專(zhuān)利名稱(chēng)：生物除草復(fù)配劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種除草復(fù)配劑，具體地說(shuō)是一種彎霉屬菌株的孢子與化學(xué)除草劑組成的復(fù)配劑。
背景技術(shù)：
雜草一直被認(rèn)為是嚴(yán)重影響農(nóng)業(yè)與環(huán)境的生物災(zāi)害之一。在過(guò)去的一個(gè)多世紀(jì) 以來(lái)，化學(xué)除草劑已經(jīng)有效地用于農(nóng)田雜草的控制中。然而，由于化學(xué)除草劑的大量應(yīng)用， 許多嚴(yán)重的問(wèn)題諸如抗性雜草的形成，土壤和水質(zhì)的下降，除草劑的殘留、水源污染以及抗 (耐)性雜草的出現(xiàn)等問(wèn)題日趨嚴(yán)重，而且化學(xué)除草劑的大量開(kāi)發(fā)和使用，并未完全解決雜 草危害問(wèn)題。隨著全球環(huán)保意識(shí)的提高，具有高效除草活性和環(huán)境安全性的生物除草劑的 研究倍受科研工作者的青睞。而且目前，世界各國(guó)正在大力倡導(dǎo)“綠色農(nóng)業(yè)”、“生態(tài)農(nóng)業(yè)”， 由于綠色農(nóng)業(yè)在防治病蟲(chóng)草害中少用或不用化學(xué)農(nóng)藥，因此，加強(qiáng)生物除草劑的研究與開(kāi) 發(fā)是可持續(xù)農(nóng)業(yè)發(fā)展的需要。生物除草劑在產(chǎn)品形式和應(yīng)用技術(shù)上與化學(xué)除草劑有類(lèi)似之處，主要區(qū)別是生物 除草劑大多都是活的生物產(chǎn)品。由于目前生物除草劑多是利用真菌，故將利用真菌發(fā)展的 生物除草劑也稱(chēng)為真菌除草劑。真菌除草劑的應(yīng)用基于植物病理學(xué)的流行病學(xué)原理，是以 病原菌為手段使雜草感染病害而抑制雜草生長(zhǎng)，達(dá)到控制雜草的目的。植物病害是寄主、病 原菌和環(huán)境綜合影響的結(jié)果，因此，研究真菌除草劑也就是篩選高毒性的菌株，在適宜的環(huán) 境條件下防除目標(biāo)雜草。自從生物除草劑Devine 和Collego 分別在1981年和1982年獲得注冊(cè)以來(lái)，先 后有六個(gè)品種獲得注冊(cè)。與這一領(lǐng)域研究規(guī)模的迅速擴(kuò)大相比，新注冊(cè)的生物除草劑產(chǎn)品 的數(shù)量并不多，其中的一個(gè)主要原因是在某一種雜草上分離一種特殊的有潛在應(yīng)用價(jià)值 的病原物一般相對(duì)比較容易，但是它的以后的發(fā)展過(guò)程往往是漫長(zhǎng)而復(fù)雜的，限制生物除 草劑發(fā)展的因素主要包括四個(gè)方面，即生物因素、環(huán)境因素、技術(shù)因素、市場(chǎng)因素。生物因素 包括寄主的變化和抗性的形成；環(huán)境因素包括溫度和濕度，特別是濕度，一直被認(rèn)為是影響 生物除草劑藥效發(fā)揮的主要因素；技術(shù)因素是指劑型的生產(chǎn)和加工常常影響生物除草劑的 發(fā)展，這需要雜草學(xué)的專(zhuān)家和植物病理學(xué)的專(zhuān)家共同努力才能完成；市場(chǎng)因素是指生產(chǎn)農(nóng) 藥的主要跨國(guó)公司不愿意花費(fèi)巨大的成本和時(shí)間進(jìn)行生物除草劑的研制和開(kāi)發(fā)。生物除草劑加工和應(yīng)用研究的目的是將分離得到的致病微生物通過(guò)加工處理，改 善有機(jī)體對(duì)環(huán)境條件(如水分)的依賴(lài)性，并且易于保藏、包裝、運(yùn)輸、操作和應(yīng)用，增加穩(wěn) 定性、生物活性、對(duì)雜草的親和力和附著力，并可能增加生物除草劑的殺草譜，最終將生物 除草劑融入雜草綜合治理當(dāng)中。馬唐屬(Digitaria sp.)雜草是秋熟作物田惡性雜草，廣泛分布于世界熱帶和溫 帶地區(qū)，從北緯50度至南緯40度均有其生長(zhǎng)。目前，世界上馬唐屬有300多個(gè)種，是世界 18種惡性雜草之一。