專利名稱：：抗諾羅病毒劑以及含有其的組合物的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及抗諾羅病毒效果優(yōu)異且對人體的安全性高的、使用含有單寧的柿屬類植物提取物的抗諾羅病毒劑，以及含有該抗諾羅病毒劑，對諾羅病毒的消毒和感染預防等有用的抗諾羅病毒用組合物。
背景技術：
：諾羅病毒(Norovirus)屬于杯狀病毒科諾羅病毒屬，是直徑為30nm的不帶包膜的、正鏈的單鏈RNA病毒，從1963年在美國作為食物中毒急性腸胃炎的病原體被發(fā)現(xiàn)以來，在世界各個國家都被檢出過。如果觀察我國過去6年來由諾羅病毒引起的食物中毒狀況，發(fā)生件數(shù)每年大約有270件(食物中毒總件數(shù)的大約18%)，患者數(shù)每年約為1萬人(食物中毒總患者數(shù)的大約30%)。作為感染源，有來自以牡蠣等雙殼貝為原因食物的食物材料的感染和來自患者的吐出物，排泄物的二次感染，特別是后者為感染擴大的主要原因。另外，諾羅病毒感染力極強，也被稱為感染io個以上的病毒。現(xiàn)在還沒有抗諾羅病毒的疫苗或治療藥物，通過原因食品的加熱以及烹飪器具或手的消毒來預防諾羅病毒的感染是唯一的應付手段。但是，餐飲店、提供伙食的設施、工廠等進行烹飪加工食品的地方，目前作為抗菌劑被廣泛使用的潔而滅或酒精類并沒有確認出抗諾羅病毒的效果，而氯系漂白劑(次氯酸鈉等)、碘試劑(聚維酮碘等)、醛試劑(戊二醛等)等被認為有一定的效果。但是，從對人體安全性的考慮出發(fā)，對操作者的手指或烹飪器具類來說，不能說使用這些藥劑類是適宜的，更何況不能讓食品直接接觸這些。在這樣的背景下，強烈的要求可以以安全的方法、清潔的保持操作者的手指或烹飪器具類的、抗諾羅病毒性優(yōu)異的洗滌劑、消毒劑等，但是至今為止幾乎還沒有發(fā)現(xiàn)諾羅病毒消毒效果優(yōu)異且對人體安全性高的成分，而像這樣的理想的洗滌劑等的開發(fā)也沒有進展。舉一個例子，作為主張諾羅病毒的滅活作用、安全性、對手的肌膚溫柔的消毒液，在日本特開2007-045732號公報(專利文獻1)中提案有如下消毒液含有0.050.5重量％的聚六亞甲基雙胍系化合物，優(yōu)選進一步含有4080重量％的乙醇，調制pH為912的范圍。而另一方面，將柿子的果實提取液發(fā)酵而得到的"柿漆"自古以來在中國作為用于降血壓等的中藥而被使用，在日本作為民間藥也被愛用。據(jù)說該柿漆中含有豐富的單寧，除了具有收斂性(與蛋白質等結合來收縮組織的性質)之外，還具有抗菌作用或消臭作用。利用該功能性，例如在日本特開2005-232043號公報(專利文獻2)中，為了進一步提高柿漆提取物的操作性或抗菌性，提出了用環(huán)糊精包被的配合的抗菌性齒科用組合物，另外，日本特開2001-172861號公報(專利文獻3)中提出了在纖維中含浸含有功能性藥劑(消臭劑、抗菌劑等)和柿漆或柿單寧的溶液，利用柿單寧的收斂作用，使這些黏著而成的纖維制品。在日本特開2006-206558號公報(專利文獻4)中記載有含單寧物質、脂肪酸酯類、螯合劑等的抗菌性組合物(權利要求D，作為該單寧物質可以舉出單寧酸、兒茶酚、沒食子酸、柿單寧、茶單寧和五倍子單寧等(權利要求4)。但是，使用單寧酸的情況只相對于4大腸桿菌和金黃色葡萄球菌被證實了該抗菌性組合物的有效性(實施例)，而上述單寧物質中只有柿單寧具有顯著的抗諾羅病毒性，因此，作為抗諾羅病毒用組合物的成分，柿單寧是極其重要的這樣的技術思想?yún)s沒有被具體的公開。另外，有關含在柿子中的單寧(縮合型單寧)的結構或精制方法可以參照以下的2篇學術論文(松雄(Matsuo)和伊藤(Itoo)，1981a/1981b，非專利文獻1和2)。專利文獻1:日本特開2007-045732號公報專利文獻2:日本特開2005-232043號公報專利文獻3:日本特開2001-172861號公報專利文獻4:日本特開2006-206558號公報非專利文獻1:松雄智明(Matsuo，Tomoaki)和伊藤(Itoo，Saburo)(1981a);ComparativeStudiesofCondensedTanninsfromSeveralYoungFruits.J.Japan.Soc.Hort.Sci.，50(2)，262-269.非專利文獻2:松雄智明(Matsuo，Tomoaki)和伊藤(Itoo，Saburo)(1981b);ASimpleandRapidPurificationMethodofCondensedTanninsfromSeveralYo皿gFruits.Agric.Biol.Chem.，45(8)，1885—1887.
發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于提供諾羅病毒的滅活作用優(yōu)異、且對人體安全性高的抗諾羅病毒劑，以及含有該抗諾羅病毒劑、對諾羅病毒的消毒和感染預防有用的抗諾羅病毒用組合物。本發(fā)明人等為解決上述課題，在從作為食品或食品添加劑而被認可的物質或植物成分，即，即使入口也是安全的原材料中，探索具有抗諾羅病毒活性的物質時，發(fā)現(xiàn)含有單寧的柿子屬的植物提取液具有顯著的抗諾羅病毒活性，從而完成了本發(fā)明。S卩，本發(fā)明的抗諾羅病毒劑，其特征在于，以含有單寧的柿屬(Diospyros)的植物提取物(以下稱為"柿子提取物")為有效成分。作為該柿子提取物，優(yōu)選為通過對柿屬的植物果實的榨汁或提取液進行加熱或醇處理而得到的提取物，另外，優(yōu)選由至少含有縮合型單寧的提取物，例如，從柿子Diospyroskaki而得到的提取物。