專(zhuān)利名稱(chēng)：5-氨基乙酰丙酸鹽、其制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及5_氨基乙酰丙酸鹽，其可用于微生物、發(fā)酵、動(dòng)物、藥物、植物等領(lǐng)域 中；制備該鹽的方法；含有該鹽的藥物組合物；以及含有該鹽的植物活化劑組合物。
背景技術(shù)：
已知的是，5-氨基乙酰丙酸在微生物發(fā)酵領(lǐng)域中，可用于VB12和血紅素酶的制備、 微生物培養(yǎng)、嚇啉的制備等；在動(dòng)物治療領(lǐng)域中，可用于感染性疾病的治療(參見(jiàn)非專(zhuān)利文 獻(xiàn)1)、殺菌、對(duì)由嗜血桿菌引發(fā)的疾病的診斷、作為衍生物的原材料、脫毛、風(fēng)濕病治療(參 見(jiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)2)、癌癥治療(參見(jiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)3)、血栓治療(參見(jiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)4)、癌癥手術(shù) 中的診斷(參見(jiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)5)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、UV切除、血紅素代謝研究、毛發(fā)護(hù)理、對(duì)由重 金屬中毒引發(fā)的卟啉癥的診斷、貧血癥的預(yù)防等；在植物領(lǐng)域中，可用作農(nóng)藥等。另一方面，在5-氨基乙酰丙酸中，只有其鹽酸鹽的制備方法是已知的，人們已經(jīng) 報(bào)道了使用馬尿酸(參見(jiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)1)、琥珀酸單酯酰氯(參見(jiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)2)、糠胺(參見(jiàn)專(zhuān) 利文獻(xiàn)3)、羥甲基糠醛(參見(jiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)4)、氧代戊酸甲酯(參見(jiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)5)、或琥珀酸酐 (參見(jiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)6)作為原料的方法。然而，由于5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽含有鹽酸，所以必須考慮在生產(chǎn)過(guò)程以及配制 和分裝過(guò)程中，由蒸發(fā)的氯化氫對(duì)裝置造成的腐蝕以及引起的刺激，因此最好是采取對(duì)策 來(lái)防止出現(xiàn)上述這些情況。此外，在將5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽口服給藥或應(yīng)用于人的皮膚時(shí)，舌頭或皮膚會(huì) 感受到灼熱的刺激。因此，作為在醫(yī)藥領(lǐng)域中使用的5-氨基乙酰丙酸，人們關(guān)注的是刺激 性比5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽更小的5-氨基乙酰丙酸鹽。另外，由于5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽具有在130_156°C時(shí)部分分解、并且在156°C時(shí) 完全分解的性質(zhì)，所以存在著難以承受高溫加熱滅菌處理的問(wèn)題。放射線照射殺菌方法已知是一種解決該問(wèn)題的方法(參見(jiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)7)，但該方法 需要放射線照射裝置。因此，為了通過(guò)常規(guī)的、便利的加熱滅菌法來(lái)殺菌，就有必要改善5-氨基乙酰丙 酸的耐熱性。另外，盡管5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽被用于植物領(lǐng)域(參見(jiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)8)中，但當(dāng)其 與植物常用的殺菌劑成分例如硝酸銀等混合使用時(shí)，在某些情況下，由5-氨基乙酰丙酸鹽 酸鹽與硝酸銀反應(yīng)而產(chǎn)生氯化銀沉淀物，由于存在著噴霧器的噴嘴被堵塞而不能?chē)娝幍目?能性，所以在操作上要十分小心。此外，在將5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液直接施加到 水果上的情況中，當(dāng)存在氯離子時(shí)，水果的顏色有時(shí)變得不夠鮮艷。
另外，盡管人們已經(jīng)提出了含有5-氨基乙酰丙酸離子和硝酸根離子的水溶液，但 目前還沒(méi)有分離出5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽(參見(jiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)6)。專(zhuān)利文獻(xiàn)1 JP-A-48-92328專(zhuān)利文獻(xiàn)2 JP-A-62-111954專(zhuān)利文獻(xiàn)3 JP-A-2-76841專(zhuān)利文獻(xiàn)4 JP-A-6-172281專(zhuān)利文獻(xiàn)5 JP-A-7-188133專(zhuān)利文獻(xiàn)6 JP-A-9-316041專(zhuān)利文獻(xiàn)7 JP-T-2001-514243專(zhuān)利文獻(xiàn)8 JP-A-4-338305非專(zhuān)利文獻(xiàn)1 =Peter W.等人，J. Am. Acad. Dermatol. ,31,678-680 (1994)非專(zhuān)利文獻(xiàn)2 :Kenneth Τ.，美國(guó)專(zhuān)利 5，368，841 (1994)非專(zhuān)利文獻(xiàn)3 =Hillemanns P.等人，Int. J. Cancer, 85,649-653 (2000)非專(zhuān)利文獻(xiàn)4 山田一郎等人，日本形成外科學(xué)會(huì)要旨集(1988)# # ^lJ ^； K 5 =Kamasaki N.等人，Journal of Japan Society for LaserMedicine,22,255-262(2001)非專(zhuān)禾O(píng)文獻(xiàn) 6 :Baxter C. S.等人，Toxicology And AppliedPharmacology,￡7, 477-482(1979)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的問(wèn)題在這種情況下，本發(fā)明提供一種新型的5-氨基乙酰丙酸鹽，其具有低刺激性或 者能夠承受高溫加熱滅菌處理；制備該鹽的方法；使用含有該鹽的醫(yī)藥組合物；以及含有 該鹽的植物活化劑組合物。解決問(wèn)題的方法通過(guò)考慮上述實(shí)際情況，本發(fā)明人進(jìn)行了深入的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了一種滿(mǎn)足上述 要求的5-氨基乙酰丙酸鹽，該鹽可通過(guò)如下方法得到洗脫被吸附在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上的 5-氨基乙酰丙酸，并將洗脫液與磷酸、硝酸或磺酸混合。即，本發(fā)明涉及下述(1)至(23)(1) 一種屬于氨基乙酰丙酸鹽類(lèi)的5-氨基乙酰丙酸鹽，其中該鹽是選自磷酸鹽、 硝酸鹽和磺酸鹽中的至少一種。(2)根據(jù)上述⑴所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，該鹽是由下式⑴表示的氨基乙酰 丙酸磷酸鹽H0C0CH2CH2C0CH2NH2 · HOP(O) (OR1) n(OH) 2_n (I)其中，R1表示氫原子、具有1-18個(gè)碳原子的烷基、具有2-18個(gè)碳原子的鏈烯基、具 有7-26個(gè)碳原子的芳烷基或苯基；η為0-2的整數(shù)；且其中當(dāng)η為2時(shí)，兩個(gè)R1是相同的 或不同的。(3)根據(jù)上述(2)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，其中R1為氫原子、甲基、乙基、正丁 基、十六烷基、2-乙基己基、油烯基、芐基或苯基。
(4)根據(jù)上述(2)或(3)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，該鹽是水溶液形式的。(5)根據(jù)上述(2)或(3)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，該鹽是固體形式的。(6)根據(jù)上述(1)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，該鹽是5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽。(7)根據(jù)上述(6)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，該鹽是固體。(8)根據(jù)上述(1)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，該鹽是由下式(II)表示的5-氨基 乙酰丙酸磺酸鹽H0C0CH2CH2C0CH2NH2 · HOSO2R2 (II)其中，R2表示被低級(jí)烷基取代的苯基。(9)根據(jù)上述⑶所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，其中被取代的苯基是4-甲基苯基、 2，4_ 二甲基苯基或2，5_ 二甲基苯基。(10)根據(jù)上述⑶或(9)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，該鹽是水溶液形式的。(11)根據(jù)上述⑶或(9)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽，該鹽是固體形式的。(12) 一種制備根據(jù)上述(2)至(5)中的任意一項(xiàng)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽的方 法，該方法包括洗脫被吸附在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上的5-氨基乙酰丙酸，并將洗脫液與磷酸類(lèi) 物質(zhì)混合。(13)根據(jù)上述(12)所述的方法，其中所述的5-氨基乙酰丙酸是用氨水洗脫的。(14) 一種制備根據(jù)上述(6)或(7)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽的方法，該方法包括 洗脫被吸附在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上的5-氨基乙酰丙酸，并將洗脫液與硝酸混合。