專利名稱：提高奶牛乳品質(zhì)量和奶?？篃釕?yīng)激的飼料添加劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及動物飼料添加劑，具體涉及一種用于提高奶牛乳品質(zhì)量和奶牛 抗熱應(yīng)激的詞料添加劑。
背景技術(shù)：
共軛亞油酸(簡稱CLA，下面同)具有抗癌、抗氧化、增強免疫、降低脂肪 沉積、促進生長以及預(yù)防心血管疾病和糖尿病等多種有益于人類健康的生物學(xué) 功能，美國國家研究委員會(NRC)已于1996年將共軛亞油酸列為唯一的一 種具有抗癌作用的動物源脂肪酸，反3動物產(chǎn)品是人類食物中共軛亞油酸的主 要來源，其中，乳脂中的共軛亞油酸含量最為豐富。因此，提高奶牛乳脂中共 軛亞油酸的含量，改善牛奶品質(zhì)，對人類健康具有重要意義。有文獻(xiàn)"Kdly等， JNutr， 1998: 881-885)"報道，在奶牛日糧中直接添加植物油脂或籽實可以提高 牛奶中共軛亞油酸的含量，通常能夠提高3倍左右。但在文獻(xiàn)"周慶安等，中 國油脂，2002:77-79"中又報道了若將油脂直接加入到奶牛日糧中時，會使奶 牛的飼料采食量和纖維素消化率下降。其原因有①油脂包被在纖維素表面， 限制了纖維素的消化；②油脂對纖維素分解菌產(chǎn)生毒性作用；③油脂對微生物 菌群的包被作用，降低了微生物表面酶的活性；④長鏈脂肪酸與瘤胃中的陽離 子形成不溶性復(fù)合物，影響微生物活動所需要的離子強度，或因離子濃度的改 變而影響瘤胃的pH值。因此如何提高奶牛的牛乳中共軛亞油酸的含量是一個 值得研究的課題。
在文獻(xiàn)"Giesy等，J Dairy Sci, 2002: 2023-2029"報道了在飼料中直接添 加共軛亞油酸轉(zhuǎn)可提高乳脂中共軛亞油酸在總脂肪酸中的相對含量，從而可 以提高乳品質(zhì)量。但是，存在的問題是雖提高了乳脂中共軛亞油酸的相對含 量，但它同時會降低乳脂率。每頭牛每天添加共軛亞油酸鈣50g或100g，乳 脂率下降29%或34%，因而最終表現(xiàn)出牛乳中CLA的含量維持不變或甚至 有所降低。
另外，奶牛受到高溫刺激時會產(chǎn)生熱應(yīng)激反應(yīng)，即通過作用于下丘腦-垂 體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)所引起的包括機體非特異性防御反應(yīng)和特異性障礙在內(nèi)的 全身性適應(yīng)癥。熱應(yīng)激可導(dǎo)致奶牛的新陳代謝發(fā)生紊亂、生產(chǎn)性能下降、產(chǎn)乳 畺降低，乳成分改變、免疫力減弱等，嚴(yán)重的熱應(yīng)激可導(dǎo)致奶牛中暑，甚至死 亡。熱應(yīng)激還會引起奶牛血清中抗氧化指標(biāo)的變化，導(dǎo)致機體抗氧化體系的失衡。所以，如何提高奶?？篃釕?yīng)激的能力也是目前奶牛飼養(yǎng)中的一個需要解決
的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種既提高奶牛乳品質(zhì)，又使奶牛抗熱應(yīng)激的能力 提高，從而提高其產(chǎn)奶量的飼料添加劑。
為達(dá)到本發(fā)明的目的所采用的技術(shù)方案是提供一種提高奶牛乳品質(zhì)量和 抗熱應(yīng)激的的飼料添加劑，它是由共軛亞油酸鈣、納米硒和維生素E組成， 其組成為每1千克共軛亞油酸鈣加入納米硒15 50mg和維生素E 25,000 75,000IU，每頭奶牛每天添加100 400g的飼料添加劑。
共軛亞油酸鈣作為一種脂肪酸鈣，由于在瘤胃內(nèi)不溶解，只在真胃及小腸 中才被溶解，所以對瘤胃內(nèi)微生物的活動沒有影響，不會影響瘤胃發(fā)酵和飼料 消化率，同時又可使脂肪得以有效地利用，可以提供能量，從而緩解奶牛熱應(yīng) 激反應(yīng)，提高生產(chǎn)性能，降低呼吸頻率和直腸溫度等。但共軛亞油酸鈣在體內(nèi) 和體外均易氧化，還可引起乳脂抑制。
硒是人體和動物必不可少的一種微量元素，與保持機體持久健康有關(guān)，它 是一種很強的抗氧化劑，能將有毒的過氧化物還原為無害物質(zhì)，對細(xì)胞和組織 有保護作用，使之免受過氧化物的損害，尤其對細(xì)胞膜和細(xì)胞器膜具有特殊的 保護作用。缺乏硒，會引起體內(nèi)重要的電解質(zhì)鈉、鉀、鈣的代謝混亂和脂肪質(zhì) 過氧化物的增加。
