專利名稱：：彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖及其培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種馬蹄蓮球莖及其培育方法，具體地說是一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖及其培育方法。技術(shù)背景馬蹄蓮Z朋z^fec力j'aaez^z'o/w'ca(Callalily)，天南星科，馬蹄蓮屬多年生草本。不同種的馬蹄蓮可歸為兩群(l)植株莖葉在原產(chǎn)地冬季不落葉，退化的雄蕊散布在肉穗花序下部雌花中，漿果成熟時(shí)變?yōu)槌壬⑹燔浻姓承?，以Z3eMi，^3種為代表，Za"力^w'cs具有長(zhǎng)形、有分枝的地下莖，開白花，泛稱為白花馬蹄蓮；(2)植株莖葉在原產(chǎn)地冬季落葉，無退化的雄蕊散布在肉穗花序的下部雌花中，成熟的漿果堅(jiān)硬綠色，地下莖為緊湊的盤形(Earl，1957)，具有彩色的花苞，統(tǒng)稱為彩色馬蹄蓮。馬蹄蓮U^^et/esc力ia)葉片與花，雅致大方，可用作盆花、切花，還可扎成花束、花籃和花圈等。其葉片形狀多樣，上面分布的特有斑點(diǎn)也具有很高的觀賞價(jià)值。國外己普遍采用組培技術(shù)工廠化生產(chǎn)彩色馬蹄蓮種苗，其優(yōu)點(diǎn)在于植株長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、開花整齊、產(chǎn)花量高，能保持原品種的性狀、繁殖速度快、便于管理。種苗生產(chǎn)包括如下步驟外植體消毒獲得無菌培養(yǎng)材料，叢生芽誘導(dǎo)和繼代擴(kuò)繁，生根苗生產(chǎn)，生根苗馴化。其中外植體消毒是非常關(guān)鍵的環(huán)節(jié)?，F(xiàn)有滅菌法均為一次滅菌方法，且均是使用升汞進(jìn)行滅菌，滅菌效果最高只能達(dá)到20%左右，且升汞為劇毒物品，使用升汞作為消毒劑對(duì)操作人員非常不安全，且長(zhǎng)期使用會(huì)對(duì)環(huán)境造成極大的污染。在現(xiàn)有技術(shù)對(duì)馬蹄蓮微型種球進(jìn)行試管快繁的過程中也有人提出過二次消毒，但其僅是增加了一次消毒，同樣是使用升汞進(jìn)行，因此雖然消毒效果比一次消毒好，但其還是無法解決升汞替代的問題。在自然條件下，從組培苗到形成開花球需要2年，不同品種彩色馬蹄蓮組培苗都可以經(jīng)過2個(gè)栽培周期可形成直徑4cm以上的開花種球。球根花卉試管成球技術(shù)是解決組培苗移栽成活率低，減少病毒感染的有效途徑，但并不是所有品種都適合用該方法，原因是有些品種試管成球產(chǎn)量很低，甚至很難成球。與白花馬蹄蓮(Z3eMiopica)不同，彩色馬蹄蓮(ZAr力wVs)屬旱生型花卉，基質(zhì)要求排水良好，不含病原體。pH為6.06.5。pH〉7.5，環(huán)境溫度過高，通風(fēng)不良等因素增加細(xì)菌性軟腐病的感染機(jī)率。彩色馬蹄蓮屬于需肥較少的花卉。特別要求水質(zhì)清潔，不含真菌。發(fā)根階段有規(guī)律的澆水十分重要。生長(zhǎng)適溫白天為18。C25。C，夜間13"C16'C，基質(zhì)溫度不要超過25°C，生根階段理想溫度是16°C。炎熱季節(jié)可通過遮蔭、通風(fēng)進(jìn)行降溫，遮蔭度為30%50%，光照不足時(shí)，有些紅花品種花朵著色不良，商品品質(zhì)降低。危害馬蹄蓮的主要蟲害是蚜蟲和薊馬，其危害一方面能傳播病毒，另一方面在佛焰苞上留下病斑，降低商品價(jià)值。我國引進(jìn)和種植彩色馬蹄蓮的時(shí)間不長(zhǎng)，對(duì)其栽培技術(shù)研宄處于起步階段，但也取得了可喜的研究進(jìn)展。由于彩色馬蹄蓮花型獨(dú)特，花色豐富亮麗，深受消費(fèi)者的喜愛，近年來已成為世界性新興而具有發(fā)展?jié)摿Φ那蚋ɑ?。彩色馬蹄蓮種球采收后，要經(jīng)過812周的休眠期才能正常生長(zhǎng)。采收處理方法和貯藏條件直接影響種球的萌芽整齊度，生長(zhǎng)勢(shì)和能否正常開花。目前國內(nèi)采用的貯藏方法一般最多可貯藏6個(gè)月。
發(fā)明內(nèi)容為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明人經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的摸索實(shí)驗(yàn)最終得到一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖及其培育方法。本發(fā)明的目的在于提供一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖，本發(fā)明的另一目的在于提供上述優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下具體技術(shù)方案本發(fā)明提供一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖，其于年月日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心CGMCC(地址北京市朝陽區(qū)大屯路，郵編100101，電話010-64807355)。