這樣的抗諾羅病毒劑作為與醇、表面活性劑、抗菌劑、保濕劑和化妝品用油脂類等組合的組合物的、對抗諾羅病毒有效的成分而使用是適宜的。即，本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物，其特征在于，含有上述抗諾羅病毒劑和從醇、表面活性劑、抗菌劑、保濕劑和化妝品用油脂類組成的組中選出的至少l種。這樣的抗諾羅病毒用組合物優(yōu)選以相對于組合物的整體為0.015重量％的比例含有柿子提取物(換算成固體成分)。上述抗諾羅病毒用組合物優(yōu)選進一步含有有機酸和/或其鹽。作為上述有機酸和/或其鹽，優(yōu)選是碳原子數(shù)為210的有機酸和/或其鹽，更優(yōu)選為碳原子數(shù)為210的含羥基的有機酸和/或其鹽。其中，優(yōu)選為由乳酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸和水楊酸組成的組中選出的至少1種有機酸和/或其鹽，特別優(yōu)選為檸檬酸或其鹽。另外，上述抗諾羅病毒用組合物優(yōu)選進一步含有維生素C類。5作為抗諾羅病毒用組合物而使用的醇優(yōu)選為乙醇和/或異丙醇。本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物提供一種形態(tài)，作為至少含有所述抗諾羅病毒劑和醇的抗諾羅病毒用醇制劑。作為抗諾羅病毒用組合物的成分而使用的表面活性劑，優(yōu)選為陰離子系表面活性劑和/或非離子系表面活性劑，特別優(yōu)選由甘油部分脂肪酸酯、失水山梨糖醇部分脂肪酸酯和蔗糖部分脂肪酸酯組成的組中選出的至少l種表面活性劑。本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物提供一種形態(tài)，作為至少含有所述抗諾羅病毒劑和表面活性劑的抗諾羅病毒洗滌用組合物。作為抗諾羅病毒用組合物的成分而使用的抗菌劑，優(yōu)選為由異丙基甲基苯酚、對羥基苯甲酸丁酯和三氯生(triclosan)組成的組中選出的至少1種合成抗菌劑。本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物提供一種形態(tài)，作為至少含有所述抗諾羅病毒劑和抗菌劑的抗諾羅病毒消毒用組合物。作為抗諾羅病毒用組合物的成分而使用的保濕劑，優(yōu)選為蘆薈提取液，作為化妝品用油脂類，優(yōu)選為蜂蠟。本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物提供一種形態(tài)，作為至少含有所述抗諾羅病毒劑以及保濕劑和/或化妝品用油脂類的化妝水、乳液或雪花膏。進一步，本發(fā)明的抗諾羅病毒劑可以作為由諾羅病毒引起的感染癥的治療液或預防劑的有效成分而使用。即，本發(fā)明的對抗諾羅病毒引起的感染癥的治療液或預防劑，其特征在于，含有上述抗諾羅病毒劑作為有效成分。發(fā)明效果本發(fā)明的作為抗諾羅病毒劑而使用的柿子提取物的抗諾羅病毒性與以往的殺菌劑等相比特別的優(yōu)異，作為一個例子，可以99%以上消滅諾羅病毒。這樣的抗諾羅病毒劑用于諾羅病毒的消毒或感染預防，不僅僅是能夠單獨的使用的物質，而且作為醇制劑、洗滌用組合物、洗手液、消毒用組合物、化妝水、乳液、雪花膏等組合物、或對抗諾羅病毒的醫(yī)藥品等的有效成分是極有用的。另外，柿子提取物(柿單寧)作為食品添加物而被承認，因此，本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物的全部成分由食品或食品添加物構成，能夠成為即使附著于食品食品器具類而入口也沒有問題的組合物。通過使用以像這樣的柿子提取物作為有效成分的本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物，可以期待在處理食品的狀況下或醫(yī)療機構等中，能夠有效地進行諾羅病毒的消毒或感染預防，大幅度地抑制由諾羅病毒引起的疾病(食物中毒)發(fā)生的物質。另外，以往的抗諾羅病毒性試驗是使用與諾羅病毒同樣的屬于杯狀病毒科，確立為培養(yǎng)細胞系的、且對人沒有感染性的貓杯狀病毒作為替代而進行的(參照前述的專利文獻1:日本特開2007-045732號公報)。但是，存在著貓杯狀病毒感染肺或支氣管而杯狀病毒感染腸道等不同，即使通過試驗確認出對貓杯狀病毒的效果，但是對諾羅病毒是否有同樣的效果還是不明確的。但是，相對于此，本發(fā)明的抗諾羅病毒劑和抗諾羅病毒用組合物如后述實施例所示，通過使用諾羅病毒自身的實時熒光定量PCR法(Real-timePCR)，不僅僅確認出使諾羅病毒的感染*繁殖能力喪失，而且具有使諾羅病毒死亡(消滅諾羅病毒的RNA)的顯著的效果，與以往的顯示對抗諾羅病毒效果的物質相比是極富含實效性的優(yōu)異的物質。圖1的(a)(c)是表示使試樣作用于諾羅病毒時的病毒狀態(tài)的示意圖。(a)為病毒基因組和表面蛋白質都正常，病毒保持感染力的狀態(tài)(沒有效果)。(b)為病毒基因組被保持，但是表面蛋白質卻被破壞，失去感染力的狀態(tài)(有效果)。(c)為病毒基因組和表面蛋白質都被破壞，失去感染力的狀態(tài)(有效果)。圖2是顯示實施例2中、有關洗手劑和潤手劑的諾羅病毒滅活試驗結果的圖表。圖3是顯示實施例3(1)中、有關洗手劑和潤手劑的由維生素C帶來的抗諾羅病毒活性的穩(wěn)定化試驗結果的圖表。圖4是顯示實施例3(2)中、由維生素C帶來的抗諾羅病毒活性的穩(wěn)定化試驗結果的圖表。