專利名稱：一種柱楊高效離體再生方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)和植物育種領(lǐng)域，尤其是一種柱楊高效離體再生 方法。
背景技術(shù)：
楊樹分布廣，適應(yīng)性強(qiáng)，不僅是重要的經(jīng)濟(jì)樹種，還在水土保持和維 護(hù)生態(tài)平衡方發(fā)揮重要作用。以往人們采用傳統(tǒng)育種方法來改良楊樹品種， 但工序復(fù)雜，費(fèi)時(shí)費(fèi)工，受氣候、地域和水分等多種環(huán)境因素的限制。隨著 分子生物學(xué)的發(fā)展和楊樹組織培養(yǎng)術(shù)的日趨成熟，人們紛紛把目光轉(zhuǎn)向基 因工程，希望在短期內(nèi)達(dá)到改良楊樹品種的目的此外，由于楊樹生長(zhǎng)周期 短，離體操作容易，基因組相對(duì)較小，被喻作林木中的"煙草"，研究林木的 生理及遺傳特性具一定的意義，使楊樹的組織培養(yǎng)及其基因工程研究備受 注，進(jìn)展迅速。組織培養(yǎng)在楊樹上的應(yīng)用主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面第一，難生根樹 種的擴(kuò)大繁殖如白楊系，因根蘗繁殖率低、扦插生根難而難以運(yùn)用傳統(tǒng)方 法大量繁殖。若用組織培養(yǎng)的方法，通過改變外植體的生長(zhǎng)條件，則可在 短期內(nèi)獲得大量組培苗。第二，種質(zhì)保存，運(yùn)用組織培養(yǎng)的方法，控制植 株的生長(zhǎng)速度，不僅能避免種質(zhì)資源受病蟲害的侵襲，還能節(jié)省人力和空 間。此外，楊樹組織培養(yǎng)系統(tǒng)可作為一種模式體系，來分析基因轉(zhuǎn)移、體 細(xì)胞變異和種質(zhì)保存等方面存在的問題，研究林木生長(zhǎng)、分化及幼嫩、成 熟和復(fù)幼的分子機(jī)制。柱楊的樹冠窄，葉片更密、在秋季葉片為金黃色，有較強(qiáng)的觀賞性， 抗腐爛病和抗逆性也較強(qiáng)，在我國(guó)具有較為廣泛的應(yīng)用前景。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種柱楊高效離體再生方法。 本發(fā)明的技術(shù)方案是一種柱楊高效離體再生方法，其離體再生的方法是(1) .選取生長(zhǎng)健壯的柱楊枝條，經(jīng)消毒處后，接種在MS培養(yǎng) 基上萌發(fā)，得到無菌苗；(2) .切取無菌苗莖段種到分化培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出再生的芽；(3) .將再生的芽接種到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根；(4).待柱楊再生苗根長(zhǎng)到2 3cm時(shí)進(jìn)行移栽。而且，所述分化培養(yǎng)基的構(gòu)成為MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L IAA。而且，所述生根培養(yǎng)基的構(gòu)成為1/2MS+0.2mg/L IAA。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是本發(fā)明建立一套柱楊的離體再生技術(shù)，可促進(jìn)構(gòu)建以林木為主體、森 林與其他植被有機(jī)結(jié)合的綠色、彩色生態(tài)圈，形成農(nóng)村城市化、園林綠地、 河流道路林網(wǎng)、近郊遠(yuǎn)郊森林公園及自然保護(hù)區(qū)協(xié)調(diào)配置的農(nóng)村森林生態(tài) 網(wǎng)絡(luò)體系，有助于引進(jìn)和推廣栽培具有更高觀賞價(jià)值的農(nóng)村生態(tài)林木樹 種，推動(dòng)我國(guó)農(nóng)業(yè)的科技進(jìn)步。本發(fā)明柱楊高效離體再生技術(shù)的建立 可以使其遺傳轉(zhuǎn)化工作順利進(jìn)行，獲得較高的轉(zhuǎn)化率和轉(zhuǎn)化效 果，為柱楊在采用現(xiàn)代生物技術(shù)手段育種方面奠定基礎(chǔ)。
具體實(shí)施方式
下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述，以下實(shí)施例只是描述性 的，不是限定性的，不能以此限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。一種柱楊高效離體再生方法，其離體再生方法是(1) .挑取生長(zhǎng)健壯的柱楊枝條，經(jīng)消毒處后，接種在MS培養(yǎng) 基上萌發(fā)，得到無菌苗；(2) .切取無菌苗莖段接種到MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L IAA的 分化培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出再生的芽；(3) .將再生的芽接種到生根培養(yǎng)基，該生根培養(yǎng)基的構(gòu)成為 1/2MS+0.2mg/LIAA，再生的芽接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)生 根；(4) .待柱楊再生苗根長(zhǎng)到2 3cm時(shí)進(jìn)行移栽。 在提高柱楊高效遺傳轉(zhuǎn)化植株再生率技術(shù)的試驗(yàn)中，我們采用了以上的技術(shù)路線，轉(zhuǎn)化效果很好，可以獲得較高的再生率。
權(quán)利要求
1.一種柱楊高效離體再生方法，其特征在于離體再生的方法是(1).選取生長(zhǎng)健壯的柱楊枝條，經(jīng)消毒處后，接種在MS培養(yǎng)基上萌發(fā)，得到無菌苗；(2).切取無菌苗莖段接種到分化培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出再生的芽；(3).將再生的芽接種到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根；(4).待柱楊再生苗根長(zhǎng)到2～3cm時(shí)進(jìn)行移栽。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柱楊高效離體再生方法，其特征 在于所述分化培養(yǎng)基的構(gòu)成為MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L IAA。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柱楊高效離體再生方法，其特征 在于所述生根培養(yǎng)基的構(gòu)成為1/2MS+0.2mg/L IAA。
全文摘要
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)和植物育種領(lǐng)域的一種柱楊(Populus tremulaerecta)高效離體再生方法，離體再生的方法是(1)選取生長(zhǎng)健壯的柱楊枝條，經(jīng)消毒處后，接種在MS培養(yǎng)基上萌發(fā)，得到無菌苗；(2)切取無菌苗莖段接種到分化培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出再生的芽；(3)將再生的芽接種到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根；(4)待柱楊再生苗根長(zhǎng)到2～3cm時(shí)進(jìn)行移栽。本發(fā)明柱楊高效離體再生技術(shù)的建立可以使其遺傳轉(zhuǎn)化工作順利進(jìn)行，獲得較高的轉(zhuǎn)化率和轉(zhuǎn)化效果，為柱楊在采用現(xiàn)代生物技術(shù)手段育種方面奠定基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)A01H4/00GK101401548SQ20081015295
公開日2009年4月8日 申請(qǐng)日期2008年11月12日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月12日
發(fā)明者劉艷軍, 楊恩芹, 楊靜慧 申請(qǐng)人:天津農(nóng)學(xué)院