專利名稱：石斛屬的快速繁殖方法
石斛屬的快速繁殖方法所屬領(lǐng)域本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及石斛屬的快 速繁殖方法。
背景技術(shù)：
云南省是商品石斛主要產(chǎn)地之一，種類多，資源豐富(全國76種，云南58種，占全國種類的76.3%)。石斛藥材原植物包 含石斛屬植物39種，金石斛屬植物2種和石仙桃屬植物4種。石斛 類植物是常見名貴中藥材(具有滋陰清熱，生津益胃。潤肺止咳。明 目強(qiáng)身等功效)。人們長期無限制，掠奪性和毀滅性的采挖和近年來 大量深層次的研究開發(fā)(發(fā)現(xiàn)石斛屬許多種還具有抗腫瘤、抗衰老、 增強(qiáng)機(jī)體免疫力、擴(kuò)張血管及抗血小板凝集等作用)。再加上石斛屬 物種在自然界結(jié)實(shí)率低，種子因無胚乳，萌發(fā)率5%以下。遠(yuǎn)不能滿 足目前國內(nèi)外需求。我國和國際組織(IUCN)都明文規(guī)定，石斛屬為 禁止貿(mào)易的物種加以保護(hù)?，F(xiàn)有技術(shù)中未見有云南藥用石斛的快速繁 殖方法的報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容:.本發(fā)明的目的在于為石斛屬40種物種提供種苗快速 繁殖方法，為挽救瀕危的石斛類物種，使之成為可再生藥源，為石斛 類GAP種植提供數(shù)百萬優(yōu)良、 一致種苗的技術(shù)有參考和實(shí)用價(jià)值， 是目前保護(hù)和持續(xù)開發(fā)利用石斛類名貴中藥的多、快、好、省的對策。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案石斛屬的快速繁殖方法，取石斛果實(shí)內(nèi)種子或莖尖或帶腋芽的幼莖，果在純乙醇中沾一下，然后在酒精燈火焰上燃燒然后用于接種； 莖尖或幼莖在70%乙醇中浸一下，投入0.2%升汞8min，無菌水沖洗 干凈后接種在培養(yǎng)基中，待種子萌發(fā)或莖尖和幼莖長成擬原球莖，進(jìn) 行繼代培養(yǎng)大量增殖，然后將原球莖放在分化芽的培養(yǎng)基上，待芽條 高2-3cm時(shí)轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，待試管苗具4-5片伸展葉，根系正常， 高度達(dá)6cm及以上時(shí)，出瓶移栽。具體地，取野外采集或雜交授粉所結(jié)的果實(shí)，完整的果實(shí)在酒精 燈燃燒滅菌后，在無菌條件下將果皮打開，將種子播種在花寶1號 (N:P:K-7:6:19)3g丄"的瓊脂培養(yǎng)基上；而開裂果用尼龍布包裹散落種 子，在0.2MHgcl2中消毒6-8min，無菌水沖洗干凈后播種在花寶1號 (N:P:K-7:6:19)3g丄"的瓊脂培養(yǎng)基上；未成熟的果內(nèi)種子可播種在花 寶1號3 g丄"+NAAlmg丄"的瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)室溫度25士2。C，光 照強(qiáng)度為1500-2000Lx，光照12h/d，培養(yǎng)基PH為5，培養(yǎng)8-12天種 子由黃色轉(zhuǎn)綠，呈球形增大，基部有絲狀毛的原球莖，繼代培養(yǎng)在 1/2MS+NAAl+土豆泥3。/。