VE又名生育酚，在奶牛日糧中添加VE可以防止高不飽和脂肪酸日糧引 起的乳脂抑制(Pottier等，J. Dairy Sci. 89:685-692)。 VE也是一種強的抗氧化 劑，VE與硒合用有協(xié)同作用，兩者能共同對抗"自由基"對機體的損害，防 止不飽和脂肪酸被氧化，從而維持機體抗氧化體系的平衡。雖然在常規(guī)的奶牛 詞料的預(yù)混料中含有VE和硒，但其VE和硒的含量較低，不足以產(chǎn)生明顯的 效果。本發(fā)明將一定量的共軛亞油酸鈣、納米硒和VE三者同時作為奶牛的飼 料添加劑，添加到飼料中喂養(yǎng)奶牛，可以緩解奶牛由共軛亞油酸鈣引起的乳脂 抑制，提高乳脂率和乳脂產(chǎn)量以及提高牛奶中硒、VE和CLA的含量，又使奶 ?？篃釕?yīng)激的能力提高，從而提高其產(chǎn)奶量。
每頭奶牛每天添加100 400 g的本發(fā)明所提供的添加劑就能明顯提高 牛奶品質(zhì)，并可有效緩解奶牛的熱應(yīng)激反應(yīng)和提高奶牛的抗氧化性能。
本發(fā)明優(yōu)選的飼料添加劑組成是每1千克共軛亞油酸鈣加入納米硒30 mg和維生素E 50,000 IU，每頭奶牛每天添加200 g的詞料添加劑。本發(fā)明所提供的奶牛飼料添加劑的優(yōu)點是不僅能提高奶牛乳脂產(chǎn)量和乳
脂中不飽和脂肪酸的含量以及牛奶中硒、VE和CLA的含量，改善乳品質(zhì)量， 還能有效緩解奶牛的熱應(yīng)激反應(yīng)，提高產(chǎn)奶量，另外還可以減少熱應(yīng)激奶牛體 內(nèi)的活性氧而減少過氧化反應(yīng)，從而減少熱應(yīng)激對奶牛的損傷，提高奶牛機體 的抗氧化能力。而且產(chǎn)品制作工藝簡單，無需特殊的設(shè)備，使用安全方便，無 副作用。
下面通過實施例進一步闡述本發(fā)明的技術(shù)方案和有益效果，但不限于下述 實施例。
具體實施例方式
實施例l
稱取100 kg的共軛亞油酸鈣(中山尤利卡天然藥物有限公司的產(chǎn)品，含 c9tl 1 CLA-Ca約50%和tl0cl2 CLA-Ca約50%)和1.5 g的納米硒(廣州博仕 奧集團的產(chǎn)品)和2,500,000 IU的維生素E (廣州博仕奧集團的產(chǎn)品)混合均 勻，即得本發(fā)明的詞料添加劑l。 實施例2
稱取100 kg的共軛亞油酸鈣和3.0 g的納米硒和5，000，000 IU的維生素E 混合均勻，即得本發(fā)明的飼料添加劑2 (原料來源同上)。
實施例3
稱取100 kg的共軛亞油酸鈣和4.5 g的納米硒和7，500，000 IU的維生素E 混合均勻，即得本發(fā)明的飼料添加劑3(原料來源同上)。
實施例4飼料添加劑對奶牛熱應(yīng)激的影響試驗
4.1試驗動物
經(jīng)產(chǎn)或產(chǎn)犢30 45天的產(chǎn)奶量相近(16-17 kg/頭/天)，體重為500 kg的 健康中國荷斯坦奶牛28頭。 4.2試驗樣品
樣品實施例1、 2和3的飼料添加劑 4.3試驗方法
將28頭荷斯坦奶牛隨機分成4組(l個對照組和3個試驗組)，每組7頭。 對照組A飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組B飼喂基礎(chǔ)日糧+200g添加劑l (從實施例l 中獲得)，試驗組C飼喂基礎(chǔ)日糧+200g添加劑2 (從實施例2中獲得)，試驗 組D飼喂基礎(chǔ)日糧+200g添加劑3 (從實施例3中獲得)。日糧組成參照NRC
5(2001)配制。基礎(chǔ)日糧由青貯玉米、苜蓿干草和精料補充料組成，粗精比為 49:51，基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平如表1和表2所示。
表l基礎(chǔ)日糧組成
成分重量含量％(占干物質(zhì))
苜蓿干草20.2
青貯玉米30.8
玉米31.5
豆粕15.2
磷酸氫鈣1
石粉0.3
預(yù)混料a1
a每kg預(yù)混料的組成NaCl， 400g; NaHC03， 200g; I， O.lg; Fe， 3g; Mg， 20g; Cu^ 2g; Mn, 3g; Zn， 6g; Se， 0.06g; Co， 0.02g; VA， 800，000IU; VD， IOO，OOOIU; VE， 4，000IU.
