專利名稱：一種酪蛋白肽螯合錳的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于添加劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種在動(dòng)物技術(shù)領(lǐng)域中作營(yíng)養(yǎng)食物的酪蛋
白肽螯合錳的制備方法。
背景技術(shù)：
螯合物是一種通過(guò)強(qiáng)配位鍵螯合得到有機(jī)分子(氨基酸或者肽鏈)和金屬離子的 化合物。這些化合物廣泛應(yīng)用于動(dòng)物技術(shù)領(lǐng)域，因?yàn)樗麄兊挠行詠?lái)自所涉及金屬的生物 活性，它在許多酶的反應(yīng)中用作活化劑，并在所有生物有機(jī)體的各種新陳代謝功能中用作 調(diào)節(jié)劑。 金屬離子由于與肽鏈或者氨基酸物質(zhì)的鍵的螯合，有利于金屬離子的吸收、利用 和使用，因?yàn)樗ㄟ^(guò)有機(jī)組分轉(zhuǎn)運(yùn)到有機(jī)體的所有區(qū)域。尤其在動(dòng)物技術(shù)領(lǐng)域中，這些化合 物用于各種飼養(yǎng)或者是培育領(lǐng)域以增加和增強(qiáng)正常的新陳代謝和功能活動(dòng)，同時(shí)對(duì)動(dòng)物的 產(chǎn)出性生長(zhǎng)的能力有顯著的正面影響。 目前存在于國(guó)際國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上的螯合物可劃分為各種類型。最熟悉的一類是和能夠 與特定單個(gè)氨基酸形成配合物的金屬離子在一起的種類。它們?cè)诨瘜W(xué)組成上是可充分定義 的化合物，容易被有機(jī)體吸收和利用。第二類由能夠與單個(gè)氨基酸形成配合物的微量營(yíng)養(yǎng) 素組成，盡管這類螯合物不能充分定義，但特性類似于前述種類的那些。在生產(chǎn)這些化合物 的過(guò)程中，還注意到，某些可溶性的金屬鹽難以螯合或留下非所需的殘余產(chǎn)物，如磷酸或氫 氯酸。第三類包含有幾種，優(yōu)選最多三種分子量最高800道爾頓的氨基酸形成配合物的金 屬離子。但是較大的分子尺寸導(dǎo)致鍵接強(qiáng)度較弱且更加難以吸收。最后一種類是有些金屬 離子能夠與小肽上的某些氨基酸形成有機(jī)組分對(duì)動(dòng)物的實(shí)際營(yíng)養(yǎng)需求影響小且金屬與小
肽結(jié)合得配合物，非常可溶，而且在倡導(dǎo)中不易解離，對(duì)腸道內(nèi)ra值沒(méi)有影響，能夠順利到
達(dá)小腸，被小腸吸收。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種在動(dòng)物技術(shù)領(lǐng)域中作營(yíng)養(yǎng)食物的酪蛋白肽螯合錳的
制備方法，用于營(yíng)養(yǎng)食物的螯合添加劑，該添加劑不僅有效，而且穩(wěn)定，水溶性好，并容易再 生產(chǎn)，并且沒(méi)有非所需的反應(yīng)副產(chǎn)物。 為實(shí)現(xiàn)該目的，本發(fā)明方法采用如下具體步驟 (1)首先將酪蛋白溶解在去離子水中制成酪蛋白懸濁液，酪蛋白懸濁液中酪蛋白
與去離子水的重量比為i : 2 20;然后用堿調(diào)節(jié)酪蛋白懸濁液的ra值為7 i3，所述的