+香蕉泥15%的瓊脂培養(yǎng)基上，30天后，分 化出lcm小芽和0.5cm叢芽，又經(jīng)過1-2個(gè)月的培養(yǎng)可得到高約2-3cm 芽條，轉(zhuǎn)入1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香蕉泥15%的生根壯苗培養(yǎng)基 培養(yǎng)l個(gè)月后加強(qiáng)光照至4000Lx，培養(yǎng)一個(gè)月，當(dāng)試管苗具4-5片仲 展葉，根系正常，高度達(dá)6cm時(shí)，即可出瓶供移栽，出瓶時(shí)清除根系 上的瓊脂，3-5株一叢種植，種植基質(zhì)有鋸末、樹皮、苔蘚和陶粒等， 基質(zhì)要用20:1的水:甲醛密封消毒24h或用熱蒸汽消毒，栽后放在蔭 蔽度70%大棚內(nèi)，棚內(nèi)溫度控制在2(TC-28'C，注意保濕和排水，7-15 天用1/10MS液噴施一次，待試管苗長出新根或新葉后便可定植，依石斛屬種類不同，l-3年均可收護(hù)。'具體地，將野外采集到的石斛屬莖尖或帶腋芽的幼莖切段滅菌后接種在1/2MS+NAAlmg丄"+土豆泥3。/。+香蕉泥15%的瓊脂培養(yǎng)基上， 培養(yǎng)室溫度保持為25±2°C，光照強(qiáng)度為1500-2000Lx，光照12h/d， 培養(yǎng)基PH為5，培養(yǎng)30-60天，腋芽處可抽生新枝，新枝可切割重復(fù) 培養(yǎng)，莖尖抽生新枝短呈叢芽狀，在上述培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，長成完 整試管苗供移栽；也可接種在1/2MS或1/2MS+BA0.5+NAA0.2的瓊 脂培養(yǎng)基上，外植體基部可分化出大量擬原球莖，擬原球莖在 1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香蕉泥15%的瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)30天后， 分化出lcm小芽和0.5cm叢芽，又經(jīng)過1-2個(gè)月的培養(yǎng)可得到高2-3cm 芽條，再轉(zhuǎn)入1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香蕉泥15%的生根壯苗培養(yǎng) 基培養(yǎng)1個(gè)月，此時(shí)光照加強(qiáng)至4000Lx，當(dāng)試管苗具4-5片伸展葉，' 根系正常，高度達(dá)6cm時(shí)，即可出瓶供移栽，出瓶時(shí)清除根系上的瓊 脂，3-5株一叢種植，種植基質(zhì)有鋸末、樹皮、苔蘚和陶粒等，基質(zhì) 要用20:1的水:甲醛密封消毒24h或用熱蒸汽消毒，栽后放在大棚內(nèi) 蔭蔽度70%，棚內(nèi)溫度控制在20。C-28。C，注意保濕和排水，7-15天 用1/10MS液噴施一次，待試管苗長出新根或新葉后，依石斛屬種類 不同，1_3年均可收護(hù)。上述方法所涉及的石斛屬種類優(yōu)選長蘇石斛Dendrobium brymerianum或球花石角斗D. chysiflorum或鼓槌石角斗D.chrysotoxume 或鐵皮石斛D.candidum或金釵石斛雜種選系D.phalaenosis xD.nobile 或短棒石斛D.capillipes或兜唇石斛D.aphyllum或束花石斛 D.chrysanthum或玫瑰石角斗D.crepidatum或疊鞘石角斗D.aurantiacum var.deuneanum或密花石角斗D.densiflorum &11蘇石角斗D.fimbriatum或棒節(jié)石斛D.findlayaiium美花石斛D.loddigesii或金釵石斛D.aobile 或長距石角斗D.longicorum或報(bào)春石角斗D.primulinum或大複銷石角斗 D.wardianum或霍山石角4 D.huoshanense或齒瓣石角斗D.devonianum 或矮石斛D.bellatulum或串珠石斛D.falooneri或疏花石斛D.henryi 或細(xì)莖石斛D.moniliforme或黑毛石斛D.williamsonii或喉紅石斛 D.christyanum 或晶帽石斛 D.crystallimun 或杯鞘石斛 D.gratiotissimum 或小黃花石角斗 D.jenkinsii 或蘇唇石斛 D.harveyanum 或橋L唇石角斗 D.strongylanthum 或尖刀唇石角斗 D,heterocarpum或啤!j叭唇石角斗D.lieniflomm或翅t(yī)更石斛D.trigonopiis 或草石斛 D.compactum或秋石斛 D.phalaenosis或石角斗屬一禾中 Dendrobium,sp.或叉唇石角斗D.stuposum或勐海石角斗D.minutiflorum 或腫節(jié)石斛D.pendulum。