表2基礎(chǔ)日糧營養(yǎng)成分含量
化學(xué)成分重量含量％(占千物質(zhì))
粗蛋白18.1
中性洗滌纖維36.2
酸性洗滌纖維18.9
鈣0.87
磷0.43
干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%54.1
能量/(MJMJ'kg-l)7.86
試驗動物的飼養(yǎng)管理奶牛采取舍飼栓系詞養(yǎng)，全混合日糧(TMR)每天 飼喂2次，自由飲水，管道式機器擠奶每日2次(7:00， 19:00)。試驗持續(xù)8 周，預(yù)試期1周，正規(guī)試期7周。試驗期間在牛舍內(nèi)距地面約2.0m處懸掛干 濕球溫度計，每天定時(8:00、 14:00和20:00測三次求平均值)記錄牛舍溫度 和相對濕度，按公式THI-0.80 Td + (Td-14.4)RH +46.4計算溫濕度指數(shù)，其 中Td為干球溫度，RH為相對濕度，THI為溫濕度指數(shù)。
試驗測定指標(biāo)及采樣方法:在試驗期間主要測定指標(biāo)有產(chǎn)奶量、乳成分(乳 脂、乳蛋白和乳糖)含量、乳脂脂肪酸組成、呼吸頻率、直腸溫度和血清抗氧 化指標(biāo)。血清抗氧化指標(biāo)包括超氧化物歧化酶、谷胱苷肽過氧化物酶、丙二醛、 活性氧和總抗氧化能力。產(chǎn)奶量、呼吸頻率和直腸溫度的測定在試驗期每周測定一次試驗?zāi)膛５?產(chǎn)奶量、呼吸頻率和直腸溫度。
奶樣的采集及乳成分和脂肪酸測定在試驗期每周對試驗?zāi)膛Ｈ∧虡右?次，奶樣分三部分； 一部分立即用紅外線牛奶成分分析儀測定乳成分，另一部 分分別用高效液相色譜法和原子吸收分光光度法測定牛奶中維生素E和硒的 含量。第三部分-20。C冷凍保存，等試驗結(jié)束后用毛細(xì)管氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法 測定乳脂脂肪酸組成。
血樣的采集及抗氧化指標(biāo)測定試驗結(jié)束后對試驗?zāi)膛ｎi靜脈無菌采血， 靜置30min后2000 r/min離心15min，吸取上層無溶血的血清置-2(TC冰箱中 fe存，試驗結(jié)束后用比色法測定抗氧化指標(biāo)。 4.4試驗結(jié)果
試驗期牛舍內(nèi)溫度為27.5 33.3°C，平均為30.rC。溫濕度指數(shù)(THI) 為74.1 83.7，平均為78.8。通常認(rèn)為THI超過72時即可對奶牛產(chǎn)生熱應(yīng)激 反應(yīng)，因此，本試驗期間奶牛處于熱應(yīng)激狀態(tài)。
從表3可以看出，3個試驗組(B、 C和D)奶牛的產(chǎn)奶量均顯著高于對照組A， 但各試驗組之間無顯著性差異。試驗組B奶牛的乳脂率極顯著低于其他各組， 但試驗組C和試驗組D奶牛的乳脂率與對照組A無顯著差異。試驗組C和試驗組 D奶牛的乳脂產(chǎn)量顯著高于試驗組A和試驗組B。乳蛋白率和乳糖率在對照組 和試驗組之間沒有顯著差異。
表3添加劑對奶牛產(chǎn)奶量和乳成分的影響
名稱A組B組C組D組
產(chǎn)奶量(kg/d)15.71±1.35a18.96±1.71b18.41±1.65b18.56±1.94b
乳脂率(％)3.34±0.24A2.64±0.23B3.20±0.25A3.24±0.20A
乳脂產(chǎn)量(kg/d)0.52±0.02a0.50±0.02a0.59±0.02b0.60±0.03b
乳蛋白率(％)3.31±0.313.35±0.383.29±0.323.22±0.29
乳糖率(％)4.70±0.414.55±0.354.72±0.474.66±0.43
注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(PO.Ol)，不同小寫字母表示差異顯著(P〈0.05)。
從表4可以看出，3個試驗組(B、 C和D)奶牛乳脂中的C4:0、 C6:0、 C12:0 和C16:0脂肪酸含量顯著低于對照組A， C8:0、 C10:0、 C14:0和C14:l脂肪酸 含量極顯著低于對照組A， C18:l、 C18:2、 CLA c9tl1和CLA tl0cl2 (不飽和) 脂肪酸含量極顯著高于對照組A，而C16:1、 C18:0、 C18:3和C20:0脂肪酸含 量與對照組A無顯著差異，但3個試驗組之間無顯著差異。表4添加劑對奶牛乳脂脂肪酸組成的影響
月旨肪酸(g膽g)A組B組C組D組
C4:04.02±0.35a3.33±0.28b3.45:b0.26b3.41±0.24b
C6:01.89±0.15a1.45±0.13b1.43±0.14b1.48±0.12b
C8:01,34±0.11A0.99±0.09B0.97±0.09B0.96±0.08B
C10:03.11±0.28A2.48±0.23B2.46±0.22B2.49±0.23B
C12:03.05±0.24a2.45±0.23b2.55±0.23b2.57±0.22b
C14:011.29±1.05A9.52±0.82B9.48±0.81B9.54±0.83B
C14:l0.86±0.07A0.59±0.05B0.62±0.05B0.57±0.05B
C16:029.45±2.34a26.48±2.12b27.53±1.98b27.36±1.87b
C16:l1.42±0.281.25±0.231.23±0.251.27±0.24
