專利名稱：：通過單次注射法抑制母馬動情的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明是獸醫(yī)方法的一般領域。更具體地，本發(fā)明一般涉及抑制動情的方法。
背景技術：
：孕酮類經常在比賽性、表演性和養(yǎng)殖性(傳種)母馬中用于在一周到一個月或更長時間里抑制動情的表達。不幸的是，每日治療對于給母馬施用烯丙孕素或孕酮來說是一種不切實際的方法。特別地，每日施用對于動物主人來說不方便、耗時、昂貴，而且動物也會應激。近來可生物降解的控釋藥物遞送系統(tǒng)的發(fā)展為用單次施用產品替代長期的每日治療方案提供了可能。這種制劑減少了勞力，降低了動物和生產者的相關操作應激，為獸醫(yī)提供了在具有各種管理系統(tǒng)的農場和展示性畜棚中維持有效的堅持服藥率的重要方法。盡管烯丙孕素或孕酮都明確地表現(xiàn)出可以抑制母馬的動情和排卵，但是其他范圍廣泛的各種處方藥合成孕酮包括醋酸曱羥孕酮都沒有顯示出可以影響動情、排卵或妊娠保持。因此，在本領域仍然有重大的缺憾。特別地，本領域缺乏用單次的、持續(xù)釋放注射抑制動情的方法、此外，本領域需要一種在母馬中抑制動情的方法，其實施只需要花費較少時間和/或金錢。本發(fā)明滿足了本領域的這種以及其他需要。
發(fā)明內容本發(fā)明一般涉及在任意種類的動物包括馬中抑制動情的方法。在本發(fā)明范圍內的方法包括施用單次劑量或在較寬的時間間4隔內施用有限劑量來有效地抑制動情的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法用于的動物包括馬、豬、狗、牛、綿羊和山羊。本發(fā)明也涉及一種在養(yǎng)殖性、竟爭性或表演性哺乳動物中抑制動情的方法，包括經胃腸外施用單次的、控釋的有效量的合成孕酮17-a-烯丙基-17-p-羥基雌甾-4，9,11-三烯-3-酮。圖1顯示的是在第0，1,3，6和9天，每次治療時的平均注射部位得分。具體實施例方式本發(fā)明一般涉及在任意種類的動物包括馬中抑制動情的方法。在本發(fā)明范圍內的方法包括施用單次劑量或在較寬的時間間隔內施用有限劑量來有效地抑制動情的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明的方法用于的動物包括馬、豬、狗、牛、綿羊和山羊。烯丙孕素也稱作17-a-烯丙基-17-&-羥基雌甾-4，9，ll-三烯-3-酮，烯丙基群勃龍以及四烯雌酮(Regumate)。烯丙孕素也被指定為CASNo.850-52-2。在本文中使用時，術語烯丙孕素包括上述化合物及其任何適當的包括該化合物的制劑。烯丙孕素可以以各種持續(xù)釋放制劑施用，例如液體制劑、微粒制劑或其任意組合。在本發(fā)明范圍內的烯丙孕素的平均每日持續(xù)釋放的劑量包括1至lQQmg/天，5至5Gmg/天或者甚至10至40mg/天。在此，無論是在說明書還是權利要求中，上述范圍均可以組合?？梢詫┬团渲瞥稍谌我獾母鞣N時間，包括1到30天，5到20天或者甚至10到15天釋放烯丙孕素。在一些實施方案中，持續(xù)釋放可以持續(xù)超過l個月。除了單次的持續(xù)釋放劑型，本發(fā)明的方法也可以包括多次的持續(xù)釋放劑型。例如，有效抑制動情30天的制劑可以每30天施用。此外，對于制劑可以施用的次數沒有限制。下面的實施例說明了本發(fā)明的效力。將從輕型母馬中隨機選擇的31只母馬放養(yǎng)在天然牧場中，隨意供給干草。通過印泡超聲監(jiān)測、強壯種馬的挑逗以及血漿孕酮濃度的放射免疫測定來確定正常的生殖周期。然后對血漿孕酮濃度水平在1ng/mL以下的顯示動情的母馬(即，動情母馬組)進行超聲監(jiān)測，直至確定卵泡為30mm或更大。