專利名稱：：聚陽離子類消毒劑在奶牛乳頭皮膚消毒中的應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及聚六亞甲基胍等聚陽離子類消毒劑在擠奶前后對奶牛乳頭皮膚進行消毒的新用途。
背景技術：
：乳房炎是引起奶牛養(yǎng)殖業(yè)經濟損失最嚴重的疾病之一。引起乳房炎的病原微生物大多由葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌等引起，這些病原微生物主要存在于奶牛體表和環(huán)境中，奶牛乳房表面污染的病原微生物可通過擠奶機、擠奶員的手或擦洗乳房的毛巾等感染乳腺，引起隱性乳房炎或臨床型乳房炎。國內外奶業(yè)界普遍認為，在擠乳前后對奶牛乳頭進行消毒劑消毒是近年來防制奶牛乳房炎的一種有效方法。乳頭藥浴消毒劑的要求為殺菌譜廣、殺菌速度快、刺激性小、藥物殘留小。為防止廣泛的而代價高的牛奶細菌污染，人們進行了許多努力?，F(xiàn)已有了許多在擠奶前處理乳房的改進方法和防止及處理牛乳腺炎的方法(例如參見美國專利4，206，529，Neumann;No.5，124，145和5，234，684，Sordillo等人；No.4,253，420，Heofelmayr和No.5,366，732,Zighelboim)。其它人描述了改進的抗微生物的組合物，其特別用于解決在擠奶前清潔過程中有污染性殘余物的問題(例如參見美國專利No.5，139,788，Schmidt)。Berg等人(牛奶科學雜質(J.DairySci.)68，457-461(1985));Pankey等人(VeterinaryClinicsofNorthAmerica9,519-530，1993);McKinnon等人(J.DairyRes.50，153-162，1983);Murdough等人(J.DaiiySci.76,2033-2038，1993)和Ansari等人(Am丄Infect.Control19,243-249,1991)進一步描述了該領域的目前狀況，并描述了在通用的擠奶前對乳頭消毒方面的改進。目前，國內市場上銷售的奶牛乳頭消毒劑品種繁多，基本上是氯己啶、碘附等傳統(tǒng)的消毒劑產品。盡管碘伏類消毒劑在奶牛擠奶消毒方面有一定的作用(王晶鈺，姜向陽，羅艷，等.奶牛乳頭專用消毒劑消毒效力研究[J].中國農學通報，2005，21(1):1-17);(袁永隆，楊玉英，孟聚誠，等.奶牛乳頭皮膚消毒劑的研制與篩選[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，1994,4:3-5)。但有實驗表明常用的1%碘伏對奶牛擠奶前后消毒效果只與0.5%氯己啶相當，參見L.K.Fox(J.DairySci.75:66-71,1992);J.S.HOGAN等人(J.DairySci.78:2502-2506,1995)。作為殺菌力更強，刺激性更小、無毒、不著色的聚六亞甲基胍在奶牛擠奶消毒中的應用卻未見報道。本發(fā)明人通過大量的實驗研究，發(fā)明了將聚六亞甲基胍用于奶牛乳頭皮膚消毒的新用途。
發(fā)明內容本發(fā)提提供了含量為0.1-1%的聚六亞甲基胍等聚陽離子類消毒劑水溶液在奶牛乳頭皮膚消毒中的應用。聚六亞甲基胍等聚陽離子類消毒劑可作為一種奶牛乳頭皮膚專用消毒劑的主要成分，帶正電性的胍基具有很高的活性，很容易被通常呈負電性的各類細菌、病毒所吸附，從而抑制細菌病毒的分裂功能，使細菌、病毒喪失繁殖能力，更為重要與可貴的是聚六亞甲基胍無毒、無刺激、無其它副作用、不影響奶牛產奶質量，適用于奶牛擠奶前后的消毒，可有效預防奶牛隱性乳房炎或臨床型乳房炎的發(fā)生。實施例1實驗目的實驗室微生物殺滅效果1)試驗器材1、菌種金黃色葡萄球菌ATCC6538、大腸桿菌80992、恒溫水浴箱3、刻度吸管(O.lml、1.0ml、5.0ml、10.0ml)4、毛細吸管5、離心機6、電動混合器。2)菌片的制備消毒試驗中使用的菌片，是以菌液滴加于載體上制成，所用載體染菌前,應進行脫脂處理。統(tǒng)一用白平紋棉布制作。在剪開前，先將脫脂的布塊按載體規(guī)定的大小，抽去邊周的經緯紗各一根，再按抽紗痕剪開。此法制成的載體大小一致，且無毛邊；載體經壓力蒸汽滅菌后，用滴染法時，將經滅菌的布片平鋪于無菌平皿內，逐片滴加菌液。加量每片為0.01-0.02ml?？捎肙.lml吸管滴加菌液，也可用l.Oml注射器接6號針頭滴加菌液。置37'C溫箱內烤干(約30min)，或置室溫下自然陰千后再使用；菌片的染菌為5X105-5X106cfu。3)操作程序7、取無菌小平皿，標明所注入消毒液的濃度。按每片5.0ml的量，吸取相應濃度的消毒劑溶液注入平皿中。8、將盛有消毒劑平皿置20°C±rC水浴中5min后，用無菌鑷子分別放入預先制備的菌片4片，并使之浸透于消毒劑中。9、待菌藥相互作用至各預定時間，用無菌鑷子將菌片取出分別移入一含5.0ml中和試管中。用電動混合器混合20s，或將試管振打80次，使菌片上的細菌被洗脫進入中和液中，再放置5min以上，使中和作用充分。