堿為NaOH、 K0H、 NH3. H20中的一種。 (2)將蛋白酶加入酪蛋白懸濁液，得到酶解液；加入的蛋白酶與酪蛋白懸濁液中 所含酪蛋白的質(zhì)量比為l : 30 100，酶解溫度為45 65t:，酶解時(shí)間為l 10小時(shí)；所 述的蛋白酶為堿性蛋白酶、胰蛋白酶中的一種或者是兩者的混合物。 (3)將酶解液過(guò)濾，濾除雜質(zhì)；將酸加入過(guò)濾后的酶解液，調(diào)節(jié)ra值為3 8，得到備用酶解液；加入的酸為HC1或H2S04。 (4)在反應(yīng)器內(nèi)加入去離子水或者蒸餾水，加入的量為備用酶解液體積的3 5 倍，加熱至25 70°C ，然后將備用酶解液的1/3 2/3加入到去離子水或者蒸餾水中，攪拌 均勻后加入錳鹽，加入的錳鹽的量為加入的備用酶解液重量的5 40%，25 7(TC下保溫 攪拌0. 5 2小時(shí)進(jìn)行螯合反應(yīng)，得到初級(jí)螯合液。所述的錳鹽為硫酸錳或氯化錳。
(5)將剩余的備用酶解液加入到初級(jí)螯合液中，攪拌均勻后加入錳鹽，加入的錳鹽 的量為剩余的備用酶解液重量的5 40% ， 25 7(TC下保溫?cái)嚢?. 5 2小時(shí)進(jìn)行螯合反 應(yīng)，反應(yīng)完畢后冷卻過(guò)濾，反應(yīng)液待用；所述的錳鹽為硫酸錳或氯化錳。在整個(gè)螯合反應(yīng)過(guò) 程中用酸調(diào)節(jié)ra值為3 8，所述的酸為HC1或H2S(V (6)將反應(yīng)液置于真空于燥器中干燥至水重量含量在10%以下，得到干燥產(chǎn)品， 真空干燥器的干燥溫度為75 80°C ;將干燥產(chǎn)品粉碎后加入到無(wú)水乙醇中，攪拌0. 5 2 小時(shí)，然后離心得到酪蛋白肽螯合錳沉淀物，將沉淀物置于真空干燥器中干燥至水重量含 量在10%以下，得到酪蛋白肽螯合錳，真空干燥器的干燥溫度為75 80°C。
本發(fā)明的制備方法利用硫酸錳或氯化錳以及酪蛋白水解肽易溶于水不溶于乙醇 的特性，在純化時(shí)采用乙醇析出結(jié)晶，得到產(chǎn)品純度好(含量可以達(dá)到97%以上)生產(chǎn)總收 率為91% 99%，產(chǎn)品為均勻的疏松的晶體，質(zhì)量上乘。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)便、成本低廉，乙醇 可以循環(huán)回收利用，適宜于規(guī)模化工業(yè)生產(chǎn)。
具體實(shí)施方式

實(shí)施例1 (1)首先將400g酪蛋白溶解在2L去離子水中制成酪蛋白懸濁液；然后用NaOH調(diào)
節(jié)酪蛋白懸濁液的ra值為13。 (2)將8g堿性蛋白酶加入酪蛋白懸濁液，得到酶解液，酶解溫度為55t:，酶解時(shí)間 為5小時(shí)； (3)將酶解液過(guò)濾，濾除雜質(zhì)；加入H2S04調(diào)節(jié)酶解液的ra值為5，得到備用酶解 液。 (4)在反應(yīng)器內(nèi)加入去離子水，加入的量為備用酶解液體積的3倍，加熱至50°C， 然后將備用酶解液的1/3加入到去離子水中，攪拌均勻后加入MnS(V加入的MnS04的量為 加入的備用酶解液重量的10X，在5(TC下保溫?cái)嚢?小時(shí)進(jìn)行螯合反應(yīng)，得到初級(jí)螯合液。
(5)將剩余的備用酶解液加入到初級(jí)螯合液中，攪拌均勻后加入MnS04，加入的 MnS04的量為剩余的備用酶解液重量的10X，5(TC下保溫?cái)嚢?小時(shí)進(jìn)行螯合反應(yīng)，反應(yīng)完 畢后冷卻過(guò)濾，反應(yīng)液待用。在整個(gè)螯合反應(yīng)過(guò)程中用H^04調(diào)節(jié)ra值為5。
(6)將反應(yīng)液置于真空干燥器中干燥至水重量含量為8%，得到干燥產(chǎn)品，真空干 燥器的干燥溫度為75°C ;將干燥產(chǎn)品粉碎后加入到無(wú)水乙醇中，攪拌1小時(shí)，然后離心得到 酪蛋白肽螯合錳沉淀物，將沉淀物置于真空干燥器中干燥至水重量含量為8%，得到酪蛋白 肽螯合錳，真空干燥器的干燥溫度為75°C。
