專利名稱：草魚與團(tuán)頭魴亞科間遠(yuǎn)緣雜交的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種魚類雜交的方法，尤其涉及一種鯉科魚類中亞科間遠(yuǎn)緣雜交的方法。
背景技術(shù)：
親緣關(guān)系在種間或種間以上的雜交一般稱為遠(yuǎn)緣雜交，它是魚類性狀改良常用的 方法。遠(yuǎn)緣雜交作為一種重要的魚類遺傳育種和性狀改良方法，它可以整合整套外源基因， 從而改變雜交后代基因的表達(dá)調(diào)控，使得雜交后代可能在生長速度、抗逆性、抗病性以及肉 質(zhì)等方面表現(xiàn)出雜種優(yōu)勢(shì)。如紅鯽與湘江野鯉的屬間遠(yuǎn)緣雜交形成的雜交后代具有生長速 度快、肉質(zhì)鮮嫩、抗病力強(qiáng)、存活率高等優(yōu)點(diǎn)，并且通過多代遺傳選育，篩選出了兩性可育的 異源四倍體鯽鯉群體；紅鯽與團(tuán)頭魴的亞科間遠(yuǎn)緣雜交形成的三倍體雜交后代具有體背明 顯增高、外形優(yōu)美等優(yōu)點(diǎn)。如何利用和改進(jìn)現(xiàn)有的生物學(xué)技術(shù)和方法，挑選合適的親本魚進(jìn)行遠(yuǎn)緣雜交，對(duì) 其進(jìn)行遺傳改良以獲得性狀更為優(yōu)良、品種更加豐富和對(duì)遺傳研究更有意義的新型多倍體 魚，已成為本領(lǐng)域技術(shù)人員長期面臨和需要解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種受精率高、孵化率高、 后代性狀優(yōu)良、且對(duì)遺傳育種具有重要意義的草魚與團(tuán)頭魴亞科間遠(yuǎn)緣雜交的方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出的技術(shù)方案為一種草魚與團(tuán)頭魴亞科間遠(yuǎn)緣雜 交的方法，包括以下步驟首先挑選雌性草魚和雄性團(tuán)頭魴作為親魚進(jìn)行專池培育，然后在 繁殖季節(jié)對(duì)所述親魚進(jìn)行人工催產(chǎn)，挑選催產(chǎn)效果良好的親魚進(jìn)行干法人工授精，對(duì)授精 完成后的受精卵進(jìn)行流水孵化，孵化的魚苗在大面積的水泥池中進(jìn)行飼養(yǎng)，對(duì)飼養(yǎng)后的雜 交魚進(jìn)行檢測(cè)、篩分，獲得三倍體草魴和二倍體草魴。上述的技術(shù)方案優(yōu)選按以下具體的操作步驟進(jìn)行1)親魚的選擇和培育在繁殖期前3 4個(gè)月，挑選性成熟特征明顯、體征良好的 雌性草魚和雄性團(tuán)頭魴作為遠(yuǎn)緣雜交的親魚進(jìn)行專池培育，保持水質(zhì)良好；在繁殖期前一 個(gè)月以精餌飼養(yǎng)所述親魚，每隔2 3天流水刺激一次，以促進(jìn)親魚性腺發(fā)育成熟；體征良 好的親魚一般表現(xiàn)為體型好、體色鮮艷、體質(zhì)健壯、無病無傷；2)人工催產(chǎn)在同年的5月中旬至6月上旬，當(dāng)水溫穩(wěn)定在20°C以上時(shí)，為上述 親魚注射黃體素釋放激素類似物(LRH-A)、絨毛膜促性腺激素(HCG)與地歐酮的混合催產(chǎn) 劑進(jìn)行催產(chǎn)，所述黃體素釋放激素類似物的用量為2 μ g/kg 3 μ g/kg，絨毛膜促性腺激素 的用量為100IU/kg 150IU/kg，地歐酮的用量為lmg/kg 1. 5mg/kg ；先注射母本親魚， 4h 5h后再注射父本親魚，父本親魚的注射劑量減半；注射完畢后按1 (6 8)的數(shù)量 比將母、父本親魚放入同一產(chǎn)卵池中(水面面積為80m2左右的產(chǎn)卵池)，然后視水情及時(shí)向 池中沖水，尤其在產(chǎn)卵前3h 4h，注入一定水量后，停止注水，讓魚在靜水中催產(chǎn)，直至其