圖5是顯示實施例4中、由檸檬酸帶來的抗諾羅病毒活性的協(xié)同效果試驗結果的圖表。具體實施例方式本發(fā)明中的"抗諾羅病毒性(活性)"是指包括使諾羅病毒消失的情況(參照圖l(c))和即使殘存諾羅病毒，作用于其表面蛋白質而使感染能力(繁殖能力)喪失的情況(參照圖l(b))這兩者，是指將諾羅病毒滅活(即，進行消毒)的特性?？怪Z羅病毒劑柿子提取物本發(fā)明的抗諾羅病毒劑是以含有單寧的柿屬植物的提取物，S卩，柿子提取物(有時也被稱為柿漆單寧)作為抗諾羅病毒性有效成分的物質。另外，該柿子提取物不僅是來自含有單寧的柿屬植物的物質，而且還可以含有為了提取其而使用的溶劑等。柿子提取物的原料沒有特別的限定，但是如果使用富含柿單寧(特別是縮合型單寧)的澀柿子(例如，日本柿子的蜂屋、平核無等品種)的未成熟果實，是有效率的且經濟的。另外，如果是由同樣的成分組成的柿子提取物而得到的，柿屬植物的葉子或樹皮等果實以外的部位也可以作為原料。由這種原料調制柿子提取物的方法也沒有特別的限定，一般可以使用粉碎、壓榨除去了蒂的澀柿子，回收榨汁的方法；或者切成適宜的大小后，用攪拌機制成液狀，進一步用離心分離機回收上清液的方法；或者用水或水系溶劑進行提取，回收提取液的方法。加熱、醇和其他處理作為本發(fā)明的柿子提取物，可以直接使用像上述的柿屬植物的果實榨汁或提取液的原液，但是優(yōu)選使用由加熱或醇處理過的這些處理物(以下，有時也稱為"柿子提取物處理物")。由加熱或醇處理的柿子提取物的抗諾羅病毒性更高，而且還可以防止阻礙用于驗證抗諾羅病毒性的測定。這樣的柿子提取物處理物可以比較容易調制，并且作為組合物成分而使用時，具有幾乎沒有色或惡臭問題這樣的優(yōu)點，比起在發(fā)酵上又花時間且在色或惡臭的點上具有不易使用的問題的柿漆，在工業(yè)上容易利用。加熱處理的溫度和時間條件只要是能使榨汁等中含有的來自柿屬植物的酶失活程度的條件就可以，可以采用用于使植物的酶失活的一般的條件。即，溫度通常為60130°C，時間通常為5秒30分鐘，例如，可以在120°C130°C、510秒間、或大約在85t:、515分鐘等的條件下，進行加熱處理。另外，加熱處理工序的形式沒有特別的限定，例如殺菌榨汁工序中的加熱，或進行粉末化工序中的加熱，也可以是由用于制造柿漆(后面詳細論述)的發(fā)酵開始前的加熱等進行該處理。另一方面，醇處理通?？梢允褂?0100%，優(yōu)選為50100%的乙醇等醇類來進行。例如，優(yōu)選在柿子擠出液中添加同等程度的95v/v^的乙醇來進行處理，然后保存在密閉遮光容器內(通常為淡褐色的液體)。另外，醇處理工序的形式沒有特別的限定，例如，使用乙醇等醇系溶劑進行提取的工序，與該醇處理工序相當?shù)墓ば蛑?，作為用于制造本發(fā)明的抗諾羅病毒性組合物的醇制劑的一典型的工序，可以根據(jù)需要通過在實施了上述加熱處理的柿子提取物中添加醇后混合來進行。另外，這樣的醇處理也兼具消滅柿子提取物自身中所含的雜菌的作用。對于本發(fā)明的柿子提取物，除了上述這樣的處理之外，或在上述這樣的處理的基礎上，在不阻礙發(fā)明效果的范圍內，根據(jù)需要還可以實施由濃縮、干燥或冷凍干燥進行的固形化以及由粉碎進行的粉末化(冷凍干燥粉末通常為微黃色)，或使用離子交換樹脂等精制等處理。柿子提取物含有很多的多酚，由于在液體狀態(tài)下容易產生著色等變質，因此優(yōu)選使用冷凍干燥法在固體狀態(tài)下進行冷凍保存。這些操作優(yōu)選在柿子提取物中所含的柿單寧或其它成分不被分解的溫和條件下進行。另外，本發(fā)明的柿子提取物是未成熟的澀柿子榨汁后長時間(13年左右)發(fā)酵、熟化而得到的液體，也可以利用含有百分之幾左右的固體成分(柿單寧)和由發(fā)酵而生成的有機酸等的"柿漆"。該柿漆作為以往的民間藥或涂料等被利用，例如，通常作為"柿漆"(富山柿漆制造場)等商品被銷售?；蛘邇?yōu)選使用在柿子擠出液中加入來自柿子的酵母培養(yǎng)液，在2025t:下進行13個月的發(fā)酵而得到的發(fā)酵物(通常為紅褐色的液體)，其后在密閉容器內保存。另外，還可以利用基于日本食品衛(wèi)生法的"已存添加物名冊收錄品目錄"中，作為"柿單寧"(由品名/別名=柿漆、柿子提取物。來源*制法*本質=由柿科柿子(DiospyroskakiTHUNB.)的果實榨汁而得到的物質，或用水或乙醇提取而得到的物質。主成分為單寧和單寧酸)被記載的添加物作為本發(fā)明的柿子提取物。柿單寧柿屬(Diospyros)的植物，特別在其果實中含有豐富的具有收斂性或與金屬離子結合等規(guī)定的性質、成為感覺到澀味的來源的物質，即總稱為單寧的化合物。像這樣的柿單寧大多數(shù)的情下是兒茶素、沒食子兒茶素和它們的沒食子酸酯結合而成的，其特征在于，含有以下述推定結構式(I)表示的"柿子縮合型單寧"為主要的成分。例如，柿屬的植物中，原產于中國以日本為首被世界廣泛栽培的柿子(Diospyroskaki)果實中所含的柿子縮合型單寧是兒茶素、兒茶素沒食子酸酯、沒食子兒茶素、沒食子兒茶素沒食子酸酯以約為l:1:2:2的比例通過碳-碳鍵縮合而成的高分子化合物(松雄(Matsuo)和伊藤(Itoo):參照前面非專利文獻1)。[化1]柿子縮合型單寧的推定結構式另外，在柿單寧中除了上述"柿子縮合型單寧"以外，還可以含有兒茶素或水解型單寧等其它的單寧性化合物。水解型單寧是醇(葡萄糖等)和羧酸(沒食子酸等)的酯或其低聚物，由水解而被低分子化，與此相反，柿子縮合型單寧不會因水解而低分子化(聚合物的基本骨架的碳-碳鍵不被水解)，因此可以與水解型單寧加以區(qū)別，例如，能夠由松雄(Matsuo和伊藤(Itoo)(參照前面非專利文獻2)所記載的方法等進行精制、定量。