專利名稱：：橘小實蠅蛋白引誘劑及其制備方法橘小實蠅蛋白弓I誘劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種昆蟲引誘劑及其制備方法，具體涉及一種橘小實蠅(Bac/raceracforsafcHendel)蛋白引誘劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：橘小實蠅(Sac加cerado"afoHendel)屬雙翅目實蠅科果實蠅屬，又稱東方果實蠅，是一種世界性檢疫害蟲。主要發(fā)生在熱帶和亞熱帶地區(qū)，1947年傳入夏威夷群島，現(xiàn)已成為東南亞、印度次大陸和夏威夷群島一帶的危險性果蔬害蟲。危害的植物種類在250種以上，尤其對蔬菜和水果危害嚴重。橘小實蠅不僅被我國農(nóng)業(yè)部列入1992年發(fā)布的《中華人民共和國進境植物檢疫危險性病、蟲、雜草名錄》，而且于1995年被農(nóng)業(yè)部確定為全國植物檢疫對象。目前防治橘小實蠅的方法主要有套袋技術(shù)、釋放不育雄蟲技術(shù)、ME滅雄和使用化學(xué)農(nóng)藥。采用套袋技術(shù)成本高，對于大部分水果而言是不可行。由于橘小實蠅的成蟲在自然狀態(tài)下存活時間長、飛行能力強，因此對于世界上大部分區(qū)域采用釋放不育雄蟲技術(shù)是不可行的，只對部分島嶼有效。ME對雌性成蟲引誘效果不佳，隨著人們環(huán)保、食品安全意識的加強，傳統(tǒng)施用化學(xué)農(nóng)藥的方法受到質(zhì)疑，雖然它能在短期內(nèi)產(chǎn)生一定效果，但污染環(huán)境，對人和其他有益昆蟲有毒，且易產(chǎn)生殘留和抗藥性。申請?zhí)枮?00410051506.1的發(fā)明專利，介紹了"一種桔小實蠅引誘劑"，引誘劑采用甲基丁香酚和乙酸乙酯為原料，組分配比為甲基丁香酚500-1體積分，乙酸乙酯l體積分。申請?zhí)枮?00410026928.3的發(fā)明專利，介紹了一種"桔小實蠅緩釋型引誘劑"，其組成成分中除甲基丁香酚和殺蟲劑外，還有二氧化硅、甲基纖維素和苯甲酸鈉。申請?zhí)枮?00510048764.9的發(fā)明專利，介紹了二種"桔小實蠅引誘劑"，第一種引誘劑的配比為甲基丁香酚1%-20%、糖4%-20%、酒精10%-30%、醋10%-30%、水30%-75%;第二種引誘劑的技術(shù)方案為將甲基丁香酚1-30體積份、糖醋酒精混合液500-200000體積份；分開并配合使用。申請?zhí)枮?00610037490.8的發(fā)明專利，介紹了"一種桔小實蠅引誘劑"，其組成按質(zhì)量分數(shù)計由甲基丁香酚5000-50份，丁酸乙酯1份組成。橘小實蠅誘殺的效果甚微。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種對雄性橘小實蠅和雌性橘小實蠅都具有高活性、高持效性的橘小實蠅蛋白弓I誘劑及其制備方法。本發(fā)明的橘小實蠅蛋白弓I誘劑的制備方法，其特征在于由制備水解蛋白液和配制橘小實蠅蛋白引誘劑2個步驟組成，具體方法如下1、制備水解蛋白液A、濃縮:取1000ml啤酒廢酵母，在恒溫振蕩器中加熱至9095°C，120r.mii!-1攪拌，并保溫3648h;B、冷卻冷卻至405(TC;C、酶解加入l2g丄-'木瓜蛋白酶，在恒溫振蕩器中120r.min"攪拌，并在6065。C條件下酶解2436h，得水解蛋白液。所述啤酒廢酵母為生產(chǎn)啤酒的副產(chǎn)物，其所含蛋白質(zhì)的重量百分率為4%7%、含糖的重量百分率為8%12%;所述木瓜蛋白酶為化學(xué)純，固體，由廣西龐博生物有限公司生產(chǎn)。2、配制橘小實蠅蛋白引誘劑以上述水解蛋白液和甲基丁香酚(d,HnO)為原料混配橘小實蠅蛋白弓I誘劑，各原料所占的體積份如—卜水解蛋白液9597體積份甲基丁香酚35體積份。所述甲基丁香酚(d,H,40)，購自江蘇未豐生化研究所。屮國是一個啤酒生產(chǎn)大國，廢啤酒酵母是啤酒工業(yè)的副產(chǎn)物，在啤酒生產(chǎn)過程中，經(jīng)主發(fā)酵和后發(fā)酵的釀造工藝之后大量產(chǎn)生，屬于真菌類，含有豐富的蛋白質(zhì)、核酸、維生素和礦物質(zhì)，其有效成分為蛋白質(zhì)4-7%、糖8-12%。