專利名稱：含有嘧菌環(huán)胺的殺菌組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種增效殺菌組合物，特別是涉及一種包含嘧菌環(huán)胺與選自嘧霉胺、乙霉威、腐霉利、菌核凈、丙森鋅和百菌清的任一殺菌活性成分的增效殺菌組合物。

背景技術(shù)：
嘧菌環(huán)胺(cyprodinil)，化學(xué)名稱為4-環(huán)丙基-6-甲基-N-苯基嘧啶-2-胺，屬嘧啶胺類殺菌劑，抑制蛋氨酸的生物合成，抑制水解酶的分泌。在植物體內(nèi)被葉片迅速吸收，30％以上滲透到組織中，被保護(hù)的沉淀物被儲(chǔ)存在葉片中，在木質(zhì)部中傳輸，也在葉片之間傳輸，在高溫下代謝相對(duì)迅速，低溫下在葉片中的沉淀物相當(dāng)穩(wěn)定，代謝物無生物活性。
嘧霉胺(pyrimethanil)，化學(xué)名稱為N-(4，6-二甲基嘧啶-2-基)苯胺，屬嘧啶胺類殺菌劑。其作用機(jī)理獨(dú)特，即抑制病原菌蛋白質(zhì)分泌，包括降低一些水解酶水平，具推測(cè)這些酶與病原菌進(jìn)入寄主植物并引起寄主組織的壞死有關(guān)。用于葡萄、果樹、蔬菜、園林防治灰霉病，梨樹葉斑病。
乙霉威(diethofencarb)，化學(xué)名稱為3，4-二乙氧基苯基氨基甲酸異丙酯，屬氨基甲酸酯類殺菌劑，為內(nèi)吸性殺菌劑，抑制灰霉菌芽孢紡錘體的形成，用于防治葡萄、柑桔等抗苯達(dá)松的菌株，兼治白粉病。
腐霉利(procymidone)，化學(xué)名稱為N-(3，5-二氯苯基)-1，2-二甲基環(huán)丙烷-1，2-二羰基亞胺，是一種環(huán)酰亞胺類殺菌劑，具有保護(hù)和治療作用，在土壤中半衰期短，對(duì)環(huán)境及生態(tài)無不良影響。主要用于防治油菜、蔬菜、觀賞作物、水果等作物的病害。
菌核凈(dimethachlon)，化學(xué)名稱為N-(3，5-二氯苯基)丁二酰亞胺，是一種在我國(guó)廣泛應(yīng)用的有機(jī)雜環(huán)類殺菌劑，具有直接殺菌、內(nèi)滲治療作用、殘效期長(zhǎng)的特性。對(duì)于油菜菌核病、煙草赤腥病防效較好，對(duì)水稻紋枯病、麥類赤霉病、白粉病以及工業(yè)防腐具有良好防效。
丙森鋅(propineb)，化學(xué)名稱為丙烯基雙二硫代氨基甲酸鋅，屬二硫代氨基甲酸鹽類，作用于真菌細(xì)胞壁和蛋白質(zhì)的合成，能抑制孢子的侵染和萌發(fā)，同時(shí)能抑制菌絲體的生長(zhǎng)，導(dǎo)致其變形、死亡。且該藥含有易于被作物吸收的鋅元素，有利于促進(jìn)作物生長(zhǎng)和提高果實(shí)的品質(zhì)。
百菌清(chlorothalonil)，化學(xué)名稱為四氯間苯二腈(2，4，5，6-四氯-1，3-苯二甲腈)，屬有機(jī)氯類保護(hù)性殺菌劑，能與真菌細(xì)胞中的3-磷酸甘油醛脫氫酶中的半胱氨酸的蛋白質(zhì)結(jié)合，破壞細(xì)胞的新陳代謝而喪失生命力。其主要作用是預(yù)防真菌侵染，沒有內(nèi)吸傳導(dǎo)作用，但在植物表面有良好的粘著性，不易受雨水沖刷，有較長(zhǎng)的藥效期。
本發(fā)明人通過一系列的研究證明，嘧菌環(huán)胺與選自嘧霉胺、乙霉威、腐霉利、菌核凈、丙森鋅和百菌清的任一殺菌活性成分混配對(duì)靶標(biāo)細(xì)菌具有極強(qiáng)的增效作用，大大提高了殺菌活性，從而完成了本發(fā)明。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種混配比例合理，防治效果好，用藥成本低的增效殺菌組合物。
本發(fā)明的另一目的在于提供由該殺菌組合物配制而成的乳油、微乳劑、水乳劑、懸浮劑、可濕性粉劑、水分散粒劑、顆粒劑等劑型。
本發(fā)明的另一目的在于提供將該殺菌組合物用于防治由高等病原物引起的葉霉病、灰霉病的用途。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下所述 一種殺菌組合物，其特征在于含有增效有效量的嘧菌環(huán)胺與選自嘧霉胺、乙霉威、腐霉利、菌核凈、丙森鋅和百菌清的任一殺菌活性成分。
其中，嘧菌環(huán)胺與選自嘧霉胺、乙霉威、腐霉利、菌核凈、丙森鋅和百菌清的任一殺菌活性成分的重量比可以在很寬的范圍內(nèi)變化，優(yōu)選為40∶1～1∶40，更優(yōu)選為10∶1～1∶10。
并且，嘧菌環(huán)胺與嘧霉胺或菌核凈的重量比進(jìn)一步優(yōu)選為5∶1～1∶8；嘧菌環(huán)胺與乙霉威或腐霉利的重量比進(jìn)一步優(yōu)選為3∶1～1∶8；嘧菌環(huán)胺與丙森鋅的重量比進(jìn)一步優(yōu)選為1∶1～1∶10；嘧菌環(huán)胺與百菌清的重量比進(jìn)一步優(yōu)選為1∶4～1∶10。
本發(fā)明的組合物中活性組分為總重量的0.5％至95％。