在中國(guó)，馬唐是玉米、棉花、高粱、大豆、花生、甘蔗、煙草等秋熟旱作物 田的惡性雜草，也是蔬菜田、果園和園藝作物田的優(yōu)勢(shì)雜草，甚至也是南方陸稻田的主要危害性雜草。目前，防除馬唐主要有人工、機(jī)械、物理和化學(xué)防除幾類(lèi)方法。以上各種方法盡 管均有一定效果，但由于該草很強(qiáng)的繁殖能力和抗逆性，人工拔除和機(jī)械防除均不理想，化 學(xué)防除也較為困難。在馬唐屬雜草的生物防除研究方面，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)用一種彎孢霉屬真菌菌株的分生 孢子以及菌絲可用于雜草防除(專(zhuān)利號(hào)CN01134002. 9)，但在高效地根除雜草上還需要進(jìn) 一步的研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)玉米、大豆、甘蔗和果園中的惡性馬唐屬雜草，提供一種彎霉 屬菌株和化學(xué)除草劑的復(fù)配劑用于防除目標(biāo)雜草，降低該菌株孢子的用量。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明為提供了一種彎霉屬菌株的孢子與化學(xué)除草劑復(fù)配 齊U，該復(fù)配劑包括一種彎孢霉屬真菌菌株QZ-2000(保藏單位中國(guó)微生物菌種保藏委員 會(huì)；保藏日期2001年10月8日，保藏號(hào)CGMCCN0. 0640)的分生孢子以及化學(xué)除草劑，所 述分生孢子濃度為l-10g/L，化學(xué)除草劑的濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列的脲類(lèi)除草劑異丙隆(化學(xué)名3-(4-異丙基苯基)-1，
1-二甲基脲)、綠麥隆(化學(xué)名1，1-二甲基-3-(3-氯-4-甲基苯)脲)，濃度為常規(guī)用量 的 1/20-1/3。化學(xué)除草劑可選自下列二苯醚類(lèi)除草劑乙氧氟草醚(化學(xué)名2_氯-l-(3-乙氧 基-4-硝基苯氧基)-4-三氟甲基苯)，濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列磺酰脲類(lèi)除草劑煙嘧磺隆(化學(xué)名2-(4，6_ 二甲氧基 嘧啶-2-氨基甲酰氨基磺酰)-N，N-二甲基煙酰胺)、氟吡磺隆(化學(xué)名N-((4，6-二甲氧 基-2-嘧啶)氨基)-2-(2_氟-1-(丙酰氧基)丙基)-3_吡啶磺酰胺)、甲磺隆(化學(xué)名
2-((4_甲氧基-6-甲基-1，3，5-三嗪基-2-氨基)脲基磺?；?苯甲酸甲酯)、氯磺隆(化 學(xué)名1-(2_氯苯基磺酰)-3-(4_甲基-1，3，5-三嗪-2-氨基)脲)、吡嘧磺隆(化學(xué)名 5-((4，6-二甲氧基-2-嘧啶)氨基)甲酰氨基磺酰)-1_甲基吡唑-4-乙基甲酸酯)、芐嘧 磺隆(化學(xué)名3-((4，6_ 二甲氧基-2-嘧啶)氨基)-1-(2_甲氧基甲?；S基)磺酰脲)、 甲嘧磺隆(化學(xué)名2-((4，6_ 二甲基-2-嘧啶)氨基氨基甲酰氨基磺酰基)苯甲酸甲酯)、 氯嘧磺隆(化學(xué)名2-((4_氯-6-甲氧基-2-嘧啶)氨基氨基甲酰氨基磺?；?苯甲酸甲 酯)，濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列三酮類(lèi)除草劑磺草酮(化學(xué)名2-(2_氯-4-甲砜基)苯 甲?；?1，3-環(huán)己二酮)，濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列硫代氨基甲酸酯類(lèi)除草劑禾草敵(化學(xué)名N，N-六亞甲 基硫代氨基甲酸-S-乙酯)、炔草酯(化學(xué)名(R)-2-(4-(5-氯-3-氟-2-吡啶氧基)苯氧 基)丙酸炔丙基酯)、殺草丹(化學(xué)名N，N-二乙基硫代氨基甲酸對(duì)氯芐酯)，濃度為常規(guī) 用量的1/20-1/3。