專利名稱：：一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基以及固體菌種的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種食用菌的固體菌種，尤其涉及一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基以及固體菌種的制備方法，具體適用于草腐食用菌的菌種培養(yǎng)。
背景技術(shù)：
：草腐食用菌包括雙孢蘑菇、巴西蘑菇、草菇、雞腿菇、褐蘑菇等食用菌。長期以來，草腐食用菌多使用麥粒、谷粒等固體顆粒作為菌種培養(yǎng)基，所制得的生產(chǎn)、栽培用的菌種被稱為麥粒菌種，雖然麥粒菌種具有萌發(fā)快、生長點多和生長勢強等優(yōu)點，但是其制作工藝繁瑣、費工費時，滅菌要求高、菌種污染較難控制，最嚴重的是菌種易發(fā)生吐黃水的老化現(xiàn)象，從而造成保存期較短，一般為3545天。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的制作工藝繁瑣、滅菌要求高、菌種易老化以及保存期較短的缺陷與問題，提供一種工藝簡單、滅菌要求低、菌種難老化，且保存期較長的一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基以及固體菌種的制備方法。為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土6878，棉籽殼1015，麩皮1015，石膏12，蔗糖12并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的pH值為6.57.0。所述培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土73，棉籽殼15，麩皮10，石膏1，蔗糖1并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的PH值為7.0。—種采用所述培養(yǎng)基的草腐食用菌固體菌種的制備方法，其特征在于按如下步驟進行(1)備料按生產(chǎn)量備足原料，并將泥炭土過篩以去除直徑大于lcm的雜物，要求麩皮新鮮、無霉變，棉籽殼不結(jié)塊成團；(2)配制按培養(yǎng)基的組分及其重量份比例將泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏與蔗糖混勻，并加入水，原料與水的重量比為i:i.2i:1.3，加水后對原料進行混合翻拌以使原料吸水均勻，同時加入石灰以調(diào)整pH值，使得配制出的培養(yǎng)基的pH值為6.57.0;(3)分裝用菌種袋對上述制得的培養(yǎng)基進行分裝，每袋裝培養(yǎng)基0.25kg，要求分裝后的菌種袋飽滿、松緊適宜，并在菌種袋上加蓋塑料套圈封口，對菌種袋接觸時注意輕拿輕放以防菌種袋破損而造成菌種污染；(4)滅菌對上述制得的菌種袋進行高溫滅菌，滅菌溫度為121°C123°C，時間為2.5小時，滅菌結(jié)束后將菌種袋放入室內(nèi)進行自然冷卻以備用；(5)接種在超凈工作臺或接種箱內(nèi)打開上述滅菌后的菌種袋的封口蓋，對制得的培養(yǎng)基進行無菌接種；在制作原種時，每袋接入的母種用量為lcm見方小塊；在制作生產(chǎn)種時，每袋接入的原種用量為15ml;(6)培養(yǎng)把接種后的菌種袋放于25t:的暗室內(nèi)培養(yǎng)菌絲，如接入的為母種，則5天后定植吃料，如接入的為原種，則3天后定植吃料；培養(yǎng)菌絲7天后可清污去雜，培養(yǎng)菌絲2530天后菌絲滿袋，菌種成熟，即制得所述的固體菌種。所述分裝步驟中所用的菌種袋為單層高壓聚丙烯菌種袋。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為1.由于本發(fā)明一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基以及固體菌種的制備方法中所使用的原料只包括泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏與蔗糖，以及調(diào)整pH值的石灰，因此在制作本發(fā)明時，不需要浸泡或蒸煮，而一般的麥粒菌種在制作時必須對麥粒進行浸泡或蒸煮，否則麥粒難以達到適宜的含水量，且在浸泡、蒸煮時要把握好火候，稍有不慎則導致失敗，此外，麥粒菌種的盛裝容器一般為玻璃瓶，體積重量大，使用不便，且其所用的菌種袋要求為雙層袋，工序煩瑣、費工費時，而本發(fā)明用的是單層菌種袋。