專利名稱：：一種復(fù)合β-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于家禽飼料添加劑領(lǐng)域，具體涉及一種復(fù)合e-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑，及其在蛋雞飼料中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：目前大多數(shù)蛋雞飼料原料中含有較多的抗?fàn)I養(yǎng)因子，不但影響動物的消化利用率，還造成飼料資源的浪費(fèi)及環(huán)境的污染。此外，雞蛋產(chǎn)品還存在藥物、激素、有毒有害物質(zhì)超標(biāo)，養(yǎng)殖環(huán)境的惡化等問題，已成為影響我國蛋雞養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)發(fā)展的瓶頸。研究、開發(fā)和利用"綠色"、"安全"、"環(huán)保"的飼料應(yīng)為解決上述問題的有效途徑。中國專禾U《供成年期肉雞專用的非常規(guī)蛋白復(fù)合雞飼料》(申請?zhí)?00910016608.2)公開了含有P_甘露聚糖酶、木聚糖酶和小麥型復(fù)合酶等酶制劑組成的肉雞飼料。中國專利《一種飼用復(fù)合阿魏酸酯酶添加劑及其使用方法》(申請?zhí)?00810101057.5)公開了由阿魏酸酯酶、纖維素酶、術(shù)聚糖酶和葡聚糖酶4種酶組成的酶添加劑。他們都只是單純酶制劑的混合，沒有與乳酸菌的益生效應(yīng)進(jìn)行疊加，因此飼養(yǎng)效果受到影響。|3-甘露聚糖酶、木聚糖酶、13-葡聚糖酶、纖維素酶及果膠酶的主要作用是降解飼料原料中P-甘露聚糖、木聚糖、13-葡聚糖、纖維素及果膠等的抗?fàn)I養(yǎng)作用，提高日糧營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率。屎腸球菌屬于乳酸菌，是益生菌制劑的一種，屬于腸道共生菌，代謝能產(chǎn)生乳酸及一些抗菌物質(zhì)。其主要作用是促進(jìn)動物機(jī)體腸道微生態(tài)平衡，提高有益菌的數(shù)量，降低有害菌的數(shù)量，提高機(jī)體免疫力。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供一種復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑，該添加劑能夠降解飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，補(bǔ)充內(nèi)源性消化酶功能的不足，提高蛋禽對日糧營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率；減少蛋雞糞中有機(jī)物質(zhì)的排泄量，降低環(huán)境污染，改善養(yǎng)殖環(huán)境；減少后腸有害微生物的生長繁殖和粘性糞便的發(fā)生率，改善雞只的健康狀況，降低臟蛋率，促進(jìn)蛋雞腸道微生態(tài)平衡，提高機(jī)體免疫力；提高料蛋比和蛋雞產(chǎn)蛋率，降低飼養(yǎng)成本；縮小不同批次原料質(zhì)量的差異性，穩(wěn)定飼料產(chǎn)品的質(zhì)量。本發(fā)明另一目的是提供上述復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑在蛋雞飼料中的應(yīng)用。本發(fā)明還一目的是提供一種屎腸球菌菌株。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為—種復(fù)合|3_甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑，其組成成份及其重量份為P-甘露聚糖酶28木聚糖酶2430P-葡聚糖酶9154纖維素酶2833果膠酶2027屎腸球菌發(fā)酵液90110。上述復(fù)合|3_甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑，其組成成份及其重量份優(yōu)選為P-甘露聚糖酶4木聚糖酶27P-葡聚糖酶13纖維素酶31果膠酶24屎腸球菌發(fā)酵液101。上述復(fù)合P-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的制備方法，按照比例將P-甘露聚糖酶、木聚糖酶、P_葡聚糖酶、纖維素酶和果膠酶混合均勻，然后按照比例加入屎腸球菌發(fā)酵液，混合均勻，再在45t:條件下烘干，使水分含量《10%，即得復(fù)合e-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑。上述復(fù)合|3_甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑中所述的屎腸球菌發(fā)酵液中屎腸球菌的活菌數(shù)為^5Xl(TCFU/mL。