具體實(shí)施例方式下面用本發(fā)明的實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并 不以此來限定本發(fā)明。實(shí)施例1: 1材料與方法 1.1供試材料[l]長蘇石角斗Dendrobium brymerianum西雙版納[2]球花石斛D.chysiflorum (2個(gè)居群)景洪、昆明[3]鼓槌石斛D.chrysotoxume (4個(gè)居群)勐海、保山、思茅、景洪[4]鐵皮石斛D.candidum (9個(gè)居群)廣南、思茅、文山(3個(gè)居群)浙江、盈江、安寧、小哨 [5]金釵石斛雜種選系D.phalaenosis xD.nobile:6]短棒石斛D.capillipes (2個(gè)居群)西雙版納、魯?shù)?7]兜唇石斛D.aphyllum (2個(gè)居群)騰沖、景洪 :8]束花石斛D.chrysanthum (3個(gè)居群)麗江、思茅、景洪 :9]玫瑰石斛D.crepidatum文山101疊鞘石角斗D.aurantiacum var.deuneanum (2個(gè)居群)昆明、勐海 ll]密花石斛D.densiflorum 12〗流蘇石斛D.fimbriatum (9個(gè)居群)緬甸、越南、高黎貢山、西雙 版納等棒節(jié)石斛D.fmdlayanum (2個(gè)居群)景洪、思茅 美花石斛D.loddigesii金釵石斛D.aobile (8個(gè)居群)石屏、景洪(2個(gè)居群)、勐臘、 保山、蘭坪、勐海、昆明 長距石角斗D.longicorum 報(bào)春石角4 D.primulinum大苞鞘石斛D.wardianum (2個(gè)居群)昆明、景洪 霍山石角斗D.huoshanense齒瓣石斛D.devonianum (2個(gè)居群)屏邊、景洪 矮石斛D.bellatulum (2個(gè)居群)文山、景洪 串珠石斛D.falooneri 疏花石角斗D.henryi細(xì)莖石斛D.moniliforme (2個(gè)居群)高黎貢山、麗江 黑毛石斛D.williamsonii 喉紅石斛D.christyanum昆明 晶帽石斛D.crystallimun (2個(gè)居群)騰沖、景洪[28]杯鞘石斛D.gratiotissimum (3個(gè)居群)魯?shù)?、景洪、思?[29]小黃花石斛D.jenkinsii (2個(gè)居群)文山、景洪 [30]蘇唇石斛D.harveyanum景洪 [31]梳唇石角斗D.strongylanthum[32]尖刀唇石斛D.heterocarpum (3個(gè)居群)昆明、景洪、思茅 [33]喇叭唇石斛D.lieniflorum (2個(gè)居群)騰沖、鎮(zhèn)康 [34〗翅梗石斛D.trigonopus[35]草石斛D.compactum (2個(gè)居群)思茅、騰沖 [36]秋石斛D.phalaenosis (2個(gè)居群)泰國、安寧 [37]石斛屬一種Dendrobium.sp.麻栗坡 [38]叉唇石斛D.stuposum [39]勐海石角4 D.minutiflorum [40]腫節(jié)石斛D.pendulum 1.2方法培養(yǎng)室溫度25士2。C,保存室溫度15-20°C ，光照強(qiáng)度為 1500-2000Lx，光照12h/d。