保藏日2008年4月15日；保藏編號(hào)CGMCCNo.2457;建議的分類命名為銀星馬蹄蓮(Za/^eofesr力iaWZ^57scWa^3)上述的彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其包括以下步驟(1)外植體的選擇(2)無菌材料的獲得(3)彩色馬蹄蓮叢生芽擴(kuò)繁繼代(4)彩色馬蹄蓮生根苗生產(chǎn)(5)彩色馬蹄蓮生根苗馴化。以上步驟均為公知步驟，在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上其中本發(fā)明的發(fā)明點(diǎn)在于步驟(2)無菌材料的獲得的方法改進(jìn)，本發(fā)明是采用二次滅菌法，具體二次滅菌的具體滅菌方法是先將塊莖刷洗干凈，操作時(shí)避免損傷芽和芽眼。刮去芽周圍的表皮，挖取0.5cm'!左右的芽塊用自來水沖洗，將材料用75%酒精消毒lmin，用滅菌水沖洗，再用5%~10%次氯酸鈉液(100ml加吐溫2滴)消毒510min，用滅菌水沖洗2遍，逐個(gè)切除外層組織2~3層，再次用5%10°/。次氯酸鈉液消毒lmin，用滅菌水沖洗3遍，于吸水紙上瀝干多余的水分后，接種在基本培養(yǎng)基上。2周后進(jìn)一步挑選沒污染的材料要轉(zhuǎn)入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中。誘導(dǎo)率為100%。培養(yǎng)30天后轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基上?；九囵B(yǎng)基配方為MS，3%蔗糖，pH5.8。培養(yǎng)條件為2225。C恒溫，光照12h，25003500LX。誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS，BA12mg*L_1+NAA0.11.0mg'L—i或IAAO.32.0mg'L—'，3%蔗糖，pH5.8。培養(yǎng)條件為2225t:恒溫，光照12h，25003500LX。繼代培養(yǎng)基為:MS，BAO.11mg'L—'+NAA0.10.5mg'L—1或IAAO.12.0mg*L—'，3%蔗糖，pH5.8。培養(yǎng)條件為2225。C恒溫，光照12h，25003500LX。上述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，還包括步驟(6)彩色馬蹄蓮一年生籽球的培育，本發(fā)明在此步驟(6)中基質(zhì)采用的是無土固體混合基質(zhì)，基質(zhì)成分泥炭和珍珠巖(直徑0.3ram以上大顆粒)按2:1的比例混合均勻；栽植床厚度為15cm25cm，寬度為lm1.2m。在種植前無土固體混合基質(zhì)需用復(fù)合殺菌劑溶液噴灑；所述復(fù)合殺菌劑溶液為70%多菌靈500倍溶液與40%農(nóng)用鏈霉素1000倍液按1:1比例混合的溶液，每平方米噴灑藥液510L。上述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其中步驟(6)彩色馬蹄蓮一年生籽球的培育在栽種過程中定植3周后開始施肥，施肥管理分為前期、中期和后期。前期施肥配方硝酸鈣300700克，硝酸鉀100500克，硝酸銨200650克，硫酸鎂150450克，磷酸二氫鉀100300克，微肥1530克兌水1000公斤。中期施肥配方硝酸鈣300700克，硝酸鉀200600克，硝酸銨150450克，硫酸鎂100450克，磷酸二氫鉀150450克，微肥1530克兌水1000公斤。后期施肥配方硝酸鈣300700克，硝酸鉀200600克，硝酸銨100300克，硫酸鎂100450克，磷酸二氫鉀200600克，微肥1530克兌水1000公斤。所述的施肥最佳配方為前期施肥配方硝酸鈣600克，硝酸鉀300克，硝酸銨500克，硫酸鎂300克，磷酸二氫鉀200克，微肥22克兌水1000公斤。中期施肥配方硝酸鈣600克，硝酸鉀400克，硝酸銨300克，硫酸鎂300克，磷酸二氫鉀300克，微肥22克兌水1000公斤。后期施肥配方硝酸鈣600克，硝酸鉀400克，硝酸銨200克，硫酸鎂300克，磷酸二氫鉀400克，微肥22克兌水1000公斤。上述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其中，步驟(6)培育的一年生籽球需在515°C，相對(duì)濕度70%80%條件下貯藏。上述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其中，所述珍珠巖為直徑0.3mm以上大顆粒珍珠巖，采用0.3mm以上大顆粒珍珠巖的作用是增加栽培介質(zhì)的排水性和透氣性且不含病原微生物。上述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其中，還包括步驟(7)彩色馬蹄蓮二年生籽球的培育，其采用無土固體混合基質(zhì)，泥炭和珍珠巖(直徑O.3mm以上大顆粒)按2:1的比例混合均勻；在種植前無土固體混合基質(zhì)用復(fù)合殺菌劑溶液噴灑；所述復(fù)合殺菌劑溶液為70%多菌靈稀釋500倍溶液與40%農(nóng)用鏈霉素稀釋1000倍液按1:1比例混合的溶液。上述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其中，所述步驟(7)培育的彩色馬蹄蓮二年生籽球在貯藏前需放于陰涼通風(fēng)處貯燥，本發(fā)明的為了促使球莖表面快速干燥，將球莖攤開放置于層架上，在1(TC25"C恒溫環(huán)境條件下用排風(fēng)扇吹干球莖至讓根系自行脫落為止；后在515。