除了殺菌劑活性成分之外，本發(fā)明的殺菌組合物中還可包括功能性助劑。也就是說，本發(fā)明組合物可添加功能性助劑等其他組分，配制成乳油、水乳劑、微乳劑、懸浮劑、可濕性粉劑、水分散粒劑或其他劑型的制劑。
在這些制劑中，除活性成分外，均含有表面活性劑，而且根據(jù)不同劑型還可含有有機(jī)溶劑或助溶劑、載體(填料)或水等稀釋劑，必要時(shí)加入抗凍劑、增稠劑、穩(wěn)定劑、消泡劑、崩解劑等其他功能性助劑。表面活性劑可以是乳化劑、分散劑、濕潤(rùn)劑或滲透劑。表面活性劑可以是非離子型的和離子型的，也可以是兩種以上復(fù)合使用。
所述的乳化劑包括烷基酚聚氧乙烯(聚氧丙烯)醚、芐基酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯酯、苯乙基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、蓖麻油環(huán)氧乙烷加成物、烷基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物，以及這些化合物的磷酸鹽、烷基苯磺酸(鈣鹽或鈉鹽)或直接使用市售的乳化劑單體及復(fù)配產(chǎn)品。具體的例子如農(nóng)乳500#系列、600#系列、1600#系列、NP系列、OP系列、AEO系列、700#、400#系列及其復(fù)配品種2201、0203B、2021B、4103等，這些均是本領(lǐng)域公知的乳化劑產(chǎn)品，市場(chǎng)有售。
所述的分散劑、濕潤(rùn)劑、滲透劑包括木質(zhì)素磺酸鹽(鈉鹽或鈣鹽)、烷基萘磺酸鈉、甲基萘磺酸甲醛縮合物硫酸鹽、萘磺酸甲醛縮合物、亞甲基萘磺酸鈉二丁基萘磺酸甲醛縮合物、N-甲基脂肪?；；撬徕c、烷基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物硫酸鹽、聚合羧酸鈉、烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、茶枯粉、皂素、亞硫酸紙漿廢液、脂肪醇硫酸鹽、十二烷基磺酸鈉、烷基苯磺酸鹽、滲透劑T、滲透劑OT、脂肪酰胺-N-甲基?；撬徕c鹽、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉、拉開粉、JFC，可單獨(dú)使用，也可復(fù)合使用。上述表面活性劑均是本領(lǐng)域公知的物質(zhì)，可通過各種商業(yè)渠道獲得。
所述的溶劑、助溶劑包括甲苯、二甲苯、氯苯、溶劑油、α-甲基萘、松節(jié)油、二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇、異戊醇、環(huán)己酮、異佛爾酮、苯乙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、N.N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、甲基溶纖劑、乙基溶纖劑等。
所述的抗凍劑包括乙二醇、丙三醇、丙二醇、脲、甘油、乙醚雙甘醇、聚乙二醇、異丙醇等。
所述的載體、填料包括白炭黑、輕質(zhì)碳酸鈣、陶土、凹凸棒土、高嶺土、硅藻土、膨潤(rùn)土、海泡石、沸石、石英砂、滑石粉、可單獨(dú)使用，也可兩種或以上混合使用。
所述的崩解劑有海藻酸鈉、羧甲基淀粉鈉、硫酸胺、膨潤(rùn)土、尿素、氯化鈣。
所述的消泡劑有泡敵、硅酮類、C8-10脂肪醇、C10-20飽和脂肪酸類(如癸酸、硬脂酸等)及酰胺類。
所述的粘結(jié)劑包括淀粉、糊精、阿拉伯樹膠，大豆蛋白、骨膠、硫酸鈉、石膏、聚乙烯醇、聚乙二醇、松香、石蠟、CMC、硅酸鈉?？蓡为?dú)使用，也可兩種以上混用。
制劑中可以含有增色劑，例如無機(jī)顏料氧化鐵，氧化鈦或普魯士藍(lán)；有機(jī)染料，如阿利扎林、偶氮染料、金屬酞菁或三苯甲烷染料。在水基制劑中，為防止發(fā)霉變質(zhì)，需要加入一定量的防腐劑，所述的防腐劑有苯甲酸鈉、聚甲醛、山梨糖醇、甲醛水溶液、檸檬酸、對(duì)基苯甲酸甲酯、臨苯基酚鈉、1，2-苯并異噻唑-3-酮(代號(hào)BIT)等。
本發(fā)明描述的產(chǎn)物可以呈成品制劑形式提供，即組合物中各物質(zhì)已經(jīng)混合，但組合物的成分也可以以單獨(dú)制劑提供，使用前在桶(罐)中直接混合。本發(fā)明的濃縮物通常與水混合得到所需活性物質(zhì)的濃度。
本發(fā)明的組合物可用于多種植物，如白菜、甘藍(lán)、花椰菜、冬瓜、黃瓜、番茄、荔枝、葡萄、小麥、油菜、馬鈴薯、煙草和花卉等。本發(fā)明的組合物與載體制成的產(chǎn)品的施用場(chǎng)所為農(nóng)田、果園或倉(cāng)庫(kù)等。