培養(yǎng)基隨培養(yǎng)目的和不同發(fā)育階段有所不 同。培養(yǎng)基PH為5。外植體來源于石斛屬各種的果實(shí)內(nèi)種子或莖尖，果在純乙醇中沾 一下，然后在酒精燈火焰上燒后用于接種。莖尖或幼莖在70%乙醇中 浸一下，投入0.2n/。升汞8min左右，無菌水沖洗干凈后接種。 2結(jié)果2.1組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)在本發(fā)明收集保存的石斛屬40個(gè)種中，為了保持遺傳性穩(wěn)定和規(guī) ?；a(chǎn)目的采用了種子無菌培養(yǎng)和莖尖、莖節(jié)分生組織培養(yǎng)兩種方式。
2.1.1種子無菌培養(yǎng)
種子來源于野外采集和自己雜交授粉所結(jié)的果實(shí)。野外采集的開
裂果，收集種子用尼龍布包裹，在0.2MHgcl2中消毒7min，無菌水沖 洗干凈后播種在花寶1號(N:P:K-7:6:19)3gL-1"的瓊脂培養(yǎng)基上。完整 的果實(shí)在酒精燈燃燒滅菌后即可將果皮打開將種子播種在上述培養(yǎng) 基上。未成熟的果內(nèi)種子可播種在花寶1號3 g.L-1"+NAAlmg.L-1 (單 位下同)的瓊脂培養(yǎng)基上。石斛屬種子大多呈黃色，培養(yǎng)約10天左 右即可轉(zhuǎn)綠，增大，繼而長成頂端有葉尖或冒出的芽，基部有絲狀毛 的原球莖，顯示種子萌發(fā)且萌發(fā)率較高(達(dá)95%以上)。 2丄2分生組織培養(yǎng)
將野外采集到的石斛屬莖尖或帶腋芽的幼莖切段滅菌后接種在 1/2MS+NAAlmg.L-1"+土豆泥3%+香蕉泥15%的瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng) 30天左右，腋芽處可抽生新枝，新枝可切割重復(fù)培養(yǎng)，莖尖抽生新枝 短呈叢芽狀。在此培養(yǎng)基上，它們可長成完整試管苗，供移栽。
如果把莖尖和幼莖接種在1/2MS或1/2MS+BA0.5+NAA0.2的瓊脂 培養(yǎng)基上，外植體基部可分化出大量擬原球莖。擬原球莖在 1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香蕉泥15%的瓊脂培養(yǎng)基上，也可以長成 大苗供移栽。 2丄3繼代繁殖
石斛屬原球莖增殖速度30天至60天(依種量)平均可達(dá)1:6-10 倍，由5個(gè)人組成的生產(chǎn)車間，年產(chǎn)石斛試管苗可達(dá)120萬。
上一步驟原球莖和擬原球莖培養(yǎng)基培養(yǎng)30天左右，可得到 10%lcm小芽和10%0.5cm叢芽，又經(jīng)過1-2個(gè)月的培養(yǎng)可得到高約2-3cm芽條(占50%左右)，轉(zhuǎn)入生根壯苗培養(yǎng)基(1/2MS+NAAl+土 豆泥3%+香蕉泥15%)培養(yǎng)l個(gè)月后加強(qiáng)光照(4000Lx及以上)，培 養(yǎng)一個(gè)月左右，試管苗可達(dá)到移苗標(biāo)準(zhǔn)。整個(gè)生產(chǎn)周期月4.5個(gè)月到 6個(gè)月。
2丄4試管苗移栽
當(dāng)試管苗至少4-5片伸展葉根系正常，健康，高度達(dá)6cm左右時(shí)， 即可出瓶供移栽，出瓶時(shí)要小心不能折傷葉片和根尖，清除根系上的 瓊脂，3-5株一叢種植，種植基質(zhì)有鋸末、樹皮、苔蘚和陶粒等，基 質(zhì)要用20:1的水甲醛密封消毒24h或用熱蒸汽消毒。栽后放在大棚 內(nèi)蔭蔽度約70%，棚內(nèi)溫度控制在20°C-28°C，注意保濕和排水。待 試管苗長出新根或新葉后，7-15天用1/10MS液，噴施一次，促進(jìn)幼 苗生長，和提前收護(hù)。依石斛屬種類不同一般l-3年均可收護(hù)。