C，相對(duì)濕度70%80%條件下貯藏。本發(fā)明的方法為人工培養(yǎng)方法，每步驟均有固定的條件和評(píng)選標(biāo)準(zhǔn)，本領(lǐng)域技術(shù)人員只要按照本發(fā)明所述方法進(jìn)行均可以得到本發(fā)明所述效果的彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖，不存在隨機(jī)性問題。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及有益效果本發(fā)明制備的彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖與現(xiàn)有技術(shù)制備的球莖相比較，貯藏時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)長(zhǎng)于現(xiàn)有球莖的貯藏時(shí)間，現(xiàn)有技術(shù)在貯藏6個(gè)月以后球莖栽種后開花不齊，會(huì)直接影響盆花和切花的商品性。本發(fā)明所述的彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖可貯藏時(shí)間達(dá)到10個(gè)月以上，使周年提供球莖用于生產(chǎn)盆花、切花成為可能。本發(fā)明制備方法與現(xiàn)有技術(shù)比較其顯著的優(yōu)點(diǎn)具體地說是釆用對(duì)環(huán)境沒有污染和對(duì)操作人員更安全的消毒劑，且本發(fā)明特有的二次滅菌方法，明顯提高了滅菌的效果，本發(fā)明使用的低毒消毒劑的二次滅菌方法比現(xiàn)有滅菌方法滅菌效果提高近10%，達(dá)到33.6%，且避免長(zhǎng)期消毒使用升汞作為消毒劑，該方法對(duì)操作人員安全且不造成對(duì)環(huán)境的污染。由彩色馬蹄蓮生根苗培育出一代子球的成球率高；由子球培育開花球莖由于采用了無土固體混合基質(zhì)和相應(yīng)的消毒方法，有效的防止了腐爛病的發(fā)生；通過配方施肥可提供合理的種球生長(zhǎng)不同時(shí)期對(duì)養(yǎng)分的需要，并可以有效防止栽培介質(zhì)中鹽分的積累；采用合理的采收方法和貯藏手段，不同規(guī)格的球莖萌芽和生長(zhǎng)的一致性好，球莖整齊度高，由于本發(fā)明采用的無土固體混合基質(zhì)質(zhì)地輕且疏松，采收時(shí)省力、球莖表皮不易受損，因此較含土栽培方式生長(zhǎng)的球莖表皮光潔，特別有利于球莖的長(zhǎng)期貯藏的需要。具體實(shí)施例方式實(shí)施地北京蔬菜研究中心基地實(shí)施日期2005年3月至2007年11月材料及其來源滅菌水去離子水經(jīng)過121°C126°C，壓力0.11MPa滅菌2030min抗蚜威北京市植物保護(hù)公司有售溴氰菊酯北京巿植物保護(hù)公司有售活性炭北京中關(guān)村試劑商店有售殺菌劑藥液(成分)70%多菌靈可濕性粉劑(北京市植物保護(hù)公司有售)稀釋1000倍的溶液敵克松北京市植物保護(hù)公司有售退菌特北京市植物保護(hù)公司有售一、彩色馬蹄蓮組培苗的繁殖1、外植體的選擇選取外觀健康、飽滿、無病變、無霉變、直徑》4cm的球莖上的吸芽為外植體。本具體實(shí)施方式選擇的品種為銀星馬蹄蓮(ZSj/^77ac"^3&)，其他品種也可。(一般彩色馬蹄蓮?fù)庵搀w本領(lǐng)域技術(shù)人員可以通過購買獲得，市場(chǎng)均有銷售)本發(fā)明關(guān)鍵在于培育方法，外植體的選擇只要符合上述標(biāo)準(zhǔn)即可。2、無菌材料的獲得因接種材料為球莖，消毒較為困難。本方法采用二次滅菌法獲得無菌外植體的成功率更高。二次滅菌的具體滅菌方法是先將步驟l中的外植體刷洗干凈，操作時(shí)避免損傷芽和芽眼。刮去芽周圍的表皮，挖取0.5cm3左右的芽塊用自來水沖洗，將材料用75%酒精消毒lmin，用滅菌水(去離子水經(jīng)過121。C126。C，壓力0.llMPa滅菌2030min)沖洗，再用5%10%次氯酸鈉液(100ml加吐溫2滴)消毒510min，用滅菌水沖洗2遍，逐個(gè)切除外層組織2只3層，再次用5%10%次氯酸鈉液消毒l5rain，用滅菌水沖洗3遍，于吸水紙上瀝干多余的水分后，接種在基本培養(yǎng)基上。2周后沒污染的材料要轉(zhuǎn)入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中。誘導(dǎo)率為100%。培養(yǎng)30天后轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基上?；九囵B(yǎng)基為MS，3%蔗糖，pH5.8。培養(yǎng)條件為2225r恒溫，光照12h，25003500LX。誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS，BA12mg'L—、NAA0.10.5mg'L/或IAAO.31,0mg'L—1，3%蔗糖，pH5.8。培養(yǎng)條件為2225。C恒溫，光照12h，25003500LX。3、彩色馬蹄蓮叢生芽擴(kuò)繁繼代每2530天繼代一次。繼代培養(yǎng)基為MS，BA0.11mg*L—'+NAA0.10.5mg'L—'或IAA0.10.5mg*L—'，3%蔗糖，pH5.8。