3開始順利產(chǎn)卵和產(chǎn)精；注射時(shí)優(yōu)選采用胸鰭基部無鱗處腹腔一針注射法，以提高親魚的存 活率；3)授精孵化挑選產(chǎn)卵順利的母本親魚，可以用我們特制的帆布擔(dān)架固定，以便 于操作和減少對(duì)母本親魚的損傷；然后與產(chǎn)精量大的父本親魚進(jìn)行干法人工授精，得到的 受精卵置于水溫為19°C 20°C的孵化環(huán)道或人工孵化器中進(jìn)行流水孵化；4)飼養(yǎng)魚苗全部孵出后，于孵化環(huán)道或人工孵化器中繼續(xù)培育2 3天，待魚苗 出現(xiàn)腰點(diǎn)后將魚苗轉(zhuǎn)入預(yù)先培肥的水泥池中飼養(yǎng)，1 2天后潑灑豆?jié){，2 3次/天，魚苗 長成后經(jīng)檢測(cè)、篩分獲得三倍體草魴和二倍體草魴。上述的技術(shù)方案中，所述的檢測(cè)操作優(yōu)選是指利用流式細(xì)胞DNA含量測(cè)定法、外 周血細(xì)胞培養(yǎng)的染色體倍性檢測(cè)方法和血涂片法對(duì)飼養(yǎng)后的魚苗分別進(jìn)行DNA含量、染色 體數(shù)目以及血細(xì)胞大小的檢測(cè)。上述技術(shù)方案中的草魚(Ctenopharyngodon idellus(C. et V.))隸屬于鯉形目， 鯉科，雅羅魚亞科中的二倍體魚(2η = 48)，典型的草食性魚類，生長速度快，是池塘主要養(yǎng) 殖魚類之一，但其易感染疾病，成活率不高；團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala Yih)隸屬 于鯉形目，鯉科，舶亞科，魴屬中的二倍體魚(2η = 48)，體高側(cè)扁，尾柄高而短，體型優(yōu)美， 草食性，抗逆性強(qiáng)，肉質(zhì)細(xì)嫩、腴美，脂肪豐富。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于通過反 復(fù)實(shí)驗(yàn)選擇草魚作為母本親魚，團(tuán)頭魴作為父本親魚，二者進(jìn)行遠(yuǎn)緣雜交獲得了具備多種 雜交優(yōu)勢(shì)的三倍體草魴和二倍體草魴。本發(fā)明的遠(yuǎn)緣雜交方法具有受精率和孵化率高的特 點(diǎn)，成功地解決了許多遠(yuǎn)緣雜交后代不能存活或存活率較低的問題；且本發(fā)明雜交方法獲 得的三倍體草魴和二倍體草魴不僅體型美觀(體背高)，在飼養(yǎng)過程中很少發(fā)生疾病或死 亡的情況，具有抗病力強(qiáng)的特點(diǎn)。另外，以本發(fā)明的遠(yuǎn)緣雜交方法為基礎(chǔ)，還有望通過多代 選育從二倍體草魴中獲得四倍體草魴群體；且三倍體草魴不育，生長速度快，其生長速度是 二倍體草魴的2. 7倍，也具有良好的市場(chǎng)前景?？紤]到三倍體草魴和二倍體草魴中都具有 團(tuán)頭魴的遺傳物質(zhì)，因此本發(fā)明方法得到的雜交魚的肉質(zhì)有望得到改良，本發(fā)明中三倍體 草魴和二倍體草魴的獲得，在生物進(jìn)化和魚類遺傳育種方面具有重要的生物學(xué)意義。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例中草魚(早)X團(tuán)頭魴( 片；圖2為本發(fā)明實(shí)施例中草魚(早)X團(tuán)頭魴( 及核型圖(2η = 48)；圖3為本發(fā)明實(shí)施例中草魚(早)X團(tuán)頭魴( 片；圖4為本發(fā)明實(shí)施例中草魚(早)X團(tuán)頭魴( 及核型圖(3η = 72)；圖5為本發(fā)明實(shí)施例中草魚的DNA含量圖；圖6為本發(fā)明實(shí)施例中草魚(早)X團(tuán)頭魴( 圖；圖7為本發(fā)明實(shí)施例中草魚(早)X團(tuán)頭魴(
