專利名稱：一種飼用液體植酸酶制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種飼用液體酶制劑，尤其是涉及一種飼用液體植酸酶制劑。
背景技術(shù)：
磷在植物性飼料中含量不一，但大部分以植酸及植酸鹽的形式存在，植
酸磷約占植物性飼料原料中總磷的70%以上，這些磷難以被單胃動物消化利 用，未被利用的磷隨糞便排出體外，造成磷對環(huán)境的污染，另外植酸還通過 螯合作用降低動物對Zn、 Mn、 Fe、 Ca等礦物元素和蛋白質(zhì)的利用率。因此 植酸及植酸鹽是一種天然抗?fàn)I養(yǎng)因子。在伺料中添加植酸酶，以植酸酶替代 部分或全部無機(jī)磷可降低飼料中總磷含量，降低飼料成本，提高經(jīng)濟(jì)效益， 同時可減少30—50%的糞磷排放量，防止對環(huán)境的污染。植酸酶是能水解植 酸(鹽)為肌醇和正磷酸(鹽)的一種水解酶，從而釋放正磷酸(鹽)供動 物利用。所以植酸酶是現(xiàn)階段詞料生產(chǎn)中用量最大的單一酶制劑。在植物性 詞料原料中添加植酸酶可顯著地提高磷的利用率，促進(jìn)動物生長和提高詞料 營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化率。
現(xiàn)階段植酸酶加入飼料中的方式有兩種 一種是以固體(粉劑、顆粒劑、 丸劑)的形式在飼料調(diào)質(zhì)制粒前加入。在詞料加工過程中，特別是顆粒詞料， 需要高溫高壓蒸汽進(jìn)行調(diào)制并擠壓成顆粒，溫度達(dá)75度以上，濕度達(dá)17%， 以提高飼料的粘性和消毒滅菌。而植酸酶在濕度12%、溫度60度開始失活。 在飼料制粒過程中一般植酸酶的失活達(dá)50%。
另一種加入方式是先將酶制成液體劑型，在詞料調(diào)質(zhì)制粒并冷卻后，用 專用噴涂設(shè)備噴涂到飼料顆粒的表面，這樣避免了高溫造成而酶活的損失。 植酸酶原酶液是產(chǎn)酶基因工程畢赤酵母菌的液體發(fā)酵液經(jīng)陶瓷膜過濾，超濾 膜濃縮所得的濃縮液，酶活為20000u/g以上。如果將植酸酶原酶液用水稀釋 而成液體劑型，則存在酶活的儲存穩(wěn)定性差的問題。這是因為在液體狀態(tài)下 酶分子處于舒展?fàn)顟B(tài)，活性中心裸露，易受物理和化學(xué)因素的影響，而降低活性。如圖1、圖2所示，分別是將植酸酶原酶液用水稀釋而成酶活為6600u/g 的液體植酸酶制劑在常溫儲存6個月的穩(wěn)定性分析和在40'C恒溫儲存6周的 穩(wěn)定性分析，由圖中看出，植酸酶原酶液用水稀釋而成的液體植酸酶制劑， 其常溫儲存6個月的酶活保有率在65%以下，在4(TC恒溫儲存6周的酶活保 有率在65%以下。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種酶活保有 率高的飼用液體植酸酶制劑。
本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是本發(fā)明所述詞用液體植酸酶制劑中包含的 原料有植酸酶原酶液、聚乙二醇6000、海藻糖、苯甲酸鈉、純水，所述詞
用液體植酸酶制劑的PH值為4.5 5. 5。 進(jìn)一步的，所述原料的重量配比為-酶活為23270 27836u/g的植酸酶原酶液 250 300Kg;
聚乙二醇6000 30 50Kg;
海藻糖 50 100Kg;
苯甲酸鈉 0.5 1.5Kg;
純水 600Kg。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明是采用酶蛋白分子表面修飾、添加穩(wěn)定劑、 防腐劑、優(yōu)選最佳pH等綜合穩(wěn)定措施來提高液體植酸酶制劑儲存穩(wěn)定性的 第一個方面是酶蛋白分子的化學(xué)修飾通過在酶溶液中加入多羥基醇(如
聚乙二醇(PEG) 6000)，使PEG分子中的羥基與酶蛋白分子表面及其活性
中心的羧基、氨基等以共價鍵、氫鍵及范德華力等結(jié)合，從而使酶蛋白分子
的活性中心和整個酶蛋白分子得到保護(hù)；
第二個方面是通過加入穩(wěn)定劑(如海藻糖)，提高酶溶液的滲透壓，使酶
蛋白分子的舒展度降低，分子相對處于脫水狀態(tài)而收縮，從而提高穩(wěn)定性； 第三個方面是通過加入防腐劑(如苯甲酸鈉)，提高液體酶的生物穩(wěn)定性； 第四個方面是通過優(yōu)選pH范圍(4.5 5.5)，提高酶蛋白分子的穩(wěn)定性。經(jīng)過檢測，按照本發(fā)明所述以上措施制得的產(chǎn)品，其在常溫儲存6個月
的酶活保有率及在4(TC恒溫儲存6周的酶活保有率均在80%以上。大大提高 了產(chǎn)品的穩(wěn)定性。