上述復(fù)合|3_甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑中所述各種酶，其原料酶活分別為P_甘露聚糖酶的酶活為1700U/g，木聚糖酶的酶活為>50000U/g;13-葡聚糖酶的酶活性為^8000U/g，纖維素酶的酶活性為^10000U/g，果膠酶的酶活性為^20000U/g。酶活定義1個酶活力單位是指在特定條件下，在1分鐘內(nèi)能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量，或是轉(zhuǎn)化底物中1微摩爾的有關(guān)基團(tuán)的酶量。所述的|3-甘露聚糖酶、木聚糖酶、13-葡聚糖酶、纖維素酶和果膠酶均可從市場上購買。其中P-甘露聚糖酶也可根據(jù)中國專利《一種甘露聚糖酶及其編碼基因與應(yīng)用》(專利號ZL200510103125.8)所述的方法制備。上述屎腸球菌發(fā)酵液中的屎腸球菌可以是屎腸球菌菌株(Enterococcusfaecium)Efl008，該菌株已于2009年12月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCNo.3537。所述的屎腸球菌菌株Ef1008是從蛋雞腸道中篩選鑒定的，乳酸產(chǎn)量^6g/L發(fā)酵液，對大腸桿菌K88、大腸桿菌K99、沙門氏菌的抑菌圈直徑^18mm。所述的屎腸球菌發(fā)酵液，按照如下方法制備按照2%的重量百分比將屎腸球菌菌種接種于MRS培養(yǎng)基上，在37°C，160rpm條件下培養(yǎng)9小時，即得屎腸球菌發(fā)酵液；所得屎腸球菌發(fā)酵液中屎腸球菌的活菌為^5X10"CFU/mL;其中所述的MRS培養(yǎng)基的組成成分及其含量為蛋白胨10g/L、牛肉浸膏10g/L、酵母浸膏5g/L、K2HP042g/L、檸檬酸氫二銨2g/L、葡萄糖20g/L、乙酸鈉5g/L、吐溫-80lmL，MgS047H200.58g/L、MnS044H200.25g/L，用Imol/LNaOH調(diào)節(jié)pH為7.2，115。C滅菌30min。上述屎腸球菌菌種可以是Ef1008。上述復(fù)合P-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑可用于在蛋雞飼料中應(yīng)用，其在蛋雞飼料中的添加比例為0.03%0.1%。含有上述復(fù)合|3_甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的蛋雞飼料，其中復(fù)合13_甘5露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的重〗及預(yù)混料及其重量份為:百分比為o.03%o.1%，其中基礎(chǔ)飼料的組成成份為1300玉米小麥豆粕菜籽粕棉籽粕石粉3015153350352588891-1.50.050.05150.10.1預(yù)混料所述的基礎(chǔ)日糧的制備方法，將上述組分按照重量份混合均勻即可。所述的預(yù)混料的組成為每千克預(yù)混料提供維生素D3為2040萬IU，維生素E3000IU，維生素K3為200400mg，維生素B:為>160mg，維生素B2為>700mg，維生素B6為>300mg/Kg，維生素B12為>1.8mg，生物素為>12mg，煙酸為>2200mg，泛酸為^900mg，葉酸為^70mg。預(yù)混料可于市場上購買，如可于北京偉嘉人生物技術(shù)有限公司購買。上述蛋雞飼料中所述的基礎(chǔ)日糧組份和預(yù)混料均可從市場上購買。所述的屎腸球菌Efl008的篩選及鑒定過程無菌采集5日齡健康蛋雞回腸黏膜，用滅菌的載玻片刮取回腸黏液，用滅菌生理鹽水稀釋104倍，取0.lmL接種于EC培養(yǎng)基(EC培養(yǎng)基的組成成份及其比例為胰蛋白胨2g，酵母浸膏0.5g，葡萄糖0.2g，Na2HP040.4g，K2HP040.4g，瓊脂2g，雙蒸水100ml，pH7.4，冷至4550°C。加入NaN3至終濃度為0.4mg/ml，2，3，5-氯化三苯四氮唑(TTC)O.lmg/ml，倒平板。)平板上，37。C厭氧培養(yǎng)24h，挑取紫紅色，表面光滑凸起，周邊整齊，直徑1.01.5mm的菌落，傳代于EC基礎(chǔ)斜面培養(yǎng)基，涂片，革蘭氏染色鏡檢，篩選G+，圓形或卵圓形，單個、成對或短鏈狀排列的菌株。然后將篩選菌株再在MRS平板上劃線接種純培養(yǎng)。在MRS液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)16h，取樣測乳酸產(chǎn)量，對大腸桿菌K88做抑菌實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)液在80。C水浴10min，取原液0.4mL涂板挑取80。C水浴存活的菌種接到斜面上，選取80°C水浴存活的，乳酸產(chǎn)量^6g/L發(fā)酵液，并且對大腸桿菌K88、大腸桿菌K99、沙門氏菌的抑菌圈直徑^18mm的菌株，篩選得到屎腸球菌菌株Efl008，凍存，采用40%的甘油作為保護(hù)劑。