C18:011.71±3.0511.92±3.3012.38±3.2512.24±3.01
C18:l26.09±2.48A29.64±2.45B29.25±2.02B30.12±2.87B
C18:22.55±0.18A3.05±0.26B3.18±0.22B3.23±0.30B
CLA c9tl 10.56±0.05A1.00±0.09B1.04±0.08B0.98±0.08B
CLAtl0c12<0.01±0.01A0.13±0.01B0.15±0.02B0.12±0.01B
C18:30.34±0.120.36±0.130.38±0.140.36±0.13
C20:00.19±0.040.20±0.030.20±0.020.20±0.04
脂肪酸中小寫字母c表示順式，t表示反式，CLA為共軛亞油酸。 注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(P〈0.01)，不同小寫字母表示差異顯著(P0.05) 與對照組A相比，試驗組C和試驗組D奶牛的硒和VE含量顯著增加(表 5)，但3個試驗組(B、 C和D)之間無顯著差異。
表5添加劑對牛奶中VE和硒含量的影響
名稱A組B組C組D組
Se (ug/L)18.62±1.23a23.87±1.66ab31.33±2. 54b33, 04±2. 47b
VE (mg/L)0.61±0. 05a0. 90 ±0. 06"1. 12±0. 09b1.20±0. 08b
注同行肩注不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
與對照組A相比，3個試驗組(B、 C和D)奶牛的呼吸頻率極顯著下降， 直腸溫度顯著降低，但3個試驗組之間無顯著差異，結(jié)果見表6。表6添加劑對奶牛呼吸頻率和直腸溫度的影響
名稱A組B組C組D組
呼吸頻率(次/分鐘)78.62±6.23A73.04±5.78B72.63±5.54B70.87±5.66B
直腸溫度('c)39.61±0.38a39.15±0.36b39.12±0.35b39.11±0.34b
注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(PO.Ol),不同小寫字母表示差異顯著
(P<0.05)。
從表7可以看出，添加劑可以提高奶牛的超氧化物歧化酶和谷胱苷肽過氧 化物酶活性，并提高總抗氧化能力。與對照組A相比，試驗組C和試驗組D ^J超氧化物歧化酶和谷胱苷肽過氧化物酶活性顯著升高，總抗氧化能力極顯著 升高。添加劑還可以降低丙二醛和活性氧的含量，與對照組A相比，試驗組C 和試驗組D的丙二醛和活性氧含量極顯著下降。除試驗組D奶牛的谷胱苷肽 過氧化物酶活性顯著高于試驗組C夕卜，其他抗氧化指標(biāo)在兩組之間無顯著差 異。
表7添加劑對奶牛血清抗氧化指標(biāo)的影響
名稱A組B組C組D組
超氧化物歧化酶(U/mL)41.28±3.31a42.4fch3.2681546.45±3.83b47.21±4.02b
谷胱苷肽過氧化物酶(U/mL)107.91±9.35a112.34土10.21必120.34±10.65b126.01±10.42c
丙二薛(腦ol/mL)5.22±0.46A5.14±0.48A4.77±0.37B4.68±0.42B
活性氧(U/mL)1735.35±47.32A1714.21±51.22"1546.89*58. :3B1498.66±65.02B
總抗氧化能力(U/mL)3.82±0.24A3.91土0.40幼4.27±0.31B4.31±0.43B
a:同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(PO.Ol),不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
結(jié)論:本發(fā)明的飼料添加劑可以提高奶牛乳脂產(chǎn)量和乳脂中共軛亞油酸的 含量以及牛奶中硒和VE含量，從而改善乳品質(zhì)；同時可以緩解奶牛的熱應(yīng)激 反應(yīng)，使產(chǎn)奶量增加、呼吸頻率和直腸溫度降低；而且還可以提高熱應(yīng)激奶牛
的抗氧化性能，有利于奶牛自身機體正常體況的維持，減少疾病的發(fā)生，也為
奶牛生產(chǎn)者帶來更多的經(jīng)濟效益。試驗結(jié)果表明，試驗組C和試驗組D所用 添加劑(添加劑2和添加劑3)效果明顯，但兩試驗組之間效果差異不大。因 此確定添加劑2為最佳配方。 實施例5在熱應(yīng)激下添加劑用量試驗
5.1試驗動物
經(jīng)產(chǎn)或產(chǎn)犢30 45天、產(chǎn)奶量相近、體重相近的健康中國荷斯坦奶牛28頭。
95.2試驗樣品
樣品飼料添加劑2，從實施例2獲得。 5.3試驗方法
將28頭荷斯坦奶牛隨機分成4組(1個對照組和3個試驗組)，每組7頭。 對照組A詞喂基礎(chǔ)日糧，試驗組B飼喂基礎(chǔ)日糧+100g添加劑2，試驗組C 飼喂基礎(chǔ)日糧+200g添加劑2，試驗組D飼喂基礎(chǔ)日糧+400g添加劑2。日糧 組成參照NRC (2001)配制，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見實施例4。