圖1酶活為6600u/g的液體植酸酶制劑在常溫儲存6個月穩(wěn)定性(u/g)， 是酶活為6600u/g的液體植酸酶制劑在常溫儲存6個月穩(wěn)定性分析圖2酶活為6600u/g的液體植酸酶制劑在4(TC恒溫儲存6周穩(wěn)定性(u/g)， 是酶活為6600u/g的液體植酸酶制劑在4CTC恒溫儲存6周穩(wěn)定性分析圖3酶活為6981u/g的液體植酸酶制劑在常溫儲存6個月穩(wěn)定性(u/g)， 是本發(fā)明實施例1所得產(chǎn)品在常溫儲存6個月穩(wěn)定性分析圖4酶活為6981u/g的液體植酸酶制劑在4(TC恒溫儲存6周穩(wěn)定性(u/g)， 是本發(fā)明實施例1所得產(chǎn)品在4(TC恒溫儲存6周穩(wěn)定性分析圖5酶活為6729u/g的液體植酸酶制劑在常溫儲存6個月穩(wěn)定性(u/g)， 是本發(fā)明實施例2所得產(chǎn)品在常溫儲存6個月穩(wěn)定性分析圖6酶活為6729u/g的液體植酸酶制劑在4(TC恒溫儲存6周穩(wěn)定性(u/g)， 是本發(fā)明實施例2所得產(chǎn)品在4(TC恒溫儲存6周穩(wěn)定性分析圖； 圖7酶活為6959u/g的液體植酸酶制劑在常溫儲存6個月穩(wěn)定性(u/g)，是本 發(fā)明實施例3所得產(chǎn)品在常溫儲存6個月穩(wěn)定性分析圖8酶活為6959u/g的液體植酸酶制劑在4(TC恒溫儲存6周穩(wěn)定性(u/g)， 是本發(fā)明實施例3所得產(chǎn)品在4(TC恒溫儲存6周穩(wěn)定性分析圖。
具體實施例方式
實施例1:
稱取聚乙二醇6000 30kg、海藻糖50kg、苯甲酸鈉0.5kg，邊攪拌，慢慢 加入到600kg蒸餾水中，控制溫度小于40°C，待固體全部溶解后，加入300kg 酶活為23270u/g的植酸酶液，攪拌均勻，再用20kg0.5MHCl調(diào)節(jié)pH至4.5，得酶活6981u/g的植酸酶液體1000. 5kg。如圖3、圖4所示，分別是按照本 實施例配方制的的液體植酸酶制劑在常溫儲存6個月的穩(wěn)定性分析和在40°C 恒溫儲存6周的穩(wěn)定性分析。經(jīng)分析計算，本產(chǎn)品在常溫儲存6個月的酶活 保有率為90%，在4CTC恒溫儲存6周的酶活保有率為83%。
實施例2:
稱取聚乙二醇6000 40kg、海藻糖75kg、苯甲酸鈉lkg、，邊攪拌，慢慢 加入到600kg蒸餾水中，控制溫度小于4(TC，待固體全部溶解后，加入260kg 酶活為25880u/g的植酸酶液，攪拌均勻，再用4kg0. 5MNaOH和20kg0.5MHCl 調(diào)pH節(jié)至5.0，得酶活6729u/g的植酸酶液體1000kg。如圖5、圖6所示， 分別是按照本實施例配方制的的液體植酸酶制劑在常溫儲存6個月的穩(wěn)定性 分析和在4(TC恒溫儲存6周的穩(wěn)定性分析。經(jīng)分析計算，本產(chǎn)品在常溫儲存 6個月的酶活保有率為80%，在4(TC恒溫儲存6周的酶活保有率為82. 8%。
實施例3:
稱取聚乙二醇6000 50kg、海藻糖100kg、苯甲酸鈉1.5kg、，邊攪拌，慢 慢加入到600kg蒸餾水中，控制溫度小于40 °C ，待固體全部溶解后，加入250kg 酶活為27836u/g的植酸酶液，攪拌均勻，再用0. 5kg0. 5M NaOH調(diào)pH至5. 5， 得酶活6959u/g的植酸酶液體1002kg。如圖7、圖8所示，分別是按照本實 施例配方制的的液體植酸酶制劑在常溫儲存6個月的穩(wěn)定性分析和在4(TC恒 溫儲存6周的穩(wěn)定性分析。經(jīng)分析計算，本產(chǎn)品在常溫儲存6個月的酶活保 有率為84%，在40。C恒溫儲存6周的酶活保有率為82. 7%。
權(quán)利要求
1、一種飼用液體植酸酶制劑，其特征在于，所述飼用液體植酸酶制劑中包含的原料有植酸酶原酶液、聚乙二醇6000、海藻糖、苯甲酸鈉、純水，所述飼用液體植酸酶制劑的PH值為4.5～5.5。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種飼用液體植酸酶制劑，其特征在于所述原 料的重量配比為.-酶活為23270 27836u/g的植酸酶原酶液 250 300Kg;聚乙二醇6000 30 50Kg;海藻糖 50 100Kg;苯甲酸鈉 0.5 1.5Kg;純水 600Kg。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種酶活保有率高的飼用液體植酸酶制劑。本發(fā)明是在植酸酶原酶液中加入聚乙二醇6000、海藻糖、苯甲酸鈉、純水，調(diào)節(jié)pH值為4.5～5.5其中聚乙二醇6000中的羥基與酶蛋白分子表面及其活性中心的羧基、氨基等以共價鍵、氫鍵及范德華力等結(jié)合，從而使酶蛋白分子的活性中心和整個酶蛋白分子得到保護(hù)；海藻糖(穩(wěn)定劑)，提高酶溶液的滲透壓，使酶蛋白分子的舒展度降低，分子相對處于脫水狀態(tài)而收縮，從而提高穩(wěn)定性；苯甲酸鈉(防腐劑)及優(yōu)選pH范圍(4.5～5.5)，均起到提高液體酶的生物穩(wěn)定性的作用。本發(fā)明用于飼料添加劑領(lǐng)域。
文檔編號A23K1/165GK101617740SQ200910157818
公開日2010年1月6日 申請日期2009年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月7日
發(fā)明者眭培林, 肖渲雄 申請人:廣東溢多利生物科技股份有限公司