62%100%86%AC北極星，非-接種的90%62%78%Othello，接種的78%75%77%AC北極星，接種的96%不適用96%實(shí)驗(yàn)3多樣性數(shù)據(jù)與以上實(shí)驗(yàn)類似。表15.基于評分系統(tǒng)，與高價(jià)銀-處理的種子表面相比，估計(jì)從未處理的'0thdl0'和'AC-北極星'種子表面回收的細(xì)菌和真菌種群。<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>表16.高價(jià)銀化合物減少種子的微生物感染的功效，顯示了估計(jì)的細(xì)菌和真菌種群的減少，以及作為在未處理的種子上觀察到的百分比的總微生物負(fù)荷(細(xì)菌和真菌)。<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>結(jié)論高價(jià)銀顯示出針對多種與種子表面相關(guān)的細(xì)菌和真菌物種的良好殺細(xì)菌和殺真菌功效。數(shù)據(jù)在該實(shí)驗(yàn)的3次獨(dú)立重復(fù)間保持一致。實(shí)施例6.評價(jià)高價(jià)銀在作為多種干豆栽培品種種子的水性涂層應(yīng)用時(shí)的作用。作為對患病干豆種子的種子處理，評估了由氧化硝酸銀產(chǎn)生的高價(jià)銀離子的功效。應(yīng)用氧化硝酸銀，作為對干豆(菜豆L)發(fā)芽的水性種子涂層。利用己知技術(shù)制備高價(jià)銀離子，如下通過硝酸銀(AgN03)和過硫酸鉀(K2S20s)水溶液的反應(yīng)制備硝酸銀(Ag(Ag204)2N03)產(chǎn)生黑色純硝酸銀沉淀(參見以下化學(xué)反應(yīng))。通過過濾回收沉淀，并干燥粉末。7AgN03(水溶液)+K2S208(水溶液)+8H20—Ag(Ag204)2N03(沉淀)+6HN03(水溶液)+6H2S04(水溶液)+K2S04(水溶液)+4Hz(氣體)將種子置于Petri培養(yǎng)皿中的吸濕紙上，在過量水中浸沒3天，然后在第4天晾干。3-天過量水時(shí)期在發(fā)芽種子表面形成非常高的細(xì)菌負(fù)荷，并由于致病的、腐生的和軟腐細(xì)菌，而產(chǎn)生高度疾病壓力。這些疾病壓力非常高以至于實(shí)驗(yàn)2-5的發(fā)芽率基本為0，這歸因于被微生物生長所壓制。然而，實(shí)驗(yàn)#1(栽培種'Othello'的健康種子批次)能夠克服疾病壓力并顯著發(fā)芽。這些極端條件用于揭示高價(jià)銀針對細(xì)菌疾病壓力的明顯效力。在這些條件下，與陰性對照(水)和陽性標(biāo)準(zhǔn)(ApronMaxxRTA)相比，高價(jià)銀處理顯著增加發(fā)芽。到第10天時(shí)，與陰性對照(無菌水)相比，1%高價(jià)銀處理增加發(fā)芽34.7%。另夕卜，發(fā)芽比ApronMaxxRTA—一種干豆的注冊的種子處理和工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)高54%。結(jié)果顯示在表1中，并繪圖于圖1中。如對達(dá)到25%發(fā)芽所需要的天數(shù)所觀察地，用高價(jià)銀的處理對發(fā)芽沒有副作用。例如，應(yīng)用于種子的植物毒性化合物會(huì)延遲或阻止發(fā)芽。這會(huì)引起需要更長的時(shí)期達(dá)到25%和/或50%發(fā)芽。此外，高價(jià)銀增加發(fā)芽種子的數(shù)量1.3-2.3倍。在圖2中能夠明顯地觀察到高價(jià)銀的正向作用。高價(jià)銀是優(yōu)秀的干豆種子處理，因?yàn)樗鼘Πl(fā)芽種子沒有植物毒性作用，且能夠顯著的援救受到大量污染細(xì)菌攻擊的種子的發(fā)芽。特別地，證明了利用高價(jià)銀作為種子處理，能夠增高發(fā)芽率，特別是在較低品質(zhì)的種子或不良發(fā)芽條件中。