屎腸球菌Efl008的形態(tài)特征為表面光滑凸起，周邊整齊，直徑1.01.5mm的菌落，并篩選G+，圓形或卵圓形，短鏈狀排列，這些和屎腸球菌的形態(tài)特征相符合。屎腸球菌Efl008為革蘭氏陽性菌，能在l(TC和45t:生長，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸，可生長于6.5%NaCl和40%膽汁鹽環(huán)境中，精氨酸產(chǎn)氨，不分解鼠李糖、松三糖和山梨醇，能分解蔗糖、密二糖、乳糖、麥芽糖和棉子糖，對慶大霉素、卡那霉素、多粘菌素和鏈霉素不敏感，對青霉素、紅霉素、萬古霉素，和阿莫西林敏感。這些特性與屎腸球菌的生理生化特征相符合，因此可確定菌株Ef1008為屎腸球菌(Enterococcusfaecium)。對屎腸球菌Ef1008的16SrDNA進(jìn)行測序(見序列表SECIDNo:1)，并對測得的序6列應(yīng)用BLAST程序與數(shù)據(jù)庫中已發(fā)表的屎腸球菌16SrDNA序列(AccessionNo.AY675247)進(jìn)行相似性比較，同源性均為99%，說明篩選的菌株Efl008經(jīng)16SrDNA鑒定為屎腸球菌，并且和其他菌株不同。本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)(1)、本發(fā)明可使蛋雞產(chǎn)蛋率高，料蛋比高，主要是其中所含的P-甘露聚糖酶、木聚糖酶、e-葡聚糖酶、纖維素酶、果膠酶能降低飼料原料中P-甘露聚糖、木聚糖、P_葡聚糖、纖維素及果膠的抗?fàn)I養(yǎng)作用，使動物對其利用率大大提高，降低了飼料成本；(2)、本發(fā)明屎腸球菌屬于腸道共生的乳酸菌，生長速度快，培養(yǎng)保存條件要求小，粘附能力強(qiáng)，乳酸及細(xì)菌素等抗菌物質(zhì)產(chǎn)量高，能夠促進(jìn)腸道的微生態(tài)平衡，提高機(jī)體免疫力，在應(yīng)激環(huán)境下，降低畜禽死亡率。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1屎腸球菌發(fā)酵液的制備將屎腸球菌Efl008(已于2009年12月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCNo.3537)菌種按照2%的接種量接到MRS培養(yǎng)基(MRS培養(yǎng)基的組成成份及其含量為蛋白胨10g，牛肉浸膏10g，酵母浸膏5g，iyiP042g，檸檬酸氫二銨2g，葡萄糖20g，乙酸鈉5g，Tween-80lmL，MgS047H200.58g，MnS044H200.25g，lOOOmL蒸餾水，用lmol/LNa0H調(diào)節(jié)pH為7.2，115。C滅菌30min)中，在37°C，160r/min條件下培養(yǎng)9小時，即得屎腸球菌發(fā)酵液；所得發(fā)酵液的活菌為^5X1(TCFU/mL。實(shí)施例2復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的制備按照如下方法進(jìn)行按照下述重量份取P-甘露聚糖酶(購于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所)，酶活為1700U/g)4，木聚糖酶(購于武漢新華揚(yáng)生物技術(shù)有限公司，酶活為^50000U/g))27，P-葡聚糖酶(購于武漢新華揚(yáng)生物技術(shù)有限公司，酶活性為^8000U/g)13，纖維素酶(購于武漢新華揚(yáng)生物技術(shù)有限公司，酶活性為^10000U/g)31，果膠酶(購于武漢新華揚(yáng)生物技術(shù)有限公司，酶活性為^20000U/g)24，實(shí)施例1制備的屎腸球菌發(fā)酵液(發(fā)酵液活菌為>5Xl(TCFU/mL)101;將上述酶混合均勻，然后再將屎腸球菌發(fā)酵液與復(fù)合P_甘露聚糖酶混合均勻，再在45t:條件下烘干，即得復(fù)合e-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑產(chǎn)品，所得產(chǎn)品中每克產(chǎn)品屎腸球菌活菌數(shù)為^1X101QCFU。實(shí)施例3復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌制劑的蛋雞飼料的制備按表1的基礎(chǔ)日糧組分和預(yù)混料將各組分混勻，得基礎(chǔ)日糧。表1基礎(chǔ)日糧組分及營養(yǎng)成分<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>預(yù)混料(購于北京偉嘉人生物技術(shù)有限公司，1%蛋雞用復(fù)合預(yù)混合飼料3210)按1%的量添加，其中每千克預(yù)混料提供維生素D3為2040萬IU，維生素E為13003000IU，維生素K3為200400mg，維生素B:為>160mg，維生素B2為>700mg，維生素B6為>300mg/Kg，維生素B12為>1.8mg，生物素為>12mg，煙酸為>2200mg，泛酸為>900mg，葉酸為^70mg。