(15)根據(jù)上述(14)所述的方法，其中所述的5-氨基乙酰丙酸是用氨水洗脫的。(16) 一種制備根據(jù)上述⑶或(9)的5-氨基乙酰丙酸磺酸鹽的方法，該方法包括 洗脫被吸附在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上的5-氨基乙酰丙酸，并將洗脫液與磺酸類(lèi)物質(zhì)混合。(17)根據(jù)上述(16)所述的方法，其中所述的5-氨基乙酰丙酸是用氨水洗脫的。(18) 一種用于光動(dòng)力治療或光動(dòng)力診斷的組合物，該組合物含有根據(jù)上述(1)至 (11)中的任意一項(xiàng)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽。(19) 一種包含根據(jù)上述(1)至(11)中的任意一項(xiàng)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽的植 物活化劑組合物。(20)根據(jù)上述(1)至(11)中的任意一項(xiàng)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽在制備光動(dòng)力 治療劑或光動(dòng)力診斷試劑中的應(yīng)用。(21)根據(jù)上述(1)至(11)中的任意一項(xiàng)所述的5-氨基乙酰丙酸鹽作為植物活化 劑的應(yīng)用。本發(fā)明的效果本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽是一種易于操作的物質(zhì)，這是因?yàn)樗粫?huì)發(fā)出難聞 的氣味或刺激性的氣味。而且，該鹽對(duì)皮膚和舌頭表現(xiàn)出低刺激性，并且對(duì)皮膚等具有優(yōu) 異的滲透性，因此，含有該鹽的組合物可用作光動(dòng)力治療或光動(dòng)力診斷所用的試劑。而且， 與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽相比而言，所述的5-氨基乙酰丙酸鹽具有高的分解溫度和優(yōu)異 的耐熱性。根據(jù)本發(fā)明的制備方法，可以方便有效地制成本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽。另 外，由于本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽在形成水溶液時(shí)具有低的氯離子濃度，因此在施用于 植物時(shí)幾乎不會(huì)發(fā)生由氯造成的損害。


圖1是示出5-氨基乙酰丙酸鹽水溶液的濃度和pH值之間的關(guān)系的圖。圖2是透析單元的示意圖。圖3是示出5-氨基乙酰丙酸的磷酸鹽和鹽酸鹽的豬皮膚滲透性試驗(yàn)結(jié)果的圖。圖4是示出5-氨基乙酰丙酸的磷酸鹽和鹽酸鹽的洋蔥表皮滲透性試驗(yàn)結(jié)果的圖。實(shí)施本發(fā)明的最佳方式在上述式(I)中，由R1表示的具有1-18個(gè)碳原子的烷基可以是直鏈的、支鏈的 或環(huán)狀的。直鏈或支鏈烷基包括例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁 基、正戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、2-甲基丁基、正己基、異己基、3-甲基戊基、乙基丁基、 正庚基、2-甲基己基、正辛基、異辛基、叔辛基、2-乙基己基、3-甲基庚基、正壬基、異壬基、
1-甲基辛基、乙基庚基、正癸基、1-甲基壬基、正i^一烷基、1，1-二甲基壬基、正十二烷基、 正十三烷基、正十四烷基、正十五烷基、正十六烷基、正十七烷基、正十八烷基等。環(huán)烷基或 含有環(huán)狀基團(tuán)的烷基包括例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、2-環(huán)丙 基乙基、2-環(huán)丁基乙基、2-環(huán)戊基乙基、環(huán)己基甲基、2-環(huán)己基乙基、環(huán)庚基甲基、2-環(huán)辛基 乙基、3-甲基環(huán)己基、4-甲基環(huán)己基、4-乙基環(huán)己基、2-甲基環(huán)辛基、3-(3_甲基環(huán)己基)丙 基、2-(4_甲基環(huán)己基)乙基、2-(4_乙基環(huán)己基)乙基、2-(2_甲基環(huán)辛基)乙基等。作為 上述的具有1-18個(gè)碳原子的烷基，優(yōu)選具有1-16個(gè)碳原子的烷基，特別優(yōu)選甲基、乙基、正 丁基、正十六烷基或2-乙基己基。具有2-18個(gè)碳原子的鏈烯基包括例如乙烯基、烯丙基、異丙烯基、2- 丁烯基、
2-甲基烯丙基、1，1-二甲基烯丙基、3-甲基-2-丁烯基、3-甲基-3- 丁烯基、4-戊烯基、己 烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基、環(huán)丙烯基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚烯基、環(huán)辛烯 基、4-甲基環(huán)己烯基、4-乙基環(huán)己烯基、2-環(huán)戊烯基乙基、環(huán)己烯基甲基、環(huán)庚烯基甲基、 2_環(huán)丁烯基乙基、2-環(huán)辛烯基乙基、3-(4_甲基環(huán)己烯基)丙基、5-(4_乙基環(huán)己烯基)戊 基、油烯基、11-十八烯基(vaccenyl)、9，12-十八二烯基(Iinoleyl)、9，12，15-十八烯基 (Iinolenyl)等，優(yōu)選油烯基。具有7-26個(gè)碳原子的芳烷基優(yōu)選為由具有1-6個(gè)碳原子的烷基和具有6_20個(gè) 碳原子的芳基所構(gòu)成的基團(tuán)。具有1-6個(gè)碳原子的烷基包括例如甲基、乙基、正丙基、異丙 基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)己基等，具有6-20個(gè)碳原 子的芳基包括例如苯基、萘基等。在具有7-26個(gè)碳原子的芳烷基中，優(yōu)選芐基或苯乙基， 特別優(yōu)選芐基。芳烷基中的芳基可以被1-3個(gè)取代基取代，所述取代基例如上述的具有 1-6個(gè)碳原子的烷基；具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧 基、異丁氧基和叔丁氧基；羥基；氨基；硝基；氰基；商素，例如氟、氯、溴和碘；羧基；等等。在式(II)中，取代由R2表示的苯基的低級(jí)烷基是具有1-6個(gè)碳原子的烷基。所 述的低級(jí)烷基可以是直鏈的、支鏈的或環(huán)狀的。直鏈或支鏈烷基包括例如甲基、乙基、正丙 基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、2-甲基丁基、正己基、 異己基、3-甲基戊基、乙基丁基等，優(yōu)選甲基、乙基或正丙基，特別優(yōu)選甲基。含有環(huán)狀鏈的 烷基包括例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、2-環(huán)丙基乙基、2-環(huán)丁基乙基等。對(duì)低級(jí) 烷基的取代位置和取代基的數(shù)量沒(méi)有特別限制，但低級(jí)烷基的數(shù)量?jī)?yōu)選為1-3，更優(yōu)選為1 或2。
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被低級(jí)烷基取代的苯基包括例如被具有1-6個(gè)碳原子的烷基取代的苯基，如 2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2，3_ 二甲基苯基、2，4_ 二甲基苯基、2，5_ 二甲基苯 基、2，6-二甲基苯基、3，4-二甲基苯基、3，5-二甲基苯基、2，4，6-三甲基苯基、3，4，5-三甲 基苯基、2-乙基苯基、叔丁基苯基、戊基苯基、新戊基苯基和己基苯基，特別優(yōu)選4-甲基苯 基、2，4_ 二甲基苯基或2，5-二甲基苯基。本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽可以是固體或溶液。固體是指晶體，但也可以是水合 物。溶液是指該鹽溶解或分散在包括水在內(nèi)的溶劑中的狀態(tài)，溶液的PH值可用pH調(diào)節(jié)劑 等調(diào)節(jié)。此外，可以將包括水在內(nèi)的溶劑中的兩種或多種混合使用。PH調(diào)節(jié)劑包括例如使 用磷酸、硼酸、鄰苯二甲酸、檸檬酸、琥珀酸、Tris、乙酸、乳酸、酒石酸、鄰苯二甲酸、馬來(lái)酸、 及其鹽的緩沖液、或Good’ s緩沖液。優(yōu)選以水溶液作為5-氨基乙酰丙酸鹽的溶液形式。5-氨基乙酰丙酸鹽在水溶液 中的濃度優(yōu)選為0. 01重量ppm至10重量％，更優(yōu)選0. 1重量ppm至5重量％，最優(yōu)選1重 量ppm至1重量％。此外，水溶液的pH優(yōu)選3-7，更優(yōu)選3. 5-7，最優(yōu)選4-7。另外，所述的 水溶液中還可以含有除了本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽以外的鹽，在此情況下，氯離子的濃 度優(yōu)選為50mol%或更低，更優(yōu)選為10mol%或更低，最優(yōu)選為3mol%或更低。就此而論，術(shù) 語(yǔ)“不含氯離子”是指氯離子的濃度基本上為Omol %，S卩，優(yōu)選的是，該濃度等于或小于例如 用離子色譜法進(jìn)行測(cè)量時(shí)的檢測(cè)極限(0. Ippm)。本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽可以通過(guò)如下方法來(lái)制備用含有離子的溶液洗 脫被吸附在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上的5-氨基乙酰丙酸，并將洗脫液與磷酸、硝酸或磺酸混合。 另外，可以通過(guò)將不良溶劑加入到上述5-氨基乙酰丙酸鹽的混合液中使之結(jié)晶，從而獲 得固態(tài)的5-氨基乙酰丙酸鹽。對(duì)被吸附在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上的5-氨基乙酰丙酸沒(méi)有 特別限制，對(duì)它的純度等也沒(méi)有特別限制。即，可以使用根據(jù)專(zhuān)利文獻(xiàn)JP-A-48-92328、 JP-A-62-111954、JP-A-2-76841、JP-A-6-172281、JP-A-7-188133 等、以及 JP-A-11-42083 中公開(kāi)的方法制備的那些、純化前的化學(xué)反應(yīng)溶液和發(fā)酵液、以及市售商品。就此而論，優(yōu) 選使用5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽。所述的陽(yáng)離子交換樹(shù)脂可以是強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，也可以是弱酸性陽(yáng)離子交 換樹(shù)脂。另外，螯合樹(shù)脂也適于使用。