化學(xué)除草劑可選自下列三氮苯酮類(lèi)除草劑嗪草酮(化學(xué)名4_氨基-6-(l，l-二 甲基乙基)-3-甲硫基-1，2，4-三嗪-5-四氫酮)，濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列芳氧基苯氧基丙酸類(lèi)除草劑精惡唑禾草靈(化學(xué)名 (R)-2-(4-(6-氯-1，3-苯并惡唑-2-氧基)苯氧基)丙酸乙酯)，吡氟禾草靈(化學(xué)名(R)-2-(4-((5-三氟甲基-2-吡啶)氧基)苯氧基)丙酸丁酯)、精喹禾靈(化學(xué)名(R)-2-(4-(6-氯喹惡啉-2-氧基)苯氧基)丙酸乙酯)、高效氟吡甲禾靈(化學(xué)名 (R)-2-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶氧基)苯氧基)丙酸甲酯)、氰氟草酯(化學(xué)名 (R) -2- (4 (4-氰基-2-氟苯氧基)苯氧基)-丙酸丁酯)，濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列環(huán)乙烯酮類(lèi)除草劑稀禾啶(化學(xué)名2-(1_(乙氧胺基) 丁基)-5-(2_乙硫基異丙基)-3-羥基-2-環(huán)己烯-1-酮)，濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列氯乙酰胺類(lèi)除草劑乙草胺(化學(xué)名2_乙基-6-甲 基-N-乙氧基甲基-α-氯代乙酰替苯胺)、丙草胺(化學(xué)名2_氯-Ν_(2，6-二乙基苯 基)-N-(2-丙氧基乙基)乙酰胺)，濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列二硝基苯類(lèi)除草劑地樂(lè)胺(化學(xué)名Ν-仲丁基-4-叔丁 基-2，6-二硝基苯胺)、二甲戊樂(lè)靈(化學(xué)名Ν-(1-乙基丙基)-2，6-二硝基-3，4-二甲基 苯胺)，氟樂(lè)靈(化學(xué)名2，6_ 二硝基-N，N-二正丙基-4-三氟甲基苯胺)，濃度為常規(guī)用 量的 1/20-1/3。化學(xué)除草劑可選自下列三唑并嘧啶磺酰胺類(lèi)除草劑五氟磺草胺(化學(xué)名3_(2， 2-二氟乙氧基)-Ν_[5，8-二甲氧基_(1，2，4)三唑并(1，5-C)_2-嘧啶基]-α，α , α-三 氟甲苯基-2-磺酰胺)，濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列咪唑啉酮類(lèi)除草劑咪草咽(化學(xué)名(R，S) 5-乙 基-2-(4-異丙基-4-甲基-5-氧代-2-咪唑啉基)煙酸)，濃度為常規(guī)用量的1/10-1/3。化學(xué)除草劑可選自下列有機(jī)雜環(huán)類(lèi)除草劑野燕枯(化學(xué)名1，2_ 二甲基-3， 5- 二苯基-唑甲基硫酸鹽)，濃度為常規(guī)用量的1/10-1/3。化學(xué)除草劑可選自下列三嗪類(lèi)除草劑阿特拉津(化學(xué)名2-氯-4-乙氨基-6-異 丙氨基-1，3，5-三嗪)，濃度為常規(guī)用量的1/10-1/3。化學(xué)除草劑可選自下列喹啉羧酸類(lèi)除草劑二氯喹啉酸(化學(xué)名3，7_ 二 氯-8-喹啉羧酸)，濃度為常規(guī)用量的1/10-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列嘧啶水楊酸類(lèi)除草劑雙草醚(化學(xué)名2，6_雙[(4，6-二 甲氧基嘧啶-2-基)氧]苯甲酸鈉)、嘧硫草醚(化學(xué)名2_氯-6-(4，6-二甲氧嘧啶-2-基 硫)苯甲酸鈉)，濃度為常規(guī)用量的1/10-1/3?；瘜W(xué)除草劑可選自下列的復(fù)配除草劑丁草胺·噁草酮(化學(xué)名N-丁氧甲 基-N- (2，6- 二乙基苯基)-2-氯代乙酰胺·5-叔丁基-3- (2,4- 二氯-5-異丙氧苯基)-1， 3,4-惡二唑啉-2-酮)，濃度為常規(guī)用量的1/10-1/5，所述分生孢子濃度為5-10g/L。上述除草復(fù)配劑中還可添加其他助劑，包括吐溫、植物油、SG-40、E-1310、GY_W04、 GY-NDS 等。