試驗(yàn)組日糧在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上加入0.05%的復(fù)合P-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑，混合均勻即可。實(shí)施例4含有復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的蛋雞飼料的飼養(yǎng)試驗(yàn)本試驗(yàn)采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計方案。選擇30周齡健康海蘭灰蛋雞1890只，隨機(jī)分成試驗(yàn)I組、試驗(yàn)II組和對照組(見表2)，每處理630只，每個處理設(shè)5個重復(fù)，每個重復(fù)126只雞，三組基礎(chǔ)日糧和預(yù)混料相同。(1)試驗(yàn)I組添加按照0.5g/kg比例復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑。(2)試驗(yàn)II組按照0.5g/kg比例添加市場上購買的小麥_雜粕日糧專用酶制劑(含有木聚糖酶、P-葡聚糖酶、纖維素酶、果膠酶、植酸酶等)(3)對照組只喂基礎(chǔ)日糧和預(yù)混料，進(jìn)行為期8周的試驗(yàn)。分別將試驗(yàn)及對照組所述重量的組份粉碎。然后，按照擬定配方準(zhǔn)確計量各組分，混勻，放入包裝，在陰涼干燥通風(fēng)處儲存，作為飼養(yǎng)試驗(yàn)的日糧。試驗(yàn)過程中主要考察的指標(biāo)為蛋雞的生長性能、蛋雞蛋品質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)消化率(AIA法)及腸道微生物的變化(稀釋涂布平板法)及發(fā)酵糞中氨氣和硫化氫釋放量(氨用納氏試劑比色法，硫化氫用滴定法)等。試驗(yàn)數(shù)據(jù)在Excel軟件中進(jìn)行初步運(yùn)算后，用SPSS10.0ForWindows進(jìn)行統(tǒng)計分析。各指標(biāo)差異用one-wayANOVA進(jìn)行分析，用LSD進(jìn)行多重比較，結(jié)果見下表26。表2蛋雞生長性能試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注同行標(biāo)有相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)，大寫字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，下表同。由表2可以看出，飼喂含有本發(fā)明的復(fù)合|3_甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的蛋雞飼料與基礎(chǔ)日糧相比，產(chǎn)蛋率提高了5.83%(P<O.Ol)，而且平均蛋的重量也增加了3.08%(P<0.05)，日采食量增加了3.82%(P>0.05)，料蛋比減少了7.32%(P<0.05)。飼喂含有本發(fā)明復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的蛋雞飼料與添加市場上的復(fù)合酶制劑相比，產(chǎn)蛋率提高了1.69%(PX).05)，而且平均蛋的重量也增加了1.54%(P<0.05)，日采食量增加了1.19%(P>0.05)，料蛋比減少了1.69%(P<0.05)。表3雞蛋蛋品質(zhì)試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由表3可以看出，在蛋形指數(shù)、蛋黃比例及蛋殼比例等指標(biāo)上，各處理組差異不顯著(P>0.05)。飼喂含有本發(fā)明添加復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌的蛋雞飼料與基礎(chǔ)日糧相比，能夠顯著提高蛋黃的重量，加深蛋黃的顏色，提高蛋殼強(qiáng)度。表4蛋雞對能量與粗蛋白的表觀利用率結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由表4可以看出，飼喂含有本發(fā)明復(fù)合P-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的蛋雞飼料與基礎(chǔ)日糧相比，蛋白質(zhì)的表觀利用率提高了11.85%(P<0.01)，能量的表觀利用率提高了6.47%(P<0.01)。