本發(fā)明的組合物也可以與其它具有除草、殺蟲或殺菌性能的化合物特別是保護(hù)性殺菌劑混合物使用，也可以與殺線蟲劑、防護(hù)劑、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、植物營(yíng)養(yǎng)素或土壤調(diào)節(jié)劑混合物使用。本發(fā)明的組合物可以按普通的方法施用，如澆注、噴射、噴霧。本發(fā)明的施用量隨天氣條件或作物狀態(tài)變化，施用時(shí)間可以在作物感病之前或之后。保護(hù)作用的持續(xù)時(shí)間通常與組合物中單個(gè)化合物的含量有關(guān)，也與外界因素相關(guān)，例如氣候，但通過使用適當(dāng)?shù)膭┬涂梢詼p緩氣候的影響。
本發(fā)明的組合物的顯著優(yōu)點(diǎn)一是組合物在一定配比范圍內(nèi)表現(xiàn)出極強(qiáng)的增效作用，混合后的組合物的殺菌效果較其單劑有明顯的提高，從而降低了使用劑量，在減少農(nóng)民用藥成本的同時(shí)，降低了對(duì)環(huán)境影響程度。二是品種間的結(jié)構(gòu)相差較大，該組合物的應(yīng)用能延緩單劑的抗性發(fā)生與發(fā)展。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明用以下具體實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)說明，以使本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)更明顯，但本發(fā)明絕非限于這些例子。所有制劑的配方中百分比均為重量百分比，生物活性部分的處理均為有效含量。
一、制備實(shí)施例 1、乳油的配制 按配方要求，分別加入溶劑、原藥、乳化劑、混合均勻，必要時(shí)用熱水浴加熱溶解，即得到透明狀乳油。如實(shí)施例1～3配方。
實(shí)施例1(20％乳油) 嘧菌環(huán)胺8％，嘧霉胺12％，農(nóng)乳507# 10％，農(nóng)乳OX-653 3％，甲醇10％，二甲苯補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例2(20％乳油) 嘧菌環(huán)胺8％，乙霉威12％，農(nóng)乳500# 10％，農(nóng)乳OX-635 5％，甲醇10％，二甲苯補(bǔ)足至100％。
2、可濕性粉劑的配制 按配方要求，將原藥、各種助劑及填料等充分混合，經(jīng)超細(xì)粉碎機(jī)粉碎后，即得到加工產(chǎn)品。如實(shí)施例4～9配方。
實(shí)施例3(40％可濕性粉劑) 嘧菌環(huán)胺10％，丙森鋅30％，十二烷基硫酸鈉1.5％，羧甲基纖維素1％，木質(zhì)素磺酸鈉10％，輕質(zhì)碳酸鈣補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例4(20％可濕性粉劑) 嘧菌環(huán)胺15％，嘧霉胺5％，十二烷基苯磺酸鈉1％，白炭黑10％，木質(zhì)素磺酸鈉10％，輕質(zhì)碳酸鈣補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例5(20％可濕性粉劑) 嘧菌環(huán)胺8％，乙霉威12％，十二烷基苯磺酸鈉1％，白炭黑10％，木質(zhì)素磺酸鈉10％，輕質(zhì)碳酸鈣補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例6(18％可濕性粉劑) 嘧菌環(huán)胺6％，腐霉利12％，烷酰胺基牛磺酸鹽2％，烷基萘甲醛縮合5％，烷基酚聚氧乙烯磷酸酯5％，輕質(zhì)碳酸鈣補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例7(25％可濕性粉劑) 嘧菌環(huán)胺6％，菌核凈19％，十二烷基苯磺酸鈉1％，白炭黑10％，萘酚磺酸甲醛縮合物鈉鹽10％，輕質(zhì)碳酸鈣補(bǔ)足至100％。
3、水乳劑的配制 將原藥、溶劑、乳化劑和共乳化劑加在一起，使溶解呈均勻油相。將水、抗凍劑等混合一起，成為均一水相。在高速攪拌下，將水相加入到油相或?qū)⒂拖嗉尤氲剿?，形成分散性良好的水乳劑。如?shí)施例10～12配方。
實(shí)施例8(10％水乳劑) 嘧菌環(huán)胺4％，嘧霉胺6％，聚乙烯醇0.8％，三苯乙烯苯酚+環(huán)氧乙烷、磷酸化、三乙醇胺中和8.5％，烷基-二乙二醇醚-磺酸鈉2.5％，農(nóng)乳2201 13％，二甲基甲酰胺8％，乙二醇5％，水補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例9(10％水乳劑) 嘧菌環(huán)胺4％，乙霉威6％，聚乙烯醇0.9％，烷基芳基聚氧乙烯丙烯醚8.5％，農(nóng)乳2201 15％，二甲基甲酰胺12％，乙二醇5％，水補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例10(12％水乳劑) 嘧菌環(huán)胺4％，腐霉利8％，聚乙烯醇1.5％，烷基芳基聚氧乙烯丙烯醚10％，農(nóng)乳2201 15％，二甲基甲酰胺15％，乙二醇5％，水補(bǔ)足至100％。