最終進一步混勻后，吸取1.0ml直接接種于平皿，每管接種2個平皿，測定存活菌數(shù)。10、領取一平皿，注入10.0ml稀釋液代替消毒液，放入2片菌片，作為陽性對照組。其隨后的試驗步驟和活菌培養(yǎng)計數(shù)與上述試驗組相同。11、所有試驗樣本均在37'C溫箱中培養(yǎng)，對細菌繁殖體培養(yǎng)48h觀察最終結果；對細菌芽孢培養(yǎng)72h觀察最終結果。12、試驗重復3次(包括對照)，計算各組的活菌量(cfu/片)，計算殺滅率。4)實驗結果1、對金黃色葡萄球菌的殺菌效果在2(TCirC條件下，經三次重復試驗證明，含有1.0%、0.8%、0.4%鹽酸聚六亞甲基胍水溶液，作用15s、30s、60s對金黃色葡萄球菌平均殺滅率分別為99.97%、98.89%、93.86%。(表l.l)表l.l鹽酸聚六亞甲基胍對金黃色葡萄球菌的殺菌效果消毒劑濃度(%)作用不同時間(S)的平均殺滅率及范圍(％)1530456099.9799.9999.99100.00(99.97~99.98)(99.99)(99.99)(100.00)98.8999.卯99.92100.00(98.8298.95)(99.90~99.91)(99.9099.95)(100.00)93.8695.4099.1099.卯(93.8093.93)(95.3095.50)(99.00-99.18)(99.90)73.8282.2088.5599.18(73.7073.89)(82.00~82.40)(88.49~88.60)(99.10~99.26)64.7668.0071,9978.76(64.65~64.83)(67.91~68.10)(71.8872,10)(78.71~78.83)1.00.80.40.20.1注陽性對照組平均菌落數(shù)及范圍為3.51X106(2.42X106-4.10X106)cfu/片，陰性對照組為無菌生長。2、對大腸桿菌的殺菌效果在2(rc土rc條件下，經三次重復試驗證明，殺菌消毒劑濃度含有i.0。/。、o.8%、0.4%鹽酸聚六亞甲基胍水溶液，分別作用15s、45s、60s，對大腸桿菌平均殺滅率分別為99.97%、94.62%、93.06%。，對大腸桿菌具有消毒作用(表1.2)表1.2鹽酸聚六亞甲基胍對大腸桿菌的殺菌效果消毒劑濃度(%)作用不同時間(s)的平均殺滅率及范圍(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注陽性對照組平均菌落數(shù)及范圍為3.90X106(3.80X106楊X106)cfu/片，陰性對照組為無菌生長。實施例2實驗目的皮膚刺激性試驗1.實驗方法(1)試驗動物每次試驗至少需要3只皮膚完好的健康家兔(2)皮膚刺激性試驗操作程序-A、消毒劑濃度0.5%鹽酸聚六亞甲基胍B、在試驗前24h，用脫毛劑將家兔背部脊柱兩側的毛去掉，不得損傷皮膚。去毛范圍，左右各約3cmX3cm。C、次日將受試物(濃度一般為皮膚消毒應用液的5倍或原液)0.5ml(g)直接滴于面積為2.5cmX2.5cm的一側完好皮膚上，或滴于同樣大小的2層_4層紗布上并敷貼在一側去毛皮膚表面，然后用一層無剌激塑料膜或油紙覆蓋，再用無刺激膠布固定。另一側去毛皮膚作為空白對照(或溶劑對照)。敷貼時間為4h。試驗結束后，用溫水或無刺激性溶劑除去殘留受試物。D、分別于去除受試物后lh、24h和48h觀察皮膚局部反映，并進行評分。2.實驗結果聚六亞甲基胍敷貼后lh、24h和48h各只家兔敷貼側皮膚均未出現(xiàn)紅斑及水月中，亦未出現(xiàn)中毒癥狀。結果見表1.3.表1.3聚六亞甲基胍對家兔皮膚次刺激反應動，i皮膚刺激反應評分物性重■(kg)-lh24h48h編別紅斑水腫紅斑水腫紅斑水腫號樣對樣對樣對樣對樣對樣對1早2.50000000000002早2.50000000000003古2.70000000000004古2.6000000000000總積分均值000000000000結論聚六亞甲基胍對家兔皮膚刺激指數(shù)為O，刺激強度級別為無刺激性。8權利要求1.含量為0.1-1％的聚六亞甲基胍或聚六亞甲基雙胍水溶液，在奶牛擠奶前后對其乳頭皮膚消毒的應用。2.根據(jù)權利要求1所述的應用，其特征在于所述的聚六亞甲基胍為鹽酸聚六亞甲基胍、磷酸聚六亞甲基胍或硫酸聚六亞甲基胍。3.根據(jù)權利要求1所述的應用，其特征在于所述的聚六亞甲基雙胍為鹽酸聚六亞甲基雙胍、磷酸聚六亞甲基雙胍或硫酸聚六亞甲基雙胍。全文摘要本發(fā)明提供了聚六亞甲基胍、聚六亞甲基用于胍等聚陽離子類消毒劑在擠奶前后對奶牛乳頭皮膚進行消毒的新用途。此類消毒劑無毒、無刺激、無其它副作用、不影響奶牛產奶質量，適用于奶牛擠奶前后的消毒，可有效預防奶牛隱性乳房炎或臨床型乳房炎的發(fā)生。文檔編號A01N47/40GK101590075SQ20081001660公開日2009年12月2日申請日期2008年5月26日優(yōu)先權日2008年5月26日發(fā)明者濱劉,劉哲林,李玉新申請人:煙臺綠葉動物保健品有限公司