培養(yǎng)條件為2225。C恒溫，光照12h，25003500LX。繼代20次后更換新的外植體材料。4、彩色馬蹄蓮生根苗生產(chǎn)將步驟3繼代培養(yǎng)芽高達(dá)到2cm的健壯植株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)。生根率為100%。15天左右生根lcm左右。生根培養(yǎng)基為1/2MS，NAA0.10.5mg.L—'+IAA0.10.5rag'L—'或IBA0.l0.5mg'L—\3%蔗糖，0.1%0,5%活性炭，pH5.8。培養(yǎng)條件為2325°C，光照12h，25003500LX。5、彩色馬蹄蓮生根苗馴化采用的基質(zhì)要經(jīng)過消毒，保證不含有病原。要求基質(zhì)疏松、透氣和具有一定的保水性能?；|(zhì)為草炭珍珠巖為2:i的混合成分，另加入10%(v/v)左右蛭石可增加基質(zhì)的保水性，混合均勻后填入苗床或育苗盤備用。將步驟4培養(yǎng)的生根lcra左右的生根苗根部附著的培養(yǎng)基徹底清洗干凈，操作時(shí)盡量避免損傷根系。清洗干凈的生根苗用殺菌劑藥液(成分70%多菌靈可濕性粉劑北京市植物保護(hù)公司有售)浸泡1520分鐘，取出后進(jìn)行移栽。栽植時(shí)用工具插孔，然后將小苗舒展根系后植入，不宜過深，以基質(zhì)蓋住幼苗基部為宜，種后采用殺菌劑結(jié)合定根水澆灌進(jìn)行消毒。栽植密度為每平方米600800株苗或使用72穴或128穴穴盤栽植。在光照、溫度、濕度可調(diào)控的溫室進(jìn)行。相對(duì)濕度為60%90%，光照時(shí)間1216h，光強(qiáng)為300010000LX。適宜環(huán)境溫度為1825°C。通過通風(fēng)進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)。馴化三周以后逐漸增加光照時(shí)間和光強(qiáng)。定植前期應(yīng)經(jīng)常噴霧以保持80%90%的環(huán)境相對(duì)濕度，保持介質(zhì)濕潤(rùn)但不宜過濕。定植4周后，待根系恢復(fù)開始生長(zhǎng)時(shí)，進(jìn)行常規(guī)的水分管理。別l化34周后新根開始生長(zhǎng)時(shí)，需要進(jìn)行根外施肥，n:p:K比為2:i:i，濃度為0.3%0.5%，采用先低后高的原則。避免使用高濃度的氨態(tài)氮肥。710天施肥一次。病菌危害要以預(yù)防為主。要使環(huán)境條件達(dá)到以上要求。每23周澆灌一次殺菌劑(農(nóng)用鏈霉素2000倍的稀釋溶液)。一般46周后苗高達(dá)到苗高5cm以上，葉片數(shù)3片以上，新生根2條以上。彩色馬蹄蓮球莖的培育方法6、一年生籽球的培育方法①設(shè)施的準(zhǔn)備可采用塑料大棚或日光溫室進(jìn)行栽培，保證各地種植彩色馬蹄蓮球莖生長(zhǎng)期的要求；需要安裝防蟲網(wǎng)便于通風(fēng)和害蟲的進(jìn)入；便于水分的管理，特別是雨季集中的夏季，在保護(hù)地栽培的條件下對(duì)預(yù)防腐爛病的發(fā)生至關(guān)重要。②基質(zhì)的準(zhǔn)備基質(zhì)應(yīng)疏松，透氣性、排水良好。本方法采用無土固體混合基質(zhì)，泥炭和珍珠巖(直徑0.3mm以上大顆粒)按2:1的比例混合。要求土壤微酸性，PH值5.06.5之間。將配好的基質(zhì)填入預(yù)先做好的寬L01.2m，深1520cm的畦中。新基質(zhì)一般不需要進(jìn)行消毒，對(duì)重復(fù)使用的基質(zhì)必須進(jìn)行消毒后才能使用。具體操作方法是首先，用潔凈水噴灑使基質(zhì)濕潤(rùn)，用地膜將基質(zhì)床面覆蓋，將塑料大棚或日光溫室塑料棚膜密閉，利用自然光照進(jìn)行悶棚消毒，通常晴天白天棚內(nèi)或溫室內(nèi)溫度可達(dá)到6(TC以上，保持1020天。該方法可在塑料大棚和日光溫室閑置的時(shí)間隨時(shí)進(jìn)行。種植前去掉畦面覆蓋的地膜，用復(fù)合殺菌劑溶液噴灑基質(zhì)。復(fù)合殺菌劑溶液為70%多菌靈500倍溶液與40%農(nóng)用鏈霉素1000倍液按l:1比例混合的溶液。③栽種水分管理:環(huán)境溫度為1525T:時(shí)可以進(jìn)行栽種。栽植密度為每平方米200250苗。起苗時(shí)忌傷根。在定植后采用敵克松退菌特=6:4混合按1000倍溶液處理或福美雙800倍液定根水一同澆入。澆水應(yīng)在上午910點(diǎn)進(jìn)行，澆水要均勻有規(guī)律，忌過干和過濕，在高溫季節(jié)特別是相對(duì)濕度大于70%的環(huán)境條件下易發(fā)生腐爛病，要注意控水，采取一次性澆透，讓基質(zhì)表面干透12cm再澆為宜，同時(shí)也可以在土壤表面覆蓋12cra的鋸末或腐葉土來降溫保溫，這樣可以緩和溫濕度的變化，減少病害的發(fā)生。栽種4個(gè)月后，依據(jù)氣候條件不同，球莖開始進(jìn)入休眠的時(shí)間不同。北方地區(qū)進(jìn)入9月份以后，氣溫幵始下降，彩色馬蹄蓮幵始逐步進(jìn)入休眠期，葉片養(yǎng)分向地下部分的轉(zhuǎn)移的積累，這時(shí)要減少澆水的頻率直至停止?jié)补?。施肥管理剛定植的種苗在根系恢復(fù)和發(fā)根萌芽階段可以不需施肥，定植3周后開始施肥。