還注意到對于其他豆類農(nóng)作物，高價(jià)銀能夠加速發(fā)芽(見實(shí)施例7)，然而，本文所述實(shí)驗(yàn)中的處理均不引起干豆種子的加速發(fā)芽。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示在下表17中。表17.實(shí)驗(yàn)6的發(fā)芽結(jié)果。<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>實(shí)施例7:評估高價(jià)銀對豆類作物種子(豌豆，鷹嘴豆、兵豆、大豆、干豆)的植物毒性該實(shí)驗(yàn)確定與實(shí)施例6中使用的相同的高價(jià)銀在作為抗微生物種子處理加入到豆類種子中時(shí)，是否減少發(fā)芽、突出或?qū)Χ诡愞r(nóng)作物豌豆，鷹嘴豆、大豆和兵豆具有植物毒性。對被應(yīng)用了高價(jià)銀的種子記錄了發(fā)芽數(shù)據(jù)，所述高價(jià)銀是作為以4種濃度1000-ppm，2500-ppm，5000-ppm和10000-ppm之一的水性涂層被應(yīng)用的。用不同濃度的高價(jià)銀(表19)處理5種豆類農(nóng)作物(表18)，每種100個(gè)種子，并且然后播種(11=50個(gè)種子)在5個(gè)花盆中的非-無菌沙土中，并置于溫室中，或置于無菌Petri培養(yǎng)皿的潮濕吸濕紙上(r^50個(gè)種子)。在第7-和14-天，給吸濕紙上的發(fā)芽計(jì)分。在第21-和28-天，給從土壤中的突出計(jì)分。將由高價(jià)銀涂布的豆類種子的發(fā)芽和突出與用水處理的種子的結(jié)果相比較，并且從視覺上鑒定秧苗的任何植物毒性跡象。該實(shí)驗(yàn)的可控變量總結(jié)在表20中。為了處理種子，將100個(gè)種子置于50-mLFalcon管中，并與處理溶液組合。通過輕輕地旋轉(zhuǎn)和顛倒該Falcon管，將種子與所述處理混合5分鐘。將包被的種子置于敞開的Petri培養(yǎng)皿中30分鐘，進(jìn)行干燥。以10個(gè)/花盆播種種子，將其置于溫室中，并且將其保持在汞燈照明的標(biāo)準(zhǔn)條件下，該汞燈在3:00pm-10:00pm間補(bǔ)充日光。表18.豆類發(fā)芽和突出試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)要素。<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>表20.關(guān)于豆類發(fā)芽和突出試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)要素<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>制備處理溶液10%溶液一將0.5-g高價(jià)銀加入到5-mL無菌水中。持續(xù)攪拌。5%溶液一平衡10%溶液15分鐘后，將0.5-mL10%溶液加入到0.5-mL無菌水中。持續(xù)攪拌。2.5%溶液一將0.25-mL10%溶液加入到0.75-mL無菌水中。持續(xù)攪拌。1%溶液一將O.l-mL10%溶液加入到0.9-mL無菌水中。持續(xù)攪拌。用高價(jià)銀處理豆類種子將100個(gè)種子置于50-mL的Falcon管中，并加入l-mL處理溶液。輕輕地旋轉(zhuǎn)和顛倒該管5分鐘，從而在不引起損傷的條件下，均勻包被每個(gè)種子。小心地將種子從管中去除到一個(gè)空的Petri培養(yǎng)皿中。使其保持暴露(不蓋蓋子)，并空氣干燥種子30分鐘。評估發(fā)芽和突出(1)發(fā)芽將來自每種處理的50個(gè)種子置于大Petri培養(yǎng)皿中的25個(gè)獨(dú)立潮濕吸濕紙上。在有光或無光條件下室溫培養(yǎng)2周。在第7-和14-天時(shí)對發(fā)芽計(jì)分。(2)突出將來自每種處理的50個(gè)種子播種在5個(gè)花盆(IO個(gè)種子/花盆，且5個(gè)花盆/處理)中。將其置于處于22t:，具有充足空氣循環(huán)的溫室中。