試驗動物的飼養(yǎng)管理奶牛采取舍飼栓系飼養(yǎng)，全混合日糧(TMR)每 天飼喂2次，自由飲水，管道式機器擠奶每日2次(7:00， 19:00)。試驗持續(xù) 8周，預(yù)試期1周，正試期7周。試驗期間牛舍內(nèi)溫濕度的測定方法見實施例 4中4.3項下所述。
試驗測定指標(biāo)在試驗期間主要測定指標(biāo)有產(chǎn)奶量、乳成分(乳脂、乳蛋 白和乳糖)含量、乳脂脂肪酸組成、奶牛呼吸頻率和直腸溫度。各指標(biāo)的測定 方法見實施例4中4.3項下所述。
5.4試驗結(jié)果
試驗期牛舍內(nèi)溫度為24.3 33.rC，平均為29.4'C。溫濕度指數(shù)(THI) 為74.4 85.1，平均為79.3。通常認(rèn)為THI超過72即可對奶牛產(chǎn)生熱應(yīng)激反 應(yīng)，因此，本試驗期間奶牛處于熱應(yīng)激狀態(tài)。
從表8可以看出，添加不同劑量的添加劑都可以提高奶牛的產(chǎn)奶量，當(dāng)添 加劑量達(dá)到200 g (試驗組C和D)時，產(chǎn)奶量顯著高于對照組A，但試驗組C 與試驗組D之間以及試驗組B與其他各組無顯著性差異。不同劑量的添加劑對 試驗?zāi)膛５娜槌煞譀]有明顯影響。
_表8不同劑量添加劑對奶牛產(chǎn)奶量和乳成分的影響_
名稱 A組 B組 C組 D組
產(chǎn)奶量(kg/d) 乳脂率(％)
乳蛋白率(％) 乳糖率(％)
16.71±1.35 3.32±0.28 3.32±0.30 4.65±0.38
17.91士2.03i 3.13±0.32 3.34±0.36 4.62±0.36
18.50±1.65' 3.20±0.33 3.28±0.29 4.70±0.41
18.81士1.87' 3.25±0.35 3.31±0.30 4.59±0.38
注同行肩注不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
從表9可以看出，與對照組A相比，試驗組C和試驗組D奶牛乳脂中的 C4:0、 C6:0、 C12:0和C16:0脂肪酸含量顯著降低；C8:0、 C10:0、 C14:0和C14:l 脂肪酸含量極顯著降低；C18:l、 C18:2、 CLA c9tl 1和CLA tl0cl2脂肪酸含量
10極顯著升高。但試驗組C和試驗組D之間除CLA c9tll極顯著升高外，其他 脂肪酸含量差異不明顯。而C16:1、 C18:0、 C18:3和C20力脂肪酸含量沒有明 顯變化。
表9不同劑量添加劑對奶牛乳脂脂肪酸含量的影響
脂肪酸(g/100g)A組B組C組D組
C4:03.93±0.59a3.85士0.6()A3.44±0.64b3.40±0.58b
C6:01.98±0.41a:.92i0.43351.48±0.37b1.46±0.35b
C8:01.36±0.28A1.18±0.3嚴(yán)0.99±0.28B0.97±0.24B
C10:03.09±0.50A2.88±0.47^2.48±0.42B2.50±0.38B
C12:03.12±0.51a3.01士0.48"2.62±0.41b2.59±0.38b
C14:011.42±2.43A10.84±2.50^9.52±2.32B9.48土2.418
C14:l0.92±0.22A0.79±0.20^0.65±0.23B0.58±0.18B
C16:029.62±6.05a28.45士5.83^27.46±5.68b27.33±5.12b
C16:l1.46±0.311.49±0.281.38±0.221.41±0.26
C18:011.87±3.1211.94±3.3312.13±3.5211.92±3.41
C18:l25.92±4.32A26.46±5.04^29.32±4.89B30.01±5.11B
C18:22.62±0.43A2.76±0.44"3.12±0.38B3.22±0.42B
CLA c9tl 10.55±0.21A0.67±0.21"0.94±0.32B1.32±0.42e
CLAtl0c12<0.01±0.01A0.13±0.03B0.14±0.02B
C18:30.40±0.140.39±0.120.42±0.150.38±0.14
C20:00.21±0.060.19±0.050.22±0.070.22±0.06
注脂肪酸中小寫字母C表示順式，t表示反式，CLA為共軛亞油酸；同行肩注不同大寫
字母表示差異極顯著(P〈0. 01)，不同小寫字母表示差異顯著(P〈0. 05)。
添加不同劑量添加劑對熱應(yīng)激奶牛呼吸頻率和直腸溫度的影響見表io。
當(dāng)添加劑量達(dá)到200 g (試驗組C和試驗組D)時，奶牛的呼吸頻率極顯著下 降，直腸溫度顯著降低，但試驗組C和試驗組D之間無顯著性差異。
表10不同劑量添加劑對奶牛呼吸頻率和直腸溫度的影響
名稱A組B組C組D組
呼吸頻率(次/分鐘)80.26±7.32A77.78±7.02^73.36±6.65B71.90±6.82B
直腸溫度('c)39.56±0.32a39.34士0.3031539.13±0.33b39,12±0.34b
注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯芙(PO.Ol)，不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。 結(jié)論當(dāng)本添加劑添加量達(dá)到200g時效果明顯，可以提高產(chǎn)奶量，但對
