專利名稱：矮牽牛體細(xì)胞自然突變個(gè)體組培擴(kuò)繁方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種花卉突變個(gè)體的組織培養(yǎng)以擴(kuò)大種群繁殖 的方法。
背景技術(shù)：
矮牽牛(戶e"/zia A^r/VaVilm)是茄科碧冬茄屬(矮牽牛 屬)的一種多年生草本植物，常作一、二年生栽培，抹高15— 60cm,全沐陂粘毛，莖基部木質(zhì)化，嫩莖直立，老莖匍旬狀。單 葉互生，卵形，全緣，近無柄，上部葉對(duì)生。花單生葉腋或頂生， 花較大，花冠漏斗狀，邊緣5淺裂?；ㄆ?—10月。蒴果，種子 細(xì)小。
本申請(qǐng)人在1998年8月對(duì)矮牽牛進(jìn)行葉片組織培養(yǎng)，使其 在葉片上直接萌發(fā)出不定芽，然后將其在試管中培養(yǎng)生根再移植 盆栽直至開花，發(fā)現(xiàn)了花形特異而美麗的細(xì)胞變異個(gè)體，其花冠 邊緣由淺裂變深裂，呈細(xì)鈹褶狀，且有白色細(xì)條紋鑲邊，花形及 花色均與普通矮牽牛有明顯差異。在確定此變異發(fā)生的試管苗標(biāo) 記后，將其再進(jìn)行試管繼代擴(kuò)繁并進(jìn)一步移植盆栽，得到與其相 同的花形變異矮牽牛植林，保存擴(kuò)繁至今已有十一年。因矮牽牛 有自花不孕的生物學(xué)特性，靠異花授粉種子繁殖的方法不能保持 其特異性狀，自然扦插不易生根，只有逐年用組培方法擴(kuò)繁，保 存性狀，維持種苗。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是將這一細(xì)胞自然突變形成的矮 牽牛珍稀小苗用組織培養(yǎng)育種繁殖的方法，保存性狀擴(kuò)大種群，更快更廣泛地向社會(huì)提供一種更具觀賞價(jià)值的矮牽牛新物種，增 添矮牽牛家族中的新成員。
解決上述技術(shù)問題的方案是本矮牽牛試管育種繁殖方法經(jīng) 過下列步驟
(1) 矮牽牛突變小苗的繼代擴(kuò)繁將新發(fā)現(xiàn)的矮牽牛突變 試管小苗作培植體，每4周繼代擴(kuò)繁，接種于小苗分化培養(yǎng)基中， 該培養(yǎng)基由MS鹽類添加磷酸二氫鈉85g/L與White's維生素， 及30g/L蔗糖、100mg/L肌醇、8g/L瓊脂、加入2mg/L BA即節(jié) 氨基腺嘌吟、0. 5mg/L IAA即吲哚乙酸、80mg/L Adenine sulfate 即硫酸腺噤吟和50mg/L L-Tyrosine即酪氨酸配制而成，溫度 251C，光照強(qiáng)度25001ux，光照時(shí)間16h/天，培養(yǎng)30天，得明 顯增長(zhǎng)且分化新的小芽；
(2) 誘導(dǎo)生根與移栽當(dāng)小芽長(zhǎng)至0.5—lcm高，接種到步 驟(1)所述的MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)30天后，便自然發(fā)根，正常情 況下生根率達(dá)100%。小苗移至馴化室，強(qiáng)光200001ux下馴化兩 周移栽，先洗去根部培養(yǎng)基，移至于三者的體積比為蛭石珍珠 巖泥炭-l: 1: 1的人工混合基質(zhì)中盆栽，每盆套一透明塑料 袋，該袋每2天剪一小口， 二周后移入溫室栽種即成。
本發(fā)明的有益效果是將極難發(fā)生又偶然發(fā)現(xiàn)的、由細(xì)胞自然 突變形成花形特異而美麗的矮牽牛突變個(gè)體，避開其自花不孕和 扦插難生根的優(yōu)良性狀保存的難題，用組培擴(kuò)繁方法保存性狀， 快速擴(kuò)大種群，更快、更廣泛地向社會(huì)提供一種更具觀賞價(jià)值的 矮牽牛新物種，增添矮牽牛家族中的新成員。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明下面結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步詳述本矮牽牛試管繁育的 培養(yǎng)基中，先選用的植物生長(zhǎng)激素是0. 3 —3mg/L的BA加0.5mg/L的IAA加80mg/L Adenine sulfate和50mg/L的 L-Tyrosine，這是經(jīng)過BA用0、 0.3、 1、 2、 3mg/L加0. 5mg/L 的IAA五種濃度重復(fù)3次，每次每種濃度有20個(gè)培植體的對(duì)比 試驗(yàn)得出的，2mg/L的BA加0. 5mg/L的IAA處理30天后，小芽 增長(zhǎng)最快分化最多?？傊?，本發(fā)明所公開的培養(yǎng)基及其配比值， 溫度、凝固劑等也可用諸如葡萄糖、瓊脂等替代，培養(yǎng)基各原料 的配比值也可分別采用本發(fā)明最佳方案定值的接近值取代，這是 顯而易見的。下面給出本發(fā)明的最佳實(shí)施例。 本矮牽牛試管育種繁殖方法經(jīng)過下列步驟