4、水分散性顆粒劑的配制 將原藥和粉狀載體、潤(rùn)濕展布劑及粘結(jié)劑等進(jìn)行混合粉碎，再加水捏合后，加入裝有一定規(guī)格篩網(wǎng)的造粒機(jī)中進(jìn)行造粒。然后再經(jīng)干燥，篩分(按篩網(wǎng)范圍)即得顆粒狀產(chǎn)品。如實(shí)施例13～14配方。
實(shí)施例11(40％水分散性顆粒劑) 嘧菌環(huán)胺8％，丙森鋅32％，甲基萘磺酸鈉甲醛縮合物12％，環(huán)氧聚醚5％，可溶性淀粉15％，石膏補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例12(40％水分散性顆粒劑) 嘧菌環(huán)胺8％，百菌清32％，亞甲基萘磺酸鈉5％，環(huán)氧聚醚5％，硫酸鈉，石膏補(bǔ)足至100％。
5、懸浮劑的配制 按配方要求，以水為介質(zhì)，將原藥、分散劑、助懸劑和防凍劑等加入砂磨釜中，進(jìn)行研細(xì)，制成懸浮劑。如實(shí)施例15～17配方。
實(shí)施例13(20％懸浮劑) 嘧菌環(huán)胺8％，嘧霉胺12％，甲基萘磺酸鈉甲醛縮合物5.5％，白炭黑0.2％，硅酸鎂鋁0.18％，乙二醇4％，硅酮少許，水補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例14(18％懸浮劑) 嘧菌環(huán)胺6％，腐霉利12％，木質(zhì)素磺酸鈣5％，白炭黑0.3％，乙二醇4％，硅酮少許，水補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例15(20％懸浮劑) 嘧菌環(huán)胺5％，菌核凈15％，甲基萘磺酸萘甲醛縮合物2.5％，膨潤(rùn)土1.0％，農(nóng)乳1601 3％，丙三醇4％，硅酮少許，水補(bǔ)足至100％。
6、微乳劑的配制 將原藥、溶劑、乳化劑和共乳化劑加在一起，使溶解呈均勻油相。將水、抗凍劑等混合一起，成為均一水相。在高速攪拌下，將水相加入到油相或?qū)⒂拖嗉尤氲剿啵纬煞稚⑿粤己玫奈⑷閯?。如?shí)施例18～20配方。
實(shí)施例16(10％微乳劑) 嘧菌環(huán)胺4％，嘧霉胺6％，丙醇7％，苯乙基酚聚氧乙烯醚10％，二氯甲烷10％，丙三醇5％，水補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例17(15％微乳劑) 嘧菌環(huán)胺5％，腐霉利10％，二甲苯12％，苯基聯(lián)苯酚聚乙烯醚15％，環(huán)乙醇8％，乙二醇8％，水補(bǔ)足至100％。
實(shí)施例18(10％微乳劑) 嘧菌環(huán)胺4％，乙霉威6％，乙醇6％，烷基苯磺酸鈉8％，丙己酮8％，丙二醇6％，水補(bǔ)足至100％。
二、生物實(shí)施例 試驗(yàn)例1嘧菌環(huán)胺與嘧霉胺的聯(lián)合毒力測(cè)定 供試菌 番茄灰霉病(Botrytis cinerea Pers.) 試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì) 組合藥劑的試驗(yàn)濃度為1.6、0.8、0.4、0.2、0.1μg/ml五個(gè)濃度，嘧菌環(huán)胺與嘧霉胺的處理濃度為0.8、0.4、0.2、0.1、0.05μg/ml，另設(shè)不加藥的空白對(duì)照，每個(gè)處理4次重復(fù)。
試驗(yàn)方法 將培養(yǎng)好的病原真菌孢子用去離子水從培養(yǎng)基或病組織上洗脫、過濾，離心(1000r/min)5min，倒去上清液，加入去離子水，再離心。最后用去離子將孢子重懸浮至每毫升1×105個(gè)～1×107個(gè)孢子，并加入0.5％葡萄糖溶液。用移液管或移液器從低濃度到高濃度，依次吸取藥液0.5mL分別加入小試管中，然后吸取制備好的孢子懸浮液0.5mL，使藥液與孢子懸浮液等量混合均勻。用微量加樣器吸取上述混合液滴到凹玻片上，然后架放于帶有淺層水的培養(yǎng)皿中，加蓋保濕培養(yǎng)于適宜溫度的培養(yǎng)箱中。