11乳成分沒有明顯影響；同時影響乳脂脂肪酸的組成，降低中、短鏈脂肪酸的含 量，增加長鏈不飽和脂肪酸的含量；還可以減低熱應(yīng)激奶牛的呼吸頻率和直腸 溫度，緩解奶牛的熱應(yīng)激反應(yīng)。但添加量為400 g與添加量為200 g之間效果 差異不大。為節(jié)約成本確定以添加量200g為佳。
6.1試驗動物
經(jīng)產(chǎn)或產(chǎn)犢30 45天，產(chǎn)奶量和體重相近的健康中國荷斯坦奶牛21頭。 6.2試驗樣
樣品共軛亞油酸鈣(中山尤利卡天然藥物有限公司，含c9tl1 CLA-Ca 約50%和tl0cl2 CLA-Ca約50%)，飼料添加劑2(從實施例2獲得)。 6.3試驗方法
將21頭奶牛隨機分成3組，每組7頭。對照組A飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組 B飼喂基礎(chǔ)日糧+200g共軛亞油酸鈣，試驗組C飼喂基礎(chǔ)日糧+200g添加劑2。 日糧組成參照NRC (2001)配制，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見實施例4。
試驗動物的飼養(yǎng)管理奶牛采取舍飼栓系飼養(yǎng)，全混合日糧(TMR)每天 飼喂2次，自由飲水，管道式機器擠奶每日2次(7:00, 19:00)。試驗持續(xù)8 周，預(yù)試期1周，正試期7周。
試驗測定指標(biāo)在試驗期間主要測定指標(biāo)有產(chǎn)奶量、乳成分(乳脂、乳蛋 ta和乳糖)和血清抗氧化指標(biāo)。血清抗氧化指標(biāo)包括超氧化物歧化酶、谷胱苷 肽過氧化物酶、丙二醛、活性氧和總抗氧化能力。各指標(biāo)的測定方法見實施例 4中4.3項下所述。
6.4試驗結(jié)果
從表ll可以看出，試驗組B奶牛的產(chǎn)奶量與對照組A之間無顯著性差異， 但試驗組C奶牛的產(chǎn)奶量顯著高于對照組A。試驗組B的牛奶乳脂率極顯著低于 對照組A，而試驗組C的牛奶乳脂率和對照組A之間差異不明顯。乳蛋白率和
乳糖率在對照組和試驗組之間沒有顯著性差異。
表ll共軛亞油酸鈣和添加劑對奶牛產(chǎn)奶量和乳成分的影響_
____C組
產(chǎn)奶量(kg/d) 15.68±1.53a 16.32±1.65a 18.14±1.46b
乳脂率(％) 3,43±0.26A 2.78±0.22B 3.20±0.31A
乳蛋白率(o/0) 3.29±0.35 3.33±0.30 3.39±0.22
乳糖率(％) 4.56±0.44 4.62±0.43 4.52±0.54注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(PO.Ol),不同小寫字母表示差異顯著(P〈0.05)。 從表12可以看出，試驗組B奶牛的抗氧化指標(biāo)與對照組A相比沒有顯著 性差異，但試驗組C奶牛的超氧化物歧化酶和谷胱苷肽過氧化物酶活性顯著 升高，丙二醛和活性氧含量極顯著下降，總抗氧化能力極顯著升高。
表12共軛亞油酸鈣和添加劑對奶牛血清抗氧化指標(biāo)的影響
名稱A組B組C組
超氧化物歧化酶(U/mL)40.12±3.13a41.24±3.42a47.34±3.68b
谷胱苷肽過氧化物酶(U/mL)108.29±9.74a111.23±10.08a122.03±11.06b
丙二醒(nmol/mL)5.02±0.44A5.04±0.36A4.67±0.40B
活性氧(U/mL)1728.51±35.32A1734.12±51.22A1565.22±65.13B
總抗氧化能力(U/mL)3.97±0.34A3.92±0.40A4.22±0.33B
注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(P〈0.01)，不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
結(jié)論本發(fā)明的添加劑可以緩解共軛亞油酸鈣引起的乳脂抑制，提高乳脂 率，從而改善牛奶的營養(yǎng)功能；同時添加劑還可以提高奶牛的抗氧化性能，有 利于奶牛自身機體正常體況的維持，減少疾病的發(fā)生。 實施例7奶牛在熱應(yīng)激和非熱應(yīng)激條件下的對比實驗
7.1試驗動物
在夏季和冬季各選擇經(jīng)產(chǎn)或產(chǎn)犢30 45天的產(chǎn)奶量和體重相近的健康中 國荷斯坦奶牛14頭。 7.2試驗樣品
樣品飼料添加劑2 (從實施例2中獲得)。
義3試驗方法
將夏季14頭荷斯坦奶牛隨機分成2組(熱應(yīng)激對照組A和熱應(yīng)激試驗組 B)，每組7頭；將冬季14頭荷斯坦奶牛隨機分成2組(非熱應(yīng)激對照組C和 非熱應(yīng)激試驗組D)，每組7頭。兩個對照組(A和C)飼喂基礎(chǔ)日糧，兩個 試驗組(B和D)飼喂基礎(chǔ)日糧+200 g添加劑2 (從實施例2中獲得)。日糧 組成參照NRC (2001)配制。基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平如實施例4中表1和 表2所示。