前期(36周)n、p、k比為2:1:1，避免使用高濃度的氨態(tài)肥，每io天一次，中期苗健壯時(shí)適當(dāng)增加。中期(714周)n、p、k比為i，后期(1520周)n、p、k比為1:3:2，施肥應(yīng)考慮與水分管理相協(xié)調(diào)；采用葉面噴施，施肥后立即澆水沖洗葉面，防止燒葉，球莖采收前60天停止施肥。最好在生長(zhǎng)階段，采集基質(zhì)樣品進(jìn)行分析，了解施肥水平，及時(shí)調(diào)整。既要保證生長(zhǎng)的需要，又要防止鹽分的積累。夏季高溫季節(jié)，適當(dāng)減少施肥量。前期施肥配方硝酸鈣600克，硝酸鉀300克，硝酸銨500克，硫酸鎂300克，磷酸二氫鉀200克，微肥22克兌水1000公斤。中期施肥配方硝酸鈣600克，硝酸鉀400克，硝酸銨300克，硫酸鎂300克，磷酸二氫鉀300克，微肥22克兌水1000公斤。后期施肥配方硝酸鈣600克，硝酸鉀400克，硝酸銨200克，硫酸鎂300克，磷酸二氫鉀400克，微肥22克兌水iooo公斤。光照管理定植初期需要50%60%的遮蔭，便于溫度的控制，34周后可去掉遮蔭網(wǎng)。發(fā)明人提示本領(lǐng)域技術(shù)人員值得注意的是病害防治彩色馬蹄蓮球莖培育過程中，危害最嚴(yán)重的主要病害是細(xì)菌性軟腐病。主要在夏天高溫高濕的雨季發(fā)生和流行，這段時(shí)間是防治的關(guān)鍵時(shí)期。防治方法首先在定植前作好基質(zhì)的消毒。在生產(chǎn)栽培過程中，要以預(yù)防為主，在雨季前和雨季后每隔1520天打一次農(nóng)用鏈霉素或70%的甲基托布津，雨季710天一次，特別注意在長(zhǎng)時(shí)間下雨轉(zhuǎn)晴后一定要打一次農(nóng)藥防治病害發(fā)生，同時(shí)可將可殺得、農(nóng)用鏈霉素、掃細(xì)等輪換使用。發(fā)現(xiàn)病株要及時(shí)清除。同時(shí)需要降溫、加強(qiáng)通風(fēng)、水肥的綜合管理才能收到好的預(yù)防效果。蟲害防治基質(zhì)床下鋪地布和在種植前用11.5公斤/畝的巴丹或呋喃丹進(jìn)行輪換處理可有效防止地下害蟲。另外，蚜蟲和飛虱會(huì)傳播病毒病，可用iooo1200倍的抗蚜威或溴氰菊酯2000倍液進(jìn)行防治。④采收和貯藏植株葉片開始發(fā)黃枯萎時(shí)，可以將休眠后的球莖挖出，放于陰涼通風(fēng)處干燥。為了促使球莖表面快速干燥，將球莖攤開放置于層架上，在1(TC25X:恒溫環(huán)境條件下用排風(fēng)扇吹干球莖讓泥土和根系自行脫落。采收操作中特別應(yīng)注意不要使球莖外皮擦傷，表皮損傷的球莖不能長(zhǎng)期貯藏，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致球莖的腐爛。若收獲季節(jié)正值秋冬交替的季節(jié)，應(yīng)將挖出的球莖及時(shí)放置于室內(nèi)防止溫度驟降造成球莖受凍害，儲(chǔ)藏前進(jìn)行消毒和分級(jí)。在515"C，相對(duì)濕度70%80%條件下貯藏，球莖放置時(shí)避免擁擠，采用淺盤單層碼放，保持通風(fēng)。7、二年生籽球的培育方法①設(shè)施的準(zhǔn)備可根據(jù)不同地區(qū)選擇采用塑料大棚或日光溫室進(jìn)行栽培，溫帶地區(qū)采用日光溫室栽植可延長(zhǎng)彩色馬蹄蓮生長(zhǎng)期；需要安裝防蟲網(wǎng)便于通風(fēng)和防止害蟲的迸入；安裝噴灌系統(tǒng)進(jìn)行澆灌和施肥；配有遮陽網(wǎng)。②基質(zhì)的準(zhǔn)備基質(zhì)應(yīng)疏松，透氣性、排水良好。本方法采用泥炭與珍珠巖(直徑0.3mm以上大顆粒)按2:1的比例混合。要求土壤微酸性，ra值5.o6.5之間。將配好的基質(zhì)填入預(yù)先做好的寬1.01.2m，深1520cm的畦中。新基質(zhì)一般不需要進(jìn)行消毒，對(duì)重復(fù)使用的基質(zhì)必須進(jìn)行消毒后才能使用。具體操作方法是首先，用潔凈水噴灑使基質(zhì)濕潤(rùn)，用地膜將基質(zhì)床面覆蓋，將塑料大棚或日光溫室塑料棚膜密閉，利用自然光照進(jìn)行悶棚消毒，通常晴天白天棚內(nèi)或溫室內(nèi)溫度可達(dá)到6(TC以上，保持1020天。該方法可在塑料大棚和日光溫室閑置的時(shí)間隨時(shí)進(jìn)行。種植前去掉畦面覆蓋的地膜，用復(fù)合殺菌劑溶液噴灑基質(zhì)。復(fù)合殺菌劑溶液為70%多菌靈500倍溶液與40%農(nóng)用鏈霉素1000倍液按l:1比例混合的溶液。③栽種應(yīng)選擇健康無、病斑的一年生籽球進(jìn)行栽種。水分管理環(huán)境溫度為1525。C時(shí)可以進(jìn)行栽種。栽植密度為直徑23厘米籽球每平方米150球，直徑34厘米籽球每平方米100球。種植深度為球莖的厚度，以澆水后球莖不露出為宜。在定植后采用敵克松退菌特=6:4混合按1000倍溶液處理或福美雙800倍液與定根水一同澆入。最初的34周應(yīng)保持基質(zhì)表層濕潤(rùn)，防止根尖干枯受損?？梢圆捎脟婌F方式進(jìn)行，少量多次。開始萌芽后，植株生長(zhǎng)速度加快，需水量增加。