其中，優(yōu)選強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。作為強(qiáng)酸性陽(yáng)離 子交換樹(shù)脂的種類(lèi)，優(yōu)選那些與磺酸基鍵合的聚苯乙烯類(lèi)樹(shù)脂。通過(guò)如下方法將5-氨基乙酰丙酸吸附在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上將5-氨基乙酰丙酸 溶解在合適的溶劑中而制成溶液，使該溶液從陽(yáng)離子交換樹(shù)脂中流過(guò)。對(duì)所述溶劑沒(méi)有特 別限制，只要其能夠溶解5-氨基乙酰丙酸即可，溶劑的實(shí)例包括水；二甲基亞砜；醇，例如 甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇和異丁醇；酰胺，例如N，N-二甲基甲酰胺和N，N-二甲基乙 酰胺；吡啶；等等。優(yōu)選水、二甲基亞砜、甲醇或乙醇，特別優(yōu)選的是水、甲醇或乙醇。此外， 可以將兩種或多種溶劑混合使用。另外，在使用純化前的化學(xué)反應(yīng)溶液或發(fā)酵液時(shí)，可以除 去反應(yīng)溶劑或者用合適的溶劑進(jìn)行稀釋。就此而論，上述溶劑和純化前的化學(xué)反應(yīng)溶液或 發(fā)酵液的PH都可以使用上述的pH調(diào)節(jié)劑來(lái)調(diào)節(jié)。雖然對(duì)洗提液中所用的含有離子的水溶液沒(méi)有特別限制，但優(yōu)選的是磷酸類(lèi)物 質(zhì)、硝酸、磺酸類(lèi)物質(zhì)、堿金屬或堿土金屬的氫氧化物或碳酸鹽、氨、胺以及含有氨基的化合 物溶解在水中而形成的溶液，更優(yōu)選的是氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鎂、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化銫、氫氧化鋇、碳酸銨、碳酸氫銨、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸鈉鉀、碳酸氫 鉀、氨、甲基胺、二甲基胺、三甲基胺、乙基胺、二乙基胺或三乙基胺溶解在水中而形成的溶 液，特別優(yōu)選的是氨溶解在水中而形成的溶液。這些水溶液可以?xún)煞N或多種結(jié)合使用。氨 水的濃度優(yōu)選為0. OlN至10N，更優(yōu)選為0. IN至3N。作為與5-氨基乙酰丙酸洗脫液混合的磷酸類(lèi)物質(zhì)，可使用由式(III)表示的化合 物HOP(O) (OR1)n(OH)2_n (III)其中R1和η如上所述。該磷酸類(lèi)物質(zhì)包括例如磷酸；磷酸單酯，如磷酸甲酯、磷酸乙酯、磷酸正丁酯、磷 酸2-乙基己酯、磷酸十六烷基酯、磷酸芐酯、磷酸油烯基酯和磷酸苯酯；以及磷酸二酯，如 磷酸二甲酯、磷酸二乙酯、磷酸二正丁酯、磷酸二(2-乙基己基)酯、磷酸二(十六烷基) 酯、磷酸二芐酯、磷酸二油烯基酯和磷酸二苯酯。特別優(yōu)選磷酸甲酯、磷酸乙酯、磷酸油烯基 酯、磷酸苯酯、磷酸二甲酯、磷酸二乙酯、磷酸二正丁酯、磷酸二(2-乙基己基)酯、磷酸二 (十六烷基)酯、磷酸二芐酯、磷酸二油烯基酯或磷酸二苯酯。另外，次磷酸或亞磷酸也適于 使用。磷酸類(lèi)物質(zhì)可以是其水合物或鹽，溶解或分散在適當(dāng)?shù)娜軇┲械哪切┮策m于使 用?；谕ㄟ^(guò)由吸附的5-氨基乙酰丙酸的量所推定的5-氨基乙酰丙酸的洗脫量，磷酸類(lèi)物 質(zhì)的混合量?jī)?yōu)選為1-5000倍摩爾量，更優(yōu)選為1-500倍摩爾量，最優(yōu)選為1-50倍摩爾量。 就此而論，由吸附的5-氨基乙酰丙酸的量所推定的5-氨基乙酰丙酸的洗脫量隨著陽(yáng)離子 交換樹(shù)脂和洗脫液的種類(lèi)、以及洗脫液的流量而改變，但通常為5-氨基乙酰丙酸的吸附量 的 90-100% ο與5-氨基乙酰丙酸洗脫液混合的硝酸可以是其鹽，溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲械哪切?也適于使用。硝酸的混合量與上文所述的磷酸類(lèi)物質(zhì)的混合量相同。與5-氨基乙酰丙酸洗脫液混合的磺酸類(lèi)物質(zhì)包括例如對(duì)甲苯磺酸、2，4_ 二甲基 苯磺酸、2，5-二甲基苯磺酸、3，5-二甲基苯磺酸、2，4，6_三甲基苯磺酸等，特別優(yōu)選對(duì)甲苯 磺酸、2，4_ 二甲基苯磺酸或2，5_ 二甲基苯磺酸。該磺酸類(lèi)物質(zhì)可以是其水合物或鹽，溶解 或分散在適當(dāng)?shù)娜軇┲械哪切┮策m于使用。該磺酸類(lèi)物質(zhì)的混合量與上文所述的磷酸類(lèi)物 質(zhì)的混合量相同。溶劑包括水；二甲基亞砜；醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、正丁醇和異丁醇；酰 胺，例如N，N-二甲基甲酰胺和N，N-二甲基乙酰胺；吡啶等。優(yōu)選水、二甲基亞砜、甲醇或 乙醇，特別優(yōu)選水、甲醇或乙醇。同樣，可將兩種或多種溶劑混合使用。對(duì)上文所述的不良溶劑沒(méi)有特別限制，只要能在其中析出固體即可，所述溶劑的 實(shí)例包括醇，如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、正丁醇和異丁醇；醚，如乙醚、二異丙基醚、二噁 烷、四氫呋喃和二甲氧基乙烷；酯，如乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯和Y _ 丁 內(nèi)酯；酮，如丙酮和甲乙酮；腈，如乙腈和苯甲腈等，優(yōu)選乙酸甲酯、乙酸乙酯、Y-丁內(nèi)酯、 丙酮或乙腈。特別優(yōu)選乙酸甲酯、Y-丁內(nèi)酯、丙酮或乙腈。同樣，可將兩種或多種溶劑混 合使用。用含有離子的水溶液進(jìn)行洗脫的洗脫溫度，以及磷酸類(lèi)物質(zhì)、硝酸或磺酸類(lèi)物質(zhì) 與洗脫液混合的混合溫度都優(yōu)選為_(kāi)20°C至60°C，更優(yōu)選為-10°C至30°C，在這樣的條件下，洗脫液以及磷酸、硝酸或磺酸不會(huì)變成固體?？梢杂蛇@樣的5-氨基乙酰丙酸來(lái)制備本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽，在所述的 5-氨基乙酰丙酸中，氨基是用可水解的保護(hù)基(例如?；?來(lái)保護(hù)的，或者氨基上連接有能 夠形成1，3-二氧代-1，3-二氫異吲哚-2-基這種類(lèi)型的分子骨架的保護(hù)基。另外，也可通 過(guò)不同于本發(fā)明的制備方法來(lái)制備本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽，S卩，使用所需的磷酸、硝 酸或磺酸使2-苯基-4- ( β -烷氧基羰基丙?；?噁唑啉-5-酮發(fā)生水解的方法，或者使不 同于磷酸鹽、硝酸鹽和磺酸鹽的鹽(例如5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽)在溶劑中與所需的磷酸 產(chǎn)生接觸的方法?？墒褂蒙衔淖鳛榱姿崴枋龅氖?III)所表示的化合物，并使用在上文 中作為硝酸、磺酸類(lèi)物質(zhì)和反應(yīng)溶劑描述的那些物質(zhì)。如下文中的實(shí)施例所示，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽相比而言，本發(fā)明的5-氨基乙 酰丙酸鹽不會(huì)發(fā)出難聞的氣味，特別是，5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽對(duì)皮膚和舌頭的刺激性都 小，而且沒(méi)有發(fā)現(xiàn)它具有誘變性。另外，本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽對(duì)動(dòng)物皮膚和植物表 皮都具有優(yōu)異的滲透性。因此，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的情況相似，本發(fā)明的5-氨基乙 酰丙酸鹽(優(yōu)選5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽)可用作對(duì)動(dòng)物(包括人)進(jìn)行光動(dòng)力治療或光 動(dòng)力診斷所用的試劑。作為用于光動(dòng)力治療或光動(dòng)力診斷的試劑，可舉例為用于對(duì)癌癥、感 染性疾病、風(fēng)濕病、血栓、丘疹等進(jìn)行光動(dòng)力治療或診斷的試劑?？梢詫⒈景l(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽以公知的條件用于光動(dòng)力治療或診斷 中，更具體地說(shuō)，可根據(jù)專(zhuān)利文獻(xiàn) JP-T-2001-501970(W098/30242)、JP-T-4-500770 (WO 91/01727)、JP-T-2005-501050 (W02003/011265)、JP-T-2004-506005 (W02002/013788)、 JP-T-2001-518498 (WO 99/17764)、和 JP-T-8-507755 (WO 94/17797)中所公開(kāi)的處方和方 法來(lái)使用。具體地說(shuō)，通過(guò)將有效量的本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽對(duì)動(dòng)物(包括人類(lèi))給 藥，并進(jìn)行光照射，可以對(duì)疾病進(jìn)行光動(dòng)力治療。此外，通過(guò)檢測(cè)病變部位的熒光可以對(duì)疾 病進(jìn)行光動(dòng)力診斷。本發(fā)明的用于光動(dòng)力治療或光動(dòng)力診斷的組合物(其含有本發(fā)明的5-氨基乙酰 丙酸鹽)，可以被制成諸如皮膚外用制劑、注射劑、口服制劑和栓劑之類(lèi)的劑形。在制成這些 劑形時(shí)，可以使用可藥用的載體。作為該載體，可使用水、粘結(jié)劑、崩解劑、增溶劑、潤(rùn)滑劑、 填充劑、填料等。給藥劑量隨著年齡、體重、癥狀、療效、給藥方法、治療時(shí)間等而改變，但通常，給藥 量為成人每人每次每公斤體重IOmg至10g，更優(yōu)選為IOOmg至lg，一天給藥一次或多次。另外，當(dāng)把本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽用于例如植物應(yīng)用中時(shí)，還可以加入 通常使用的肥料組分等。作為肥料組分，可舉例為專(zhuān)利文獻(xiàn)JP-A_4-338305(美國(guó)專(zhuān)利 5，298，482、EP-A-0514776)中公開(kāi)的物質(zhì)。本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽也可用作植物活化劑。在用作植物活化劑時(shí)，可以以 公知的條件使用該鹽，更具體地說(shuō)，可使用專(zhuān)利文獻(xiàn)JP-A-4-338305(美國(guó)專(zhuān)利5，298，482、 EP-A-0514776)中公開(kāi)的方法將該鹽用于植物。更具體地說(shuō)，作為植物活化劑，可舉例為莖葉處理劑、土壤處理劑等。另外，該試劑 可在種植植物或插枝之前被吸收到植物中，或者在水培時(shí)加入到水中。在本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽用作莖葉處理劑時(shí)，該處理劑中含有的5-氨基乙酰丙酸鹽的濃度優(yōu)選為1-1，OOOppm，特別是10-500ppm，并且以每10公畝10-100升、特別 是50-300升的量使用該處理劑。在本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽用作土壤處理劑時(shí)，優(yōu)選以每10公畝1-1，000g、特 別是10-500g的量使用5-氨基乙酰丙酸鹽。在種植前使用本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽作為莖葉處理劑時(shí)，該處理劑中含有 的5-氨基乙酰丙酸鹽的濃度優(yōu)選為1-1，OOOppm，特別是10-500ppm，并且以每10公畝 10-100升、特別是50-300升的量使用該處理劑。就此而論，水培時(shí)也優(yōu)選使用幾乎與此相