當卵泡達到30mm時，施用2mL的2000IU人絨毛膜促性腺激素以誘導排卵。然后對動情組的母馬進行超聲監(jiān)測，直至確認排卵以及黃體形成。當確定排卵6天后，給予該組的母馬2mL的地諾前列素注射液，隨機指定表1所示的治療方案。給予不顯示動情的母馬(即，非動情母馬組)2mL地諾前列素，所述母馬的孕酮濃度在1ng/mL以上并且通過超聲確認了黃體的存在。當通過用種馬挑逗檢測到了動情，就如動情母馬組所指定的母馬那樣治療這些母馬。治療日(dO)是與地諾前列素的最后、動情間期中的注射(排卵后5或6天)同時的。然后將母馬隨機分為如表1所示的5個治療組中的一個。表l.持續(xù)釋放的孕酮治療<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>然后，表1中的每組母馬都在治療后每隔一天超聲，直至檢測到卵泡為25mm或更大。一旦卵泡超過了25mm，每日掃描該母馬，直至卵泡排卵或恢復到小于25mm。在每次超聲檢驗前，經頸靜脈穿刺收集血樣，以用于后續(xù)的激素化驗。一旦母馬恢復動情并排卵，或排出較大的優(yōu)勢卵泡而不顯示動情，則讓其停藥。在治療后第0，1，3，6和9天進行注射部位評估。基于0-3的主觀量表進行評分。0是指沒有腫脹；l是指較小直徑的肺脹(即約12.5mm);2是指中等直徑的腫脹(即約12.5-25mm);3是指顯著腫脹(即直徑大于25mra)。用商業(yè)可用的試劑(DUgnosticSystemsLaboratories,Webster,TX)測定孕酮的血漿濃度。批內和批間CV以及分析靈敏度分別是5%、8%和0.1ng/mL。通過SAS的ProcMixed程序(SASInstituteInc.,Cary，NC)來分析數據。經單因素方差分析(one-wayANOVA)分析單點(因)變量。分析注射部位評分的數據，以評價治療效果、時間和隨時間的治療與重復測定之間的相互作用。當檢測到顯著的F時(P<0.05)，用最小顯著差數(LSD)檢驗來確定各時間內各組的差異。如表2所示，與對照組相比，各單次注射的烯丙孕素制劑對于延長(P〈0.Q5)母馬的動情恢復和排卵間隔均是有效的。烯丙孕素MP500制劑抑制動情和抑制排卵的時間最長(P〈0.05)。與對照組母馬的3.9±0.5天相比，恢復動情的平均天數是32.8±4.8天。與對照組母馬的8.3±1.2天相比，相對于施用地諾前列素，施用烯丙孕素MP500制劑的排卵天數是34.7±3.7天。兩種劑量的液體烯丙孕素LA150制劑有效地延長治療后動情的恢復(分別為12.7±0.4天和15.8土1.5天)，導致相對于治療的1.5mL和3mL劑量的平均排卵天數分別是17.2±0.75天和21.8土0.54天。醋酸甲羥孕酮治療對于延遲動情或排卵沒有效果。表2治療后動情和排卵的天數<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>平均值土SE;具有不同上標差異的平均值(P<0.05)當與對照組相比時，觀察到所有5種劑型的注射部位腫脹(附圖1)，但根據母馬和制劑的不同而不同。烯丙孕素MP500和烯丙孕素LA150/1.5mL制劑具有類似的注射部位腫脹評分，即僅有輕微的腫脹(即分數為1)。曱羥孕酮是對母馬最不生物相容的制劑。本文所述的每個實施方案都有效地不同程度地延長了排卵間隔并延遲了動情。烯丙孕素MP500制劑具有最大的抑制效果，同時僅有輕微的腫脹。這種制劑對于勞動(表演)型的馬是有益的，它抑制動情長達30天，如果需要可以重復施用以維持生殖停止或不動情。烯丙孕素LA150/1.5mL的實施方案也是非常有效的，當需要的動情抑制的時間較短(12到14天)時是有價值的。例如，該實施方案在過渡期(transitional)母馬中對于確立正常的周期或者對于動情和排卵同期化進程是有價值的。