我國現(xiàn)有啤酒企業(yè)500多家，年產(chǎn)啤酒近3000多萬噸，每年產(chǎn)啤酒廢酵母6090萬噸，對其進行綜合利用有很大的實際意義。橘小實蠅雌蟲和雄蟲都必須取食蛋白才能生長發(fā)育，本發(fā)明的橘小實蠅蛋白引誘劑對雌雄成蟲都有效。目前使用的橘小實蠅引誘劑，一般只對雄性成蟲有引誘作用，而橘小實蠅成蟲的危害特點是雌蟲在果實上產(chǎn)卵，從而造成爛果或影響其品質(zhì)。因此，橘小實蠅的雌蟲對生產(chǎn)的危害更大。而且，橘小實蠅雌性成蟲的壽命長，產(chǎn)卵量大，飛行能力強，活動范圍廣，成蟲壽命一般長達6070天，可多次交配、產(chǎn)卵，每雌成蟲產(chǎn)卵量4001000多粒。雖然誘殺雄蟲，能減少交配機會，但橘小實蠅可多次交配，且世代重疊，只要田間有性成熟的雄蟲，雌蟲的交配機會仍很大，故單一控制雄蟲的效果十分有限，本發(fā)明的橘小實蠅蛋白引誘劑對雌雄成蟲都具引誘作用，且對雌蟲的引誘率達到60%，對防控雌蟲的效果顯著，是-種能從根本上減少橘小實蠅為害的生物防治方法。蛋白質(zhì)是橘小實蠅生長過程中必不可少的營養(yǎng)源，尤其對于生殖系統(tǒng)發(fā)育作用明顯，成蟲羽化后必須補充營養(yǎng)，性成熟后才能交尾產(chǎn)卵。水解蛋白液中的小肽、氨基酸、降解過程產(chǎn)生的氨等物質(zhì)具有一定的揮發(fā)性，對橘小實蠅成蟲有良好的引誘作用。蛋白引誘劑是目前能有效引誘橘小實蠅雌蟲的引誘劑。雖然糖醋液幾乎對所有昆蟲都具有引誘作用，但由于其價格、效果及實用等方面局限性，一般不用于田間防控害蟲。本發(fā)明以啤酒廢酵母為主要原料生產(chǎn)橘小實蠅蛋白引誘劑，具有原材料來源廣，生產(chǎn)工藝簡單，成本低的特點；本發(fā)明的橘小實蠅蛋白引誘劑是具有高活性、高持效性，引誘雌蟲效果好、且對雌雄橘小實蠅都有引誘作用的蛋白引誘劑。具體實施方式為了充分公開本發(fā)明的橘小實蠅蛋白引誘劑，以下結(jié)合實施例加以說明。實施例一、一種橘小實蠅蛋白引誘劑的制備方法如下1、制備水解蛋白液A、濃縮取1000ml啤酒廢酵母，在SHZ-82A恒溫振蕩器中加熱至95°C，120r.min"攪拌，并保溫40h;B、冷卻取出冷卻至45。C;C、酶解加入2g丄-'木瓜蛋白酶后，在SHZ-82A恒溫振蕩器中120r.min-'攪拌，并且在62"C條件下酶解30h，酶解后的酶解液即水解蛋白液，4'C保存?zhèn)溆?。所述啤酒廢酵母為生產(chǎn)啤酒的副產(chǎn)物，其所含蛋白質(zhì)的重量百分率為4%7%、含糖的重量百分率為8%12%;所述木瓜蚩白酶為化學(xué)純，固體，由廣西龐博生物有限公司生產(chǎn)；所述保溫攪拌，使用常州國華儀器有限公司生產(chǎn)的SHZ-82A恒溫振蕩器。2、配制蛋白引誘劑按水解蛋白液為96體積份，甲基丁香酚為4體積份混配，即為本發(fā)明的橘小實蠅蛋白引誘劑。國內(nèi)啤酒工業(yè)的副產(chǎn)物啤酒廢酵母，一般都含蛋白質(zhì)4%7%、含糖8%12%,符合生產(chǎn)橘小實蠅蛋白引誘劑所需的水解蛋白液的要求。如果啤酒廢酵母的蛋白質(zhì)和糖的含量達不到上述標(biāo)準(zhǔn)，可先濃縮至標(biāo)準(zhǔn)含量后再投入生產(chǎn)水解蛋白液。實施例二一種橘小實蠅蛋白弓i誘劑的使用效果1、室內(nèi)生物測定方法每籠40頭試蟲，雌雄各20頭，飼喂糖和水，測試前l(fā)h停止飼喂。在兩個自制誘瓶中分別加入2ml蛋白餌劑和水(對照)，放入養(yǎng)蟲籠的對角線位置，15min后旋轉(zhuǎn)18(T，30min后統(tǒng)計兩個誘瓶中實蠅的數(shù)量，并分別記錄雌雄的數(shù)量。7:00A.M8:30A.M間迸行，測試前10min拿走飼料和水，測試時間為30min。2、數(shù)據(jù)處理引誘率=(蛋白餌劑引誘數(shù)量-對照引誘的數(shù)量)/40X100%3、結(jié)果與分析(l)水解蛋白對性成熟前期橘小實蠅成蟲的室內(nèi)生物測定結(jié)果如表1所示，水解蛋白對5日齡橘小實蠅成蟲的引誘效果最佳，引誘率達到60.0%，其中雌性和雄性的引誘率分別為63.3%和56.7%。