澆水應(yīng)在上午910點(diǎn)進(jìn)行，澆水要均勻有規(guī)律，忌過干和過濕，在高溫季節(jié)特別是相對(duì)濕度大于70%的環(huán)境條件下易發(fā)生腐爛病，要注意控水，采取一次性澆透，讓基質(zhì)表面干透12cm再澆為宜，同時(shí)也可以在土壤表面覆蓋12cm的鋸末或腐葉土來降溫保溫，這樣可以緩和溫濕度的變化，減少病害的發(fā)生/栽種4個(gè)月后，當(dāng)日溫低于15'C,夜溫低于1(TC，停止?jié)补喽寄艽偈骨蚯o休眠的發(fā)生。彩色馬蹄蓮球莖進(jìn)入休眠期時(shí)，葉片養(yǎng)分向地下部分的轉(zhuǎn)移的積累，地下球莖膨大，直至葉片完全干枯后，可以采收。施肥管理剛定植的種苗在根系恢復(fù)和發(fā)根萌芽階段可以不需施肥，定植3周后開始施肥。采用葉面噴施，每10天一次。施肥后立即澆水沖洗葉面，防止燒葉。前期(36周)N、P、K比為2:1:1，避免使用高濃度的氨態(tài)肥；中期(714周)N、P、K比為1:1:1;后期(1520周)N、P、K比為1:3:2，施肥應(yīng)考慮與水分管理相協(xié)調(diào)；球莖采收前60天停止施肥。在生長(zhǎng)階段，采集基質(zhì)樣品進(jìn)行分析，了解施肥水平，及時(shí)調(diào)整。既要保證生長(zhǎng)的需要，又要防止鹽分的積累。夏季高溫季節(jié)，適當(dāng)減少施肥量。光照管理定植初期需要50%60%的遮蔭，便于溫度的控制，34周后籽球發(fā)根萌芽后可去掉遮蔭網(wǎng)。北半球夏季，應(yīng)采用折光率為30%的遮蔭網(wǎng)，有利于降低棚內(nèi)溫度和基質(zhì)溫度，同時(shí)滿足球莖生長(zhǎng)對(duì)光照的要求。入秋以后，白天氣溫低于2(TC時(shí)，去掉遮蔭網(wǎng)，有利于光合產(chǎn)物的積累，促進(jìn)地下部球莖的生長(zhǎng)。病害防治彩色馬蹄蓮球莖培育過程中，危害最嚴(yán)重的主要病害是細(xì)菌性軟腐病。主要在夏天高溫高濕的雨季發(fā)生和流行，這段時(shí)間是防治的關(guān)鍵時(shí)期。防治方法首先在定植前作好基質(zhì)的消毒。在生產(chǎn)栽培過程中，盡量要采取定期防治的方法，在雨季前和雨季后每隔1520天噴灑一次農(nóng)用鏈霉素或70%的甲基托布津(北京市植保公司有售)10002000倍溶液，雨季710天一次，特別注意在長(zhǎng)時(shí)間下雨轉(zhuǎn)晴后一定要噴灑一次上述農(nóng)藥防治病害發(fā)生，同時(shí)可將可殺得、農(nóng)用鏈霉素、掃細(xì)等輪換使用。細(xì)心管理，發(fā)現(xiàn)病株要及時(shí)清除。同時(shí)需要降溫、加強(qiáng)通風(fēng)、水肥的綜合管理才能收到好的預(yù)防效果。蟲害防治基質(zhì)床下鋪地布和在種植前用11.5公斤/畝的巴丹或呋喃丹(北京市植保公司有售)進(jìn)行輪換處理可有效防止地下害蟲。另外，由于彩色馬蹄蓮會(huì)有花葉病毒病的發(fā)生的傳播，蚜蟲和飛虱等可用10001200倍的抗蚜威等進(jìn)行防治。④采收和貯藏植株葉片開始發(fā)黃枯萎時(shí)，可以將休眠后的球莖挖出，放于約1(TC25。C處干燥。為了促使球莖表面快速干燥，將球莖攤開放置于層架上，在恒溫環(huán)境條件下用風(fēng)扇(中強(qiáng)風(fēng)力)吹干球莖讓根系自行脫落。采收操作中特別應(yīng)注意不要使球莖外皮擦傷，表皮損傷的球莖不能長(zhǎng)期貯藏，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致球莖的腐爛。若收獲季節(jié)正值秋冬交替的季節(jié)，應(yīng)將挖出的球莖及時(shí)放置于室內(nèi)防止溫度驟降造成球莖受凍害，儲(chǔ)藏前進(jìn)行消毒和分級(jí)。在515"C，相對(duì)濕度70%80%條件下貯藏，球莖放置時(shí)避免擁擠，采用淺盤單層碼放，保持通風(fēng)。直徑大于4cm的球莖貯藏8周后可以種植。球莖安全貯藏期可達(dá)IO個(gè)月。本發(fā)明制備彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖生物性能及培育方法與現(xiàn)有技術(shù)效果比較一、本發(fā)明二次滅菌法與現(xiàn)有技術(shù)效果比較1、材料上述實(shí)施例制備優(yōu)質(zhì)球莖用銀星馬蹄蓮(Z37^eofesc力iaa76咖acw"fa)球莖的芽眼為外植體。2、方法無菌外植體的獲取因接種材料為塊莖，消毒較為困難。對(duì)比了現(xiàn)有一次滅菌和本發(fā)明實(shí)施例1所述的兩次滅菌的效果。一次滅菌的方法是刮去芽周圍的表皮，挖取0.5cm3左右的芽塊放入洗滌靈液中浸洗，再用自來水沖洗，將材料用70%酒精消毒1分鐘，用滅菌水沖洗，再用5%次氯酸鈉液(100ml加吐溫2滴)消毒15min，用滅菌水沖洗35遍，于吸水紙上瀝干多余的水分后，接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。本發(fā)明兩次滅菌經(jīng)表面消毒的具體滅菌方法是先將塊莖刷洗干凈，操作時(shí)避免損傷芽和芽眼。刮去芽周圍的表皮，挖取0.5cnT'左右的芽塊放入洗滌靈液中浸洗，再用自來水沖洗，將材料用75%酒精消毒lmin，用滅菌水沖洗，再用5%次氯酸鈉液(100ml加吐溫2滴)消毒810min，用滅菌水沖洗2遍，逐個(gè)切除外層組織，再次用5%次氯酸鈉液消毒lmin，用滅菌水沖洗3遍，于吸水紙上瀝干多余的水分后，接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。