等的量。作為被處理的植物，可舉例為谷物、蔬菜、果樹(shù)、花和觀賞植物、樹(shù)木、豆類(lèi)、馬鈴 薯、威爾士洋蔥、牧草等。實(shí)例以下基于實(shí)例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更為詳細(xì)地描述，但是本發(fā)明并不局限于此。實(shí)施例15_氨基乙酰丙酸磷酸鹽的制備將180ml的強(qiáng)酸性離子交換樹(shù)脂(AMBERLITE IR 120B Na，由日本Organo株式會(huì) 社生產(chǎn))裝入柱中。所用的離子交換樹(shù)脂是經(jīng)過(guò)了鹽酸處理而從鈉離子型轉(zhuǎn)化成氫離子 型的離子交換樹(shù)脂。然后，將20.00g(119mmOl)的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽溶解在1000ml 的離子交換水中，并將該溶液過(guò)柱，然后將1000ml的離子交換水過(guò)柱。接著，將IN的氨水 緩慢過(guò)柱，收集到346ml黃色的洗脫液。將收集到的洗脫液加入16ml、85%的磷酸(H3PO4, 238mmol)中，并使用蒸發(fā)器濃縮。向濃縮液中加入400ml的丙酮，并用攪拌器劇烈攪拌，然 后在4°C下靜置16小時(shí)。吸濾回收所析出的固體，并用500ml的丙酮洗滌。將所得固體減 壓干燥12小時(shí)，得到23.04g(101mmOl)的目標(biāo)物質(zhì)。它的物理性能數(shù)據(jù)如下所示。熔點(diǎn)108-109°C1H-Wr(D2CMOOMHz) δ ppm :2· 67(t，2H，CH2), 2. 86(t，2H，CH2), 4. 08(s，2H，CH2)13C-NMR(D20,100MHz) δ ppm 30 (CH2)，37 (CH2)，50 (CH2)，180 (CO)，207 (C00)C5H9NO3 · H3PO4的元素分析數(shù)據(jù)計(jì)算值=C26. 21% ；H 5. 28% ；N 6. 11%實(shí)測(cè)值C25. 6% ;H 5. 2% ;N 6.由離子色譜分析得到的P043_含量計(jì)算值41.45%實(shí)測(cè)值43%離子色譜分析條件分離柱由日本Dionex株式會(huì)社制造的IonPaCAS12A ；洗提 液含有 Na2CO3 和 NaHCO3(Na2CC)3 3. 0mmol/l, NaHCO3 0. 5mmol/l)的水溶液，流速1. 5ml/ 分鐘，進(jìn)樣量25μ 1，柱溫35°C，檢測(cè)器電導(dǎo)檢測(cè)器。實(shí)施例25-氨基乙酰丙酸(磷酸二正丁酯)鹽的制備將180ml的強(qiáng)酸性離子交換樹(shù)脂(AMBERLITE IR 120B Na,由日本Organo株式會(huì) 社生產(chǎn))裝入柱中。所用的離子交換樹(shù)脂是經(jīng)過(guò)了鹽酸處理而從鈉離子型轉(zhuǎn)化成氫離子型 的離子交換樹(shù)脂。然后，將20. 00g(119mmol)的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽溶解在1000ml的離子交換水中，并將該溶液過(guò)柱，然后將IOOOml的離子交換水過(guò)柱。接著，將IN的氨水緩 慢過(guò)柱，收集到321ml黃色的洗脫液。將收集到的洗脫液加入50.00g(238mmol)的磷酸二 正丁酯中，并使用蒸發(fā)器濃縮。向濃縮液中加入400ml的丙酮，并用攪拌器劇烈攪拌，然后 將混合物在_25°C下靜置16小時(shí)。吸濾回收所析出的固體。將所得固體減壓干燥12小時(shí)， 得到14.67g(43mmol)的目標(biāo)物質(zhì)。它的物理性能數(shù)據(jù)如下所示。1H-WR (D20,400MHz) δ ppm :0· 75 (6Η, CH3)，1· 23 (4Η, CH2)，1· 41 (4Η, CH2)，2. 46 (2Η, CH2)，2. 59 (2Η, CH2)，3. 66 (4Η, CH2)，3. 80 (2Η, CH2)13C-NMR (D2O, 100MHz) δ ppm 14 (CH3)，20 (CH2)，29 (CH2)，34. 2 (CH2)，34. 3 (CH2)， 36 (CH2)，67 (CH2O)，176 (COO)，204 (CO)實(shí)施例35-氨基乙酰丙酸磷酸鹽的氣味測(cè)定5個(gè)受試者直接聞實(shí)施例1制備的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽的水溶液(柱洗脫液和 磷酸的混合液)及其固體的氣味，并根據(jù)下述標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)價(jià)它們的氣味。結(jié)果示于表1中。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)0:沒(méi)有氣味。1:有氣味但不難聞。2:難聞的氣味。比較例1除了使用5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液及其固體以外，以與實(shí)施例3相同的方 式來(lái)評(píng)價(jià)氣味。就此而論，5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液是使用5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽 固體、鹽酸和離子交換水制備的，其中，使得5-氨基乙酰丙酸和氯離子的摩爾濃度分別與 實(shí)施例1中的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽水溶液中的5-氨基乙酰丙酸和磷酸根離子的摩爾濃 度相同。結(jié)果示于表1中。表1
實(shí)施例3水溶液00000固體00000
比較例1水溶液22222固體11111實(shí)施例4除了通過(guò)將0. 5g的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽溶解在Iml水中而制成水溶液以外， 以與實(shí)施例3相同的方式來(lái)評(píng)價(jià)氣味。結(jié)果示于表2中。比較例2除了通過(guò)將0. 5g的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽溶解在Iml水中而制成水溶液以外， 以與實(shí)施例3相同的方式來(lái)評(píng)價(jià)氣味。結(jié)果示于表2中。表2
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基于表1和2，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液相比，沒(méi)有聞到5-氨基乙酰丙 酸磷酸鹽的水溶液中有任何氣味。由于5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽水溶液的制備過(guò)程簡(jiǎn)化了 5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽水溶液的制備過(guò)程中所必需的防臭措施和防腐蝕性氣體的措施，因 此前者的操作更為簡(jiǎn)便。另外，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的固體相比，5-氨基乙酰丙酸磷 酸鹽的固體也沒(méi)有發(fā)出任何氣味，因此諸如稱(chēng)重和分裝之類(lèi)的操作更為便利。實(shí)施例55-氨基乙酰丙酸磷酸鹽水溶液的酸度測(cè)量分別制備濃度為ImM至IOOOmM的5_氨基乙酰丙酸磷酸鹽的水溶液和5_氨基乙 酰丙酸鹽酸鹽的水溶液，在25°C下使用pH計(jì)測(cè)量酸度。結(jié)果示于圖1。從圖1中明顯可以 看出，在同樣的濃度條件下，5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽的水溶液的酸度低于5-氨基乙酰丙酸 鹽酸鹽的水溶液的酸度。實(shí)施例65-氨基乙酰丙酸磷酸鹽的刺激性試驗(yàn)5個(gè)受試者分別將5mg的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽固體直接放在舌頭上并根據(jù)下述 標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)實(shí)施例1中得到的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽的味道進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果示于表3中。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)0 沒(méi)有感覺(jué)到刺激性。1 有刺激性但刺激性較弱。2:有強(qiáng)烈的刺激性。比較例3除了使用5mg的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽固體以外，以與實(shí)施例6相同的方式來(lái)評(píng) 價(jià)味覺(jué)。結(jié)果示于表3中。表3 如表3所示，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽相比，沒(méi)有感覺(jué)到5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽 具有強(qiáng)烈的刺激性。實(shí)施例7微生物(細(xì)菌)的誘變性試驗(yàn)(回復(fù)突變?cè)囼?yàn))根據(jù)“微生物&用^ 3変異原性試験O基準(zhǔn)”(1988年勞動(dòng)省告示第77號(hào))(1997 年勞動(dòng)省告示第67號(hào)頒布的部分修訂版)和“新規(guī)化學(xué)物質(zhì)等仁係石試験O方法仁ο^ T”(2003年11月21日頒布的薬食発1121002號(hào)、2003. 11. 