如果需要，使用汞燈補(bǔ)充光線(在3:00pm打開；在10:00pm關(guān)閉)。對于預(yù)-突出的植物，根據(jù)需要對花盆澆水，以保持潮濕但不濕。每日為突出的植物澆水。在第21和28天對突出計(jì)分。用水或4種濃度的高價(jià)銀之一處理種子，并在Petri培養(yǎng)皿中空氣干燥。處理并空氣-干燥種子后，將它們播種在溫室中盆裝的非-無菌土壤中。備選地，將它們置于大Petri培養(yǎng)皿中潮濕的吸濕紙上。在第7-天(表21)和第i4—天(表22)對吸濕紙上的種子的發(fā)芽計(jì)分。所有的大豆種子具有非常慢且低的發(fā)芽率，其在7天后具有許多未-發(fā)芽的種子和最大發(fā)芽率為64%。對于所有的處理，包括對照，Kabuli鷹嘴豆也具有總體上減少的發(fā)芽率，盡管對Kabuli鷹嘴豆發(fā)芽的減少?zèng)]有對大豆的嚴(yán)重。用高價(jià)銀的處理對該實(shí)驗(yàn)中任何豆類種子的發(fā)芽均無負(fù)作用。相反，具有重微生物負(fù)荷的種子(如大豆)顯示出增高的發(fā)芽率，其與用于處理種子的高價(jià)銀增高的濃度直接相關(guān)。表21.豆類種子的發(fā)芽。分?jǐn)?shù)來自于50個(gè)處于吸濕紙上7-天的種子。<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>表22.豆類種子的發(fā)芽。分?jǐn)?shù)來自于50個(gè)處于吸濕紙上14-天的種子。<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>*發(fā)芽率在第14-天時(shí)降低(當(dāng)與表22中的第7-天的數(shù)據(jù)相比時(shí))，因?yàn)樵诘?-天時(shí)觀察到一些出現(xiàn)的下胚軸，并將其計(jì)分為陽性發(fā)芽。然而，隨后的發(fā)育停止，且胚軸沒有完全突出。因此，在第14-天時(shí)，將這些種子計(jì)為陰性發(fā)芽。實(shí)施例8:由高價(jià)銀促進(jìn)發(fā)芽。該實(shí)驗(yàn)評估了高價(jià)銀在應(yīng)用于較低品質(zhì)的大豆種子時(shí)對發(fā)芽的促進(jìn)。發(fā)現(xiàn)高價(jià)銀增加發(fā)芽的大豆種子的速度和數(shù)量。將發(fā)芽速度顯示為7-天后的發(fā)芽百分比(表23)。水對照在第7天時(shí)到達(dá)26.7%，但是高價(jià)銀處理分別達(dá)到28%、29.6%、34.5%、和59.4%。當(dāng)與單獨(dú)的水比較時(shí)，觀察到用高價(jià)銀處理的發(fā)芽種子數(shù)量的增多。14天后，1%高價(jià)銀具有比水高34%的發(fā)芽率(表24)。高價(jià)銀處理有效地加倍(或幾乎加倍)了發(fā)芽種子的百分比。在來自水處理種子的種子和吸濕紙上觀察到過量細(xì)菌生長，而高價(jià)銀處理的種子沒出現(xiàn)顯著的細(xì)菌生長。表23.豆類種子的發(fā)芽。分?jǐn)?shù)來自于50個(gè)處于吸濕紙上7天的種子。<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>表9.豆類種子的發(fā)芽。分?jǐn)?shù)來自于50個(gè)處于吸濕紙上14天的種子。<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>實(shí)施例9.健康的干豆種子用高價(jià)銀處理的健康干豆種子比水對照或工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)"ApronMaxxRTA"具有更快的發(fā)芽和更高的發(fā)芽率％(表25)。另外，在高價(jià)銀處理中觀察到最短的達(dá)到50%和100%發(fā)芽的時(shí)間(表25)。表25.關(guān)于健康干豆種子的發(fā)芽結(jié)果。