專利名稱：一種蛭形輪蟲大量培養(yǎng)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蛭形輪蟲的大量培養(yǎng)的方法，屬蛭形輪蟲新的培養(yǎng)方法及新型餌料加工及 使用技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
蛭形輪蟲(bdelloid rotifer)廣泛存在于凈水以及污水生態(tài)環(huán)境中其特征為尾部末端有分 叉的趾，趾內(nèi)的腺體可分泌粘液，使其能夠粘著在其它固體(活性污泥、生物膜)的表面以 營附著生活。因其具有強(qiáng)有力的攝食懸浮固體的能力而受到廣泛的關(guān)注。在污水生物處理反 應(yīng)器中常見的蛭形輪蟲有旋輪屬(戶Mo&"a)、輪蟲屬(/ oton'")、以及宿輪屬(#a&ofracto) 輪蟲。蛭形輪蟲不僅可通過攝食懸浮固體達(dá)到凈化水體和減少剩余污泥量的作用，同時對活 性污泥或生物膜的形成、細(xì)菌的活性也有促進(jìn)作用。目前對輪蟲培養(yǎng)方法的研究甚多，但主 要以臂尾輪蟲屬(3rao^"omy)、晶囊輪蟲屬0^; /""c/2朋)，椎輪蟲屬(JVo/ow;w to)等一些浮游 生活型輪蟲為主。而對污水生物處理中有著重要作用的蛭形輪蟲的研究為數(shù)不多。
傳統(tǒng)用于培養(yǎng)蛭形輪蟲的餌料以生物餌料細(xì)菌和藻類為主。細(xì)菌和藻類雖能滿足輪蟲捕 食的需要，但細(xì)菌培養(yǎng)周期長，同吋細(xì)菌溶液需要新鮮配置使用不方便，培養(yǎng)中也極易絮凝 不宜捕食。而藻類雖營養(yǎng)很高，但通常粒徑過大不適宜蛭形輪蟲捕食，同時藻類作為牛物體 也需要一定的培養(yǎng)條件，因此使用不太方便同時提高了培養(yǎng)的費用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種用非生物餌料——小麥面粉進(jìn)行大量培養(yǎng)蛭形輪蟲的方法。
本發(fā)明是一種蛭形輪蟲大量培養(yǎng)的方法，其特征在于具有以下的步驟和特征
a、 利用非生物餌料溶液作為蛭形輪蟲生長的食物。其制備過程如下取一定量的小麥面 粉作為餌料原料，首先將小麥面粉滅菌處理，再加入一定量的無菌水，小麥面粉與無菌水的
重量體積比為0.75~0.85g/100mL，即每100mL的蒸餾水中加入0.75~0.85g的小麥面粉；將配 置好的溶液再經(jīng)超聲波破碎，在超聲波破碎過程中要適當(dāng)?shù)慕禍兀悦馄扑檫^程中產(chǎn)生大量 的熱量使小麥面粉溶液呈糊狀；將破碎后的面粉溶液沉降1小時后棄去底部沉淀的面粉，以 去除大粒徑的面粉顆粒，并保證其粒度均勻；再次沉降24h后取其上清液，最終得到的餌料 溶液即面粉懸濁液的濃度在5xl()S粒/mL左右，且粒徑分布在0.2~0.3pm范圍內(nèi)；最后將培養(yǎng) 液的pH值調(diào)節(jié)至5~7范圍內(nèi)；將配制好的餌料溶液保存于冰箱中待用。
b、 將上述制得的非生物佴料溶液加入于事先準(zhǔn)備好的無菌的培養(yǎng)皿中，每毫升培養(yǎng)液中投加10~100|aL所述餌料溶液。
c、在上述培養(yǎng)液中接種蛭形輪蟲，接種的初始密度為lind/mL。將其置于25'C恒溫培養(yǎng) 箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)12天后，培養(yǎng)皿中輪蟲的密度可達(dá)100~200ind/mL。 本發(fā)明的優(yōu)點和特點如下所述
本發(fā)明的特點是采用便宜易得的小麥面粉作為培養(yǎng)蛭形輪蟲的餌料，餌料的制作過程簡 單可行，制成的餌料使用方便、不易變質(zhì)、易于保存，即可降低培養(yǎng)成本。而且普通的小麥 面粉中含有大量的礦物元素，氨基酸，維生素和特定的多糖能提供充足的營養(yǎng)能滿足輪蟲生 長的各種需要。經(jīng)培養(yǎng)，培養(yǎng)皿中的輪蟲密度可達(dá)100-200ind/mL。
此外，實驗研究得出，蛭形輪蟲生長最適合的面粉溶液的pH值范圍為5 7，生長最佳的 pH值為6。在此條件下，輪蟲生長健康，繁殖快。


圖1為傳統(tǒng)用混合細(xì)菌為餌料時輪蟲的種群密度變化曲線圖。 圖2為以本發(fā)明的面粉溶液作為培養(yǎng)餌料時輪蟲的種群密度變化曲線圖。 圖3為本發(fā)明面粉溶液用于培養(yǎng)輪蟲與傳統(tǒng)的混合細(xì)菌培養(yǎng)輪蟲時的比生長速率大小比 較圖。
具體實施例方式
現(xiàn)將本發(fā)明的具體實施例敘述于后。 實施例1
本實施例中的蛭形輪蟲培養(yǎng)過程和步驟如下
(1) 稱取經(jīng)滅菌處理的小麥面粉3.8克，加入于500毫升的無菌水中，然后將該溶 液經(jīng)超聲波破碎，在超聲波破碎中適當(dāng)降溫，以免產(chǎn)生大量的熱量使小麥面粉 溶液呈糊狀；將破碎后的面粉溶液沉降l小時后棄去底部沉淀的面粉，以去除 大粒徑的面粉顆粒，并保證其粒度均勻；再次沉降24h后取其上清液，最終得 到的餌料溶液即面粉懸濁液的濃度在5xl06粒/mL左右，且粒徑分布在 0.2~0.3nm范圍內(nèi)；最后將培養(yǎng)液的pH值調(diào)節(jié)至5~7范圍內(nèi)；將配制好的館 料溶液保存于冰箱中待用。