本發(fā)明的方法可概括為取野外采集或雜交授粉所結(jié)的石斛屬果 實(shí)，完整的果實(shí)在酒精燈燃燒滅菌后，在無菌條件下將果皮打開，將 種子播種在花寶1號(N:P:K-7:6:19)3g丄"的瓊脂培養(yǎng)基上；而開裂果 用尼龍布包裹散落種子，在0.2y。Hgcl2中消毒6-8min，無菌水沖洗干 凈后播種在花寶1號(N:P:K-7:6:19)3g丄"的瓊脂培養(yǎng)基上；未成熟的 果內(nèi)種子可播種在花寶1號3 g丄"+NAAlmg丄"的瓊脂培養(yǎng)基上，培 養(yǎng)室溫度25士2。C，光照強(qiáng)度為1500-2000Lx，光照12h/d，培養(yǎng)基PH 為5，培養(yǎng)8-12天種子由黃色轉(zhuǎn)綠，呈球形增大，基部有絲狀毛的原 球莖，繼代培養(yǎng)在1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香蕉泥15%的瓊脂培養(yǎng) 基上，30天后，分化出lcm小芽和0.5cm叢芽，又經(jīng)過l-2個(gè)月的培 養(yǎng)可得到高約2-3cm芽條，轉(zhuǎn)入1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香蕉泥15% 的生根壯苗培養(yǎng)基培養(yǎng)l個(gè)月后加強(qiáng)光照至4000Lx，培養(yǎng)一個(gè)月，當(dāng)試管苗具4-5片伸展葉，根系正常，高度達(dá)6cm時(shí)，即可出瓶供移栽， 出瓶時(shí)清除根系上的瓊脂，3-5株一叢種植，種植基質(zhì)有鋸末、樹皮、 苔蘚和陶粒等，基質(zhì)要用20:1的水:甲醛密封消毒24h或用熱蒸汽消 毒，栽后放在蔭蔽度70%大棚內(nèi)，棚內(nèi)溫度控制在20°C-28°C，注意 保濕和排水，7-15天用1/10MS液噴施一次，待試管苗長出新根或新 葉后便可定植，依石斛屬種類不同，l-3年均可收護(hù)。
本發(fā)明的方法可概括為將野外采集到的石斛屬莖尖或帶腋芽的 幼莖切段滅菌后接種在1/2MS+NAAlmg丄"+土豆泥3%+香蕉泥15% 的瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)室溫度保持為25±2°C，光照強(qiáng)度為 1500-2000Lx，光照12h/d，培養(yǎng)基PH為5，培養(yǎng)30-60天，腋芽處可 抽生新枝，新枝可切割重復(fù)培養(yǎng)，莖尖抽生新枝短呈叢芽狀，在上述 培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，長成完整試管苗供移栽；也可接種在1/2MS或 1/2MS+BA0.5+NAA0.2的瓊脂培養(yǎng)基上，外植體基部可分化出大量擬 原球莖，擬原球莖在1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香蕉泥15%的瓊脂培 養(yǎng)基上培養(yǎng)30天后，分化出lcm小芽和0.5cm叢芽，又經(jīng)過1-2個(gè) 月的培養(yǎng)可得到高2-3cm芽條，再轉(zhuǎn)入1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香 蕉泥15%的生根壯苗培養(yǎng)基培養(yǎng)1個(gè)月，此時(shí)光照加強(qiáng)至4000Lx，當(dāng) 試管苗具4-5片伸展葉，根系正常，高度達(dá)6cm時(shí)，即可出瓶供移栽， 出瓶時(shí)清除根系上的瓊脂，3-5株一叢種植，種植基質(zhì)有鋸末、樹皮.、 苔蘚和陶粒等，基質(zhì)要用20:1的水:甲醛密封消毒24h或用熱蒸汽消 毒，栽后放在大棚內(nèi)蔭蔽度70%，棚內(nèi)溫度控制在20°C-28°C，注意 保濕和排水，7-15天用1/10MS液噴施一次，待試管苗長出新根或新 葉后，依石斛屬種類不同，l-3年均可收護(hù)。