調(diào)查及計(jì)數(shù)方法 按農(nóng)業(yè)部藥檢所《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則》方法，當(dāng)空白對(duì)照孢子萌發(fā)率達(dá)到90％以上時(shí)，檢查各處理孢子萌發(fā)情況。每處理各重復(fù)隨機(jī)觀察3個(gè)以上視野，調(diào)查孢子總數(shù)不少200個(gè)，分別記錄萌發(fā)數(shù)和孢子總數(shù)。孢子芽管長(zhǎng)度大于孢子的短半徑視為萌發(fā)。根據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)，計(jì)算各處理的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率。根據(jù)各藥劑濃度對(duì)數(shù)值及對(duì)應(yīng)的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率的幾率值作回歸分析，計(jì)算各藥劑的EC50，依照Wadley殺菌劑混劑聯(lián)合作用評(píng)價(jià)法，計(jì)算兩個(gè)單劑混合物后相互作用的比值(即SR＜0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用，SR＞1.5為增效作用)。
試驗(yàn)結(jié)果見下表1。
表1嘧菌環(huán)胺與嘧霉胺的聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果
試驗(yàn)結(jié)果表明；嘧菌環(huán)胺與嘧霉胺的重量比為2∶3時(shí)，其相互作用比值分別為2.11，根據(jù)GiSi(1985)提出的殺菌劑相互作用理論，具有明顯增效作用。
試驗(yàn)例2嘧菌環(huán)胺與乙霉威的聯(lián)合毒力測(cè)定 供試菌 番茄葉霉病(Fulvia fulva(Cooke)Ciferri.) 試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì) 組合藥劑及嘧菌環(huán)胺單劑的試驗(yàn)濃度為12、6、3、1.5、0.75μg/ml五個(gè)濃度，乙霉威處理濃度為20、10、5、2.5、1.25μg/ml，另設(shè)不加藥的空白對(duì)照，每個(gè)處理4次重復(fù)。
試驗(yàn)方法 在無菌操作條件下，根據(jù)試驗(yàn)處理將預(yù)先融化的滅菌培養(yǎng)基定量加入無菌錐形瓶中，從低濃度到高濃度依次定量吸取藥液，分別加入上述錐形瓶中，充分搖勻。然后等量倒入3個(gè)以上直徑為9cm的培養(yǎng)皿中，制成相應(yīng)濃度的含藥平板。將培養(yǎng)好的病原菌，在無菌條件下用直徑5mm的滅菌打孔器，自菌落邊緣切取菌餅，用接種器將菌餅接種于含藥平板中央，菌絲面朝上，蓋上皿蓋，置適宜溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
調(diào)查及計(jì)數(shù)方法 按農(nóng)業(yè)部藥檢所《農(nóng)藥生物測(cè)定試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)》方法，根據(jù)空白對(duì)照培養(yǎng)皿中的菌的生長(zhǎng)情況調(diào)查病原菌絲生長(zhǎng)情況。用卡尺測(cè)量菌落直徑。每個(gè)菌落用十字交叉法垂直測(cè)量直徑各一次，取其平均值。根據(jù)調(diào)查結(jié)果計(jì)算各處理濃度對(duì)病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制率。根據(jù)各藥劑濃度對(duì)數(shù)值及對(duì)應(yīng)的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率的幾率值作回歸分析，計(jì)算各藥劑的EC50，依照Wadley殺菌劑混劑聯(lián)合作用評(píng)價(jià)法，計(jì)算兩個(gè)單劑混合物后相互作用的比值(即SR＜0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用，SR＞1.5為增效作用)。
試驗(yàn)結(jié)果見下表2。
表2嘧菌環(huán)胺與乙霉威的聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果
試驗(yàn)結(jié)果表明；嘧菌環(huán)胺與乙霉威的重量比為2∶3時(shí)，其相互作用比值分別為1.89，根據(jù)GiSi(1985)提出的殺菌劑相互作用理論，具有明顯增效作用。
試驗(yàn)例3嘧菌環(huán)胺與百菌清的聯(lián)合毒力測(cè)定 供試菌 番茄灰霉病(Botrytis cinerea Pers.) 試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì) 組合藥劑的試驗(yàn)濃度為1.6、0.8、0.4、0.2、0.1μg/ml五個(gè)濃度，嘧菌環(huán)胺的處理濃度為1.6、0.8、0.4、0.2、0.1μg/ml，百菌清的處理濃度為12、6、3、1.5、0.75μg/ml，另設(shè)不加藥的空白對(duì)照，每個(gè)處理4次重復(fù)。