實(shí)施例2 (1)首先將600g酪蛋白溶解在1. 2L去離子水中制成酪蛋白懸濁液；然后用KOH調(diào)
節(jié)酪蛋白懸濁液的ra值為7。
(2)將20g胰蛋白酶加入酪蛋白懸濁液，得到酶解液，酶解溫度為65t:，酶解時(shí)間 為1小時(shí)； (3)將酶解液過(guò)濾，濾除雜質(zhì)；加入HC1調(diào)節(jié)酶解液的ra值為3，得到備用酶解液。
(4)在反應(yīng)器內(nèi)加入去離子水，加入的量為備用酶解液體積的4倍，加熱至25°C， 然后將備用酶解液的2/3加入到去離子水中，攪拌均勻后加入MnCl2，加入的MnCl2的量為加 入的備用酶解液重量的5%，在25t:下保溫?cái)嚢?. 5小時(shí)進(jìn)行螯合反應(yīng)，得到初級(jí)螯合液。
(5)將剩余的備用酶解液加入到初級(jí)螯合液中，攪拌均勻后加入MnCl2，加入的 MnCl2的量為剩余的備用酶解液重量的5%，251:下保溫?cái)嚢?. 5小時(shí)進(jìn)行螯合反應(yīng)，反應(yīng)
完畢后冷卻過(guò)濾，反應(yīng)液待用。在整個(gè)螯合反應(yīng)過(guò)程中用hci調(diào)節(jié)ra值為3。 (6)將反應(yīng)液置于真空干燥器中干燥至水重量含量為7%，得到干燥產(chǎn)品，真空干 燥器的干燥溫度為80°C ;將干燥產(chǎn)品粉碎后加入到無(wú)水乙醇中，攪拌0. 5小時(shí)，然后離心得 到酪蛋白肽螯合錳沉淀物，將沉淀物置于真空干燥器中干燥至水重量含量為7%，得到酪蛋 白肽螯合錳，真空干燥器的干燥溫度為80°C。
實(shí)施例3 (1)首先將300g酪蛋白溶解在6L去離子水中制成酪蛋白懸濁液；然后用NH3. H20
調(diào)節(jié)酪蛋白懸濁液的ra值為10。 (2)將2g堿性蛋白酶和lg胰蛋白酶加入酪蛋白懸濁液，得到酶解液，酶解溫度為 45t:，酶解時(shí)間為10小時(shí); (3)將酶解液過(guò)濾，濾除雜質(zhì)；加入HC1調(diào)節(jié)酶解液的ra值為8，得到備用酶解液。
(4)在反應(yīng)器內(nèi)加入蒸餾水，加入的量為備用酶解液體積的5倍，加熱至7(TC，然 后將備用酶解液的1/2加入到蒸餾水中，攪拌均勻后加入MnCl2，加入的MnCl2的量為加入 的備用酶解液重量的40%，在7(TC下保溫?cái)嚢?小時(shí)進(jìn)行螯合反應(yīng)，得到初級(jí)螯合液。
(5)將剩余的備用酶解液加入到初級(jí)螯合液中，攪拌均勻后加入MnCl2，加入的 MnCl2的量為剩余的備用酶解液重量的40X，7(TC下保溫?cái)嚢?小時(shí)進(jìn)行螯合反應(yīng)，反應(yīng)完
畢后冷卻過(guò)濾，反應(yīng)液待用。在整個(gè)螯合反應(yīng)過(guò)程中用hci調(diào)節(jié)ra值為8。 (6)將反應(yīng)液置于真空干燥器中干燥至水重量含量為10%，得到干燥產(chǎn)品，真空 干燥器的干燥溫度為78°C ;將干燥產(chǎn)品粉碎后加入到無(wú)水乙醇中，攪拌2小時(shí)，然后離心得 到酪蛋白肽螯合錳沉淀物，將沉淀物置于真空干燥器中干燥至水重量含量為10 % ，得到酪 蛋白肽螯合錳，真空干燥器的干燥溫度為78°C。
權(quán)利要求