根據(jù)后述的實施例等的對比試驗結果，僅僅非來自柿屬(Diospyros)的植物的單寧，例如來自漆樹的沒食子單寧酸(水解型單寧)、或來自金合歡樹或含羞草屬植物的荊樹單寧、兒茶素、沒食子酸、沒食子酸丙酯"沒食子酸(gallicacid)的丙基酯"的話，不顯示對抗諾羅病毒的有效性。為了表現(xiàn)本發(fā)明的抗諾羅病毒性，推測為優(yōu)選在柿子提取物中至少含有柿子縮合型單寧，但是并不排除柿子提取物中其他成分可能也有幫助。在使用柿子的果實由后述的調制方法得到的柿子提取物等中，通常自然而然的含有柿子縮合型單寧，推測為使用這樣的柿子提取物等作為原料來制造本發(fā)明的抗諾羅病毒劑是適宜的。抗諾羅病毒用組合物本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物含有作為對抗諾羅病毒有效成分的抗諾羅病毒劑、以及醇、表面活性劑、抗菌劑、保濕劑或化妝品用油脂類中的任何1種以上的成分，根據(jù)需要進一步含有檸檬酸等有機酸和/或其鹽、維生素C類的組合物。其形式沒有特別的限定，作為代表可以舉出以下的物質。至少含有抗諾羅病毒劑和醇的醇制劑至少含有抗諾羅病毒劑和表面活性劑的洗滌用組合物至少含有抗諾羅病毒劑和抗菌劑的消毒用組合物至少含有抗諾羅病毒劑和保濕劑和/或化妝品用油脂類的化妝水、乳液或雪花洗滌用組合物是可以洗掉食品、餐具、烹飪器具、操作者的手指或衣服等的臟物，同時，可以對諾羅病毒消毒的形式的組合物，例如，提供液狀或固狀的洗劑。醇制劑和消毒用組合物是用于將附著于食品、餐具、烹飪器具、操作者的手指或處理諾羅病毒患者的臟物的器具等上的諾羅病毒和細菌類滅活的形式的組合物，例如提供與以往的乙醇制劑同樣的噴霧劑?；瘖y水、雪花膏和乳液是涂在由于水洗工作等容易干裂的操作者的手指上進行護膚的同時，可以對諾羅病毒進行消毒形式的組合物(基礎化妝品)。另外，本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物中，醇、表面活性劑、抗菌劑、保濕劑和化妝品用油脂類當然可以組合2種以上而使用。例如，在醇制劑中，為了更加提高抗菌性，優(yōu)選進一步配合脂肪酸酯等表面活性劑。上述洗滌用組合物可以采用除表面活性劑外還配合有抗菌劑或醇而形成的洗手液等形式，上述雪花膏可以采用配合有保護手肌膚成分以及用于清潔的保持手肌膚的抗菌劑或醇的形式。進一步，本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物中，除了本說明書中具體說明的成分以外，還可以適宜地配合用于賦予希望的性能、提高各組合物品質的各種成分，例如增粘劑(黃原膠、角豆膠、聚丙烯酸鈉等)、防氧化劑、香料、色素等，或適合于化妝水等化妝品的肌膚防裂劑、消炎劑等?？怪Z羅病毒劑的含量本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物中的抗諾羅病毒劑的含量在發(fā)現(xiàn)抗諾羅病毒性的范圍內，可以根據(jù)組合物的成分構成或使用方法等形式來適宜地調整，相對于抗諾羅病毒組合物整體，抗諾羅病毒劑中的柿子提取物優(yōu)選為0.015重量％，更優(yōu)選為0.12重量％，進一步優(yōu)選為0.22重量％，特別優(yōu)選為0.52重量％。另外，上述柿子提取物的含量是基于"固體成分"的含量，例如，使用柿子的果實的提取液等液狀物作為制造原料時，可以調節(jié)液狀物的配合量使該液狀物中固體成分(由干燥或冷凍干燥而得到的粉末)的重量在上述范圍內。有機酸和/或其鹽本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物中除了上述的抗諾羅病毒劑，優(yōu)選還配合有機酸和/或其鹽。作為有機酸和/或其鹽，優(yōu)選碳原子數(shù)為210的有機酸和/或其鹽，更優(yōu)選為碳原子數(shù)為210的含羥基的有機酸和/或其鹽，進一步具體的可以舉出乳酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸、水楊酸、馬來酸、富馬酸、琥珀酸等有機酸和/或其鹽。其中，優(yōu)選為由乳酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸和水楊酸組成的組中選出的至少1種有機酸和/或其鹽，特別優(yōu)選為檸檬酸或其鹽。另外，作為有機酸的鹽，優(yōu)選使用上述有機酸各自的鈉鹽、鉀鹽等(例如，檸檬酸三鈉)。檸檬酸等有機酸和/或其鹽，雖然它們單獨并不顯示抗諾羅病毒性，但是通過與柿子提取物并用，可以進一步提高其效果。檸檬酸和/或其鹽是對細菌類的抗菌性也優(yōu)異的物質，作為食品添加物被認可，另外，也具有作為防止柿子提取物(柿單寧)和鐵接觸時著色的螯合劑的作用。相對于抗諾羅病毒組合物整體(含有溶劑等)，上述有機酸和/或其鹽的添加量優(yōu)選為0.055.0重量％的比例，更優(yōu)選為0.12.0重量％的比例。另外，對于水溶液組合物使用有機酸和/或其鹽時，優(yōu)選以pH成為26的量來使用。維生素C類本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物中除了上述的抗諾羅病毒劑之外，優(yōu)選還配合作為在食品等中添加的防氧化劑而眾所周之的維生素C類。在這里"維生素C類"是指包括一般被稱為維生素C的L-抗壞血酸以及DL-抗壞血酸、抗壞血酸酯(棕櫚酸酯等)等的總稱。