本發(fā)明還提供了該除草復(fù)配劑的制備方法，包括以下步驟(1) 一種彎孢霉屬真菌菌株QZ-2000的分生孢子培養(yǎng)將QZ-2000于培養(yǎng)基中培 養(yǎng)5-8天，該培養(yǎng)基中含有馬鈴薯、葡萄糖和瓊脂；取菌落小塊轉(zhuǎn)接于麥麩_鋸屑或麥麩固 體培養(yǎng)基中培養(yǎng)5-9天，將菌切成小塊平鋪于平地容器內(nèi)，厚度0. 5-1. 5cm，置于黑光燈下 連續(xù)照射48-72h，風(fēng)干粉碎，過(guò)篩后即可得孢子粉；或?qū)⒕湫K接種于玉米粉-豆粉-蔗 糖液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)5-7天，濾去培養(yǎng)基殘液后，無(wú)菌水沖洗，得到菌絲體，粉碎后即 獲得菌絲體片段懸浮液，于培養(yǎng)皿中燈照36-48h，即得孢子；
(2)配置化學(xué)除草劑母液制備常規(guī)用量1/20-1/3的化學(xué)除草劑水溶液；(3)將步驟(1)中制得的孢子與步驟(2)中配置的化學(xué)除草劑母液混合，其中孢子 的濃度為l-10g/L。步驟(2)中配置化學(xué)除草劑母液可選用上述復(fù)配劑產(chǎn)品中采用的化學(xué)除草劑的 種類(lèi)及濃度；步驟(3)中混合時(shí)還可加入其它助劑，如吐溫、植物油、SG-40、E-1310、GY-W04、 GY-NDS 等。
其中，步驟⑴中的QZ-2000與菌落小塊于固體培養(yǎng)基中的最佳培養(yǎng)時(shí)間為7天， 菌落小塊于液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)時(shí)間為6天；菌落小塊于固體培養(yǎng)基培養(yǎng)后，菌塊平鋪?zhàn)?佳厚度為1cm，黑光燈最佳照射時(shí)間為48h ；菌絲體片段懸浮液于培養(yǎng)皿中最佳燈照時(shí)間為 36h。使用方法、劑量和時(shí)期使用噴霧的方法實(shí)施，使用劑量為孢子l-10g/L與化學(xué)除 草劑常規(guī)用量的1/20-1/3復(fù)配，使用期在雜草萌發(fā)至3葉期為最佳。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)和積極效果1.孢子與化學(xué)除草劑復(fù)配需要考慮到多種因素所選化學(xué)除草劑必須在除草的 同時(shí)不妨礙病原菌孢子的侵染，不影響寄主對(duì)病原菌的敏感性和病原菌對(duì)寄主的致病毒 力，復(fù)配前要做孢子與化學(xué)除草劑的相容性試驗(yàn)；另外除草劑對(duì)作物的安全性也要考慮； 孢子化學(xué)除草劑存在復(fù)配使用的方法，復(fù)配的比例；作物的生長(zhǎng)環(huán)境的復(fù)雜性等。本發(fā)明所 選用的化學(xué)除草劑與孢子的相容性好，并且在進(jìn)行大量的實(shí)驗(yàn)與探索下，獲得了孢子與化 學(xué)除草劑復(fù)配的使用方法，具體的復(fù)配比例，并且利用該彎孢霉菌的孢子與不同的化學(xué)除 草劑選擇性復(fù)配，可以在不同的作物田中安全使用，達(dá)到良好的控草效果。2.本發(fā)明用生物除草與化學(xué)除草配合，克服了生物除草劑與化學(xué)除草劑的使用限 制。生物除草劑(真菌除草劑)一般需要較長(zhǎng)的露期(濕度)和特定的溫度條件來(lái)保證其 侵染和發(fā)?。徽婢倪x擇性高，寄主專(zhuān)一性強(qiáng)，商業(yè)應(yīng)用范圍?。徽婢咦拥鹊纳a(chǎn)成本較 高?；瘜W(xué)除草劑的使用也帶來(lái)了諸多的環(huán)境問(wèn)題殘留藥害，水源污染等，并威脅人畜的健 康。而本發(fā)明中使用孢子與化學(xué)除草劑復(fù)配， 方面減少了孢子的用量，降低了使用生物防 治成本，一定程度上克服了孢子使用時(shí)對(duì)濕度的依賴(lài)性，另外擴(kuò)大了孢子的殺草譜，擴(kuò)大了 應(yīng)用范圍，而且與單用孢子比，復(fù)配中化學(xué)除草劑起到了增效作用。