試驗動物的飼養(yǎng)管理奶牛采取舍飼栓系飼養(yǎng)，全混合日糧(TMR)每天 飼喂2次，自由飲水，管道式機器擠奶每日2次(7:00， 19:00)。夏季試驗和 冬季試驗都持續(xù)4周，預(yù)試期1周，正試期3周。牛舍內(nèi)溫濕度的測定方法見 實施例4中4.3項下所述。試驗測定指標(biāo)在試驗期間主要測定指標(biāo)有產(chǎn)奶量、乳成分(乳脂、乳蛋 白和乳糖)含量、乳脂脂肪酸組成、奶牛呼吸頻率、直腸溫度和血清抗氧化指 標(biāo)。血清抗氧化指標(biāo)包括超氧化物歧化酶、谷胱苷肽過氧化物酶、丙二醛、活
性氧和總抗氧化能力。各指標(biāo)的測定方法見實施例4中4.3項下所述。 7.4試驗結(jié)果
夏季試驗期牛舍內(nèi)溫度為25.3 32.9'C，平均為29.6'C。溫濕度指數(shù)(THI) 為76.4 84.3，平均為80.7。冬季試驗期牛舍內(nèi)溫度為5.2 17.1aC,平均為 13.6°C。溫濕度指數(shù)(THI)為30.4 64.3，平均為57.8。通常認(rèn)為THI超過 72時即可對奶牛產(chǎn)生熱應(yīng)激反應(yīng)，因此，本試驗?zāi)膛Ｔ谙募咎幱跓釕?yīng)激狀態(tài)， 在冬季處于非熱應(yīng)激狀態(tài)。
從表13和表14可以看出，添加劑在熱應(yīng)激期和非熱應(yīng)激期都可以顯著增加
奶牛的產(chǎn)奶量，但對乳脂率、乳蛋白率和乳糖率沒有明顯影響。
_表13添加劑在熱應(yīng)激期對奶牛產(chǎn)奶量和乳成分的影響_
_^_^_^_
產(chǎn)奶量(kg/d) 16.27±1.42a 18.57±1.60b
乳脂率(％) 3.33±0.44 3.36±0.42
乳蛋白率(％) 3.32±0.31 3.35±0.38
_乳糖率(％)_4.60±0.41_4.55±0.35
注同行肩注不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
_表14添加劑在非熱應(yīng)激期對奶牛產(chǎn)奶量和乳成分的影響_
_^_￡^__
產(chǎn)奶量(kg/d) 19.34±1.65a 2U5±1.94b
乳脂率(％) 3.42±0.52 3.46±0.50
乳蛋白率(％) 3.32±0.32 3.33±0.29
_乳糖率(％)_4.57±0.47_4.62±0.43_
注同行肩注不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
從表15和表16可以看出，添加劑在熱應(yīng)激期和非熱應(yīng)激期都可以降低奶 牛乳脂中短鏈和中鏈脂肪酸(C4:0、 C6:0、 C8:0、 C10:0、 C12:0、 C14:0、 C14:l 和C16力)的含量，但可以增加乳脂中長鏈脂肪酸C18:1和C18:2的含量。同 時，乳脂中c9tllCLA和tl0cl2CLA含量在熱應(yīng)激期和非熱應(yīng)激期都極顯著增 加。
14表15添加劑在熱應(yīng)激期對奶牛乳脂脂肪酸含量的影響
脂肪酸(g/100g) a組 b組
C4:03.92±0.35a3.34Hr0.28b
C6:01.88±0.15a1.44±0.13b
C8:01.35±0.12A0.89±0.09B
C10:03.21±0.27A2.58±0.22B
C12:03.03±0.22a2.55±0.22b
C14:01U2±1.12A9.60±0.78B
C14:l0.89±0.06A0.52±0.05B
C16:029.55±2.44a26,54±2.22b
C16:l1.54±0.321.45±0.33
C18:011.87±3.1511.94±3.33
C18:l26.12±2.34A29.56±2.42B
C18:22.45±0.22A3.03±0.24B
CLAc9tl10.55±0.05A0.99±0.08B
CLAtl0c12<0.01±0.01A0.14:t0.01B
C18:30.35±0,130.37±0.15
C20:00.20±0.140.21±0.12
脂肪酸中小寫字母c表示順式，t表示反式，CLA為共軛亞油酸。
E:同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(P〈0.01),不同小寫字母表示差異顯著(PO.O:表16添加劑在非熱應(yīng)激期對奶牛乳脂脂肪酸含量的影響月旨肪酸(g膽g)C組D組
C4:03.90±0.23a3.33±0.25b
C6:01.86±0.16a1.45±0.12b
C8:01.33±0.13A0.90±0.09B
C翻3.22±0.26A2.57±0.22B
C12:03.02±0.20a2.56±0.21b
C14:011.33±1.13A9.64±0.77B
C14:l0.88±0.08A0.50±0.05B
C16:029.60±2.52a26.48±2.31b
C16:l1.56±0.341.50±0.35
C18:0U.90±2.6511.95±2.73C18:l
C18:2 CLA c9tl 1 CLAtl0c12
C18:3
_C20:0
脂肪酸中小寫字母c表示順式，t表示反式，CLA為共軛亞油酸。
注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(PO.Ol)，不同小寫字母表示差異顯著(P0.05) 從表17和表18可以看出，在熱應(yīng)激時期，添加劑可以極顯著降低奶牛的 呼吸頻率和顯著降低奶牛的直腸溫度。但在非熱應(yīng)激時期，添加劑對奶牛的呼 吸頻率和直腸溫度沒有顯著影響。