試驗(yàn)方法 將培養(yǎng)好的病原真菌孢子用去離子水從培養(yǎng)基或病組織上洗脫、過濾，離心(1000r/min)5min，倒去上清液，加入去離子水，再離心。最后用去離子將孢子重懸浮至每毫升1×105個(gè)～1×107個(gè)孢子，并加入0.5％葡萄糖溶液。用移液管或移液器從低濃度到高濃度，依次吸取藥液0.5mL分別加入小試管中，然后吸取制備好的孢子懸浮液0.5mL，使藥液與孢子懸浮液等量混合均勻。用微量加樣器吸取上述混合液滴到凹玻片上，然后架放于帶有淺層水的培養(yǎng)皿中，加蓋保濕培養(yǎng)于適宜溫度的培養(yǎng)箱中。
調(diào)查及計(jì)數(shù)方法 按農(nóng)業(yè)部藥檢所《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則》方法，當(dāng)空白對(duì)照孢子萌發(fā)率達(dá)到90％以上時(shí)，檢查各處理孢子萌發(fā)情況。每處理各重復(fù)隨機(jī)觀察3個(gè)以上視野，調(diào)查孢子總數(shù)不少200個(gè)，分別記錄萌發(fā)數(shù)和孢子總數(shù)。孢子芽管長(zhǎng)度大于孢子的短半徑視為萌發(fā)。根據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)，計(jì)算各處理的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率。根據(jù)各藥劑濃度對(duì)數(shù)值及對(duì)應(yīng)的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率的幾率值作回歸分析，計(jì)算各藥劑的EC50，依照Wadley殺菌劑混劑聯(lián)合作用評(píng)價(jià)法，計(jì)算兩個(gè)單劑混合物后相互作用的比值(即SR＜0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用，SR＞1.5為增效作用)。
試驗(yàn)結(jié)果見下表3。
表3嘧菌環(huán)胺與百菌清的聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明；嘧菌環(huán)胺與百菌清的重量比為1∶7時(shí)，其相互作用比值分別為1.93，根據(jù)GiSi(1985)提出的殺菌劑相互作用理論，具有明顯增效作用。
試驗(yàn)例4嘧菌環(huán)胺與腐霉利的聯(lián)合毒力測(cè)定 供試菌 番茄灰霉病(Botrytis cinerea Pers.) 試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì) 組合藥劑的試驗(yàn)濃度為0.8、0.4、0.2、0.1、0.05μg/ml五個(gè)濃度，嘧菌環(huán)胺及腐霉利的處理濃度為1.6、0.8、0.4、0.2、0.1μg/ml，另設(shè)不加藥的空白對(duì)照，每個(gè)處理4次重復(fù)。
試驗(yàn)方法 將培養(yǎng)好的病原真菌孢子用去離子水從培養(yǎng)基或病組織上洗脫、過濾，離心(1000r/min)5min，倒去上清液，加入去離子水，再離心。最后用去離子將孢子重懸浮至每毫升1×105個(gè)～1×107個(gè)孢子，并加入0.5％葡萄糖溶液。用移液管或移液器從低濃度到高濃度，依次吸取藥液0.5mL分別加入小試管中，然后吸取制備好的孢子懸浮液0.5mL，使藥液與孢子懸浮液等量混合均勻。用微量加樣器吸取上述混合液滴到凹玻片上，然后架放于帶有淺層水的培養(yǎng)皿中，加蓋保濕培養(yǎng)于適宜溫度的培養(yǎng)箱中。
調(diào)查及計(jì)數(shù)方法 按農(nóng)業(yè)部藥檢所《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則》方法，當(dāng)空白對(duì)照孢子萌發(fā)率達(dá)到90％以上時(shí)，檢查各處理孢子萌發(fā)情況。每處理各重復(fù)隨機(jī)觀察3個(gè)以上視野，調(diào)查孢子總數(shù)不少200個(gè)，分別記錄萌發(fā)數(shù)和孢子總數(shù)。孢子芽管長(zhǎng)度大于孢子的短半徑視為萌發(fā)。根據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)，計(jì)算各處理的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率。根據(jù)各藥劑濃度對(duì)數(shù)值及對(duì)應(yīng)的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率的幾率值作回歸分析，計(jì)算各藥劑的EC50，依照Wadley殺菌劑混劑聯(lián)合作用評(píng)價(jià)法，計(jì)算兩個(gè)單劑混合物后相互作用的比值(即SR＜0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用，SR＞1.5為增效作用)。
