專利名稱：富含β-胡蘿卜素海膽的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種富β -胡蘿卜素海膽的培育方法。
背景技術(shù)：
海膽的食用部分主要是生殖腺，提升生殖腺產(chǎn)量和品質(zhì)是海膽育種的重要研究方向。胡蘿卜素在海膽生殖腺中的積累決定了生殖腺的顏色表現(xiàn)，另外，胡蘿卜素還參與海膽生殖、促進(jìn)卵的發(fā)育成熟以及提高幼體的成活率，因此，海膽性腺中胡蘿卜素含量既是影響海膽性腺的重要品質(zhì)又對其生殖性狀起重要作用。海膽可以吸收利用大型褐藻和底棲硅藻中的胡蘿卜素，因此，通過改善營養(yǎng)條件可提升胡蘿卜素含量，若能結(jié)合遺傳育種的方法，則能獲得更穩(wěn)定的富含胡蘿卜素的海膽品系。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種易控制、好操作、能穩(wěn)定提高海膽生殖腺胡蘿卜素含量的海膽培育方法。本發(fā)明的富β -胡蘿卜素海膽的培育方法，操作步驟如下a、從各種地理群體選擇種海膽至育種場地，從親膽所在的生境水溫逐步調(diào)整至適宜溫度，所述適宜溫度為15°C 23°C，調(diào)溫幅度彡2. 0°C /天，靜水培育，每日吸底一次，換水1/2 2/3，選擇海帶和煮熟的紫貽貝肉作為投喂餌料，日投餌1次，培育至性成熟；b、利用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設(shè)計，以雌雄比2 1的比例建立至少100個海膽家系；C、將家系群體置于最強為50001x的照度條件下進(jìn)行養(yǎng)殖，自然光周期，以海帶和裙帶菜作為餌料，并保持每個家系海膽數(shù)量至少100個；d、養(yǎng)殖家系群體至繁殖季節(jié)，從至少20個家系中隨機(jī)挑選海膽，每家系中挑選30 個，測量每個海膽的殼高(TH)、殼徑(TD)、活體重(BW)和性腺β-胡蘿卜素含量((β-c) C)；e、評估β -胡蘿卜素含量的選育潛力計算β -胡蘿卜素含量的變異系數(shù)，以此評價其表型變異程度；對β -胡蘿卜素含量進(jìn)行方差分析，判斷家系等因素影響的顯著性；估計胡蘿卜素含量的遺傳力；選擇胡蘿卜素含量具有至少5%的表型變異、方差分析家系因素的P值小于0. 05、具有至少0. 1的遺傳力的海膽家系群體進(jìn)行培育；f、計算殼高對β-胡蘿卜素含量的通徑系數(shù)1 ，計算殼徑對β-胡蘿卜素含量的通徑系數(shù)bD，計算活體重對β-胡蘿卜素含量的通徑系數(shù)bw;計算海膽殼高的遺傳力h2H，計算殼徑的遺傳力h2D，計算活體重的遺傳力h2w ；g、在b步驟中的每個家系里均選出至少30個海膽，測量其殼高IV殼徑Pd、活體重 ρ .
