專利名稱：一種檸檬苦素化合物-凱雅馨作為椰心葉甲毒殺劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及下述通式(I)表示的檸檬苦素化合物-凱雅馨的新應(yīng)用，具體涉及凱 雅馨作為椰心葉甲毒殺劑的應(yīng)用，尤其是椰心葉甲2-4齡幼蟲的毒殺劑。
背景技術(shù)：
下述通式(I)表示的檸檬苦素化合物_凱雅馨于1966年首次報(bào)道從非洲桃花 心木分離出來(見文獻(xiàn):Adesogan E. K.，Bevan C. ff. L.，Powell J. ff.，Taylor D. A. H.， J. Chem. Soc. C-0rg.，23，2127—2133，1966)。其通式如下 通式(I)通式⑴表示的化合物-凱雅馨，外觀呈白色粉末，分子式為C31H4(I08， 其化學(xué)名為6-去氧，3-0-異丁?；?桃花心木內(nèi)酯[英文名為6-Deoxy， 3-0-isobutyryl-swietenolide]，中文名為凱雅馨。到目前為止，沒有發(fā)現(xiàn)上述通式(I)表示的化合物_凱雅馨對(duì)椰心葉甲具有毒殺 作用的報(bào)道。椰心葉甲Brontispa longissima(Gestro)是一種重大危險(xiǎn)性的外來毀滅性害蟲。 在國家林業(yè)局最新公布的19種林業(yè)檢疫性有害生物名單中名列第三位，是我國1992年新 增的禁止入境的二類檢疫性有害生物。目前椰心葉甲在我國海南省、廣東省、臺(tái)灣省和香港 地區(qū)危害嚴(yán)重，并且有蔓延的趨勢(shì)。該害蟲嚴(yán)重為害椰子、檳榔、大王棕等棕櫚科植物，對(duì)我 國亞熱帶甚至溫帶地區(qū)種植的棕櫚科園林植物的生長(zhǎng)和繁殖構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。目前國內(nèi)的 化學(xué)防治方法主要是采用高效氯氰菊酯、呲蟲啉、辛硫磷等人工合成的化學(xué)農(nóng)藥。這類農(nóng)藥 雖毒力強(qiáng)、見效快，但長(zhǎng)期、大量使用易導(dǎo)致農(nóng)藥殘留、農(nóng)藥抗性、環(huán)境污染和慢性毒性等諸 多問題。因此，研發(fā)高效低毒、無公害、選擇性強(qiáng)的生物農(nóng)藥已成為當(dāng)今農(nóng)藥發(fā)展的新趨勢(shì) 和必然需求。上述通式(I)是由植物新陳代謝產(chǎn)生，屬于生物農(nóng)藥，開發(fā)作為椰心葉甲的毒殺 劑可以很好的克服上述人工合成的化學(xué)農(nóng)藥作為椰心葉甲的毒殺劑而存在的種種問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供凱雅馨作為椰心葉甲毒殺劑的新應(yīng)用。本發(fā)明通過幼蟲活體模型實(shí)驗(yàn)證實(shí)凱雅馨對(duì)椰心葉甲的2-4齡幼蟲具有很強(qiáng)的 毒殺作用，因此可以作為椰心葉甲的毒殺劑，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。本發(fā)明的中的凱雅馨可以通過現(xiàn)有技術(shù)中的方法分離得到，如根據(jù)參考文獻(xiàn) Adesogan E. K. , Bevan C. ff. L. , Powell J. ff. , Taylor D. A. H. , J. Chem. Soc. C_0rg. , 23, 2127-2133，1966公開的分離方法分離獲得。本發(fā)明人利用現(xiàn)代色譜技術(shù)從印度的木果楝屬紅樹植物Xylocarpus moluccensis中分離出檸檬苦素化合物凱雅馨(Khayasin)，其分離方法是以木果楝屬紅樹 植物Xylocarpus moluccensis的種子為原料，粉碎后用乙醇提取，減壓濃縮后得乙醇提取 物，乙醇提取物加水混懸后，用乙酸乙酯萃取，減壓濃縮得到的乙酸乙酯萃取物。