表l水解蛋白對不同日齡橘小實蠅成蟲的引誘率<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>(2)甲基丁香酚對橘小實蠅成蟲引誘效果的室內(nèi)生物測定結(jié)果如表2所示。甲基丁香酚對雄蟲的引誘效果較好，平均可達卯.0%以上，對雌蟲引誘效果差，總體引誘率只有47.5%。表2甲基丁香酚對橘小實蠅引誘效果的測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>(3)水解蛋白中添加不同比例的甲基丁香酚對橘小實蠅成蟲引誘效果的5%的甲基丁香酚后，引誘率平均超過70.0%，最高可達71.7%，相對單獨使用水解蛋白和甲基丁香酚，其效果分別增力口10.8%和23.3%。當(dāng)甲基丁香酚的添加比例超過5%時，引誘至誘集瓶屮的橘小實蠅成蟲很快就會抽搐死亡；而且，添加了較高比例的甲基丁香酚，會掩蓋水解蛋白的揮發(fā)性味道，導(dǎo)致雌蟲引誘效果降低。表3水解蛋白中添加不同比例甲基丁香酚引誘效果的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>4、使用方法本發(fā)明的橘小實蠅蛋白引誘劑在果園的使用量為100ml/畝，使用方法于水果轉(zhuǎn)色期至成熟期內(nèi)，懸掛誘捕器于距地面1.0-1.5m處，每畝IO個；每個誘捕器以棉花為誘芯，吸取10ml橘小實蠅蛋白引誘劑即可。(1)橘小實蠅蛋白引誘劑對橘小實蠅的引誘率平均為70.8%，與單獨使用水解蛋白和甲基丁香酚相比，引誘效果分別增加10.8%和23.3%;(2)橘小實蠅蛋白引誘劑的使用成本為16.7元/畝.年，與單獨使用GF-120和甲基丁香酚相比，價格分別降低了27.7°/。和89.6%。所述GF-120為美國陶氏益農(nóng)公司開發(fā)的一種瓜實蠅蛋白餌劑，通常被用于替代橘小實蠅引誘劑，但使用效果較差。權(quán)利要求1、一種橘小實蠅蛋白引誘劑的制備方法，其特征在于由制備水解蛋白液和配制橘小實蠅蛋白引誘劑2個步驟組成，具體方法如下(1)制備水解蛋白液A、濃縮取1000ml啤酒廢酵母，在恒溫振蕩器中加熱至90～95℃，120r.min-1攪拌，并保溫36～48h；B、冷卻冷卻至40～50℃；C、酶解加入1～2g.L-1木瓜蛋白酶，在恒溫振蕩器中120r.min-1攪拌，并在60～65℃條件下酶解24～36h，得水解蛋白液；(2)配制橘小實蠅蛋白引誘劑以上述水解蛋白液和甲基丁香酚為原料混配橘小實蠅蛋白引誘劑，各原料所占的體積份如下水解蛋白液95～97體積份甲基丁香酚3～5體積份。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種橘小實蠅蛋白引誘劑的制備方法，其特征在于步驟如下(1)制備水解蛋白液A、濃縮取1000ml啤酒廢酵母，在SHZ-82A恒溫振蕩器中加熱至95°C,120r.min"攪拌，并保溫40h;B、冷卻取出冷卻至45'C;C、酶解加入2g丄"木瓜蛋白酶后，在SHZ-82A恒溫振蕩器中120r.mii!-1攪拌，并且在62。C條件下酶解30h，4匸保存?zhèn)溆茫?2)配制橘小實蠅蛋白引誘劑按水解蛋白液為96體積份，甲基丁香酚為4體積份混配。3、由權(quán)利要求1或2的方法制備的橘小實蠅蛋白引誘劑。全文摘要本發(fā)明涉及一種橘小實蠅(BactroceradorsalisHendel)蛋白引誘劑及其制備方法，橘小實蠅蛋白引誘劑由水解蛋白液和甲基丁香酚的混配而成，水解蛋白液采用啤酒工業(yè)的副產(chǎn)品廢啤酒酵母生產(chǎn)。產(chǎn)品經(jīng)室內(nèi)生物測定結(jié)果表明，對橘小實蠅的引誘率平均可達71.7％，其中雌性和雄性的引誘率分別為58.3％和85.0％。本發(fā)明具有生產(chǎn)工藝簡單，原料豐富等優(yōu)點；產(chǎn)品對橘小實蠅雌性和雄性成蟲都具有引誘作用，同時對環(huán)境無污染，對人和其他有益昆蟲無毒，具有良好的應(yīng)用前景。文檔編號A01P19/00GK101589728SQ20091011209公開日2009年12月2日申請日期2009年6月30日優(yōu)先權(quán)日2009年6月30日發(fā)明者季清娥,波王,陳家驊申請人:福建農(nóng)林大學(xué)