另一方面孢子與化學(xué)除 草劑復(fù)配大大降低了化學(xué)除草劑的用量，降低了化學(xué)除草劑的污染，使其在環(huán)境中的殘留 量減小到食品安全允許的范圍，對(duì)作物、人畜、環(huán)境安全性顯著提高，可用于生產(chǎn)綠色，甚至 有機(jī)農(nóng)產(chǎn)品。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 (1)分生孢子培養(yǎng)將QZ-2000于培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，該培養(yǎng)基中含有馬鈴薯、葡 萄糖和瓊脂；取菌落小塊轉(zhuǎn)接于麥麩_鋸屑或麥麩固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，將菌切成小塊 平鋪于平地容器內(nèi)，厚度為1cm，置于黑光燈下連續(xù)照射48h，風(fēng)干粉碎，過(guò)篩后即可得孢子 粉；或?qū)⒕湫K接種于玉米粉_豆粉_蔗糖液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)6天，濾去培養(yǎng)基殘液 后，無(wú)菌水沖洗，得到菌絲體，粉碎后即獲得菌絲體片段懸浮液，于培養(yǎng)皿中燈照36h，即得孢子；(2)配置化學(xué)除草劑母液配制化學(xué)除草劑煙嘧磺隆制劑稀釋一百倍的母液，取Iml煙嘧磺隆制劑加入到IOOml水中，混合均勻；(3)將步驟(1)中制得的孢子5g溶于IOOOml水中與步驟(2)中配置的化學(xué)除草 劑母液0. 8-4ml混合，孢子的濃度為5 X IO6個(gè)/ml。實(shí)施例2 (1)分生孢子培養(yǎng)將QZ-2000于培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，該培養(yǎng)基中含有馬鈴薯、葡 萄糖和瓊脂；取菌落小塊轉(zhuǎn)接于麥麩_鋸屑或麥麩固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，將菌切成小塊 平鋪于平地容器內(nèi)，厚度為1cm，置于黑光燈下連續(xù)照射48h，風(fēng)干粉碎，過(guò)篩后即可得孢子 粉；或?qū)⒕湫K接種于玉米粉_豆粉_蔗糖液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)6天，濾去培養(yǎng)基殘液 后，無(wú)菌水沖洗，得到菌絲體，粉碎后即獲得菌絲體片段懸浮液，于培養(yǎng)皿中燈照36h，即得 孢子；(2)配置化學(xué)除草劑母液配制化學(xué)除草劑乙氧氟草醚制劑稀釋一百倍的母液， 取Iml乙氧氟草醚制劑加入到IOOml水中，混合均勻；(3)將步驟(1)中制得的孢子5g溶于IOOOml水中與步驟(2)中配置的化學(xué)除草 劑母液 0. 6-3ml 以及植物油 2-10ml，SG_401_5g，GY-W040. 2_lg，GY-NDSO. 2_lg 混合，其中 孢子的濃度為5X IO6個(gè)/ml。實(shí)施例3 (1)分生孢子培養(yǎng)將QZ-2000于培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，該培養(yǎng)基中含有馬鈴薯、葡 萄糖和瓊脂；取菌落小塊轉(zhuǎn)接于麥麩_鋸屑或麥麩固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，將菌切成小塊 平鋪于平地容器內(nèi)，厚度為1cm，置于黑光燈下連續(xù)照射48h，風(fēng)干粉碎，過(guò)篩后即可得孢子 粉；或?qū)⒕湫K接種于玉米粉_豆粉_蔗糖液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)6天，濾去培養(yǎng)基殘液 后，無(wú)菌水沖洗，得到菌絲體，粉碎后即獲得菌絲體片段懸浮液，于培養(yǎng)皿中燈照36h，即得 孢子；(2)配置化學(xué)除草劑母液配制化學(xué)除草劑丁草胺·噁草酮制劑稀釋一百倍的母 液，取Iml乙氧氟草醚制劑加入到IOOml水中，混合均勻；(3)將步驟(1)中制得的孢子5g溶于IOOOml水中與步驟(2)中配置的化學(xué)除草 劑母液1. 