因此本發(fā)明工藝簡單、操作方便、省工省時。2.由于本發(fā)明一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基以及固體菌種的制備方法中所使用的原料只包括泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏與蔗糖，以及調(diào)整pH值的石灰，而一般的麥粒菌種所使用的原料的營養(yǎng)極其豐富，極易引起污染，因此對麥粒菌種的滅菌時間長，一般在4個小時以上，而本發(fā)明的滅菌時間一般為2.5個小時，因此本發(fā)明的滅菌要求低、不易污染。3.由于本發(fā)明一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基以及固體菌種的制備方法所制得的固體菌種保存期為6070天，而一般的麥粒菌種易老化，在菌絲培養(yǎng)30天后即會發(fā)生吐黃水現(xiàn)象，因此本發(fā)明的保存期較長。4.由于本發(fā)明一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基以及固體菌種的制備方法中所使用的主要原料為泥炭土，泥炭土經(jīng)多年自然發(fā)酵而成，腐熟度好，持水力強，肥力適宜，此外我國泥炭土資源豐富，價格便宜，泥炭土售價為250300元/m3，折合為0.250.30元/升，每升原料可制作固體菌種2瓶，而同樣容積的麥粒菌種的原料成本為0.400.50元，因而，采用泥炭土為主料制作固體菌種，其原料成本比麥粒菌種降低約40%，加之由于泥炭土無須預處理便可直接使用，進而使制作工藝簡化、生產(chǎn)所需的水、電、人工等費用減少，故本發(fā)明制作的菌種比麥粒菌種至少降低生產(chǎn)成本50%，因此本發(fā)明節(jié)省成本。具體實施例方式以下結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明進行詳細描述本發(fā)明的一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土6878，棉籽殼1015，麩皮1015，石膏12，蔗糖12并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的pH值為6.57.0。所述培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土73，棉籽殼15，麩皮10，石膏1，蔗糖1并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的PH值為7.0。上述培養(yǎng)基的組成成分及作用說明如下泥炭土作為本發(fā)明固體菌種中的主料，它經(jīng)多年自然發(fā)酵而成，腐熟度好，持水力強；肥力適宜，含有高量有機質(zhì)，如中國吉林省的泥炭土有機質(zhì)平均含量為65.4%，川西北高原為57.5%，泥炭土中氮的含量也相當豐富，東北地區(qū)泥炭土含氮量平均為1.52.0%，最高可達2.5%，此外，泥炭土中磷的含量也高于礦物質(zhì)土體，約0.290.33%，非常適合于作為草腐菌類，如雙孢蘑菇、草菇、巴西蘑菇等的出菇覆土材料。棉籽殼顆粒性好，能增強培養(yǎng)料的透氣性，以利菌絲生長。麩皮為培養(yǎng)料提供維生素和氮源。蔗糖為培養(yǎng)料提供速效碳源。石膏為培養(yǎng)料補充鈣元素。石灰為培養(yǎng)料補充鈣元素和調(diào)整pH值。本發(fā)明進而提出了一種采用所述培養(yǎng)基的草腐食用菌固體菌種的制備方法，該方法依次包括以下步驟(1)備料按生產(chǎn)量備足原料，并將泥炭土過篩以去除直徑大于lcm的雜物，要求麩皮新鮮、無霉變，棉籽殼不結(jié)塊成團；(2)配制按培養(yǎng)基的組分及其重量份比例將泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏與蔗糖混勻，并加入水，原料與水的重量比為i:i.2i:1.3，加水后對原料進行混合翻拌以使原料吸水均勻，同時加入石灰以調(diào)整pH值，使得配制出的培養(yǎng)基的pH值為6.57.0;(3)分裝用菌種袋對上述制得的培養(yǎng)基進行分裝，每袋裝培養(yǎng)基0.25kg，要求分裝后的菌種袋飽滿、松緊適宜，并在菌種袋上加蓋塑料套圈封口，對菌種袋接觸時注意輕拿輕放以