13製局第2號(hào)、以及環(huán)保 企発第031121002號(hào))中的「細(xì)菌&用^ 3復(fù)帰突然変異試験」進(jìn)行試驗(yàn)。將5% (重 量/體積)的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽溶解在蒸餾水(由和光純藥工業(yè)株式會(huì)社生產(chǎn))中 制成溶液，向0. Iml的該溶液中加入0. 5ml的0. IM磷酸鈉緩沖液(pH 7. 4)(在代謝活性 試驗(yàn)中加入0. 5ml的S9mix)，再加入0. Iml的各個(gè)試驗(yàn)菌株的懸浮液(使用組氨酸缺陷 型的 Salmonellatyphimurium TA 100，TA 98，TA 1535 和 TA 1537 以及色氨酸缺陷型的 Escherichia coli WP2 uvrA(由日本生物分析研究中心提供)共5株細(xì)菌)，然后在37°C 下預(yù)培養(yǎng)20分鐘，同時(shí)進(jìn)行振蕩。培養(yǎng)結(jié)束后，向培養(yǎng)液中加入2. Oml上層瓊脂(提前將 其在45°C下保溫)，并在葡萄糖瓊脂平板基本培養(yǎng)基上鋪層。在此情況下，將每種劑量的樣 品設(shè)置2塊平板。但是，將溶劑對(duì)照樣品設(shè)置3塊平板(陰性對(duì)照)。在37°C下培養(yǎng)48小 時(shí)，然后在立體顯微鏡下觀察每個(gè)試驗(yàn)菌株的生長(zhǎng)是否受到抑制，并計(jì)數(shù)出現(xiàn)回復(fù)突變的 菌落的數(shù)量。在測(cè)量中，使用自動(dòng)菌落分析儀(CA-11:由System Science株式會(huì)社制造) 在86mm的直徑(內(nèi)徑84mm)的平板上對(duì)大約80mm的直徑內(nèi)的面積進(jìn)行計(jì)數(shù)測(cè)量，并使用個(gè) 人計(jì)算機(jī)通過(guò)進(jìn)行面積校正和計(jì)數(shù)損失校正而計(jì)算出上述菌落數(shù)。然而，當(dāng)菌落數(shù)為1500 個(gè)或更多時(shí)，自動(dòng)菌落分析儀的可靠性會(huì)降低，因此，在立體顯微鏡下對(duì)平板上的5個(gè)點(diǎn)進(jìn) 行人工測(cè)量，從而對(duì)平均值進(jìn)行面積校正。以如下方式進(jìn)行劑量設(shè)定試驗(yàn)使用5，000 μ g/ 平板的劑量作為最大劑量(這是試驗(yàn)指南中規(guī)定的最大劑量)的樣品，以公比4對(duì)其進(jìn)行 稀釋得到7種劑量的樣品，對(duì)這7種樣品進(jìn)行劑量設(shè)定試驗(yàn)。結(jié)果如下與溶劑對(duì)照樣品比 較，不管劑量設(shè)定試驗(yàn)樣品中是否存在S9mix，在每個(gè)菌株中都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)回復(fù)突變菌落數(shù)增 加2倍或更多的情況；沒(méi)有發(fā)現(xiàn)菌株的生長(zhǎng)受到5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽這種被測(cè)物抑制的 情況；也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)被測(cè)物中出現(xiàn)沉淀物的情況。使用5，OOOyg/平板的劑量作為最大劑量(這是上述指南中規(guī)定的最大劑量)的 樣品，以公比2對(duì)其進(jìn)行稀釋得到5種劑量的樣品，也進(jìn)行本試驗(yàn)。結(jié)果如下與溶劑對(duì)照 樣品比較，不管劑量設(shè)定試驗(yàn)樣品是否具有代謝活性，在每個(gè)菌株中都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)回復(fù)突變 菌落數(shù)增加2倍或更多的情況(表4)。由此證實(shí)5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽不具有突變誘發(fā) 能力。
實(shí)施例8急性口服毒性試驗(yàn)該試驗(yàn)根據(jù)OE⑶指南No. 423 “急性經(jīng)口毒性-急性毒性等級(jí)法”(2001年12月
17日采用)進(jìn)行。用5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽以300mg/kg體重的劑量、對(duì)一組3只禁食的 雌性大鼠(Sprague-Dawley⑶物種)進(jìn)行處理。另外，以2000mg/kg體重的劑量對(duì)其它兩 組或多組禁食的雌性大鼠進(jìn)行處理。給藥后進(jìn)行2周的連續(xù)觀察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有的大鼠 都沒(méi)有死亡(表5)，沒(méi)有全身中毒的癥狀，整體而言，所有大鼠的體重都有所增加(表6)， 據(jù)推測(cè)，急性口服50%致死量(LD50)大于2，500mg/kg體重。表 5 表6 實(shí)施例9急性皮膚刺激性試驗(yàn)根據(jù)OECD指南No. 404“急性皮膚刺激性/腐蝕性試驗(yàn)”(1992年7月17日采用) 和EU委員會(huì)指令92/69/EEC B4法急性毒性(皮膚刺激性)的試驗(yàn)方法進(jìn)行本試驗(yàn)。將 0. 5g的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽溶解在0. 5ml蒸餾水中制成溶液(pH 3. 1)，使用三只新西 蘭白兔(雄性)進(jìn)行試驗(yàn)，將所述溶液在每只動(dòng)物皮膚上的2. 5cm的、去毛但無(wú)傷的方形區(qū) 域上涂4小時(shí)，然后在1小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)和72小時(shí)的時(shí)候進(jìn)行觀察。結(jié)果在24小時(shí) 內(nèi)觀察到很輕微的紅斑，但48小時(shí)后達(dá)到正常(表7和8)。另外，將溶液(將0. 5g的5-氨 基乙酰丙酸磷酸鹽溶解在0. 5ml蒸餾水中而制成)(pH 3. 1)在一只新西蘭白兔(雄性)皮 膚上的2. 5cm的、去毛但無(wú)傷的方形區(qū)域上涂3分鐘或1小時(shí)，然后在1小時(shí)、24小時(shí)、48 小時(shí)和72小時(shí)的時(shí)候進(jìn)行觀察，在這種情況中也沒(méi)有觀察到皮膚刺激性(表7和8)。因 為P. I. I.值(原發(fā)性皮膚刺激指數(shù))為0. 5，由此證實(shí)該鹽在現(xiàn)行的聯(lián)合國(guó)推薦的GHS中 的刺激性分類(lèi)之外，不屬于刺激性物質(zhì)。在這一方面，將0. 5g的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽溶 解在0. 5ml蒸餾水中，制成對(duì)比溶液，并根據(jù)OECD指南來(lái)判斷腐蝕性，由于該溶液的pH為 2. 0或更低，所以沒(méi)有進(jìn)行試驗(yàn)。表 7 表8 實(shí)施例10動(dòng)物表皮滲透性試驗(yàn)本試驗(yàn)使用透析單元(有效面積1. 13m2，如圖2所示)，對(duì)受體層中17ml的pH為 6. 8的生理鹽水進(jìn)行攪拌并保持在37°C。將經(jīng)過(guò)預(yù)處理的豬皮全層(表皮+真皮)放入膜 過(guò)濾器中，并將其設(shè)置在透析單元上。向供體層中加入ImM的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽水溶 液0.5ml。在受體層中在預(yù)定的時(shí)間段采集到0.2ml的溶液后，用新鮮的生理鹽水補(bǔ)充該 層。然后，將0.05ml的采集樣品或標(biāo)準(zhǔn)液與3.5ml的液體A(1升中含有4g氯化鈉的乙酰 丙酮/乙醇/水=15/10/75 (體積/體積/體積)的混合溶液)和0. 45ml的液體B (用水 將85ml的福爾馬林稀釋到1升所制得的溶液)混合，并對(duì)混合液加熱處理30分鐘，30分 鐘后，用水冷卻。隨后，用HPLC(分析條件為流速1.0ml/分鐘，溫度25°C，使用激發(fā)波長(zhǎng) 為473nm和熒光波長(zhǎng)為363nm的熒光檢測(cè)器，使用甲醇/2. 5%乙酸水溶液=40/60 (體積/ 體積)的混合溶液作為洗提液，并使用WakOSil-II5C18HG、4. 6m Φ X 150mm作為柱)進(jìn)行測(cè) 量。由標(biāo)準(zhǔn)液的峰面積求出每個(gè)樣品的濃度。然后，使用洋蔥表皮代替豬皮進(jìn)行同樣的試驗(yàn)，但是將5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽水 溶液的濃度改為0. ImM。結(jié)果在圖3和4中示出。由圖3和4可以理解，5-氨基乙酰丙酸 鹽酸鹽和5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽在豬皮和洋蔥表皮中表現(xiàn)出相似的滲透性。比較例4除了用5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽代替5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽以外，以與實(shí)施例10 相同的方式測(cè)量滲透性。由上述試驗(yàn)可以證實(shí)，雖然當(dāng)5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽直接施于皮膚時(shí)，會(huì)產(chǎn)生刺 激性，但5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽沒(méi)有產(chǎn)生皮膚刺激(如實(shí)施例9所示)，而且它們對(duì)皮膚具 有相同的滲透性，由此表明5_氨基乙酰丙酸磷酸鹽是一種在某些醫(yī)療(光動(dòng)力治療和光 動(dòng)力診斷)和植物應(yīng)用方面，比5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽更為有用的鹽。實(shí)施例11