2-6g以及植物油2-10ml，吐溫1. 2_4ml混合，其中孢子的濃度為5X IO6個(gè)/ml。試驗(yàn)例1 化學(xué)除草劑與菌株QZ-2000孢子的相容性進(jìn)行了試驗(yàn)。選取21種除草劑每種化學(xué)除草劑測(cè)試三種濃度1.常規(guī)使用濃度，以1. OX代表； 2.常規(guī)使用濃度稀釋5倍，以5. OX代表；3.常規(guī)使用濃度稀釋10倍，以IOX代表。以懸滴 法鏡檢計(jì)數(shù)檢測(cè)孢子的萌發(fā)率，以不加除草劑的溶液作為對(duì)照。萌發(fā)率方面比較孢子與農(nóng)藥的相容性。在常規(guī)使用濃度稀釋10倍時(shí)，均超過(guò) 90%。在常規(guī)使用濃度稀釋5倍時(shí)，高效氟吡甲禾靈、精喹禾靈、阿特拉津、乙草胺、異丙 隆、草甘膦、氯磺隆、異丙隆、甲磺隆、氟吡磺隆、氟樂(lè)靈溶液中的孢子萌發(fā)率低，其余均大于 50%，且相互間沒(méi)有顯著差異。孢子萌發(fā)率的試驗(yàn)結(jié)果表明馬唐生防菌株QZ-2000與磺草 酮、氟吡磺隆、煙嘧磺隆、二甲戊樂(lè)靈、芐嘧磺隆、乙氧氟草醚、丁噁等化學(xué)除草劑相容性較 好，可以將其復(fù)配使用。
表1不同濃度化學(xué)除草劑中孢子的萌發(fā)率
‘
處理_LOX_5jOX_10.0X_CK
磺草酮89.71±1.80ABab 95.48±0.57Aa95.72士 0.28Aa
氟吡磺隆 88.10±1.16ABabc 94.37±1.48Aab94.32±1.20Aa
煙嘧磺隆80.14±3.71Bc95.24±1.66Aa95.10 士 3.33Aa
94.51 士 2.04Aa
精喹禾靈34.75士 1.26Cd86.93±1.88Bc91.67±2.62Aa 試驗(yàn)例2 人工種植玉米和馬唐，將菌株QZ-2000的孢子與化學(xué)除草劑復(fù)配，孢子濃度為 3X IO5個(gè)/ml，在馬唐2. 5-3. 5葉期施藥(此時(shí)一般玉米已達(dá)4葉期以上)，施藥時(shí)間均在 下午15:00以后。施藥時(shí)的氣候條件日均氣溫20-26°C，日平均相對(duì)濕度60士25%。試驗(yàn)結(jié)果表明，低劑量的玉農(nóng)樂(lè)(通用名煙嘧磺隆)與孢子復(fù)配，可以達(dá)到與普 通化學(xué)除草劑相似的除草效果(表2)。當(dāng)孢子分別與1/10、1/5玉農(nóng)樂(lè)復(fù)配時(shí)，對(duì)馬唐的 防效增加顯著，施藥4周后的鮮重防效分別為62. 3%和82. 2%，同時(shí)，兩種處理之間差異 達(dá)到顯著標(biāo)準(zhǔn)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在田間條件下，低劑量玉農(nóng)樂(lè)與孢子復(fù)配可以大大提高 QZ-2000菌劑對(duì)雜草的防除效果。
表2各處理對(duì)馬唐的2周、4周后的鮮重防效和株防效調(diào)查結(jié)果
14 試驗(yàn)例3 選用不同的孢子濃度和化學(xué)除草劑濃度處理馬唐幼苗，在馬唐3葉期施藥，不保 濕。處理7天、14天后的防效見(jiàn)表3。試驗(yàn)結(jié)果表明，不同孢子濃度對(duì)除草效果有顯著影響，隨著孢子濃度增加，除草效 果增強(qiáng)。當(dāng)孢子濃度達(dá)到5g/L時(shí)，孢子與1/10化學(xué)除草劑復(fù)配時(shí)得馬唐株防效達(dá)到80% 以上。表3不同濃度的孢子與化學(xué)除草劑復(fù)配對(duì)馬唐的致病性 試驗(yàn)例4 選用彎孢霉屬菌株QZ-2000的孢子濃度3g/L，不同的化學(xué)除草劑濃度都為常規(guī)用 量的1/10，在馬唐3葉期施藥，不保濕。處理14天后的病情指數(shù)和鮮重抑制率見(jiàn)表4。試驗(yàn)結(jié)果表明，孢子與化學(xué)除草劑復(fù)配比單用孢子或單用化學(xué)除草劑的效果好， 即兩者復(fù)配起到增效作用。