通過配合維生素C類，可以抑制柿子提取物(特別是柿單寧)的氧化，可以穩(wěn)定地且持續(xù)地發(fā)揮抗諾羅病毒的效果，并且可以抑制由氧化引起的紅色的顯色。相對于抗諾羅病毒組合物整體(含有溶劑等)，維生素C類的添加量優(yōu)選為0.013.0重量％的比例，更優(yōu)選為0.051.0重量％的比例。醇作為醇，可以使用與一般的醇制劑相同的物質，優(yōu)選為對細菌類具有優(yōu)異的抗菌性、作為食品添加物而被認可的乙醇和/或丙醇。這些的醇濃度只要和一般的醇制劑具有同等程度就可以，可以考慮抗菌性來進行調整，但是相對于醇制劑整體，優(yōu)選為2080%左右。另外，醇作為溶劑有時也可以用于醇制劑以外的組合物，另外，也可以作為帶給肌膚收斂性或防腐性的成分而配合于化妝品等中。表面活性劑表面活性劑有陽離子系、陰離子系、兩性離子系和非離子系的表面活性劑，但是如果考慮柿子縮合型單寧(多酚)的化學性質，本發(fā)明優(yōu)選使用陰離子系表面活性劑和/或非離子系表面活性劑。作為陰離子系表面活性劑，例如可以舉出肥皂(高級脂肪酸的堿鹽)、單烷基硫酸鹽、烷基聚氧乙烯硫酸鹽、烷基苯磺酸鹽、單烷基磷酸鹽等。作為非離子系表面活性劑，例如可以舉出聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、多元醇(甘油、糖醇等)的部分脂肪酸酯、脂肪酸二乙醇酰胺等。在這些表面活性劑中，作為食品添加物被認可的甘油部分脂肪酸酯、山梨糖醇部分脂肪酸酯和蔗糖部分脂肪酸酯等，由于即使附著于食品、餐具、烹飪器具上也不會有問題，因此是本發(fā)明的優(yōu)選表面活性劑。另外，上述這樣的表面活性劑也有破壞細菌類的細胞膜或病毒的包膜的作用，例如，甘油的與碳原子數(shù)為618的脂肪酸的部分酯由于對大腸桿菌或金黃色葡萄球菌的抗菌性優(yōu)異，因此在前述的醇制劑中配合這些表面活性劑是適宜的。另外，作為用于混合油相和水相的成分，在雪花膏或乳液中可以使用表面活性劑?？咕鷦┛梢栽诒景l(fā)明中使用的前述乙醇、檸檬酸等以外的抗菌劑(包括被稱為殺菌劑、除菌劑的物質)沒有特別的限定，例如相對于與諾羅病毒同樣的在食品加工時的感染或醫(yī)院感染成為問題的大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、MRSA、沙門菌、副溶血性弧菌、綠膿桿菌等有效的抗菌劑是適宜的，作為這樣的抗菌劑可以舉出以下的物質。，天然抗菌劑蛋白質類(魚精蛋白、蛋白溶菌酶等)、肽類(聚賴氨酸等)等；抗生素青霉素系抗生素、氯霉素、鏈霉素、四環(huán)素系抗生素、頭孢菌素系抗生素等.合成抗菌劑氯系化合物(三氯生等)、碘系化合物(聚維酮碘)、鋅化合物(鋅化十六烷基吡啶等)、苯羧酸類(苯甲酸、水楊酸、異丙基甲基苯酚、對羥基苯甲酸丁酯(=尼泊金丁酯)等)、有機酸酯類(甘油酯、蔗糖酯等)、醛類(戊二醛、甲醛等)、雙胍系化合物(葡萄糖酸洗必太等)、季胺鹽(潔而滅、溴化十六烷銨等)等。在這些抗菌劑中，在抗菌作用優(yōu)異的方面和與柿子提取物的相溶性的方面，異丙基甲基苯酚、對羥基苯甲酸丁酯和三氯生等是本發(fā)明的優(yōu)選抗菌劑。另外，作為上述這樣的抗菌劑而使用的物質可以配合于前述的醇制劑中，也可以作為防腐劑用于化妝品等中。*保濕劑可以在本發(fā)明中使用的保濕劑(濕潤劑)與在化妝水、乳液、雪花膏等一般的化妝品中使用的物質是相同的，例如可以舉出，甘油、丙二醇、山梨糖醇、聚乙二醇、透明質酸、硫酸鈉軟骨素、神經酰胺、蘆薈提取液等。這些保濕劑中，作為食品或食品添加物而被認可的蘆薈提取液等由于即使附著于食品、餐具、烹飪器具上也沒有問題，因此是本發(fā)明的優(yōu)選保濕劑?；瘖y品用油脂類化妝品用油脂類是在皮膚表面形成覆膜，發(fā)揮保護皮膚或賦予柔軟性、光澤性的作用，使化妝品保持適當?shù)氖褂酶械某煞帧１景l(fā)明中可以使用與在乳液、雪花膏等一般的化妝品中使用的油脂類同樣的化妝品用油脂類，例如可以舉出下列這樣的物質。油脂(高級脂肪酸和甘油的酯)植物性油脂、動物性油脂或它們的氫化物(部分氫化菜籽油等)、合成三酸甘油酯(三(辛酸/癸酸)甘油等)等；*蠟(高級脂肪酸和高級脂肪醇在常溫下的固體酯)植物性蠟、動物性蠟(蜂蠟、羊毛脂等)等；烴礦物性烴(液體石蠟、凡士林、石蠟等)、動物性烴(角鯊烷等)等；高級脂肪酸十二烷酸、肉豆蔻酸、十六烷酸、硬脂酸、油酸、異硬脂酸等；高級酯十六醇、硬酯醇、羊毛脂醇等；酯(蠟以外的、脂肪酸和醇的酯)肉豆蔻酸肉豆蔻醇酯、丙二醇二油酸酯、十六烷基乳酸酯等。這些化妝品用油脂類中，作為食品或食品添加物而被認可的蜂蠟等由于即使附著于食品、餐具、烹飪器具上也沒有問題，因此是本發(fā)明的優(yōu)選化妝品用化妝品油脂類。制造方法關于本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物的制造方法，除了配合作為制造原料之一的抗諾羅病毒劑(柿子提取物)，然后根據(jù)需要進一步配合檸檬酸等有機酸和/或其鹽或維生素C類，結合這些配合而實施適當?shù)恼{整之外，與以往的醇制劑、洗滌劑、消毒劑、化妝水、乳液、雪花膏等的制造方法相同。即，除了這些以往產品的一般的(或根據(jù)需要進行了微調整的)制造原料以外還配合抗諾羅病毒劑，通過與以往產品同樣的(或根據(jù)需要進行微調整)制造工序，可以制造本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物。例如，如果是雪花膏的形式，在純水中添加抗諾羅病毒劑或其它成分來調制水相部，另一方面添加由化妝品用油脂類等形成的油相部，以規(guī)定的比例混合這些來制造。