產(chǎn)生氯化銀沉淀物的試驗(yàn)在IOml的離子交換水中，溶解0. 5g的5_氨基乙酰丙酸磷酸鹽和0. 5g硝酸銀，將 混合物靜置5分鐘，并觀察液體的狀態(tài)。沒(méi)有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生沉淀物。就此而論，將0.5g的5-氨 基乙酰丙酸鹽酸鹽和0. 5g硝酸銀溶解在IOml的離子交換水中，將混合物靜置5分鐘，并觀 察液體的狀態(tài)。發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了沉淀物。實(shí)施例12蘋(píng)果著色的試驗(yàn)將實(shí)施例1中得到的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽以下表所示的預(yù)定濃度溶解在離子 交換水中。將展布劑(由丸和物產(chǎn)株式會(huì)社制造的“ 了 7?？?子Bi”)以0. 1重量％的濃 度加入到上述液體中。用磷酸調(diào)節(jié)PH。除了將上述的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽替換成5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽、并將調(diào)節(jié) PH的磷酸替換為鹽酸以外，以相同的方式制備5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液。將這樣制備的液體以2升/枝的比例噴到3個(gè)主枝上，其中“富士”蘋(píng)果的幼果已 經(jīng)掛果但還沒(méi)有變成紅色(9月15日)。大約2個(gè)月后(11月6日)，收獲蘋(píng)果并檢查它們 的色度。用MINOLTA CAMERA株式會(huì)社制造的色度計(jì)CR-200來(lái)測(cè)量色度。結(jié)果示于表9中。表9 “_”表示發(fā)現(xiàn)水果上有大量斑點(diǎn)。在表9所示的Lab值中，L表示亮度，a表示紅色，b表示黃色。因此，a值越高意 味著紅色越濃。噴施5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽情況中的紅色比噴施5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽 情況中的更濃。實(shí)施例13植物活化效果將600g火山灰土壤裝在內(nèi)徑為12cm的瓷罐中，一共準(zhǔn)備12罐，每個(gè)罐中種有1 株長(zhǎng)到15cm高度的紫露草屬的鴨跖草，將其放在20°C的恒溫環(huán)境下，用下述處理液進(jìn)行一 天一次的莖葉施用處理。21天后觀察葉片的狀況。結(jié)果總結(jié)在表10中。表10
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評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)0 沒(méi)有發(fā)現(xiàn)樹(shù)葉表面上有任何異常1 發(fā)現(xiàn)樹(shù)葉表面上有變黃的區(qū)域2 發(fā)現(xiàn)樹(shù)葉表面上有壞死的區(qū)域基于表10所示的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽的植物活化效果類(lèi)似于或者 大于5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的效果。實(shí)施例14植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)效果將水稻種子(Akinishiki)^ Benlate (由 Sumika Takeda Engei 株式會(huì)社生產(chǎn)) (200倍)水溶液中浸泡一晝夜，然后在30°C、黑暗條件下進(jìn)行培育以促進(jìn)發(fā)芽。選擇破胸 期的種子，用鑷子將10粒種子挾到發(fā)泡聚乙烯板的溝槽(溝槽是用切斷刀切成的)中，使 該板漂浮在高型的皮氏培養(yǎng)皿(該培養(yǎng)皿中裝有150ml的濃度分別如表11所示的5-氨基 乙酰丙酸磷酸鹽溶液)中，并在5，000勒克斯持續(xù)光照的條件下在25°C下培育24小時(shí)。將 各濃度的重復(fù)數(shù)設(shè)定為3。三天后進(jìn)行觀察，測(cè)量每個(gè)方案中第一個(gè)葉鞘的長(zhǎng)度以及種子的 根的長(zhǎng)度，計(jì)算它們與未處理方案的比值并計(jì)算出平均值。結(jié)果示于表11中。表11 5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽表現(xiàn)出與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽相似或更強(qiáng)的促進(jìn)植物 生長(zhǎng)的效果。實(shí)施例15耐鹽性改善效果向內(nèi)徑為12cm的瓷罐(沒(méi)有排水孔)中填充600g的旱地土壤，播種7_8粒棉花種 子(品種M-5Acala)，將種子上覆蓋Icm厚的土壤，并使種子在溫室中生長(zhǎng)。隨后，進(jìn)行常 規(guī)管理，在嫩葉展開(kāi)的時(shí)候，制備含有待測(cè)化合物(其濃度分別如表12所示)以及0.05% (體積/體積)的展布劑(Neoesterin，由Kumiai化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社制造)的耐鹽性改善 劑，并將其以每10公畝100升的體積用量施加到莖葉上。每種待測(cè)化合物被設(shè)置成表12 所示的濃度。四天后，將氯化鈉以表12所示的相當(dāng)于土壤重量的0-1. 5%的量溶解在30ml 水中，并滴加到土壤中。再繼續(xù)進(jìn)行常規(guī)栽培，23天后進(jìn)行檢查。通過(guò)肉眼觀察來(lái)進(jìn)行所述 檢查，并根據(jù)下述6個(gè)級(jí)別對(duì)鹽害的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果示于表12中。評(píng)價(jià)級(jí)別
0 完全沒(méi)有觀察到鹽害。
1 觀察到非常輕微的鹽害。
2 觀察到較輕微的鹽害。
3:觀察到明顯的鹽害。
4 觀察到嚴(yán)重的鹽害。
5:由于鹽害，導(dǎo)致植物體枯
表12
如表12所示，5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽表現(xiàn)出與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽相似或更 強(qiáng)的耐鹽性改善效果。當(dāng)在下述條件下采用離子色譜柱，對(duì)上述實(shí)施例中使用的5-氨基乙酰丙酸磷酸 鹽水溶液中的氯離子的濃度進(jìn)行測(cè)量時(shí)，各個(gè)樣品中的氯離子的濃度都等于或低于檢測(cè)極 限(0. Ippm)。測(cè)量條件如下A:分離柱(由日本Dionex株式會(huì)社制造的IonPaCAS12A)，B 保護(hù)柱(由日本Dionex株式會(huì)社制造的IonPac AG12A)，C 洗提液(含有Na2CO3和 NaHCO3(Na2CO3 3. Ommol/1, NaHCO3 0. 5mmol/l)的水溶液)，D 流速(1. 5ml/ 分鐘)，E 抑 制器(ASRS (再生型，電流值為50mA))，F(xiàn):進(jìn)樣量(25 μ 1)，G 恒溫爐溫度(35°C)，以及H: 檢測(cè)器(電導(dǎo)檢測(cè)器)。實(shí)施例165-氨基乙酰丙酸硝酸鹽的制備將180ml的強(qiáng)酸性離子交換樹(shù)脂(AMBERLITE IR 120B Na，由日本Organo株式會(huì) 社生產(chǎn))裝入柱中。所用的離子交換樹(shù)脂是經(jīng)過(guò)了鹽酸處理而從鈉離子型轉(zhuǎn)化成氫離子型 的離子交換樹(shù)脂。然后，將36. 00g(214mmol)的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽溶解在1800ml的離 子交換水中，并將該溶液過(guò)柱，然后將IOOOml的離子交換水過(guò)柱。接著，將IN的氨水緩慢過(guò) 柱，收集594ml黃色的洗脫液。將收集到的洗脫液加入33ml的60%的硝酸(HNO3 442mmol) 中，并使用蒸發(fā)器濃縮。向濃縮液中加入400ml的丙酮，并用攪拌器劇烈攪拌，然后使混合 物在4°C下靜置16小時(shí)。吸濾回收所析出的固體，并用500ml的乙酸甲酯洗滌。將所得固體減壓干燥12小時(shí)，得到31.09g(160mmOl)的目標(biāo)物質(zhì)。它的物理性能數(shù)據(jù)如下所示。熔點(diǎn)114°C1H-WR(D2OdOOMHz) δ ppm :2· 75(t，2H，CH2), 2. 93(t，2H，CH2), 4. 17(s，2H，CH2)13C-NMR(D20,100MHz) δ ppm 30 (CH2)，37 (CH2)，50 (CH2)，180 (CO)，207 (COO)C5H9NO3 · HNO3的元素分析數(shù)據(jù)計(jì)算值=C30. 93% ；H 5. 19% ；N 14. 43%實(shí)測(cè)值=C30. 1% ；H 5. 2% ；N 14. 7%由離子色譜分析得到的NO3-含量計(jì)算值31.94%實(shí)測(cè)值31%離子色譜分析條件分離柱由日本Dionex株式會(huì)社制造的IonPaCAS12A ；洗提 液含有 Na2CO3 和 NaHCO3 (Na2CO3 3. Ommol/1, NaHCO3 0. 5mmol)的水溶液，流速1. 5ml/ 分 鐘，進(jìn)樣量25μ 1，柱溫35°C，檢測(cè)器電導(dǎo)檢測(cè)器。實(shí)施例175-氨基乙酰丙酸硝酸鹽的氣味測(cè)量5個(gè)受試者直接聞實(shí)施例16中制備的5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽的水溶液(柱洗脫 液和硝酸的混合液)及其固體的氣味，并以與實(shí)施例3相同的方式來(lái)評(píng)價(jià)它們的氣味。結(jié) 果示于表13中。比較例5除了使用5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液及其固體以外，以與實(shí)施例17相同的 方式來(lái)評(píng)價(jià)氣味。就此而論，5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液是使用5-氨基乙酰丙酸鹽酸 鹽固體、鹽酸和離子交換水制備的，其中，使得5-氨基乙酰丙酸和氯離子的摩爾濃度分別 與實(shí)施例16中的5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽水溶液中的5-氨基乙酰丙酸和硝酸根離子的摩 爾濃度相同。結(jié)果示于表13中。表 13 實(shí)施例18除了通過(guò)將0. 5g的5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽溶解在Iml水中而制成水溶液以外， 以與實(shí)施例17相同的方式來(lái)評(píng)價(jià)氣味。結(jié)果示于表14中。比較例6除了通過(guò)將0. 5g的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽溶解在Iml水中而制成水溶液以外， 以與實(shí)施例17相同的方式來(lái)評(píng)價(jià)氣味。結(jié)果示于表14中。