該萃取 物經(jīng)正相硅膠柱層析，以氯仿-甲醇為洗脫劑從體積比100 1-5 1梯度洗脫，收集氯 仿-甲醇體積比為100 1洗脫的餾分，然后經(jīng)反向硅膠柱層析洗脫，以乙腈-水為洗脫劑 從體積比50 50-100 0梯度洗脫，收集乙腈-水體積比為65 35的洗脫的餾分，最后 通過高效液相色譜制備，用體積比為50 50的乙腈-水為洗脫劑洗脫，分離純化而得到化 合物凱雅馨(Khayasin)。本發(fā)明采用浸葉法測(cè)定凱雅馨對(duì)椰心葉甲2-4齡幼蟲的毒殺活性，結(jié)果表明該化 合物對(duì)椰心葉甲2-4齡幼蟲具有很強(qiáng)的毒殺作用。在供試濃度為50mg/L時(shí)，椰心葉甲幼蟲 的致死率為100%，其殺蟲效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對(duì)照藥劑-川楝素(50mg/L)，毒殺效果見表1。表1化合物凱雅馨(Khayasin)對(duì)椰心葉甲2_4齡幼蟲的毒力 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明凱雅馨可以用作椰心葉甲的毒殺劑，其對(duì)椰心葉甲2-4齡幼蟲 具有很強(qiáng)的毒殺效果。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明，而不是對(duì)本發(fā)明的限制。凱雅馨(Khayasin)的制備以7. 0kg印度木果楝屬植物Xylocarpus moluccensis的種子為原料，粉碎后用 15kg 95% (體積分?jǐn)?shù))的乙醇室溫提取5次，減壓濃縮后得乙醇提取物1087g。乙醇提 取物加水混懸后，用乙酸乙酯萃取8次，減壓濃縮得到的乙酸乙酯萃取物320g。該萃取物 經(jīng)正相硅膠(100-200目)柱層析，以氯仿-甲醇洗脫系統(tǒng)從體積比100 1-5 1梯度 洗脫，收集氯仿-甲醇體積比為100 1洗脫的餾分，該餾分濃縮后，然后經(jīng)反向硅膠(:075 um)柱層析洗脫，用乙腈_水洗脫系統(tǒng)從體積比50 50-100 0梯度洗脫，收集乙 腈-水體積比為65 35洗脫的餾分，該餾分最后通過高效液相色譜制備(Waters 600，色 譜柱 YMC 250X 10mm, i. d. ,5um, RP-C18，流速 3ml/min，保留時(shí)間 RT = 22. 6min)，以體積 比為50 50的乙腈-水為洗脫系統(tǒng)洗脫，分離純化得到白色化合物，該化合物經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定 為凱雅馨(Khayasin)。結(jié)構(gòu)鑒定由高分辨質(zhì)譜(HRT0F-MS)可知此上一步驟分離得到的化合物的[M+Na] +為 563. 2625，確定其分子式為C31H4(108。該化合物最大紫外吸收波長(zhǎng)位于210. Onm，其核磁 共振波譜 CHNMR，13C 匪R)數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[Adesogan E. K.，Bevan C. ff. L.，Powell J. ff.， Taylor D. A. H.，J. Chem. Soc. C-0rg.，23，2127-2133 (1966)]報(bào)道的 Khayasin 數(shù)據(jù)對(duì)照 一致，故確定該化合物為6-去氧，3-0-異丁?；?桃花心木內(nèi)酯，英文名為6-Deoxy， 3-0-isobutyryl-swietenolide]，中文名為凱雅馨，其結(jié)構(gòu)式如通式(I)所示。其1H NMR與 13C NMR數(shù)據(jù)見表2。表2.咕，13〇匪R data of Khayasin. (500MHz for'H and 125MHz for13C 匪R， Chloroform-d)
對(duì)比例1 供試椰心葉甲幼蟲模型