試驗(yàn)結(jié)果見下表4。
表4嘧菌環(huán)胺與腐霉利的聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明；嘧菌環(huán)胺與腐霉利的重量比為1∶2時(shí)，其相互作用比值分別為2.05，根據(jù)GiSi(1985)提出的殺菌劑相互作用理論，具有明顯增效作用。
試驗(yàn)例5嘧菌環(huán)胺與菌核凈的聯(lián)合毒力測(cè)定 供試菌 番茄葉霉病(Fulvia fulva(Cooke)Ciferri.) 試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì) 組合藥劑的試驗(yàn)濃度為12、6、3、1.5、0.75μg/ml五個(gè)濃度，嘧菌環(huán)胺及菌核凈的處理濃度為20、10、5、2.5、1.25μg/ml，另設(shè)不加藥的空白對(duì)照，每個(gè)處理4次重復(fù)。
試驗(yàn)方法 在無菌操作條件下，根據(jù)試驗(yàn)處理將預(yù)先融化的滅菌培養(yǎng)基定量加入無菌錐形瓶中，從低濃度到高濃度依次定量吸取藥液，分別加入上述錐形瓶中，充分搖勻。然后等量倒入3個(gè)以上直徑為9cm的培養(yǎng)皿中，制成相應(yīng)濃度的含藥平板。將培養(yǎng)好的病原菌，在無菌條件下用直徑5mm的滅菌打孔器，自菌落邊緣切取菌餅，用接種器將菌餅接種于含藥平板中央，菌絲面朝上，蓋上皿蓋，置適宜溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
調(diào)查及計(jì)數(shù)方法 按農(nóng)業(yè)部藥檢所《農(nóng)藥生物測(cè)定試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)》方法，根據(jù)空白對(duì)照培養(yǎng)皿中的菌的生長(zhǎng)情況調(diào)查病原菌絲生長(zhǎng)情況。用卡尺測(cè)量菌落直徑。每個(gè)菌落用十字交叉法垂直測(cè)量直徑各一次，取其平均值。根據(jù)調(diào)查結(jié)果計(jì)算各處理濃度對(duì)病菌的菌絲生長(zhǎng)抑制率。根據(jù)各藥劑濃度對(duì)數(shù)值及對(duì)應(yīng)的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率的幾率值作回歸分析，計(jì)算各藥劑的EC50，依照Wadley殺菌劑混劑聯(lián)合作用評(píng)價(jià)法，計(jì)算兩個(gè)單劑混合物后相互作用的比值(即SR＜0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用，SR＞1.5為增效作用)。
試驗(yàn)結(jié)果見下表5。
表5嘧菌環(huán)胺與菌核凈的聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果
試驗(yàn)結(jié)果表明；嘧菌環(huán)胺與菌核凈的重量比為1∶3時(shí)，其相互作用比值分別為1.83，根據(jù)GiSi(1985)提出的殺菌劑相互作用理論，具有明顯增效作用。
試驗(yàn)例6嘧菌環(huán)胺與丙森鋅的聯(lián)合毒力測(cè)定 供試菌 黃瓜灰霉病(Botrytis cinerea Pers.) 試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì) 組合藥劑及嘧菌環(huán)胺的試驗(yàn)濃度為1.6、0.8、0.4、0.2、0.1μg/ml五個(gè)濃度，丙森鋅的處理濃度為6、3、1.5、0.75、0.375μg/ml，另設(shè)不加藥的空白對(duì)照，每個(gè)處理4次重復(fù)。
試驗(yàn)方法 將培養(yǎng)好的病原真菌孢子用去離子水從培養(yǎng)基或病組織上洗脫、過濾，離心(1000r/min)5min，倒去上清液，加入去離子水，再離心。最后用去離子將孢子重懸浮至每毫升1×105個(gè)～1×107個(gè)孢子，并加入0.5％葡萄糖溶液。用移液管或移液器從低濃度到高濃度，依次吸取藥液0.5mL分別加入小試管中，然后吸取制備好的孢子懸浮液0.5mL，使藥液與孢子懸浮液等量混合均勻。用微量加樣器吸取上述混合液滴到凹玻片上，然后架放于帶有淺層水的培養(yǎng)皿中，加蓋保濕培養(yǎng)于適宜溫度的培養(yǎng)箱中。