3、結(jié)果與分析外植體滅菌方法比較見表l。表l兩種滅菌方法效果比較<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>由表1可知，由于外植體生長(zhǎng)在地下，受污染程度高，一般的滅菌方法很難成功，外植提污染一直是本領(lǐng)域難以解決的技術(shù)問題，普通升汞二次滅菌污染率也僅有小幅提高，在本次試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)采用本發(fā)明二次消毒的方法較一次滅菌法成功率有顯著提高。且本發(fā)明二次滅菌法為采用常規(guī)升汞制劑，避免了以往方法對(duì)環(huán)境造成的污染。二、本發(fā)明選擇無土固體混合基質(zhì)代替現(xiàn)有技術(shù)的土壤培養(yǎng)和部分土壤培養(yǎng)?，F(xiàn)有技術(shù)對(duì)于彩色馬蹄蓮的培養(yǎng)采用土壤培養(yǎng)，培育效果不好，主要是因?yàn)椴噬R蹄蓮對(duì)土壤潔凈程度要求很高，而土壤徹底消毒是很困難的，往往土壤中易引入病原菌，造成彩色馬蹄蓮成活率低，產(chǎn)量下降，商品價(jià)值降低等。土壤培養(yǎng)對(duì)環(huán)境會(huì)造成一定影響，如本發(fā)明采用無土固體基質(zhì)對(duì)彩色馬蹄蓮進(jìn)行培養(yǎng)，基質(zhì)成分為泥炭和珍珠巖(直徑0.3mm以上大顆粒)按2:1的比例混合均勻，避免了現(xiàn)有技術(shù)對(duì)環(huán)境的影響，且透氣性和排水性均能達(dá)到彩色馬蹄蓮的標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明的無土固體基質(zhì)的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)在于利于施肥管理。其成分清楚，施肥時(shí)可以具體得知施肥量及成分，使得施肥精準(zhǔn)。而現(xiàn)有應(yīng)用的土壤成分復(fù)雜，施肥不好控制。本發(fā)明所用基質(zhì)培養(yǎng)與現(xiàn)有技術(shù)(土壤培養(yǎng))最終培養(yǎng)效果比較見表2:表2<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>提出的前、中、后期的施肥管理配方與現(xiàn)有技術(shù)應(yīng)用的糞肥比較具有很好的技術(shù)效果?，F(xiàn)有技術(shù)施肥應(yīng)用的為糞肥，成本過高，施加不方便，且很易引入病原菌造成滅菌失效，彩色馬蹄蓮成活率降低等情況。本發(fā)明的施肥管理中所述的配方不僅制備容易，且易滿足彩色馬蹄蓮的營(yíng)養(yǎng)需求。降低了培養(yǎng)成本，同時(shí)操作更簡(jiǎn)便。本發(fā)明施肥管理及肥料配方的應(yīng)用與現(xiàn)有技術(shù)應(yīng)用糞肥的最終培養(yǎng)效果比較見表3:表3施肥管理底肥追肥腐爛病發(fā)病率％肥料流失本發(fā)明不施用糞肥根據(jù)不同生長(zhǎng)階段的需要定量施加《5極少現(xiàn)有技術(shù)施用糞肥各生長(zhǎng)階段施用復(fù)合肥>10隨機(jī)性強(qiáng)四、本發(fā)明所用采收和貯藏方法為本發(fā)明另一發(fā)明點(diǎn)在貯藏前需放于陰涼通風(fēng)處干燥，為了促使球莖表面快速干燥，將球莖攤開放置于層架上，在1(TC25。C恒溫環(huán)境條件下用排風(fēng)扇吹干球莖至讓根系自行脫落為止；后在515°C，相對(duì)濕度70%80%條件下貯藏。而本領(lǐng)域技術(shù)人員目前通常就是陰涼處貯藏，并沒有對(duì)貯藏條件的限制和貯藏前期的處理。利用本發(fā)明所述的貯藏方法和現(xiàn)有技術(shù)相比較效果見表4:表4采收、貯藏方法采收環(huán)境影響球莖干燥處理腐爛病發(fā)病率％貯藏期本發(fā)明省時(shí)、省力表皮完好采收受環(huán)境影響小恒溫，強(qiáng)制通風(fēng)《5io個(gè)月以上現(xiàn)有技術(shù)較費(fèi)力表皮多有破損采收受環(huán)境影響大自然干燥>106個(gè)月五、本發(fā)明方法制備得到的彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖(CGMCCNo.2457)與現(xiàn)有技術(shù)制備的彩色馬蹄蓮球莖的比較，見表5，可知本發(fā)明制備的彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖在貯藏十個(gè)月的時(shí)候生物特性仍保持完好，而現(xiàn)有技術(shù)制備得到的彩色馬蹄蓮球莖在保存至IO個(gè)月時(shí)生物性能明顯下降，商品性下降己無法利用表5<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>權(quán)利要求1、一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖，其特征在于，其保藏編號(hào)為CGMCCNo.2457。