權(quán)利要求
1、石斛屬的快速繁殖方法，其特征在于取石斛果實(shí)內(nèi)種子或莖尖或帶腋芽的幼莖，果在純乙醇中沾一下，然后在酒精燈火焰上燃燒然后用于接種；莖尖或幼莖在70％乙醇中浸一下，投入0.2％升汞8min，無菌水沖洗干凈后接種在培養(yǎng)基中，待種子萌發(fā)或莖尖和幼莖長成擬原球莖，進(jìn)行繼代培養(yǎng)大量增殖，然后將原球莖放在分化芽的培養(yǎng)基上，待芽條高2-3cm時(shí)轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，待試管苗具4-5片伸展葉，根系正常，高度達(dá)6cm及以上時(shí)，出瓶移栽。
2、 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于取野外采集或雜交授粉 所結(jié)的果實(shí)，完整的果實(shí)在酒精燈燃燒滅菌后，在無菌條件下將果皮 打開，將種子播種在花寶1號(N:P:K-7:6:19)3g丄"的瓊脂培養(yǎng)基上； 開裂果，用尼龍布包裹散落種子，在0.2MHgcl2中消毒6-8min，無菌 水沖洗干凈后播種在花寶1號(N:P:K-7:6:19)3g丄"的瓊脂培養(yǎng)基上； 未成熟的果內(nèi)種子可播種在花寶1號3 g丄"+NAAlmg丄'1的瓊脂培養(yǎng) 基上，培養(yǎng)室溫度25士2。C，光照強(qiáng)度為1500-2000Lx，光照12h/d， 培養(yǎng)基PH為5，培養(yǎng)8-12天種子由黃色轉(zhuǎn)綠，呈球形增大，基部有 絲狀毛的原球莖，繼代培養(yǎng)在1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香蕉泥15% 的瓊脂培養(yǎng)基上，30天后，分化出lcm小芽和0.5cm叢芽，又經(jīng)過 1-2個(gè)月的培養(yǎng)可得到高約2-3cm芽條，轉(zhuǎn)入1/2MS+NAAl+土豆泥 3%+香蕉泥15%的生根壯苗培養(yǎng)基培養(yǎng)1個(gè)月后加強(qiáng)光照至4000Lx， 培養(yǎng)一個(gè)月，當(dāng)試管苗具4-5片伸展葉，根系正常，高度達(dá)6cm時(shí)，即可出瓶供移栽，出瓶時(shí)清除根系上的瓊脂，3-5株一叢種植，種植 基質(zhì)有鋸末、樹皮、苔蘚和陶粒等，基質(zhì)要用20:1的水:甲醛密封消 毒24h或用熱蒸汽消毒，栽后放在蔭蔽度70%大棚內(nèi)，棚內(nèi)溫度控制 在20。C-28。C，注意保濕和排水，7-15天用1/10MS液噴施一次，待試 管苗長出新根或新葉后便可定植，依石斛屬種類不同，1-3年均可收 護(hù)。
3、如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于將野外采集到的石斛屬 莖尖或帶腋芽的幼莖切段滅菌后接種在1/2MS+NAAlmg丄"+土豆泥 3%+香蕉泥15%的瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)室溫度保持為25士2'C，光照強(qiáng) 度為1500-2000Lx，光照12h/d，培養(yǎng)基PH為5，培養(yǎng)30-60天，腋 芽處可抽生新枝，新枝可切割重復(fù)培養(yǎng)，莖尖抽生新枝短呈叢芽狀， 在上述培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，長成完整試管苗供移栽;也可接種在1/2MS 或1/2MS+BA0.5+NAA0.2的瓊脂培養(yǎng)基上，外植體基部可分化出大量 擬原球莖，擬原球莖在1/2MS+NAAl+土豆泥3%+香蕉泥15%的瓊脂 