在一些情況中，當動情和排卵的程度與烯丙孕素每日治療或孕酮加雌二醇治療相當或更有利時，該實施方案是特別有價值的。本文所述的實施方案是具有與權利要求所述的本發(fā)明的要素相對應的要素的組合物、結構、系統(tǒng)和方法的例子。這樣寫成的說明使得本領域普通技術人員能夠實施和使用具有替代要素的實施方案，所述替代要素同樣也與權利要求所述的本發(fā)明的要素相對應。因此，本發(fā)明范圍包括與權利要求的文字語言相同的組合物、結構、系統(tǒng)和方法，還包括與權利要求的文字語言沒有實質性差異的其他組合物、結構、系統(tǒng)和方法。盡管本文僅解釋和描述了某些特征和實施方案，但是對于相關領域的普通技術人員來說，可以做出很多的變更和改變。所附的權利要求意欲包括所有這些變更和改變。8權利要求1.一種在養(yǎng)殖性、競爭性或表演性哺乳動物中抑制動情的方法，其包括胃腸外施用單次的控釋的有效量的合成孕酮17-α-烯丙基-17-β-羥基雌甾-4，9，11-三烯-3-酮的步驟。2.權利要求l的方法，其中該養(yǎng)殖性、竟爭性或表演性哺乳動物是動情前或動情后的小雌馬或母馬。3.權利要求l的方法，其中該養(yǎng)殖性哺乳動物是動情的母馬。4.權利要求1的方法，其中所述施用包括單次的持續(xù)釋放的肌內注射，以提供約l-100mg/天的平均日劑量。5.權利要求1的方法，其中所述施用包括單次的持續(xù)釋放的肌內注射，以提供約5-50mg/天的平均日劑量。6.權利要求l的方法，其中所述施用包括單次的持續(xù)釋放的肌內注射，其中以約10-40天的時間間隔重復注射。7.權利要求1的方法，其中施用包括單次的持續(xù)釋放的肌內注射，其中以約10-30天的時間間隔重復注射。8.權利要求7的方法，其中所述時間間隔是約30天。9.權利要求8的方法，其中該養(yǎng)殖性、竟爭性或表演性哺乳動物是動情的母馬。10.權利要求l的方法，其中所述施用重復至少一次。11.權利要求io的方法，其中在前次劑量的動情抑制期結束或接近結束時重復所述施用。12.權利要求l的方法，其中該哺乳動物選自馬、豬、牛、狗、綿羊和山羊。13.權利要求l的方法，其中合成孕酮17-ot-烯丙基-17-p-羥基雌齒-4，9，11-三烯-3-酮構成液體制劑的組分。14.權利要求l的方法，其中合成孕酮17-ot-烯丙基-17-P-羥基雌甾-4，9，11-三烯-3-酮構成微粒制劑的組分。15.—種在母馬中抑制動情的方法，包括胃腸外施用單次的控釋液體制劑的步驟，所述制劑含有有效量的合成孕酮17-a-烯丙基-17-p-羥基雌甾-4，9，ll-三烯-3-酮，能在約10-30天的時間里釋放出約l-100mg/天的孕酮。16.權利要求15的方法，其中胃腸外施用為肌內注射。17.權利要求15的方法，其中能在約25-30天的時間里釋放出約10-35mg/天的孕酮。18.權利要求15的方法，其中能在約10-15天的時間里釋放出約10-30mg/天的孕酮。19.權利要求15的方法，其中在前次劑量的動情抑制期結束或接近結束時重復所述施用至少一次。全文摘要本發(fā)明一般涉及在養(yǎng)殖性或競爭性動物中抑制動情的方法，包括給該養(yǎng)殖性動物經胃腸外施用動情抑制量的17-α-烯丙基-17-β-羥基雌甾-4，9，11-三烯-3-酮。根據本發(fā)明的方法，可以在任意的各種時間包括30天或更長時間里抑制動情。此外，本發(fā)明的方法包括無限期地重復持續(xù)釋放劑量。文檔編號A01N43/00GK101522025SQ200780036303公開日2009年9月2日申請日期2007年8月21日優(yōu)先權日2006年8月22日發(fā)明者P·J·伯恩斯申請人:生物釋放科技有限責任公司