2、一種權(quán)利要求1所述的彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其包括以下步驟:(l)外植體的選擇；(2)無菌材料的獲得；(3)彩色馬蹄蓮叢生芽擴(kuò)繁繼代；(4)彩色馬蹄蓮生根苗生產(chǎn)；(5)彩色馬蹄蓮生根苗馴化；其特征在于所述步驟(2)無菌材料的獲得采用二次滅菌法，具體二次滅菌的具體滅菌方法是先將塊莖刷洗干凈，操作時(shí)避免損傷芽和芽眼。刮去芽周圍的表皮，挖取0.5(^'左右的芽塊用自來水沖洗，將材料用70%75%酒精消毒lmin，用滅菌水沖洗，再用5。/。10。/。次氯酸鈉液消毒510min，用滅菌水沖洗2遍，逐個(gè)切除外層組織23層，再次用5%10%次氯酸鈉液消毒15min，用滅菌水沖洗3遍，于吸水紙上瀝干水分后，接種在基本培養(yǎng)基上；2周后將培養(yǎng)材料轉(zhuǎn)入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中；誘導(dǎo)率為100%;培養(yǎng)30天后轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基上；3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其特征在于，還包括步驟(6)彩色馬蹄蓮一年生籽球的培育，其采用無土固體混合基質(zhì)，該基質(zhì)成分泥炭和珍珠巖按2:1的比例混合；在種植前無土固體混合基質(zhì)用復(fù)合殺菌劑溶液噴灑；所述復(fù)合殺菌劑溶液為70%多菌靈500倍溶液與40%農(nóng)用鏈霉素1000倍液按1:1比例混合的溶液。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其特征在于，所述步驟(6)彩色馬蹄蓮一年生籽球的培育，在栽種過程中定植3周后開始施肥，施肥管理分為前期、中期和后期；前期施肥配方硝酸鈣300700克，硝酸鉀100500克，硝酸銨200650克，硫酸鎂150450克，磷酸二氫鉀100300克，微肥1530克兌水1000公斤；中期施肥配方硝酸鈣300700克，硝酸鉀200600克，硝酸銨150450克，硫酸鎂100450克，磷酸二氫鉀150450克，微肥1530克兌水1000公斤；后期施肥配方硝酸鈣300700克，硝酸鉀200600克，硝酸銨100300克，硫酸鎂100450克，磷酸二氫鉀200600克，微肥1530克兌水1000公斤。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其特征在于，所述前期施肥配方硝酸鈣600克，硝酸鉀300克，硝酸銨500克，硫酸鎂300克，磷酸二氫鉀200克，微肥22克兌水1000公斤；中期施肥配方硝酸鈣600克，硝酸鉀400克，硝酸銨300克，硫酸鎂300克，磷酸二氫鉀300克，微肥22克兌水1000公斤；后期施肥配方硝酸鈣600克，硝酸鉀400克，硝酸銨200克，硫酸鎂300克，磷酸二氫鉀400克，微肥22克兌水1000公斤。6、根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其特征在于，步驟(6)培育的一年生籽球需在515°C，相對(duì)濕度70%80%條件下貯藏。7、根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其特征在于，所述珍珠巖為直徑0.3mm以上大顆粒珍珠巖。8、根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其特征在于，還包括步驟(7)彩色馬蹄蓮二年生籽球的培育，其采用無土固體混合基質(zhì)，泥炭和珍珠巖按2:1的比例混合；在種植前無土固體混合基質(zhì)用復(fù)合殺菌劑溶液噴灑；所述復(fù)合殺菌劑溶液為70。/。多菌靈500倍溶液與40%農(nóng)用鏈霉素1000倍液按1:1比例混合的溶液。9、根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖的培育方法，其特征在于，所述步驟(7)培育的彩色馬蹄蓮二年生籽球貯藏方法在貯藏前需放于陰涼通風(fēng)處干燥，為了促使球莖表面快速干燥，將球莖攤開放置于層架上，在l(TC25t:恒溫環(huán)境條件下用排風(fēng)扇吹干球莖至讓根系自行脫落為止；后在515°C，相對(duì)濕度70%80%條件下貯藏。全文摘要本發(fā)明公開了一種彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖，其保藏編號(hào)為CGMCCNo.2457。本發(fā)明制備的彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖與現(xiàn)有技術(shù)制備的球莖相比較，貯藏時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)長(zhǎng)于現(xiàn)有球莖的貯藏時(shí)間，現(xiàn)有技術(shù)在貯藏6個(gè)月以后球莖栽種后開花不齊，會(huì)直接影響盆花和切花的商品性。本發(fā)明所述的彩色馬蹄蓮優(yōu)質(zhì)球莖可貯藏時(shí)間達(dá)到10個(gè)月以上，使周年提供球莖用于生產(chǎn)盆花、切花成為可能。文檔編號(hào)A01H5/04GK101627729SQ20081011678公開日2010年1月20日申請(qǐng)日期2008年7月17日優(yōu)先權(quán)日2008年7月17日發(fā)明者滌周,賢王申請(qǐng)人:北京市農(nóng)林科學(xué)院