另外，本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物的使用方法也和以往的醇制劑、洗滌劑、消毒劑、化妝水、乳液、雪花膏等相同。進一步，如果是洗滌劑的話，可以制成在使用時稀釋使用的濃縮型，或者如果是醇制劑或消毒劑的話，除了可以制成噴射型之外，還可以含浸在不紡布中制成擦拭型等，本發(fā)明的抗諾羅病毒組合物可以根據(jù)使用方法以適宜的優(yōu)選方式產品化。醫(yī)藥品本發(fā)明的抗諾羅病毒劑可以作為由諾羅病毒引起的感染癥的治療劑或預防劑的有效成分而使用。像這樣的醫(yī)藥品的劑型例如可以從液體劑型、糖漿劑、片劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑等經口攝取型、或注射劑這些中適宜地選擇，根據(jù)需要可以并用賦形劑(例如乳糖或其它糖類)、粘合劑(例如淀粉、甲基纖維素、聚乙烯醇)、穩(wěn)定劑(例如抗壞血酸)、保存劑(例如對羥基苯甲酸酯)、甜味料、溶劑等各種添加劑，按照一般的制劑方法來制造。另外，這些醫(yī)藥品的有效投入量可以根據(jù)患者的年齡、體重、癥狀、藥劑的投入途徑、投入日程、制劑形態(tài)、素材的阻礙活性的強度等適宜地決定，醫(yī)藥品中的抗諾羅病毒劑的含量也可以根據(jù)這些條件進行調節(jié)。實施例12諾羅病毒試驗液以下的實施例等中使用的"諾羅病毒試驗液"是如下制備的將從患者的大便中采集并保存凍結在-S(TC的諾羅病毒凍結原液在冰上解凍，取出該100i!L，用磷酸緩沖生理鹽水(PBS)稀釋10倍，以lOOOOrpm進行20分鐘的離心分離，除去沉淀物后進行調制(950iiL溶液)。"實時熒光定量PCR法以下實施例等中的"實時熒光定量PCR法"是按照由厚生勞動省醫(yī)藥食品局食品安全部監(jiān)視安全科長下達的(參照食安監(jiān)發(fā)第1105001號、平成15年11月5日。htW/www,mhlw.go.ip/topics/syokuchu/kanren/kanshi/031105_l.html)所帶有的資茅斗"諾羅病毒檢測法"來進行。另外，實時熒光定量PCR法中計數(shù)圖1中(a)和(b)狀態(tài)的病毒基因組數(shù)量。艮卩，以下的實施例等中，只有(c)的諾羅病毒(的RNA)消失的情況才被評價為"有效果"，(b)的諾羅病毒(的RNA)沒有消失的情況，即使喪失感染*增殖能力也評價為"沒有效果"。不論這些，本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物被評價為具有比以往更高的效果，可以考慮為包括諾羅病毒為(b)狀態(tài)的實際效果更高。實施例l(1)柿子提取物和乙醇制劑的調制(a)柿漆發(fā)酵液(FA-1):將柿子(澀柿子)的未成熟果實的粉碎物放入孔細的布袋中進行榨汁，該榨汁放入玻璃容器后進行大約一年的自然發(fā)酵后，過濾分離固體物質，得到紅褐色的溶液。在該溶液中含有約10%的固體成分(柿子提取物)，其大約一半(大約5%)為柿單寧。(b)柿漆冷凍干燥粉末(FD-1):將柿子(澀柿子)的未成熟果實的粉碎物放入孔細的布袋中進行榨汁，冷凍干燥該榨汁得到粉末。由于是天然產物，產品率不一定，但是在57%左右。使用上述的柿子提取物(FA-1和FD-1)、乙醇、檸檬酸和檸檬酸三鈉，調制表1所示處方的組合物(乙醇制劑)A1A4。另外，使用配合有柿子提取物以外成分的試樣，同樣地調制成表1所示處方的試樣溶液BlB7。(2)抗諾羅病毒性試驗充分混合25L的諾羅病毒試驗液和如上所述調制的組合物(AlA5或BlB7)各25yL，混合液在室溫下放置2分鐘后，用PBS稀釋50倍。使用它們的稀釋液，進行RNA的提取、cDNA的合成等處理后，由實時熒光定量PCR法計數(shù)殘存于稀釋液中的病毒基因組的RNA數(shù)。對于相對于上述各試樣溶液的對照物，也進行同樣的試驗。從這些測定值的對比求出各組合物的諾羅病毒的抑制率。結果如表1所示。與配合有以往通用的抗菌劑、公認有抗諾羅病毒作用的聚維酮碘的組合物Bl相比，配合有柿子提取物(FD-1或FA-1)的組合物AlA4的抑制率，任何一個都顯著地高。另外，對于配合有水解性單寧或低分子單寧和相似化合物的組合物，完全沒有確認出對諾羅病毒的有效性。另外，在以下實施例的記載中(包括表中的記載)，"％"沒有特別的聲明則表示"重量％"。13表1組合物的配合組成和抗諾羅病毒性試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*1單寧酸來自漆樹(五倍子)的水解型單寧。主成分為1，2，3，4，6-五沒食子酰葡萄糖或其多聚體。*2荊樹單寧來自金合歡樹的水解型單寧*3沒食子酸丙酯沒食子酸(gallicacid)的丙酯。(3)抗菌性試驗(1)試驗樣品使用如前述調制的柿子提取物(FD-1)、以及甘油己酸酯、檸檬酸、檸檬酸三鈉和乙醇，調制成表2所示處方的組合物A5A7。使用這些組合物A5A7的原液和用純水將這些原液稀釋為2，4，8，16和20倍而得到的稀釋液作為試驗樣品。[O130]表2組合物的配合組成(其余部分為水)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>[O132](2)細菌種類大腸桿菌IF03301菌株金黃色葡萄球菌IF012792菌株(3)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件大腸桿菌在脫氧膽酸瓊脂培養(yǎng)基中35t:培養(yǎng)24小時金黃色葡萄球菌在甘露醇高鹽瓊脂培養(yǎng)基中35t:培養(yǎng)48小時(4)操作試驗樣品各9mL分別加入1.0mL的菌液攪拌，敏化1分鐘后，涂抹于各自的選擇甸養(yǎng)基，在各自的培養(yǎng)時間后確認培養(yǎng)狀態(tài)，判斷效果，結果如表3所示。