調(diào)查及計(jì)數(shù)方法 按農(nóng)業(yè)部藥檢所《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則》方法，當(dāng)空白對(duì)照孢子萌發(fā)率達(dá)到90％以上時(shí)，檢查各處理孢子萌發(fā)情況。每處理各重復(fù)隨機(jī)觀察3個(gè)以上視野，調(diào)查孢子總數(shù)不少200個(gè)，分別記錄萌發(fā)數(shù)和孢子總數(shù)。孢子芽管長(zhǎng)度大于孢子的短半徑視為萌發(fā)。根據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)，計(jì)算各處理的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率。根據(jù)各藥劑濃度對(duì)數(shù)值及對(duì)應(yīng)的孢子萌發(fā)相對(duì)抑制率的幾率值作回歸分析，計(jì)算各藥劑的EC50，依照Wadley殺菌劑混劑聯(lián)合作用評(píng)價(jià)法，計(jì)算兩個(gè)單劑混合物后相互作用的比值(即SR＜0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用，SR＞1.5為增效作用)。
試驗(yàn)結(jié)果見下表6。
表6嘧菌環(huán)胺與丙森鋅的聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果
試驗(yàn)結(jié)果表明；嘧菌環(huán)胺與丙森鋅的重量比為1∶4時(shí)，其相互作用比值分別為2.12，根據(jù)GiSi(1985)提出的殺菌劑相互作用理論，具有明顯增效作用。
雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
權(quán)利要求
1.殺菌組合物，其特征在于含有增效有效量的嘧菌環(huán)胺與選自嘧霉胺、乙霉威、腐霉利、菌核凈、丙森鋅和百菌清的任一殺菌活性成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的殺菌組合物，其特征在于嘧菌環(huán)胺與選自嘧霉胺、乙霉威、腐霉利、菌核凈、丙森鋅和百菌清的任一殺菌活性成分的重量比優(yōu)選為40∶1～1∶40。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2的殺菌組合物，其特征在于嘧菌環(huán)胺與選自嘧霉胺、乙霉威、腐霉利、菌核凈、丙森鋅和百菌清的任一殺菌活性成分的重量比優(yōu)選為10∶1～1∶10。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3的殺菌組合物，其特征在于嘧菌環(huán)胺與嘧霉胺或菌核凈重量比進(jìn)一步優(yōu)選為5∶1～1∶8。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3的殺菌組合物，其特征在于嘧菌環(huán)胺與乙霉威或腐霉利的重量比進(jìn)一步優(yōu)選為3∶1～1∶8。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3的農(nóng)藥組合物，其特征在于嘧菌環(huán)胺與丙森鋅或百菌清的重量比進(jìn)一步優(yōu)選為1∶1～1∶10。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3的農(nóng)藥組合物，其特征在于嘧菌環(huán)胺與百菌清的重量比進(jìn)一步優(yōu)選為1∶4～1∶10。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7的任一權(quán)利要求所述的殺菌組合物配制而成的乳油、微乳劑、水乳劑、懸浮劑、可濕性粉劑、水分散粒劑或顆粒劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-7的任一權(quán)利要求所述的殺菌組合物用于防治由高等病原物引起葉霉病和灰霉病的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種增效殺菌組合物，特別是涉及一種包含嘧菌環(huán)胺與選自抑霉唑、嘧霉胺、乙霉威、腐霉利、菌核凈、丙森鋅和百菌清的任一殺菌活性成分的增效殺菌組合物。
文檔編號(hào)A01N37/32GK101755782SQ20091022399
公開日2010年6月30日 申請(qǐng)日期2009年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月23日
發(fā)明者陳章艷, 游文莉 申請(qǐng)人:陳章艷, 游文莉