古)后代中二倍體草魴的外形照 $)后代中二倍體草魴的染色體圖 古)后代中三倍體草魴的外形照 $)后代中三倍體草魴的染色體圖
$ )后代中二倍體草魴的DNA含量 $ )后代中三倍體草魴的DNA含量圖；圖8為本發(fā)明實(shí)施例中草魚的血涂片圖(100X)；圖9為本發(fā)明實(shí)施例中草魚(早)X團(tuán)頭魴($ )后代中二倍體草魴的血涂片圖 (100X)；圖10為本發(fā)明實(shí)施例中草魚(早)X團(tuán)頭魴($ )后代中三倍體草魴的血涂片 圖(100X)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例在繁殖期前3 4個(gè)月，挑選性成熟特征明顯、體型好、體色鮮艷、體質(zhì)健壯、無病 無傷的雌性草魚和雄性團(tuán)頭魴作為遠(yuǎn)緣雜交的親魚進(jìn)行專池培育，保持水質(zhì)良好。特別是 在繁殖期前一個(gè)月左右合理投喂飼料，以精餌飼養(yǎng)親魚，每隔2 3天流水刺激一次，以促 進(jìn)親魚性腺發(fā)育成熟。在同年的5月中旬至6月上旬，當(dāng)水溫穩(wěn)定在20°C以上時(shí)，為挑選的親魚注射 LRH-A、HCG與地歐酮的混合催產(chǎn)劑進(jìn)行催產(chǎn)，LRH-A的用量為2 μ g/kg 3 μ g/kg，HCG的 用量為100 150IU/kg，地歐酮的用量為1 1. 5mg/kg ；先注射母本親魚，4h 5h后再注 射父本親魚，父本親魚的注射劑量減半；注射完畢后按1 (6 8)的數(shù)量比將母、父本親 魚放入同一水面面積為SOm2左右的產(chǎn)卵池中，然后視水情及時(shí)向池中沖水，尤其在產(chǎn)卵前 3h 4h，注入一定水量后，停止注水，讓魚在靜水中催產(chǎn)，直至其開始順利產(chǎn)卵和產(chǎn)精；注 射時(shí)采用胸鰭基部無鱗處腹腔一針注射法，以提高親魚的存活率。當(dāng)發(fā)現(xiàn)親魚在產(chǎn)卵池中相互追逐后，開始拉網(wǎng)打撈，對(duì)親魚進(jìn)行檢測(cè)(注意要用 軟質(zhì)網(wǎng)，操作要輕，水中檢測(cè)，并且檢測(cè)母本草魚時(shí)用特制的帆布擔(dān)架)，將催產(chǎn)效果良好的 雌性草魚用特制的帆布擔(dān)架包裹固定，然后與雄性團(tuán)頭魴進(jìn)行干法人工授精，把精卵擠入 干凈的瓷盆中，用干凈的攪拌器迅速不停地?cái)嚢?min 3min，然后迅速將受精卵輕輕倒入 事先準(zhǔn)備好的孵化環(huán)道(或人工孵化器)中進(jìn)行流水孵化，密度控制在40000 50000粒 /m2左右，水溫控制在19°C 20°C之間。魚苗全部孵出后，先于孵化環(huán)道中培育2 3天，待魚苗出現(xiàn)腰點(diǎn)后將魚苗轉(zhuǎn)入預(yù) 先培肥的面積為IOOm2的水泥池中飼養(yǎng)，1 2天后潑灑豆?jié){，2 3次/天，力求細(xì)、勻，直 至魚苗長到能正常攝食。孵化期間，統(tǒng)計(jì)胚胎的受精率和孵化率。