rW ’h、按f和g步驟所得的數(shù)值計算每個海膽的β-胡蘿卜素含量的綜合選擇指數(shù)I， 按如下公式計算
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I = bHPHhH2+bDPDhD2+bffPffhff2i、按I值計算每個家系的平均綜合選擇指數(shù)，上選50%的家系；再從被選家系中上選綜合選擇指數(shù)高的海膽個體且留種率小于或等于2%，按雌雄比為2 1的比例，在避免近親交配的情況下，再次建立至少100個海膽家系；j、循環(huán)b i步驟至少4次；在按上述步驟育成后推廣的養(yǎng)殖群體內(nèi)，在上市季節(jié)前至少一個月開始，投喂海帶、胡蘿卜和添加了螺旋藻粉的配合飼料。本發(fā)明的富胡蘿卜素海膽的培育方法，其中所述的e步驟中分別計算殼高、殼徑、活體重對β-胡蘿卜素含量間的遺傳相關(guān)，選育具有正的遺傳相關(guān)且它們與胡蘿卜素含量的遺傳相關(guān)較大。本發(fā)明的富胡蘿卜素海膽的培育方法，操作方便，控制容易，明顯增加了海膽性腺內(nèi)胡蘿卜素的含量，提高了海膽的品質(zhì)。
具體實施例方式操作步驟如下a、從不同地理群體選擇種海膽，要求無畸形、棘刺完整堅硬、管足活力強，蝦夷馬糞海膽要求殼徑> 45mm，濕重> 65g、光棘球海膽要求殼徑> 65mm，濕重> 100g、馬糞海膽要求殼徑> 30mm，濕重> 35g，大規(guī)格的海膽產(chǎn)精卵量大且受精孵化率高。對種海膽進(jìn)行暫養(yǎng)，其條件要求從親膽所在的生境水溫逐步調(diào)整至適宜溫度，所述適宜溫度為15°C 23°C，其中蝦夷馬糞海膽為18°C 20°C，光棘球海膽為20 23°C，馬糞海膽為15 18°C， 調(diào)溫幅度< 2. 0°C /天，升溫過快容易造成種膽死亡；靜水培育，每日吸底一次，換水1/2 2/3，新鮮海水要與養(yǎng)殖用水溫度一致，這種換水方式能減少溫度刺激和干露刺激，防止種膽提前產(chǎn)卵；投喂海帶和煮熟的紫貽貝肉，日投餌1次，貽貝價格便宜，煮熟的紫貽貝肉能提供海膽性腺發(fā)育所需的蛋白、脂肪和類胡蘿卜素等營養(yǎng)，培育至性成熟。b、利用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設(shè)計，以雌雄比2 1的比例建立至少100個海膽家系。C、將家系群體置于最強為50001χ的照度條件下進(jìn)行養(yǎng)殖，自然光周期，底棲硅藻能在這種條件下快速增殖生長，從而保證海膽對底棲硅藻的需求，投喂海帶和裙帶菜，海帶和裙帶菜等大型褐藻是海膽的主要天然餌料，是海膽性腺中的胡蘿卜素主要來源，并保持每個家系海膽數(shù)量至少100個。d、養(yǎng)殖家系群體至繁殖季節(jié)，從至少20個家系中隨機(jī)挑選海膽，每家系中挑選至少30個，測量每個海膽的殼高(TH)、殼徑(TD)、活體重(BW)和性腺β-胡蘿卜素含量 ((β -c) C)。e、評估β -胡蘿卜素含量的選育潛力計算β -胡蘿卜素含量的變異系數(shù)，以此評價其表型變異程度；對β -胡蘿卜素含量進(jìn)行方差分析，判斷家系等因素影響的顯著性；估計胡蘿卜素含量的遺傳力；選擇胡蘿卜素含量具有至少5%的表型變異、方差分析家系因素的P值小于0. 05、具有至少0. 1的遺傳力的海膽家系群體進(jìn)行培育。最好分別計算殼高、殼徑、活體重對β -胡蘿卜素含量間的遺傳相關(guān)，選育具有正的遺傳相關(guān)且它們與胡蘿卜素含量的遺傳相關(guān)較大(蝦夷馬糞海膽前三者與胡蘿
4卜素含量的遺傳相關(guān)為0.4 0. 5)，則將他們作為間接選擇β-胡蘿卜素含量的輔助性狀。f、計算殼高對β-胡蘿卜素含量的通徑系數(shù)1 ，計算殼徑對胡蘿卜素含量的通徑系數(shù)bD，計算活體重對β-胡蘿卜素含量的通徑系數(shù)bw。計算海膽殼高的遺傳力h2H，計算殼徑的遺傳力h2D，計算活體重的遺傳力h2w。g、在b步驟中的每個家系里均選出至少30個海膽，測量其殼高IV殼徑Pd、活體重 ρ