表3抗菌性試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注1)表中"<IOO"表示沒有確認出菌繁殖的狀態(tài)(有效果)。注2)表中"-"表示菌無限大繁殖的狀態(tài)(沒有效果)。無論對大腸桿菌還是對金黃色葡萄球菌都按A7>A6>A5的順序顯示強的抗菌性。從這樣的結果可知，通過并用乙醇、脂肪酸酯，進一步使用有機酸和其鹽，可以得到不僅對諾羅病毒產生效果，而且對大腸桿菌等細菌效果也優(yōu)異的抗諾羅病毒用組合物。實施例2(1)柿子提取物和洗手劑潤手劑的調制(c)柿子提取物(柿漆FD2-2):將進行了充分殺菌(NaClO)、洗凈和防止變色(維生素C)等處理的柿子果實切碎后絞碎。用20目的篩子過濾得到的果實果汁溶液，進行高溫殺菌處理(120130°C、7IO秒)后，進行冷凍干燥處理，調制成粉末狀的柿子提取物(柿漆FD2-2)。攪拌混合下述表4中所示的成分，調制成含有上述柿子提取物(FD2-2)的3種洗手劑。另外，攪拌混合下述表5中所示的成分，調制成含有上述柿子提取物(FD2-2)的潤手劑。表4洗手劑的配合組成(單位克)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>*1Mydol12:花王株式會社制。月桂基葡糖苷。*2PoemM-200:理研維他命株式會社制。甘油單癸酸都表5潤手劑的配合組成<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>*1PoemM-200:理研維他命株式會社制。甘油單癸酸酯。(2)諾羅病毒的滅活試驗分別將如上述調制的洗手劑和潤手劑各10iiL和諾羅病毒試驗液10iiL充分混合后，在室溫下放置30秒、60秒或120秒。另夕卜，對于10L的總對照(只有PBS(phosphate-bufferedsaline,磷酸鹽緩沖液))，也和10yL的諾羅病毒試驗液充分混合后，在室溫下放置120秒。從這些試樣中取5iiL，用2mL的PBS稀釋(400倍)，進行RNA的提取、cDNA的合成等處理后，通過實時熒光定量PCR法計算殘存于稀釋液中的諾羅病毒基因組RNA數(shù)。而另一方面，作為上述試樣的對照，預先用4mL的PBS分別稀釋5yL的實施例2中調制的洗手劑和潤手劑后，和5iiL的諾羅病毒試驗液充分混合，在室溫下放置120秒。然后對于這些試樣也進行RNA的提取、cDNA的合成等處理后，通過實時熒光定量PCR法計算殘存于稀釋液中的諾羅病毒基因組RNA數(shù)。結果如圖2所示。上述(1)中調制的洗手劑和潤手劑都顯示出具有極高的抗諾羅病毒活性。實施例3由維生素C帶來的抗諾羅病毒活性的穩(wěn)定化試驗(1)準備在前述實施例2中調制的洗手劑(KSF15-2)和潤手劑(KSYIIL-5)、以及在各自中添加有1%的維生素C而得到的物質(KSF15-2(VC)/KSYHL-5(VC))，在2008年2月9日26日的17天(晴天)中保持于太陽光下。對于這4種樣品和總對照，按與上述實施例2(2)同樣的次序(諾羅病毒試驗液和樣品的接觸時間為2分鐘)，進行諾羅病毒的滅活試驗。結果如圖3所示。可知對于洗手劑、潤手劑，通過添加維生素C，抗諾羅病毒活性都保持在高的水平。洗手劑即使沒有添加維生素C，也沒有確認到大的活性降低，但是潤手劑不添加維生素C而直接照射陽光，則失去了抗諾羅病毒活性。(2)調制由0.3%的柿子提取物(上述FD2-2)、50%的乙醇、1.6%的檸檬酸、0.5%的檸檬酸三鈉、0.5%的甘油單癸酸酯和水(余部)組成的組合物(HA-72)和由0.3%的柿子提取物(上述FD2-2)、50%的乙醇、1.6%的檸檬酸、0.5%的檸檬酸三鈉、0.5%的甘油單癸酸酯、0.5X的維生素C和水(余部)組成的組合物(HA-72(VC))，進而再次使用上述(1)中調制的KSF15-2(VC)和KSYHL-5(VC)，在陽光下保持10天。對于這4種樣品按與上述實17施例2(2)同樣的次序(諾羅病毒試驗液和樣品的接觸時間為2分鐘)，進行諾羅病毒的滅活試驗。結果(殘存的諾羅病毒數(shù)的平均值、n=3)如圖4所示。組合物為乙醇制劑的形式時，可知與上述(1)的結果相同，通過添加維生素C，抗諾羅病毒活性保持在高的水平。實施例4由檸檬酸帶來的抗諾羅病毒活性的協(xié)同效果試驗調制由O.3%的柿子提取物(上述FD2-2)、50X的乙醇和水(余部)組成的乙醇溶液A和由0.3%的柿子提取物(上述FD2-2)、1.6X的檸檬酸、50X的乙醇和水(余部)組成的乙醇溶液B，以及總對照，按照上述實施例2(2)的方法(諾羅病毒試驗液和樣品的接觸時間為2分鐘)，進行諾羅病毒的滅活試驗。結構如圖4所示。關于對照為100時的諾羅病毒殘存率，可知乙醇溶液A為6.7，乙醇溶液B為0.08，通過在柿子提取物和乙醇中進一步添加檸檬酸，抗諾羅病毒活性進一步顯著提高。18權利要求一種抗諾羅病毒劑，其特征在于，以含有單寧的柿屬(Diospyros)的植物提取物(以下稱為“柿子提取物”)為有效成分。2.根據(jù)權利要求1所述的抗諾羅病毒劑，其中，所述柿子提取物是通過對柿屬的植物果實的榨汁或提取液進行加熱或醇處理而得到的提取物。3.根據(jù)權利要求1或2所述的抗諾羅病毒劑，其中，所述柿子提取物至少含有縮合型單寧。4.根據(jù)權利要求13中任一項所述的抗諾羅病毒劑，其中，所述柿子提取物是由柿子Diospyroskaki而得到的提取物。