防菌種袋破損而造成菌種污染；(4)滅菌對上述制得的菌種袋進行高溫滅菌，滅菌溫度為121°C123°C，時間為2.5小時，滅菌結(jié)束后將菌種袋放入室內(nèi)進行自然冷卻以備用；(5)接種在超凈工作臺或接種箱內(nèi)打開上述滅菌后的菌種袋的封口蓋，對制得的培養(yǎng)基進行無菌接種；在制作原種時，每袋接入的母種用量為lcm見方小塊；在制作生產(chǎn)種時，每袋接入的原種用量為15ml;(6)培養(yǎng)把接種后的菌袋放于25t:的暗室內(nèi)培養(yǎng)菌絲，如接入的為母種，則5天后定植吃料，如接入的為原種，則3天后定植吃料；培養(yǎng)菌絲7天后可清污去雜，培養(yǎng)菌絲2530天后菌絲滿袋，菌種成熟，即制得所述的固體菌種。所述分裝步驟中所用的菌種袋為單層高壓聚丙烯菌種袋。如在培養(yǎng)基中接入的為母種，則培養(yǎng)長滿菌絲即得原種，也稱為二級種。如在培養(yǎng)基中接入的為原種，則培養(yǎng)長滿菌絲即得栽培種，也稱為三級種、生產(chǎn)種或栽培種。實施例1:—種草腐食用菌的固體菌種的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土68，棉籽殼15，麩皮15，石膏l(xiāng)，蔗糖1并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的pH值為7.0。—種采用所述培養(yǎng)基的草腐食用菌固體菌種的制備方法，該制作方法按如下步驟進行(1)備料按生產(chǎn)量備足原料，并將泥炭土過篩以去除直徑大于lcm的雜物，要求麩皮新鮮、無霉變，棉籽殼不結(jié)塊成團；(2)配制按培養(yǎng)基的組分及其重量份比例將泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏與蔗糖混勻，并加入水，原料與水的重量比為l:1.21:1.3，加水后對原料進行混合翻拌以使原料吸水均勻，同時加入石灰以調(diào)整pH值，使得配制出的培養(yǎng)基的pH值為7.0;(3)分裝用菌種袋對上述制得的培養(yǎng)基進行分裝，每袋裝培養(yǎng)基0.25kg，要求分裝后的菌種袋飽滿、松緊適宜，并在菌種袋上加蓋塑料套圈封口，對菌種袋接觸時注意輕拿輕放以防菌種袋破損而造成菌種污染；(4)滅菌對上述制得的菌種袋進行高溫滅菌，滅菌溫度為121°C123°C，時間為2.5小時，滅菌結(jié)束后將菌種袋放入室內(nèi)進行自然冷卻以備用；(5)接種在超凈工作臺或接種箱內(nèi)打開上述滅菌后的菌種袋的封口蓋，對菌種袋內(nèi)的培養(yǎng)基進行無菌接種，接入的為母種，每袋接入的母種用量為lcm見方小塊。(6)培養(yǎng)把接種后的菌袋放于25t:的暗室內(nèi)培養(yǎng)菌絲，5天后定植吃料，培養(yǎng)菌絲7天后可清污去雜，培養(yǎng)菌絲2530天后菌絲滿袋，菌種成熟，即制得所述的固體菌種。實施例2:—種草腐食用菌的固體菌種的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土78，棉籽殼10，麩皮10，石膏l(xiāng)，蔗糖1并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的pH值為6.8?！N采用所述培養(yǎng)基的草腐食用菌固體菌種的制備方法，該制作方法按如下步驟進行(1)備料按生產(chǎn)量備足原料，并將泥炭土過篩以去除直徑大于lcm的雜物，要求麩皮新鮮、無霉變，棉籽殼不結(jié)塊成團；(2)配制按培養(yǎng)基的組分及其重量份比例將泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏與蔗糖混勻，并加入水，原料與水的重量比為l:1.21:1.3，加水后對原料進行混合翻拌以使原料吸水均勻，同時加入石灰以調(diào)整pH值，使得配制出的培養(yǎng)基的pH值為6.8;(3)分裝用菌種袋對上述制得的培養(yǎng)基進行分裝，每袋裝培養(yǎng)基0.25kg，要求分裝后的菌種袋飽滿、松緊適宜，并在菌種袋上加蓋塑料套圈封口，對菌種袋接觸時注意輕拿輕放以防菌種袋破損而造成菌種污染；(4)滅菌對上述制得的菌種袋進行高溫滅菌，滅菌溫度為121°C123°C，時間為2.5小時，滅菌結(jié)束后將菌種袋放入室內(nèi)進行自然冷卻以備用；(5)接種在超凈工作臺或接種箱內(nèi)打開上述滅菌后的菌種袋的封口蓋，對菌種袋內(nèi)的培養(yǎng)基進行無菌接種，接入的為原種，每袋接入的原種用量為15ml。