(1) 矮牽牛突變小苗的繼代擴(kuò)繁將新發(fā)現(xiàn)的矮牽牛突變 試管小苗作培植體,每4周繼代擴(kuò)繁，接種于小苗分化培養(yǎng)基中， 該培養(yǎng)基由MS鹽類添加磷酸二氫鈉85g/L與White's維生素， 及30g/L蔗糖、100mg/L肌醇、8g/L瓊脂、加入2mg/L BA即節(jié) 氨基腺嘌吟、0. 5mg/L IAA即吲咮乙酸、80mg/L Adenine sulfate 即硫酸腺嘌吟、50mg/LL-Tyrosine即酪氨酸配制而成，溫度25 X:，光照強(qiáng)度25001ux，光照時(shí)間16h/天，培養(yǎng)30天，得明顯 增長(zhǎng)且分化新的小芽；
(2) 誘導(dǎo)生根與移栽當(dāng)小芽長(zhǎng)至0.5—lcm高，接種到步 驟(1)所述的MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)30天后，便自然發(fā)根，生根率 達(dá)畫。小苗移至馴化室，強(qiáng)光200001ux下馴化兩周移栽，先 洗去根部培養(yǎng)基，移至于三者的體積比為蛭石珍珠巖泥炭=1: 1: 1的人工混合基質(zhì)中盆栽，每盆套一透明塑料袋，該袋每2 天剪一小口 ， 二周后移入溫室栽種即成。
上述培養(yǎng)基中MS鹽類和White's維生素及其它相關(guān)化學(xué)品 可市售獲得，按商品說明書配用，為同行所公知。
權(quán)利要求
1、一種矮牽牛體細(xì)胞自然突變個(gè)體組培擴(kuò)繁方法，其特征是經(jīng)過下列步驟(1)矮牽牛突變小苗的繼代擴(kuò)繁將新發(fā)現(xiàn)的矮牽牛突變?cè)嚬苄∶缱髋嘀搀w，每4周繼代擴(kuò)繁，接種于小苗分化培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基由MS鹽類添加磷酸二氫鈉85g/L與White’s維生素，及30g/L蔗糖、100mg/L肌醇、8g/L瓊脂、加入2mg/L BA即芐氨基腺嘌吟、0.5mg/L IAA即吲哚乙酸、80mg/L Adenine sulfate即硫酸腺嘌吟、50mg/L L-Tyrosine即酪氨酸配制而成，溫度25℃，光照強(qiáng)度2500lux，光照時(shí)間16h/天，培養(yǎng)30天，得明顯增長(zhǎng)且分化新的小芽；(2)誘導(dǎo)生根與移栽當(dāng)小芽長(zhǎng)至0.5-1cm高，接種到步驟(1)所述的MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)30天后，便自然發(fā)根，生根率達(dá)100％。小苗移至馴化室，強(qiáng)光20000lux下馴化兩周移栽，先洗去根部培養(yǎng)基，移至于三者的體積比為蛭石∶珍珠巖∶泥炭＝1∶1∶1的人工混合基質(zhì)中盆栽，每盆套一透明塑料袋，該袋每2天剪一小口，二周后移入溫室栽種即成。
全文摘要
一種矮牽牛體細(xì)胞自然突變個(gè)體組培擴(kuò)繁方法經(jīng)過下列步驟一是矮牽牛突變小苗的繼代擴(kuò)繁，以小苗作培植體，在特別配制與適其成長(zhǎng)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到明顯增長(zhǎng)且分化新的小芽；二是誘導(dǎo)生根與移栽，將小芽再接種到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中培養(yǎng)60天，正常情況下生根率達(dá)100％，再移至馴化室馴化兩周后移栽于人工基質(zhì)中，一周后即移入溫室栽種。采用本方法能克服矮牽牛自花不孕和扦插難發(fā)根的優(yōu)良性狀保存的難題，并快速地將極難得發(fā)現(xiàn)的自然突變且遺傳性狀穩(wěn)定的變異矮牽牛小苗繁育擴(kuò)種，培育出更具有觀賞價(jià)值的矮牽牛新物種。
文檔編號(hào)A01H4/00GK101578961SQ20091010010
公開日2009年11月18日 申請(qǐng)日期2009年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月22日
發(fā)明者偉 方, 朱圓圓, 林新春, 黃麗春 申請(qǐng)人:浙江林學(xué)院