5.—種抗諾羅病毒用組合物，其特征在于，含有權利要求14中任一項所述的抗諾羅病毒劑和從醇、表面活性劑、抗菌劑、保濕劑和化妝品用油脂類組成的組中選出的至少1種成分。6.根據(jù)權利要求5所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，相對于組合物的整體，以0.015重量％的比例含有所述抗諾羅病毒劑中的柿子提取物(換算成固體成分)。7.根據(jù)權利要求5或6所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，進一步含有有機酸和/或其^!.o8.根據(jù)權利要求57中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述有機酸和/或其鹽，含有碳原子數(shù)為210的有機酸和/或其鹽。9.根據(jù)權利要求58中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述有機酸和/或其鹽，含有碳原子數(shù)為210的含羥基的有機酸和/或其鹽。10.根據(jù)權利要求59中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述有機酸和/或其鹽，含有從乳酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸和水楊酸組成的組中選出的至少1種有機酸和/或其鹽。11.根據(jù)權利要求510中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述有機酸和/或其鹽，含有檸檬酸和/或其鹽。12.根據(jù)權利要求511中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，進一步含有維生素C類。13.根據(jù)權利要求512中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述醇，含有乙醇和/或異丙醇。14.根據(jù)權利要求513中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其為至少含有所述抗諾羅病毒劑和醇的抗諾羅病毒用醇制劑。15.根據(jù)權利要求514中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述表面活性劑，含有陰離子系表面活性劑和/或非離子系表面活性劑。16.根據(jù)權利要求515中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述表面活性劑，含有從甘油部分脂肪酸酯、失水山梨糖醇部分脂肪酸酯和蔗糖部分脂肪酸酯組成的組中選出的至少1種表面活性劑。17.根據(jù)權利要求516中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其為至少含有所述抗諾羅病毒劑和表面活性劑的抗諾羅病毒洗滌用組合物。18.根據(jù)權利要求517中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述抗菌劑，含有從異丙基甲基苯酚、對羥基苯甲酸丁酯和三氯生組成的組中選出的至少1種合成抗菌劑。19.根據(jù)權利要求518中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其為至少含有所述抗諾羅病毒劑和抗菌劑的抗諾羅病毒消毒用組合物。20.根據(jù)權利要求519中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述保濕劑，含有蘆薈提取液。21.根據(jù)權利要求520中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其中，作為所述化妝品用油脂類，含有蜂蠟。22.根據(jù)權利要求521中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物，其為至少含有所述抗諾羅病毒劑、以及保濕劑和/或化妝品用油脂類的化妝水、乳液或雪花膏。23.—種諾羅病毒的消毒或感染預防方法，其特征在于，使用權利要求14中任一項所述的抗諾羅病毒劑或權利要求522中任一項所述的抗諾羅病毒用組合物。24.由諾羅病毒引起的感染癥的治療劑或預防劑，其特征在于，含有權利要求14中任一項所述的抗諾羅病毒劑。全文摘要本發(fā)明的目的在于提供在諾羅病毒的滅活作用上優(yōu)異且對人體安全性高的抗諾羅病毒劑，以及含有該抗諾羅病毒劑，對于諾羅病毒的消毒或感染預防有用的抗諾羅病毒用組合物。像這樣的本發(fā)明的抗諾羅病毒劑，其特征在于，通過加熱或醇處理含有單寧的柿屬(Diospyros)的植物提取物(以下，稱為“柿子提取物”)，優(yōu)選為柿屬植物的果實榨汁或提取液而得到的柿子提取物作為有效成分。另外，本發(fā)明的抗諾羅病毒用組合物特征在于，含有上述抗諾羅病毒劑和由醇、表面活性劑、抗菌劑、保濕劑和化妝品用油脂類組成的組中選出的至少1種，優(yōu)選進一步含有檸檬酸等有機酸和/或其鹽或維生素C類。文檔編號A01N37/40GK101730536SQ20088001972公開日2010年6月9日申請日期2008年6月11日優(yōu)先權日2007年6月12日發(fā)明者中井義昭,島本整,辻徹申請人:國立大學法人廣島大學;阿爾丹株式會社