表4孢子與不同化學(xué)除草劑復(fù)配防除馬唐的病情指數(shù)和鮮重抑制率比較 試驗(yàn)例5 選用彎孢霉屬菌株QZ-2000的孢子濃度1 X IO5個(gè)/ml，不同的化學(xué)除草劑濃度都 為常規(guī)用量的1/10，孢子和除草劑復(fù)配。采取4葉期馬唐同一位置(第三葉)大小一致的葉片，先用75%的酒精表面消毒， 再用無(wú)菌水沖洗數(shù)次后剪成長(zhǎng)約5cm的片斷，每處理取6片葉在IOml孢子懸浮液中輕搖浸 漬30秒鐘，拿出將葉片平有濕潤(rùn)濾紙的培養(yǎng)皿中(保持濾紙濕潤(rùn))，至于25V的光照培養(yǎng)箱中(12小時(shí)黑暗，12小時(shí)光照)2天，拿出調(diào)查馬唐離體葉片的發(fā)病情況。所測(cè)試的作物田常用化學(xué)除草劑對(duì)畫(huà)眉草彎孢霉菌株QZ-2000的分生孢子對(duì)馬 唐致病性的影響見(jiàn)表4-3。菌株QZ-2000的致病性因化學(xué)除草劑的種類(lèi)及其濃度而呈現(xiàn)差 異。部分化學(xué)除草劑與孢子復(fù)配對(duì)馬唐離體葉片的致病性并不隨著除草劑濃度的增加而升 高，可能是由于除草劑對(duì)孢子有傷害，濃度越高，傷害越大。煙嘧磺隆、二甲戊樂(lè)靈、芐嘧磺 隆、乙氧氟草醚、丁草胺·噁草酮、草甘膦與孢子復(fù)配對(duì)馬唐的致病性較高，且隨除草劑濃度 增加而提高，可初步確定為與QZ-2000復(fù)配的候選化學(xué)除草劑。表5不同化學(xué)除草劑及濃度對(duì)孢子致病性的影響(2d)
權(quán)利要求
一種除草復(fù)配劑，其特征在于該復(fù)配劑主要由一種彎孢霉屬真菌菌株QZ-2000的分生孢子和化學(xué)除草劑組成，所述分生孢子濃度為1-10g/L，化學(xué)除草劑的濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的除草復(fù)配劑，其特征在于化學(xué)除草劑可選自下列的脲類(lèi)除 草劑異丙隆、綠麥??；或下列二苯醚類(lèi)除草劑乙氧氟草醚；或下列磺酰脲類(lèi)除草劑煙嘧 磺隆、氟吡磺隆、甲磺隆、氯磺隆、吡嘧磺隆、芐嘧磺隆、甲嘧磺隆、氯嘧磺?。换蛳铝腥?lèi) 除草劑磺草酮；或下列硫代氨基甲酸酯類(lèi)除草劑禾草敵、炔草酯、殺草丹；或下列三氮苯 酮類(lèi)除草劑嗪草酮；或下列芳氧基苯氧基丙酸類(lèi)除草劑精惡唑禾草靈、吡氟禾草靈、精 喹禾靈、高效氟吡甲禾靈、氰氟草酯；或下列環(huán)乙烯酮類(lèi)除草劑稀禾啶；或下列氯乙酰胺 類(lèi)除草劑乙草胺、丙草胺；或下列二硝基苯類(lèi)除草劑地樂(lè)胺、二甲戊樂(lè)靈、氟樂(lè)靈；或下 列三唑并嘧啶磺酰胺類(lèi)除草劑五氟磺草胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的除草復(fù)配劑，其特征在于化學(xué)除草劑可選自下列咪唑啉酮 類(lèi)除草劑咪草咽；或下列有機(jī)雜環(huán)類(lèi)除草劑野燕枯；或下列三嗪類(lèi)除草劑阿特拉津； 或下列喹啉羧酸類(lèi)除草劑二氯喹啉酸；或下列嘧啶水楊酸類(lèi)除草劑雙草醚、嘧硫草醚； 所述化學(xué)除草劑的濃度為常規(guī)用量的1/10-1/3。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的除草復(fù)配劑，其特征在于化學(xué)除草劑可選自下列的復(fù)配除 草劑丁草胺 噁草酮，濃度為常規(guī)用量的1/10-1/5，所述分生孢子的濃度為5-10g/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一所述的除草復(fù)配劑，其特征在于所述復(fù)配劑中還包括 吐溫、植物油、36-40、￡-1310、6￥-104、6丫-冊(cè)3中的一種或兩種以上。