<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>權(quán)利要求1.一種處理植物材料的方法，所述方法包括使植物材料或其部分與包括至少一種防腐劑的組合物接觸，所述防腐劑包括高價(jià)銀離子，由此保存所述植物材料。2.權(quán)利要求l的方法，其中所述組合物包括硝酸銀水溶液；氧化劑；和至少一種酸的陰離子。3.權(quán)利要求1的方法，其中接觸植物或其部分包括接觸種子、根、根莖、匍匐莖、塊莖、莖、葉、花、維管組織、和它們的組合。4.權(quán)利要求1的方法，其中保存所述植物材料包括針對一種或多種生物膜處理所述植物材料。5.權(quán)利要求4的方法，其中針對一種或多種生物膜處理所述植物材料包括清除或減少所述生物膜。6.權(quán)利要求4的方法，其中針對一種或多種生物膜處理所述植物材料包括針對選自由下列各項(xiàng)組成的組的一種或多種屬處理所述植物材料歐文氏菌屬(五nv/w'a)、假單胞菌屬(尸化z^owo"os)、黃單胞菌屬(v^a"Aomowos1)、t昆狀木干菌屬(CVav沾acfer)、矢l/j、桿菌屬(CwWo6a"en'Mm)、鏈霉菌屬(浙eptom少ces)、鐮刀菌屬(Fwar/謂)、絲核菌屬(腸;zoctom'a)、刺盤孢屬(Co〃etoWc/7MW)、輪枝孢菌屬(KeWc/〃z'wm)、腐霉菌屬(」Fy/z/wm)、疫霉菌屬(尸/^to//^/zora)、長i需子包屬(T/e/^m'"^zo5pon'M附)、禾亥盤菌屬(5Wera"m'a)、葡萄包屬(So^yto)、殼二包屬(Jscoc/2_yto)，和它們的變異體。7.處理生物膜的方法，所述方法包括使所述生物膜與抗-生物膜試劑接觸，其中所述抗-生物膜試劑包括銀沉積化合物。8.權(quán)利要求7的方法，其中所述抗-生物膜試劑包括高價(jià)銀離子，和其混合物。9.權(quán)利要求7的方法，其中所述生物膜位于植物或其部分，或與植物商品的生產(chǎn)、運(yùn)輸、操作、加工或包裝相關(guān)的天然或人造表面材料之上或之中。10.權(quán)利要求7的方法，其中所述生物膜位于動(dòng)物或其部分，或與動(dòng)物商品的生產(chǎn)、運(yùn)輸、操作、加工或包裝相關(guān)的天然或人造表面材料之上或之中。11.權(quán)利要求7的方法，其中所述生物膜位于醫(yī)學(xué)裝置或其部分，或與所述裝置的生產(chǎn)、運(yùn)輸、操作、加工或包裝相關(guān)的天然或人造表面材料12.權(quán)利要求7的方法，其中所述生物膜位于工業(yè)機(jī)器或表面或其部分之上或之中。13.權(quán)利要求7的方法，所述方法還包括至少一種另外的抗-生物膜試劑。14.權(quán)利要求7的方法，其中所述抗-生物膜試劑還包括處理浮游生物細(xì)菌。15.抗-生物膜組合物，所述抗-生物膜組合物包括包含高價(jià)銀離子的組16.—種處理表面的方法，所述方法包括使所述表面或其部分與包括至少一種防腐劑的組合物接觸，所述防腐劑包括高價(jià)銀離子，由此消毒所述表面。17.—種處理表面的方法，所述方法包括使所述表面或其部分與包括至少一種防腐劑的組合物接觸，所述防腐劑包括高價(jià)銀離子，由此防止所述表面的污染。全文摘要本發(fā)明是利用高價(jià)銀離子處理生物膜的方法和組合物。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，使用抗-生物膜試劑保存、消毒或處理植物材料，包括種子、葉，莖、導(dǎo)管、花、根和果實(shí)，以及任何表面，特別是消毒工作或加工表面和種子或植物表面；用在抗微生物涂層；和治療人、植物、和動(dòng)物疾病和病癥中。文檔編號A01N59/16GK101494987SQ200780027487公開日2009年7月29日申請日期2007年6月22日優(yōu)先權(quán)日2006年6月22日發(fā)明者利里亞姆·L·馬克斯,麥克爾·W·哈丁,默爾·E·奧爾森申請人:創(chuàng)新技術(shù)公司