一種酪蛋白肽螯合錳的制備方法，其特征在于該方法的具體步驟是(1)將酪蛋白溶解在去離子水中制成酪蛋白懸濁液，酪蛋白懸濁液中酪蛋白與去離子水的重量比為1∶2～20；然后用堿調(diào)節(jié)酪蛋白懸濁液的PH值為7～13；(2)將蛋白酶加入酪蛋白懸濁液，得到酶解液；加入的蛋白酶與酪蛋白懸濁液中所含酪蛋白的質(zhì)量比為1∶30～100，酶解溫度為45～65℃，酶解時(shí)間為1～10小時(shí)；(3)將酶解液過(guò)濾，濾除雜質(zhì)；將酸加入過(guò)濾后的酶解液，調(diào)節(jié)PH值為3～8，得到備用酶解液；(4)在反應(yīng)器內(nèi)加入去離子水或者蒸餾水，加入的量為備用酶解液體積的3～5倍，加熱至25～70℃，然后將備用酶解液的1/3～2/3加入到去離子水或者蒸餾水中，攪拌均勻后加入錳鹽，加入的錳鹽的量為加入的備用酶解液重量的5～40％，25～70℃下保溫?cái)嚢?.5～2小時(shí)進(jìn)行螯合反應(yīng)，得到初級(jí)螯合液；(5)將剩余的備用酶解液加入到初級(jí)螯合液中，攪拌均勻后加入錳鹽，加入的錳鹽的量為剩余的備用酶解液重量的5～40％，25～70℃下保溫?cái)嚢?.5～2小時(shí)進(jìn)行螯合反應(yīng)，反應(yīng)完畢后冷卻過(guò)濾，反應(yīng)液待用；在整個(gè)螯合反應(yīng)過(guò)程中用酸調(diào)節(jié)PH值為3～8；(6)將反應(yīng)液置于真空干燥器中干燥至水重量含量在10％以下，得到干燥產(chǎn)品，真空干燥器的干燥溫度為75～80℃；將干燥產(chǎn)品粉碎后加入到無(wú)水乙醇中，攪拌0.5～2小時(shí)，然后離心得到酪蛋白肽螯合錳沉淀物，將沉淀物置于真空干燥器中干燥至水重量含量在10％以下，得到酪蛋白肽螯合錳，真空干燥器的干燥溫度為75～80℃。
2. 如權(quán)利要求l所述的一種酪蛋白肽螯合錳的制備方法，其特征在于步驟(1)中所 述的堿為NaOH、 KOH、 NH3. H20中的一種。
3. 如權(quán)利要求l所述的一種酪蛋白肽螯合錳的制備方法，其特征在于步驟(2)中所 述的蛋白酶為堿性蛋白酶、胰蛋白酶中的一種或者是兩者的混合物。
4. 如權(quán)利要求1所述的一種酪蛋白肽螯合錳的制備方法，其特征在于步驟(3)和步 驟(5)中加入的酸為HC1或112504。
5. 如權(quán)利要求1所述的一種酪蛋白肽螯合錳的制備方法，其特征在于步驟(4)和步 驟(5)中所述的錳鹽為硫酸錳或氯化錳。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酪蛋白肽螯合錳的制備方法。本發(fā)明方法的具體步驟是首先將酪蛋白溶解在去離子水中制成酪蛋白懸濁液，然后將蛋白酶加入酪蛋白懸濁液，得到酶解液，將酸加入過(guò)濾后的酶解液，調(diào)節(jié)pH值為3～8；將去離子水或者蒸餾水加熱，再將酶解液的1/3～2/3加入到去離子水或者蒸餾水中，然后加入錳鹽，再將剩余的備用酶解液加入，并加入錳鹽，進(jìn)行螯合反應(yīng)，將反應(yīng)液干燥純化后得到酪蛋白肽螯合錳。本發(fā)明得到的產(chǎn)品純度和生產(chǎn)總收率較高，并且工藝簡(jiǎn)便、成本低廉，適宜于規(guī)模化工業(yè)生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A23K1/16GK101766262SQ20101004007
公開(kāi)日2010年7月7日 申請(qǐng)日期2010年1月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月19日
發(fā)明者馮杰, 周源, 王勇, 馬文強(qiáng) 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)