6.一種除草復(fù)配劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)一種彎孢霉屬真菌菌株QZ-2000的分生孢子培養(yǎng)將QZ-2000于培養(yǎng)基中培養(yǎng)5-8 天，該培養(yǎng)基中含有馬鈴薯、葡萄糖和瓊脂；取菌落小塊轉(zhuǎn)接于麥麩_鋸屑或麥麩固體培養(yǎng) 基中培養(yǎng)5-9天，將菌切成小塊平鋪于平地容器內(nèi)，厚度0. 5-1. 5cm，置于黑光燈下連續(xù)照 射48-72h，風(fēng)干粉碎，過(guò)篩后即可得孢子粉；或?qū)⒕湫K接種于玉米粉_豆粉_蔗糖液體 培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)5-7天，濾去培養(yǎng)基殘液后，無(wú)菌水沖洗，得到菌絲體，粉碎后即獲得菌 絲體片段懸浮液，于培養(yǎng)皿中燈照36-48h，即得孢子；(2)配置化學(xué)除草劑母液制備常規(guī)用量1/20-1/3的化學(xué)除草劑水溶液；(3)將步驟(1)中制得的孢子與步驟(2)中配置的化學(xué)除草劑母液混合，其中孢子的濃 度為 l-10g/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的除草復(fù)配劑的制備方法，其特征在于步驟(2)中的化學(xué)除 草劑可選自下列的脲類(lèi)除草劑異丙隆、綠麥?。换蛳铝卸矫杨?lèi)除草劑乙氧氟草醚；或 下列磺酰脲類(lèi)除草劑煙嘧磺隆、氟吡磺隆、甲磺隆、氯磺隆、吡嘧磺隆、芐嘧磺隆、甲嘧磺 隆、氯嘧磺?。换蛳铝腥?lèi)除草劑磺草酮；或下列硫代氨基甲酸酯類(lèi)除草劑禾草敵、炔 草酯、殺草丹；或下列三氮苯酮類(lèi)除草劑嗪草酮；或下列芳氧基苯氧基丙酸類(lèi)除草劑精 惡唑禾草靈、吡氟禾草靈、精喹禾靈、高效氟吡甲禾靈、氰氟草酯；或下列環(huán)乙烯酮類(lèi)除草 劑稀禾啶；或下列氯乙酰胺類(lèi)除草劑乙草胺、丙草胺；或下列二硝基苯類(lèi)除草劑地樂(lè) 胺、二甲戊樂(lè)靈、氟樂(lè)靈；或下列三唑并嘧啶磺酰胺類(lèi)除草劑五氟磺草胺。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的除草復(fù)配劑的制備方法，其特征在于步驟(2)中的化學(xué)除 草劑可選自下列咪唑啉酮類(lèi)除草劑咪草咽；或下列有機(jī)雜環(huán)類(lèi)除草劑野燕枯；或下列三嗪類(lèi)除草劑阿特拉津；或下列喹啉羧酸類(lèi)除草劑二氯喹啉酸；或下列嘧啶水楊酸類(lèi)除草 劑雙草醚、嘧硫草醚；所述化學(xué)除草劑的濃度為常規(guī)用量的1/10-1/3。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的除草復(fù)配劑的制備方法，其特征在于步驟(2)中的化學(xué)除 草劑可選自下列的復(fù)配除草劑丁草胺 噁草酮，濃度為常規(guī)用量的1/10-1/5 ；步驟(3)中 的分生孢子濃度為5-10g/L。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的的除草復(fù)配劑的制備方法，其特征在于步驟(3)混合時(shí)， 還可加入吐溫、植物油、SG-40、E-1310、GY-W04、GY-NDS中的一種或兩種以上。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種除草復(fù)配劑及其制備方法。該除草復(fù)配劑主要由一種彎孢霉屬真菌菌株QZ-2000的分生孢子和化學(xué)除草劑組成，所述分生孢子濃度為1-10g/L，化學(xué)除草劑的濃度為常規(guī)用量的1/20-1/3。本發(fā)明采用分生孢子與化學(xué)除草劑復(fù)配，一方面減少了孢子的用量，降低了使用生物防治成本，而且與單用孢子比，復(fù)配中化學(xué)除草劑起到了增效作用；另一方面降低了化學(xué)除草劑的污染。
文檔編號(hào)A01N47/36GK101856036SQ20101019984
公開(kāi)日2010年10月13日 申請(qǐng)日期2010年6月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月13日
發(fā)明者強(qiáng)勝, 徐春鳳, 朱云枝, 陸艷娜, 陳世國(guó), 高同軍 申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)