表 14 表13和14說(shuō)明，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液相比，沒(méi)有聞到5-氨基乙 酰丙酸硝酸鹽的水溶液中有任何氣味。由于5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽水溶液的制備過(guò)程簡(jiǎn) 化了 5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽水溶液的制備過(guò)程中所必需的防臭措施和防腐蝕性氣體的措 施，因此前者的操作更為簡(jiǎn)便。另外，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的固體相比，5-氨基乙酰丙 酸硝酸鹽的固體也沒(méi)有發(fā)出任何氣味，所以諸如稱(chēng)重和分裝之類(lèi)的操作更為便利。實(shí)施例19產(chǎn)生氯化銀沉淀物的試驗(yàn)在IOml的離子交換水中，溶解0. 5g的5_氨基乙酰丙酸硝酸鹽和0. 5g硝酸銀，將 混合物靜置5分鐘，并觀察液體的狀態(tài)。沒(méi)有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生沉淀物。就此而論，將0. 5g的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽和0. 5g硝酸銀溶解在IOml的離子 交換水中，將混合物靜置5分鐘，并觀察液體的狀態(tài)。發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了沉淀物。實(shí)施例20植物活化效果將600g旱地土壤裝在內(nèi)徑為12cm的瓷罐中，然后播種12粒蘿卜種子，將種子上 覆蓋5mm厚的土壤，并使種子在溫室中生長(zhǎng)。用下述處理液體進(jìn)行一天一次的莖葉施用處 理。21天后觀察葉片的狀況。結(jié)果總結(jié)在表15中。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)與實(shí)施例13的相同。表15 由表15發(fā)現(xiàn)5_氨基乙酰丙酸硝酸鹽的植物活化效果與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽 的相似或者更強(qiáng)。實(shí)施例21蘋(píng)果著色的試驗(yàn)將實(shí)施例16中得到的5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽以表16所示的預(yù)定濃度溶解在離 子交換水中。將展布劑(由丸和物產(chǎn)株式會(huì)社制造的“ 了 7?？?子Bi”)以0. 1重量％的 濃度加入到上述液體中。用硝酸調(diào)節(jié)PH。除了將上述的5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽替換成5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽、并將硝酸 替換為鹽酸以外，以與上述相同的方式制備溶液。將這樣制備的液體以2升/枝的比例噴在3個(gè)主枝上，其中“富士”蘋(píng)果的幼果已 經(jīng)掛果但還沒(méi)有變成紅色(9月15日)。大約2個(gè)月后(11月6日)，收獲蘋(píng)果并檢查它們 的色度。用MINOLTA CAMERA株式會(huì)社制造的色度計(jì)CR-200測(cè)量色度。結(jié)果示于表16中。表 16
24 “_”表示發(fā)現(xiàn)水果上有大量斑點(diǎn)。在表16所示的Lab值中，L表示亮度，a表示紅色，b表示黃色。因此，a值越高意 味著紅色越濃。噴施5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽情況中的紅色比噴施5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽 情況中的紅色更濃。實(shí)施例22浮游生物的培養(yǎng)將濃度為lmM(194ppm)的5_氨基乙酰丙酸硝酸鹽加入到IOOml的表17 (培養(yǎng)液 組分)所示的滅菌培養(yǎng)液中，將Chlorella sp.接種到該培養(yǎng)液中，并在30°C、以及有氧和 黑暗的條件下在往復(fù)式搖床中進(jìn)行培養(yǎng)，然后測(cè)定細(xì)胞數(shù)(0D 660)。將濃度為lmM(168ppm)的5_氨基乙酰丙酸鹽酸鹽加入到IOOml的表17 (培養(yǎng)液 組分)所示的滅菌培養(yǎng)液中，將Chlorella sp.接種到該培養(yǎng)液中，并在30°C、以及有氧和 黑暗的條件下在往復(fù)式搖床中進(jìn)行培養(yǎng)，然后測(cè)定細(xì)胞數(shù)(0D 660)。將Chlorella sp.接種到IOOml的表17(培養(yǎng)液組分)所示的滅菌培養(yǎng)液中，并 在30°C、以及有氧和黑暗的條件下在往復(fù)式搖床中進(jìn)行培養(yǎng)，然后測(cè)定細(xì)胞數(shù)(0D 660)。表17 表18結(jié)果(細(xì)胞數(shù)0D660nm) 由表18的結(jié)果明顯可見(jiàn)，5-氨基乙酰丙酸硝酸鹽表現(xiàn)出與5-氨基乙酰丙酸鹽酸 鹽相同的效果。當(dāng)在下述條件下采用離子色譜柱，對(duì)上述實(shí)施例中使用的5-氨基乙酰丙酸硝酸 鹽水溶液中的氯離子的濃度進(jìn)行測(cè)量時(shí)，各個(gè)樣品中的氯離子的濃度都等于或低于檢測(cè)極 限(0. Ippm)。
測(cè)量條件如下A:分離柱(由日本Dionex株式會(huì)社制造的IonPaCAS12A)，B 保護(hù)柱(由日本Dionex株式會(huì)社制造的IonPac AG12A)，C 洗提液(含有Na2CO3和 NaHCO3(Na2CO3 3. Ommol/1, NaHCO3 0. 5mmol/l)的水溶液)，D 流速(1. 5ml/ 分鐘)，E 抑 制器(ASRS (再生型，電流值為50mA))，F(xiàn):進(jìn)樣量(25 μ 1)，G 恒溫爐溫度(35°C)，以及H: 檢測(cè)器(電導(dǎo)檢測(cè)器)。實(shí)施例235-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽的制備將180ml的強(qiáng)酸性離子交換樹(shù)脂(AMBERLITE IR 120B Na，由日本Organo株式會(huì) 社生產(chǎn))裝入柱中。所用的離子交換樹(shù)脂是經(jīng)過(guò)了鹽酸處理而從鈉離子型轉(zhuǎn)化成氫離子型 的離子交換樹(shù)脂。然后，將36. 00g(215mmol)的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽溶解在1800ml的離 子交換水中，并將該溶液過(guò)柱，然后將IOOOml的離子交換水過(guò)柱。接著，將IN的氨水緩慢 過(guò)柱，收集到555ml黃色的洗脫液。將收集到的洗脫液與81.72g(430mmOl)的對(duì)甲苯磺酸 一水合物混合，并使用蒸發(fā)器濃縮。向濃縮液中加入400ml的丙酮，并用攪拌器劇烈攪拌， 然后在4°C下靜置16小時(shí)。吸濾回收所析出的固體，并用400ml的丙酮洗滌。將所得固體 減壓干燥12小時(shí)，得到47.78g(158mm0l)的目標(biāo)物質(zhì)。它的物理性能數(shù)據(jù)如下所示。熔點(diǎn)186°C1H-WR(D2OdOOMHz) δ ppm 2. 38(s,3H, CH3)，2· 67 (t，2H，CH2)，2· 84 (t，2H，CH2), 4. 10 (s，2H, CH2) 7. 34 (d, 2H,環(huán) H)，7. 69 (d, 2H,環(huán) H)13C-NMR (D2O, 100MHz) δ ppm :23 (CH3)，30 (CH2)，37 (CH2)，50 (CH2)，128 (環(huán) C)， 132 (環(huán) C)，142 (環(huán) C)，145 (環(huán) C)，180 (CO)，207 (COO)C5H9NO3 · C7H8SO3 的元素分析數(shù)據(jù)計(jì)算值=C47. 52% ；H 5. 65% ；N 4. 62%實(shí)測(cè)值=C47. 4% ；H 5. 6% ；N 4. 6%實(shí)施例245-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽的氣味測(cè)量5個(gè)受試者直接聞實(shí)施例23中制備的5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽的水溶液 (柱洗脫液和對(duì)甲苯磺酸的混合液)及其固體的氣味，并以與實(shí)施例3相同的方式來(lái)評(píng)價(jià)它 們的氣味。結(jié)果示于表19中。比較例7除了使用5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液及其固體以外，以與實(shí)施例24相同的 方式來(lái)評(píng)價(jià)氣味。就此而論，5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液是使用5-氨基乙酰丙酸鹽酸 鹽固體、鹽酸和離子交換水制備的，其中，使得5-氨基乙酰丙酸和氯離子的摩爾濃度分別 與實(shí)施例23中的5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽水溶液中的5-氨基乙酰丙酸和對(duì)甲苯磺 酸根離子的摩爾濃度相同。結(jié)果示于表19中。表 19 實(shí)施例25除了通過(guò)將0. 5g的5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽溶解在Iml水中而制成水溶液 以外，以與實(shí)施例24相同的方式來(lái)評(píng)價(jià)氣味。結(jié)果示于表20中。(比較例8)除了通過(guò)將0. 5g的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽溶解在Iml水中而制成水溶液以外， 以與實(shí)施例24相同的方式來(lái)評(píng)價(jià)氣味。結(jié)果示于表20中。表 20 表19和20說(shuō)明，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的水溶液相比，沒(méi)有聞到5-氨基乙 酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽的水溶液中有任何氣味。由于5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽水溶液 的制備過(guò)程簡(jiǎn)化了 5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽水溶液的制備過(guò)程中所必需的防臭措施和防腐 蝕性氣體的措施，因此前者的操作更為簡(jiǎn)便。另外，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的固體相比， 5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽的固體也沒(méi)有發(fā)出任何氣味，所以諸如稱(chēng)重和分裝之類(lèi)的操 作更為便利。(實(shí)施例沈)結(jié)晶狀態(tài)的耐熱性使用熔點(diǎn)儀測(cè)量熔點(diǎn)。表 21 如表21所示，5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽的保持固態(tài)的能力優(yōu)于5-氨基乙酰 丙酸鹽酸鹽。