(6)培養(yǎng)把接種后的菌袋放于25t:的暗室內(nèi)培養(yǎng)菌絲，3天后定植吃料，培養(yǎng)菌絲7天后可清污去雜，培養(yǎng)菌絲2530天后菌絲滿袋，菌種成熟，即制得所述的固體菌種。實施例3:—種草腐食用菌的固體菌種的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土72，棉籽殼12，麩皮13，石膏l(xiāng)，蔗糖2并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的pH值為6.5。—種采用所述培養(yǎng)基的草腐食用菌固體菌種的制備方法，該制作方法按如下步驟進行(1)備料按生產(chǎn)量備足原料，并將泥炭土過篩以去除直徑大于lcm的雜物，要求麩皮新鮮、無霉變，棉籽殼不結(jié)塊成團；(2)配制按培養(yǎng)基的組分及其重量份比例將泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏與蔗糖混勻，并加入水，原料與水的重量比為i:i.2i:1.3，加水后對原料進行混合翻拌以使原料吸水均勻，同時加入石灰以調(diào)整pH值，使得配制出的培養(yǎng)基的pH值為6.5;(3)分裝用菌種袋對上述制得的培養(yǎng)基進行分裝，每袋裝培養(yǎng)基0.25kg，要求分裝后的菌種袋飽滿、松緊適宜，并在菌種袋上加蓋塑料套圈封口，對菌種袋接觸時注意輕拿輕放以防菌種袋破損而造成菌種污染；(4)滅菌對上述制得的菌種袋進行高溫滅菌，滅菌溫度為121°C123°C，時間為2.5小時，滅菌結(jié)束后將菌種袋放入室內(nèi)進行自然冷卻以備用；(5)接種在超凈工作臺或接種箱內(nèi)打開上述滅菌后的菌種袋的封口蓋，對菌種袋內(nèi)的培養(yǎng)基進行無菌接種，接入的為母種，每袋接入的母種用量為lcm見方小塊。(6)培養(yǎng)把接種后的菌袋放于25t:的暗室內(nèi)培養(yǎng)菌絲，5天后定植吃料，培養(yǎng)菌絲7天后可清污去雜，培養(yǎng)菌絲2530天后菌絲滿袋，菌種成熟，即制得所述的固體菌種。實施例4:—種草腐食用菌的固體菌種的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土73，棉籽殼15，麩皮10，石膏l(xiāng)，蔗糖1并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的pH值為7.0?！N采用所述培養(yǎng)基的草腐食用菌固體菌種的制備方法，該制作方法按如下步驟進行(1)備料按生產(chǎn)量備足原料，并將泥炭土過篩以去除直徑大于lcm的雜物，要求麩皮新鮮、無霉變，棉籽殼不結(jié)塊成團；(2)配制按培養(yǎng)基的組分及其重量份比例將泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏與蔗糖混勻，并加入水，原料與水的重量比為l:1.21:1.3，加水后對原料進行混合翻拌以使原料吸水均勻，同時加入石灰以調(diào)整pH值，使得配制出的培養(yǎng)基的pH值為7.0;(3)分裝用菌種袋對上述制得的培養(yǎng)基進行分裝，每袋裝培養(yǎng)基0.25kg，要求分裝后的菌種袋飽滿、松緊適宜，并在菌種袋上加蓋塑料套圈封口，對菌種袋接觸時注意輕拿輕放以防菌種袋破損而造成菌種污染；(4)滅菌對上述制得的菌種袋進行高溫滅菌，滅菌溫度為121°C123°C，時間為2.5小時，滅菌結(jié)束后將菌種袋放入室內(nèi)進行自然冷卻以備用；(5)接種在超凈工作臺或接種箱內(nèi)打開上述滅菌后的菌種袋的封口蓋，對菌種袋內(nèi)的培養(yǎng)基進行無菌接種，接入的為原種，每袋接入的原種用量為15ml;(6)培養(yǎng)把接種后的菌袋放于25t:的暗室內(nèi)培養(yǎng)菌絲，3天后定植吃料，培養(yǎng)菌絲7天后可清污去雜，培養(yǎng)菌絲2530天后菌絲滿袋，菌種成熟，即制得所述的固體菌種。本發(fā)明一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基以及固體菌種的制備方法適于各種草腐食用菌如雙孢蘑燕、草燕、雞腿燕、褐蘑燕、巴西蘑燕即姬松茸等食用菌的培養(yǎng)。