表17添加劑在熱應(yīng)激期對奶牛呼吸頻率和直腸溫度的影響__
__^_5_
呼吸頻率(次/分鐘) 79.23±6.02A 70.68±5.70B
直腸溫度('C) 39.56±0.32a 39.08±0.23b
注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(P〈0.01)，不同小寫字母表示差異顯著(P〈0.05)。
_表18添加劑在非熱應(yīng)激期對奶牛呼吸頻率和直腸溫度的影響_
_§^_^_2_
呼吸頻率(次/分鐘) 39.72±5.24 40.68±6.87
直腸溫度(。C) 38.06±0.43 38.12±0.34
從表19和表20可以看出，添加劑在熱應(yīng)激期和非熱應(yīng)激期都可以顯著升 高超氧化物歧化酶和谷胱苷肽過氧化物酶的活性；極顯著降低丙二醛和活性氧 的含量，并顯著提高總抗氧化能力。
_表19添加劑在熱應(yīng)期對奶牛血清抗氧化指標(biāo)的影響_
__ A組 B組
超氧化物歧化酶(U/mL) 谷胱苷肽過氧化物酶(U/mL) 丙二醛(nmol/mL) 活性氧(U/mL)
_總抗氧化能力(U/mL)
注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(PO.Ol)，不同小寫字母表示差異顯著(P〈0.05)。
26.02±2.13
2.54±0.23'
0.56±0.0^
<0.01±0.01
0.36±0.15 0.23±0.13
29.45士2.34'
3.02±0.23B
1.01±0.07B
0.13±0.01B
0.34±0.16 0.22±0.13
42.02±3.23A 106.89±11.37a
5.44±0.45A 1742.53士54.44'
3.90±0.22A
49.45±3.68B 121.23±9.34b 4.68±0.37B 1565.52i65.071 4.41±0.19B
16表20添加劑在非熱應(yīng)期對奶牛血清抗氧化指標(biāo)的影響
名稱C組D組
超氧化物歧化酶(U/mL)51.10±4.02A58.34±3.76B
谷胱苷肽過氧化物酶(U/mL)120.24±9.35a132.07±10.24b
丙二醛(nmol/mL)4.21±0.34A3.66±0.32B
活性氧(U/mL)1474.26±55.32A1320.04±49.32B
總抗氧化能力(U/mL)4.50±0.33a4.83±0.21b
注同行肩注不同大寫字母表示差異極顯著(PO.Ol)，不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
結(jié)論本添加劑在熱應(yīng)激期和非熱應(yīng)激期都可以增加奶牛產(chǎn)奶量和乳脂中 共軛亞油酸的含量，從而改善乳品質(zhì)，但對乳成分沒有明顯影響。添加劑在熱 應(yīng)激時期可以降低奶牛的呼吸頻率和直腸溫度，有利于緩解奶牛的熱應(yīng)激反 應(yīng)。但在非熱應(yīng)激期對奶牛的呼吸頻率和直腸溫度沒有顯著影響。在熱應(yīng)激期 和非熱應(yīng)激期，添加劑都可以提高奶牛的抗氧化性能，有利于奶牛自身機體正 常體況的維持，減少疾病的發(fā)生。
權(quán)利要求
1、一種提高奶牛乳品質(zhì)和抗熱應(yīng)激的飼料添加劑，其特征在于由共軛亞油酸鈣、納米硒和維生素E組成，其組成為每1千克共軛亞油酸鈣加入納米硒15～50mg和維生素E 25,000～75,000IU，每頭奶牛每天添加100～400g的飼料添加劑。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高奶牛乳品質(zhì)和抗熱應(yīng)激的飼料添加劑，其 特征在于每1千克共軛亞油酸鈣加入納米硒30 mg和維生素E 50,000 IU， 夢頭奶牛每天添加200 g的飼料添加劑。
全文摘要
提高奶牛乳品質(zhì)量和奶?？篃釕?yīng)激的飼料添加劑，涉及動物飼料添加劑。該添加劑是由共軛亞油酸鈣、硒和維生素E組成，其配比為每1千克共軛亞油酸鈣加入硒15～50mg和維生素E 25,000～75,0000IU。優(yōu)點是不僅能提高奶牛乳脂產(chǎn)量和乳脂中不飽和脂肪酸的含量以及牛奶中硒和VE的含量，改善乳品質(zhì)量，還能有效緩解奶牛的熱應(yīng)激反應(yīng)，提高產(chǎn)奶量，另外還可以減少熱應(yīng)激奶牛體內(nèi)的活性氧而減少過氧化反應(yīng)，從而減少熱應(yīng)激對奶牛的損傷，提高奶牛機體的抗氧化能力。而且產(chǎn)品制作工藝簡單，無需特殊的設(shè)備，使用安全方便，無副作用。
文檔編號A23K1/18GK101579059SQ20091004063
公開日2009年11月18日 申請日期2009年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月29日
發(fā)明者冀軍鋒, 冀紅斌, 劉朝亮, 征 李, 楊得坡, 林少寶, 承 梅, 王冬梅, 董衛(wèi)星, 趙偉師 申請人:廣州風(fēng)行牛奶有限公司;中山大學(xué);中山市尤利卡天然藥物有限公司