飼喂含有本發(fā)明復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌添加劑飼料添加劑的蛋雞飼料與添加市場上的復(fù)合酶制劑相比，蛋白質(zhì)的表觀利用率提高了3.53%(P>0.05)，能量的表觀利用率提高了2.46%(P>0.05)。表5蛋雞盲腸腸道菌群試驗(yàn)結(jié)果(lgCFU/g盲腸內(nèi)容物)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由表5可以看出，飼喂含有本發(fā)明復(fù)合P-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的蛋雞飼料不管是與基礎(chǔ)日糧相比還是與添加市場上的復(fù)合酶制劑相比均能極顯著的提高蛋雞盲腸中乳酸菌的含量(P<0.01)，降低其大腸桿菌的含量(P<0.01)。表6蛋雞發(fā)酵糞中氨氣和硫化氫釋放量的試驗(yàn)結(jié)果(mg/m3)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由表6可以看出，飼喂含有本發(fā)明復(fù)合P-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的蛋雞專用飼料與基礎(chǔ)日糧相比，氨氣逸出量降低了40.05%(P<0.01)，硫化氫逸出量降低了29.29%P<0.01)。飼喂含有本發(fā)明復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑的蛋雞飼料與添加市場上的復(fù)合酶制劑相比，氨氣逸出量降低了27.81%(P<O.Ol)，硫化氫逸出量降低了18.31%(P>0.05)。終上所述復(fù)合|3-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑可以提高腸道中有益菌的數(shù)量，降低有害菌的數(shù)量，維持腸道微生態(tài)平衡，提高飼料原料的利用率，減少環(huán)境污染，進(jìn)而提高其生產(chǎn)性能及蛋品質(zhì)。序列表〈110〉北京聯(lián)合盛邦生物技術(shù)有限公司〈120〉一種復(fù)合13-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑〈160>1〈170>PatentInversion3.5〈210>1〈211>1522〈212>DNA〈213>Enterococcusfaecium〈400〉1tacggttaccttgttacttc3CCCC^tC3tctatcccacctteggcggctggctccaaa60aggttacctcaccgacttcgggtgttec^actctcgtggtgtgacgggcggtgtgtera120郷cccgggaacgtattcaccgcggcgtgctgatccgcgattactegcgattccggcttc1803tgC3ggCg3gttgcagcctgc^tccg^ttagcttagc240ctcgcgacttcgcaactcgttgtacttcccattgtegcacgtgtgtegcc300ggggcatgatgatttgacgtcatccccaccttcctccggtttgtcaccggcagtcttgct3603g3gtgCCC3actg^tgatggc^cteacgcgctcgttgcgggactt皿420cccaacatctC3Cg3C3Cg3gCtg3Cg3C3accatgcaccacctgtcactttgcccccga480郷gg^gctctatctctagggatgt咖gacctggteaggttcttcgcg540ttgcttcgaatgctccaccgcttgtgcgggcccccgtcaattcctttgag600tttcaaccttgcggtcgtectccccaggcgtgcgttagctgC3gC3Ctg3660郷gcgga^ccctcc^cacttagcactcatcgtttacggcgtggacteccagggtatc720taatcctgtttgctccccacgctttcgagcctcagcgtcagttacagacc3g3g3gCCgC780cttcgccactggtgttcctccatatatctacgcatttcaccgctacacatggaattccac840tctcctcttctgcactcaagtctcccagtttccaatgaccctccccggttgagccggggg■ctttcacatcagactteagaaaccgcctgcgctcgctttacgcccaataaatccggacaa960cgcttgccacctecgtetteccgcggctgctggracgtegttegccgtggctttctggtt1020agateccgtc皿gggatg皿cagttectctcatccttgttcttctcteac1080tecgatccgaaaaccttcttcactcacgcggcgttgctcggtcagactttcgtccattgc1140cgaagattccctectgctgcctcccgteggagtttgggccgtgtctcagtcccaatgtgg1200ccgatcaccctctcaggtcggctetgcatcgtggccttggtgagccgttecctcacc皿c1260tegcteatgcaccgcgggtccatccatcagcgacacccgaaagcgccttt1320ccatgcggtttcgattgttetecggtettegcacctgtttccaagtgttetccccttctg1380atgggc郷ttecccacgtgttectcacccgttcgccactcctctttttccggtggagra1440agctccggtgcgttcgacttgcatgtetteggcacgccgccagcgttcgt1500cctgagccaggatcaaactc15221權(quán)利要求一種復(fù)合β-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑，其特征在于其組成成份及其重量份為β-甘露聚糖酶2～8木聚糖酶24～30β-葡聚糖酶9～15纖維素酶28～33果膠酶20～27屎腸球菌發(fā)酵液90～110。2.按照權(quán)利要求l所述的飼料添加劑，其特征在于其組成成份及其重量份為P-甘露聚糖酶4木聚糖酶27P-葡聚糖酶13纖維素酶31果膠酶24屎腸球菌發(fā)酵液101。3.按照權(quán)利要求1或2所述的飼料添加劑，其特征在于其所述的屎腸球菌發(fā)酵液中屎腸球菌的活菌數(shù)為》5X101QCFU/mL。4.按照權(quán)利要求1或2所述的飼料添加劑，其特征在于其原料酶活分別為P-甘露聚糖酶的酶活為1700U/g，木聚糖酶的酶活為>50000U/g;13-葡聚糖酶的酶活性為>8000U/g，纖維素酶的酶活性為^10000U/g，果膠酶的酶活性為^20000U/g。5.按照權(quán)利要求1或2所述的飼料添加劑，其特征在于所述的屎腸球菌是屎腸球菌菌株(Enterococcusfaecium)Efl008，已于2009年12月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCNo.3537。6.按照權(quán)利要求1或2所述的飼料添加劑，其特征在于所述的屎腸球菌發(fā)酵液按照如下方法制備按照2X的重量百分比將屎腸球菌菌種接種于MRS培養(yǎng)基上，在37t:，160rpm條件下培養(yǎng)9小時，即得屎腸球菌發(fā)酵液；所得屎腸球菌發(fā)酵液中屎腸球菌的活菌為>5X10，F(xiàn)U/mL;其中所述的MRS培養(yǎng)基的組成成分及其含量為蛋白胨10g/L、牛肉浸膏10g/L、酵母浸膏5g/L、1(2昍0428/1、檸檬酸氫二銨2g/L、葡萄糖20g/L、乙酸鈉5g/L、吐溫-801mL，MgS04*7H200.58g/L、MnS04*4H200.25g/L，用Imol/LNaOH調(diào)節(jié)pH為7.2，115°C滅菌30min。7.權(quán)利要求1或2所述的飼料添加劑在蛋雞飼料中應(yīng)用。8.按照權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于所述的飼料添加劑在蛋雞飼料中的添加比例為0.030.1%。9.含有權(quán)利要求1或2所述的飼料添加劑的蛋雞飼料，其特征在于權(quán)利要求1或2所述的飼料添加劑的重量百分比為0.03%0.1%，其中基礎(chǔ)飼料的組成成份及預(yù)混料及其重量份為玉米3050小麥1535豆粕1525菜籽粕38棉籽粕38石粉89磷酸氫鈣1-1.5賴氨酸鹽酸鹽0.050.1蛋氨酸0.050.1預(yù)混料15。10.按照權(quán)利要求10所述的蛋雞飼料，其特征在于所述的預(yù)混料的組成為每千克預(yù)混料提供維生素D3為2040萬IU，維生素E為13003000U，維生素K3為200400mg，維生素B丄為160mg，維生素B2為>700mg，維生素B6為>300mg/Kg，維生素B12為>1.8mg，生物素為^12mg，煙酸為^2200mg，泛酸為^900mg，葉酸為^70mg。全文摘要本發(fā)明公開了一種復(fù)合β-甘露聚糖酶及乳酸菌飼料添加劑，其組成成份及其重量份為β-甘露聚糖酶2～8，木聚糖酶24～30，β-葡聚糖酶9～15，纖維素酶28～33，果膠酶20～27，屎腸球菌發(fā)酵液90～110。本發(fā)明還公開了一種屎腸球菌菌株(Enterococcusfaecium)Ef1008。本發(fā)明飼料添加劑可用于在蛋雞飼料中應(yīng)用，其在蛋雞飼料中的添加比例為0.03％～0.1％。本發(fā)明可使蛋雞產(chǎn)蛋率高，可使動物對其利用率大大提高，降低了飼料成本；本發(fā)明中屎腸球菌能夠促進(jìn)腸道的微生態(tài)平衡，提高機(jī)體免疫力，在應(yīng)激環(huán)境下，降低畜禽死亡率。文檔編號A23K1/165GK101715879SQ20091024310公開日2010年6月2日申請日期2009年12月25日優(yōu)先權(quán)日2009年12月25日發(fā)明者李冬青,王婷婷申請人:北京聯(lián)合盛邦生物技術(shù)有限公司