—般的麥粒菌種在菌絲培養(yǎng)30天后即吐黃水，表明其菌絲易衰老，不耐儲藏，而采用本發(fā)明制作方法制得的固體菌種未見吐黃水現(xiàn)象發(fā)生，其菌種保質(zhì)期可達6070天，而且其播種后菌絲萌發(fā)、定植方面無明顯差異，子實體都能正常形成，其產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)量相當，經(jīng)試驗5個標準筐，每筐面積為0.205m2，結(jié)果產(chǎn)巴西蘑菇鮮重9.18Kg，折合單產(chǎn)計算為9.18Kg+(0.205m2/筐X5筐)=8.95Kg/m2，產(chǎn)品質(zhì)量指標無異常。下表為以巴西蘑菇為例來比較各種栽培菌種的應用情況四種巴西蘑菇栽培種應用情況比較<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>權(quán)利要求一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基，其特征在于該培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土68～78，棉籽殼10～15，麩皮10～15，石膏1～2，蔗糖1～2并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的pH值為6.5～7.0。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基的組分及其重量份比例為泥炭土73，棉籽殼15，麩皮10，石膏l(xiāng)，蔗糖1并加入石灰調(diào)整培養(yǎng)基的pH值為7.0。3.—種采用權(quán)利要求1或2所述培養(yǎng)基的草腐食用菌固體菌種的制備方法，其特征在于按如下步驟進行(1)備料按生產(chǎn)量備足原料，并將泥炭土過篩以去除直徑大于lcm的雜物，要求麩皮新鮮、無霉變，棉籽殼不結(jié)塊成團；(2)配制按培養(yǎng)基的組分及其重量份比例將泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏與蔗糖混勻，并加入水，原料與水的重量比為1:1.21:1.3，加水后對原料進行混合翻拌以使原料吸水均勻，同時加入石灰以調(diào)整pH值，使得配制出的培養(yǎng)基的pH值為6.57.0;(3)分裝用菌種袋對上述制得的培養(yǎng)基進行分裝，每袋裝培養(yǎng)基0.25kg，要求分裝后的菌種袋飽滿、松緊適宜，并在菌種袋上加蓋塑料套圈封口，對菌種袋接觸時注意輕拿輕放以防菌種袋破損而造成菌種污染；(4)滅菌對上述制得的菌種袋進行高溫滅菌，滅菌溫度為121°C123°C，時間為2.5小時，滅菌結(jié)束后將菌種袋放入室內(nèi)進行自然冷卻以備用；(5)接種在超凈工作臺或接種箱內(nèi)打開上述滅菌后的菌種袋的封口蓋，對制得的培養(yǎng)基進行無菌接種；在制作原種時，每袋接入的母種用量為lcm見方小塊；在制作生產(chǎn)種時，每袋接入的原種用量為15ml;(6)培養(yǎng)把接種后的菌種袋放于25t:的暗室內(nèi)培養(yǎng)菌絲，如接入的為母種，則5天后定植吃料；如接入的為原種，則3天后定植吃料；培養(yǎng)菌絲7天后可清污去雜，培養(yǎng)菌絲2530天后菌絲滿袋，菌種成熟，即制得所述的固體菌種。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種草腐食用菌固體菌種的制備方法，其特征在于所述分裝步驟中所用的菌種袋為單層高壓聚丙烯菌種袋。全文摘要一種草腐食用菌固體菌種的培養(yǎng)基以及固體菌種的制備方法，屬于菌種培養(yǎng)領(lǐng)域。首先按配方比例備足泥炭土、棉籽殼、麩皮、石膏、蔗糖，然后加石灰、水混拌制得pH值為6.5～7.0的培養(yǎng)基，再用菌種袋分裝培養(yǎng)基，每袋0.25kg，隨后進行高溫滅菌，溫度為121℃～123℃，時間為2.5小時，待冷卻后再接入母種或原種，隨后把菌種袋放于25℃的暗室內(nèi)培養(yǎng)菌絲，培養(yǎng)菌絲7天后可清污去雜，培養(yǎng)菌絲25～30天后菌絲滿袋，即制得所述的固體菌種。本發(fā)明制得的培養(yǎng)基以及用其制得的固體菌種不僅不易老化、保存期限長，而且制作工藝簡單、滅菌要求低，更節(jié)省成本。文檔編號C05G3/00GK101717309SQ200910272928公開日2010年6月2日申請日期2009年11月26日優(yōu)先權(quán)日2009年11月26日發(fā)明者周全,唐興國,宋鵬飛,黃振興申請人:武漢生物工程學院