實(shí)施例27滅菌分解試驗(yàn)首先，對(duì)50mg的5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽或者5_氨基乙酰丙酸鹽酸鹽進(jìn)行 加熱滅菌(121 ，20分鐘，1.5kgf/cm2)。確認(rèn)滅菌前后的重量沒(méi)有發(fā)生變化，然后采用文 獻(xiàn)(Clin. Chem.，36/8，1494(1990))中描述的方法，對(duì)5-氨基乙酰丙酸在滅菌前后的分解 度進(jìn)行檢驗(yàn)。結(jié)果示于表22中。表 22 如表22所示，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)高溫加熱滅菌處理后，5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽的分 解度低于5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽的分解度。實(shí)施例28產(chǎn)生氯化銀沉淀物的試驗(yàn)在IOml的離子交換水中，溶解0. 5g的5_氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽和0. 5g硝 酸銀，將混合物靜置5分鐘，并觀察液體的狀態(tài)。沒(méi)有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生沉淀物。就此而論，將0. 5g的5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽和0. 5g硝酸銀溶解在IOml的離子 交換水中，將混合物靜置5分鐘，并觀察液體的狀態(tài)。發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了沉淀物。實(shí)施例29植物活化效果將600g旱地土壤裝在內(nèi)徑為12cm的瓷罐中，然后播種12粒蘿卜種子，將種子上 覆蓋5mm厚的土壤，并使種子在溫室中生長(zhǎng)。用下述處理液體進(jìn)行一天一次的莖葉施用處 理。21天后觀察葉片的狀況。結(jié)果總結(jié)在表23中。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)與實(shí)施例13相同。表 23 由表23發(fā)現(xiàn)，5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽的植物活化效果與5-氨基乙酰丙酸 鹽酸鹽的相似或者更強(qiáng)。實(shí)施例30蘋(píng)果著色的試驗(yàn)將實(shí)施例23中得到的5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽以表24所示的預(yù)定濃度溶 解在離子交換水中。將展布劑(由丸和物產(chǎn)株式會(huì)社制造的“ 7 7 口 - f Bi”)以0. 1重 量％的濃度加入到上述液體中。用對(duì)甲苯磺酸調(diào)節(jié)PH。除了將上述的5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽替換成5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽、并 將對(duì)甲苯磺酸替換為鹽酸以外，以與上述相同的方式制備溶液。將這樣制備的液體以2升/枝的比例噴到3個(gè)主枝上，其中“富士”蘋(píng)果的幼果已 經(jīng)掛果但還沒(méi)有變成紅色(9月15日)。大約2個(gè)月后(11月6日)，收獲蘋(píng)果并檢查它們 的色度。用MINOLTA CAMERA株式會(huì)社制造的色度計(jì)CR-200測(cè)量色度。結(jié)果示于表24中。表 24 “_”表示發(fā)現(xiàn)水果上有大量斑點(diǎn)。在表24的Lab值中，L表示亮度，a表示紅色，b表示黃色。因此，a值越高意味著 紅色越濃。噴施5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲苯磺酸鹽的情況中的紅色比噴施5-氨基乙酰丙酸鹽 酸鹽情況中的更濃。當(dāng)在下述條件下采用離子色譜柱，對(duì)上述實(shí)施例中使用的5-氨基乙酰丙酸對(duì)甲 苯磺酸鹽水溶液中的氯離子的濃度進(jìn)行測(cè)量時(shí)，各個(gè)樣品中的氯離子的濃度都等于或低于 檢測(cè)極限(0. Ippm)。測(cè)量條件如下A:分離柱(由日本Dionex株式會(huì)社制造的IonPaCAS12A)，B 保護(hù)柱(由日本Dionex株式會(huì)社制造的IonPac AG12A)，C 洗提液(含有Na2CO3和 NaHCO3(Na2CO3 3. Ommol/1, NaHCO3 0. 5mmol/l)的水溶液)，D 流速(1. 5ml/ 分鐘)，E 抑 制器(ASRS (再生型，電流值為50mA))，F(xiàn):進(jìn)樣量(25 μ 1)，G 恒溫爐溫度(35°C)，以及H: 檢測(cè)器(電導(dǎo)檢測(cè)器)。雖然本發(fā)明參照具體實(shí)施方式
進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，但是對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái) 說(shuō)，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下，顯然可以作出各種變化和改進(jìn)。本申請(qǐng)基于2004年3月30日提交的日本專(zhuān)利申請(qǐng)(日本專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?br> 2004-099670)、2004年3月30日提交的日本專(zhuān)利申請(qǐng)(日本專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?004-099671)、 2004年3月30日提交的日本專(zhuān)利申請(qǐng)(日本專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?004-099672)、2004年11月30 日提交的日本專(zhuān)利申請(qǐng)(日本專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?004-345661)、2005年2月25日提交的日本專(zhuān) 利申請(qǐng)(日本專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?005-051216)、2005年2月25日提交的日本專(zhuān)利申請(qǐng)(日本 專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?005-051217)、和2005年2月25日提交的日本專(zhuān)利申請(qǐng)(日本專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?br> 2005-051218)，上述專(zhuān)利申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容以引用方式并入本文。工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明的5_氨基乙酰丙酸鹽是一種便于操作的物質(zhì)，這是因?yàn)樗粫?huì)釋放出難 聞的氣味或刺激性的氣味，而且，該鹽對(duì)皮膚和舌頭表現(xiàn)出低刺激性的特性，其對(duì)皮膚等也 具有優(yōu)異的滲透性，因此含有該鹽的組合物可用作光動(dòng)力治療或光動(dòng)力診斷所用的試劑。 而且，與5-氨基乙酰丙酸鹽酸鹽相比，本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽還具有高分解溫度和優(yōu)異的耐熱性。根據(jù)本發(fā)明的制備方法，可以方便有效地制備出本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸 鹽。另外，由于本發(fā)明的5-氨基乙酰丙酸鹽在形成水溶液時(shí)具有低的氯離子濃度，因此在 施用于植物時(shí)幾乎不會(huì)出現(xiàn)由氯造成的損害。
權(quán)利要求
由下式(I)表示的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽HOCOCH2CH2COCH2NH2·HOP(O)(OR1)n(OH)2-n(I)其中，R1表示氫原子、具有1-18個(gè)碳原子的烷基、具有2-18個(gè)碳原子的鏈烯基、具有7-26個(gè)碳原子的芳烷基或苯基；n為0-2的整數(shù)；且其中當(dāng)n為2時(shí)，兩個(gè)R1是相同的或不同的。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽，其中R1為氫原子、甲基、乙基、正丁 基、十六烷基、2-乙基己基、油烯基、芐基或苯基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽，該鹽是水溶液形式的。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽，該鹽是固體形式的。
5.一種用于光動(dòng)力治療或光動(dòng)力診斷的組合物，該組合物包含根據(jù)權(quán)利要求1至4中 的任意一項(xiàng)所述的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽。
6.一種包含根據(jù)權(quán)利要求1至4中的任意一項(xiàng)所述的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽的植物 活化劑組合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至4中的任意一項(xiàng)所述的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽在制備光動(dòng)力治 療劑或光動(dòng)力診斷試劑中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至4中的任意一項(xiàng)所述的5-氨基乙酰丙酸磷酸鹽作為植物活化劑 的應(yīng)用。
全文摘要
一種可用于微生物、發(fā)酵、動(dòng)物、藥物、植物等領(lǐng)域的5-氨基乙酰丙酸鹽；一種制備該鹽的方法；一種含有該鹽的藥物組合物；以及一種含有該鹽的植物活化劑組合物。
文檔編號(hào)A01N25/02GK101885736SQ20101021536
公開(kāi)日2010年11月17日 申請(qǐng)日期2005年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月30日
發(fā)明者岡田秀樹(shù), 田中徹, 石塚昌宏, 立谷尚久, 肥后麻衣, 西川誠(chéng)司 申請(qǐng)人:克斯莫石油株式會(huì)社