rW0h、按f和g步驟所得的數(shù)值計算每個海膽的β-胡蘿卜素含量的綜合選擇指數(shù)I， 按如下公式計算I = bHPHhH2+bDPDhD2+bffPffhff2i、按I值計算每個家系的平均綜合選擇指數(shù)，上選50%的家系；再從被選家系中上選綜合選擇指數(shù)高的海膽個體且留種率小于或等于2%，按雌雄比為2 1的比例，在避免近親交配的情況下，再次建立至少100個海膽家系。這種大規(guī)模的家系數(shù)量主要是為了有效控制多代選育的近交系數(shù)。j、循環(huán)b i步驟至少4次。在按上述步驟育成后推廣的養(yǎng)殖群體內(nèi)，在上市季節(jié)前至少一個月開始，投喂海帶、胡蘿卜和添加了螺旋藻粉的配合飼料。胡蘿卜和添加了螺旋藻粉的配合飼料也可增加海膽性腺內(nèi)胡蘿卜素含量。
權(quán)利要求
1. 一種富含β-胡蘿卜素海膽的培育方法，按如下步驟操作a、從各種地理群體選擇種海膽至育種場地，從親膽所在的生境水溫逐步調(diào)整至適宜溫度，所述適宜溫度為15°C 23°C，調(diào)溫幅度彡2. O0C/天，靜水培育，每日吸底一次，換水 1/2 2/3，選擇海帶和煮熟的紫貽貝肉作為投喂餌料，日投餌1次，培育至性成熟；b、利用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設(shè)計，以雌雄比2 1的比例建立至少100個海膽家系；c、將家系群體置于最強為50001x的照度條件下進(jìn)行養(yǎng)殖，自然光周期，以海帶和裙帶菜作為餌料，并保持每個家系海膽數(shù)量至少100個；d、養(yǎng)殖家系群體至繁殖季節(jié)，從至少20個家系中隨機(jī)挑選海膽，每家系中挑選30個， 測量每個海膽的殼高(TH)、殼徑(TD)、活體重(BW)和性腺β-胡蘿卜素含量((i3-c)C)；e、評估胡蘿卜素含量的選育潛力計算胡蘿卜素含量的變異系數(shù)，以此評價其表型變異程度；對β -胡蘿卜素含量進(jìn)行方差分析，判斷家系等因素影響的顯著性；估計 β-胡蘿卜素含量的遺傳力；選擇胡蘿卜素含量具有至少5%的表型變異、方差分析家系因素的P值小于0. 05、具有至少0. 1的遺傳力的海膽家系群體進(jìn)行培育；f、計算殼高對胡蘿卜素含量的通徑系數(shù)1 ，計算殼徑對胡蘿卜素含量的通徑系數(shù)bD，計算活體重對β-胡蘿卜素含量的通徑系數(shù)bw;計算海膽殼高的遺傳力h2H，計算殼徑的遺傳力h2D，計算活體重的遺傳力h2w ；g、在b步驟中的每個家系里均選出至少30個海膽，測量其殼高PH、殼徑PD、活體重Pw；h、按f和g步驟所得的數(shù)值計算每個海膽的胡蘿卜素含量的綜合選擇指數(shù)I，按如下公式計算I = bHPHhH2+bDPDhD2+bffPffhff2i、按I值計算每個家系的平均綜合選擇指數(shù)，上選50%的家系；再從被選家系中上選綜合選擇指數(shù)高的海膽個體且留種率小于或等于2%，按雌雄比為2 1的比例，在避免近親交配的情況下，再次建立至少100個海膽家系；j、循環(huán)b i步驟至少4次；在按上述步驟育成后推廣的養(yǎng)殖群體內(nèi)，在上市季節(jié)前至少一個月開始，投喂海帶、胡蘿卜和添加了螺旋藻粉的配合飼料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富含胡蘿卜素海膽的培育方法，其特征在于所述的e步驟中分別計算殼高、殼徑、活體重對胡蘿卜素含量間的遺傳相關(guān)，選育具有正的遺傳相關(guān)且它們與胡蘿卜素含量的遺傳相關(guān)較大。
全文摘要
富含β-胡蘿卜素海膽的培育方法從各種地理群體選擇種海膽，靜水培育至性成熟；用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設(shè)計，以雌雄比2∶1的比例建立海膽家系；最高5000lx的照度條件下自然光周期養(yǎng)殖；養(yǎng)殖至繁殖季節(jié)，隨機(jī)挑選海膽測量殼高、徑、活體重和性腺β-胡蘿卜素含量；評估β-胡蘿卜素含量的選育潛力選擇β-胡蘿卜素含量具有至少5％的表型變異、方差分析的P值小于0.05、具有至少0.1的遺傳力的海膽進(jìn)行培育；計算海膽的β-胡蘿卜素含量的綜合選擇指數(shù)I；選平均綜合選擇指數(shù)高的海膽再次建立至少100個海膽家系；循環(huán)上述步驟至少4次；投喂配合飼料。本方法好操作，易控制，海膽性腺內(nèi)β-胡蘿卜素含量高。
文檔編號A01K61/00GK102283140SQ20101020077
公開日2011年12月21日 申請日期2010年6月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月17日
發(fā)明者丁君, 常亞青, 張偉杰 申請人:大連水產(chǎn)學(xué)院