供試幼蟲系從海南儋州椰子樹上采回，在室內(nèi)飼養(yǎng)繁殖多代。試驗(yàn)時(shí)挑取個(gè)體大 小、顏色一致的2、3、4齡中期幼蟲供試。毒殺活性測(cè)試試驗(yàn)采用浸葉法將椰子樹Cocos nucifera Linnaeus的樹葉放入50mg/L川楝 素_丙酮溶液中浸漬3秒后，放吸水紙上晾干，再將晾干的浸藥葉片放入培養(yǎng)皿中，然后將 大小一致的椰心葉甲2、3、4齡幼蟲分別放入裝有浸藥葉片的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿底鋪有濾紙 保濕。將處理好的培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱(T:25士 1°C，RH = 70 80%)中。以丙酮作空白對(duì) 照，試驗(yàn)重復(fù)3次，每次10頭幼蟲。定時(shí)檢查試蟲死亡情況，以毛筆輕觸蟲體，以完全不動(dòng)者 視為死亡。分別于給藥后12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)和72小時(shí)時(shí)統(tǒng)計(jì)死蟲數(shù)，計(jì)算死亡率。 其結(jié)果見于表1。實(shí)施例1 供試椰心葉甲幼蟲模型供試幼蟲系從海南儋州椰子樹上采回，在室內(nèi)飼養(yǎng)繁殖多代。試驗(yàn)時(shí)挑取個(gè)體大 小、顏色一致的2、3、4齡中期幼蟲供試。毒殺活性測(cè)試試驗(yàn)采用浸葉法。將椰子樹Cocos nucifera Linnaeus的樹葉放入50mg/L的凱 雅馨一丙酮溶液中浸漬3秒后取出，放吸水紙上晾干，再將晾干的浸藥葉片放入培養(yǎng)皿中， 然后將大小一致的椰心葉甲2、3、4齡幼蟲分別放入裝有浸藥葉片的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿底鋪 有濾紙保濕。將處理好的培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱(T :25士 1°C，RH = 70 80% )中。以丙酮作 空白對(duì)照，試驗(yàn)重復(fù)3次，每次10頭幼蟲。定時(shí)檢查試蟲死亡情況，以毛筆輕觸蟲體，以完 全不動(dòng)者視為死亡。分別于給藥后12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)和72小時(shí)時(shí)統(tǒng)計(jì)死蟲數(shù)，計(jì)算 死亡率。其結(jié)果見于表1。
權(quán)利要求
下述通式(I)表示的化合物作為椰心葉甲毒殺劑的應(yīng)用通式(I)。FSA00000149256100011.tif
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式(I)表示的化合物作為椰心葉甲毒殺劑的應(yīng)用，其特征 在于，所述的椰心葉甲為椰心葉甲的2-4齡幼蟲。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種檸檬苦素化合物-凱雅馨作為椰心葉甲毒殺劑的應(yīng)用，其結(jié)構(gòu)如通式(I)所示。本發(fā)明采用浸葉法測(cè)定凱雅馨對(duì)椰心葉甲2-4齡幼蟲的毒殺活性，結(jié)果表明該化合物對(duì)椰心葉甲2-4齡幼蟲具有很強(qiáng)的毒殺作用。在供試濃度為50mg/L時(shí)，椰心葉甲幼蟲的致死率為100％，其殺蟲效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對(duì)照藥劑-川楝素(50mg/L)。由此表明凱雅馨可以用作椰心葉甲的毒殺劑，其對(duì)椰心葉甲2-4齡幼蟲具有很強(qiáng)的毒殺效果。通式(I)
文檔編號(hào)A01N43/16GK101849541SQ20101018881
公開日2010年10月6日 申請(qǐng)日期2010年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月26日
發(fā)明者吳軍, 李敏一 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院南海海洋研究所