培養(yǎng)基上培養(yǎng)30天后，分化出lcm小芽和0.5cm叢芽，又經(jīng)過1-2 個(gè)月的培養(yǎng)可得到高2-3cm芽條，再轉(zhuǎn)入1/2MS+NAAl+土豆泥3%+ 香蕉泥15%的生根壯苗培養(yǎng)基培養(yǎng)1個(gè)月，此時(shí)光照加強(qiáng)至4000Lx， 當(dāng)試管苗具4-5片伸展葉，根系正常，高度達(dá)6cm時(shí)，即可出瓶供移 栽，出瓶時(shí)清除根系上的瓊脂，3-5株一叢種植，種植基質(zhì)有鋸末、 樹皮、苔蘚和陶粒等，基質(zhì)要用20:1的水:甲醛密封消毒24h或用熱 蒸汽消毒，栽后放在大棚內(nèi)蔭蔽度70%，棚內(nèi)溫度控制在2(TC-28'C， 注意保濕和排水，7-15天用1/10MS液噴施一次，待試管苗長出新根 或新葉后，依石斛屬種類不同，l-3年均可收護(hù)。4、如權(quán)利要求1或2或3所述的方法，其特征在于所述石斛種 類優(yōu)選長蘇石角斗Dendrobium brymerianum或球花石角斗D. chysiflorum 或鼓槌石斛D.chrysotoxume或鐵皮石斛D.candidum或金釵石斛雜 種選系D.phalaenosis xD.nobile或短棒石斛D.capillipes或兜唇石斛 D.aphyllum或束花石角斗D.chrysanthum或玫瑰石角斗D.crepidatum或 疊鞘石角斗D.aurantiacum var.deuneanum或密花石斛D.densiflorum流 蘇石斛 D.fimbriatum或棒節(jié)石斛 D.fmdlayanum美花石斛 D.loddigesii或金釵石斛D.aobile或長距石斛D.longicorum或報(bào)春 石斛 D.primulinum或大苞鞘石斛 D.wardianum或霍山石斛 D.huoshanense或齒瓣石角斗D.devonianum或矮石斛D.bellatulum或 串珠石斛 D.falooneri或疏花石斛 D.henryi或細(xì)莖石斛 D.moniliforme或黑毛石角斗D.williamsonii或喉紅石角斗D.christyanum 或晶帽石角斗D.crystallimun或杯鞘石角斗D.gratiotissimum或小黃花石 角斗 D.jenkinsii 或蘇唇石角斗 D.harveyanum 或*荒唇石角斗 D.strongylanthum或尖刀唇石斛 D.heterocatpum或喇叭唇石角斗 D.lieniflorum或翅梗石角斗D.trigonopus或草石斛D.compactum或秋 石角斗 D.phalaenosis或石角斗屬——種 Dendrobium.sp. 或叉唇石角斗 D.stuposum或動(dòng)海石角斗D.minutiflorum或月中節(jié)石角斗D.pendulum。
全文摘要
石斛屬的快速繁殖方法，取石斛果實(shí)內(nèi)種子或莖尖或帶腋芽的幼莖，果在純乙醇中沾一下，然后在酒精燈火焰上燃燒然后用于接種；莖尖或幼莖在70％乙醇中浸一下，投入0.2％升汞8min，無菌水沖洗干凈后接種在培養(yǎng)基中，待種子萌發(fā)或莖尖和幼莖長成擬原球莖，進(jìn)行繼代培養(yǎng)大量增殖，然后將原球莖放在分化芽的培養(yǎng)基上，待芽條高2-3cm時(shí)轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，待試管苗具4-5片伸展葉，根系正常，高度達(dá)6cm及以上時(shí)，出瓶移栽。
文檔編號A01H4/00GK101213940SQ20081005804
公開日2008年7月9日 申請日期2008年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月18日
發(fā)明者程治英, 羅吉鳳, 龍春林 申請人:中國科學(xué)院昆明植物研究所