(2) 將上述制得的非生物餌料溶液加入于事先準(zhǔn)備好的無菌的培養(yǎng)皿中，每毫升培 養(yǎng)液中投加不同量的所述餌料溶液。即分別加入IO、 50、 IOO微升的餌料溶液 組成三組平行樣。(3)將上述三組試樣分別置于25。C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。經(jīng)12天培養(yǎng)后，輪蟲的平 均密度可達(dá)102.7ind/mL。
對比實驗
將本發(fā)明的面粉溶液與傳統(tǒng)混合細(xì)菌作為培養(yǎng)輪蟲的餌料時的對比實驗結(jié)果如附圖中圖 1、圖2和圖3所示。
圖1表示以混合細(xì)菌為餌料時輪蟲的種群密度變化圖，由圖中可以得出，輪蟲以混合細(xì) 菌為餌料的培養(yǎng)時可以達(dá)到最大種群密度為34.33ind/mL。圖2表示本發(fā)明面粉溶液用于培養(yǎng) 時輪蟲的種群密度變化圖，由圖中可以得出，輪蟲以本發(fā)明面粉溶液為餌料的培養(yǎng)下可以達(dá) 到最大種群密度為102.7ind/mL。圖3表示本發(fā)明面粉溶液用于培養(yǎng)輪蟲與以混合細(xì)菌為餌料 時輪蟲的比生長速率大小比較圖，由圖可以得出，以本發(fā)明面粉溶液為餌料的培養(yǎng)下輪蟲的 比生長速率大小為0.6109d—、以混合細(xì)菌為餌料的培養(yǎng)下，輪蟲的比生長速率大小為 0.3231d-1。
由圖l， 2， 3比較得，本發(fā)明餌料溶液十分有利于蛭形輪蟲種群的增長，在其培養(yǎng)下，輪蟲 的種群密度以及比生長速率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于以混合細(xì)菌為餌料培養(yǎng)下的情況，可見，本發(fā)明作為蛭 形輪蟲的餌料不僅是可行的，而且具有較好的培養(yǎng)效果。
權(quán)利要求
1、一種蛭形輪蟲大量培養(yǎng)的方法，其特征在于具有以下的步驟和特征a、利用非生物餌料溶液作為蛭形輪蟲生長的食物；其制備過程如下取一定量的小麥面粉作為餌料原料，首先將小麥面粉滅菌處理，再加入一定量的無菌水，小麥面粉與無菌水的重量體積比為0.75～0.85g/100mL，即每100mL的蒸餾水中加入0.75～0.85g的小麥面粉；將配置好的溶液再經(jīng)超聲波破碎，在超聲波破碎過程中要適當(dāng)?shù)慕禍兀悦馄扑檫^程中產(chǎn)生大量的熱量使小麥面粉溶液呈糊狀；將破碎后的面粉溶液沉降1小時后棄去底部沉淀的面粉，以去除大粒徑的面粉顆粒，并保證其粒度均勻；再次沉降24h后取其上清液，最終得到的餌料溶液即面粉懸濁液的濃度在5×106粒/mL左右，且粒徑分布在0.2～0.3μm范圍內(nèi)；最后將培養(yǎng)液的pH值調(diào)節(jié)至5～7范圍內(nèi)；將配制好的餌料溶液保存于冰箱中待用；b、將上述制得的非生物餌料溶液加入于事先準(zhǔn)備好的無菌的培養(yǎng)皿中，每毫升培養(yǎng)液中投加10～100μL所述餌料溶液；c、在上述培養(yǎng)液中接種蛭形輪蟲，接種的初始密度為1ind/mL；將其置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)12天后，培養(yǎng)皿中輪蟲的密度可達(dá)100～200ind/mL。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種蛭形輪蟲的大量培養(yǎng)的方法，屬蛭形輪蟲新的培養(yǎng)方法及新型餌料加工及使用技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供了一種用非生物餌料——小麥面粉作為餌料大量培養(yǎng)蛭形輪蟲的方法，其特點是采用滅菌處理后的小麥面粉加入于一定量的無菌水中，小麥面粉與無菌水的重量體積比為0.75～0.85g/100mL，即每100毫升無菌水中加入0.75～0.85克的小麥面粉，然后經(jīng)超聲波破碎，再將其靜置沉降24小時，取其上清液，調(diào)節(jié)pH值至5～7。將該餌料溶液放入事先準(zhǔn)備好的輪蟲培養(yǎng)液中，并置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12天，結(jié)果輪蟲的密度可達(dá)100～200ind/mL。本發(fā)明餌料來源廣泛，制作方便，可簡化培養(yǎng)過程，降低成本。
文檔編號A01K67/00GK101455192SQ20091004482
公開日2009年6月17日 申請日期2009年1月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月4日
發(fā)明者丁國際, 汪燁蕊, 沈成媛, 薛素嬌, 惠 許 申請人:上海大學(xué)