草魚與團(tuán)頭魴遠(yuǎn)緣雜交魚的受精率和孵 化率分別為95%和80%，相比同類雜交試驗(yàn)，其受精率和孵化率得到了顯著地提高。再用外周血細(xì)胞培養(yǎng)的染色體倍性檢測(cè)方法對(duì)上述雜交魚的體細(xì)胞染色體數(shù)目 進(jìn)行抽樣檢測(cè)，我們發(fā)現(xiàn)草魚與團(tuán)頭魴雜交魚中存在兩種倍性的個(gè)體，一種為二倍體(2η =48)，含有一套草魚染色體和一套團(tuán)頭魴染色體(參見圖2)，我們稱其為二倍體草魴；另 一種為三倍體(3η = 72)，含有兩套草魚染色體和一套團(tuán)頭魴染色體(參見圖4)，我們稱其 為三倍體草魴。同時(shí)，以普通草魚為參照，用流式細(xì)胞儀測(cè)定上述篩選出的二倍體草魴和三倍體 草魴紅細(xì)胞中的DNA含量，測(cè)定結(jié)果分別如圖5、圖6、圖7所示。分析圖中數(shù)據(jù)可知，草魚、 二倍體草魴和三倍體草魴的DNA平均含量分別為60. 56,68. 63和98. 19，二倍體草魴與對(duì)照草魚的DNA平均含量比值為1. 133，該比值與預(yù)計(jì)的1 1理論比值間無顯著差異；三倍體 草魴與對(duì)照草魚的DNA平均含量比值為1.621，該比值與預(yù)計(jì)的1.5 1理論比值間無顯著 差異?？梢?，流式細(xì)胞DNA含量測(cè)定法的試驗(yàn)結(jié)果與外周血細(xì)胞培養(yǎng)的染色體倍性檢測(cè)方 法獲得的結(jié)果是一致的。另外再以普通草魚為參照，用血涂片法比較上述篩選出的十二個(gè)月齡的二倍體草 魴與三倍體草魴紅細(xì)胞大小，結(jié)果如下表1所示表1 草魚、二倍體草魴及三倍體草魴的血細(xì)胞大小比較 由表1的比較分析可見，二倍體草魴血細(xì)胞大小與母本草魚血細(xì)胞的大小相近， 而三倍體草魴血細(xì)胞的大小明顯要比草魚和二倍體草魴血細(xì)胞要大(參見圖8、圖9、圖 10)。另外，在二倍體草魴中未發(fā)現(xiàn)“ 鈴狀”細(xì)胞核血細(xì)胞，而在三倍體草魴中發(fā)現(xiàn)有“ 鈴狀”細(xì)胞核血細(xì)胞(參見圖10中黑色箭頭所指處)。在相同條件下，我們對(duì)上述培育出的十二個(gè)月齡的二倍體草魴、三倍體草魴、草 魚、團(tuán)頭魴的體重、側(cè)線鱗數(shù)、側(cè)線上鱗數(shù)、側(cè)線下鱗數(shù)、背鰭條數(shù)、腹鰭條數(shù)、臀鰭條數(shù)等生 物學(xué)性狀進(jìn)行隨機(jī)抽樣檢測(cè)，檢測(cè)的結(jié)果如下表2、表3所示表2 二倍體草魴與三倍體草魴生長速度比較(單位克) 表3 草魚、團(tuán)頭魴及雜交后代的可數(shù)性狀比較(單位片或條) 注上表中大寫的羅馬數(shù)字代表硬棘條的數(shù)目，阿拉伯?dāng)?shù)字代表鰭條的數(shù)目。由上表2可見，三倍體草魴的生長速度要明顯快于二倍體草魴(三倍體草魴的生 長速度是二倍體草魴的2. 7倍)。由上表3可見，二倍體草魴(參見圖1)和三倍體草魴(參 見圖3)具有雜交特征，例如二倍體草魴與三倍體草魴的側(cè)線鱗數(shù)分別為46 47、43 46， 介于草魚的39 42和團(tuán)頭魴的49 52之間；二倍體草魴與三倍體草魴的部分性狀則偏 向父本，例如背鰭條式分別為ΠΙ+8和111+9，均超過了其母本III+7的范圍，靠近父本的 III+8 9。另外，從圖1、圖3所示的雜交魚外形圖上比較可以發(fā)現(xiàn)，雖然兩種雜交魚貌似 其母本草魚，但是也顯示出父本團(tuán)頭魴的高背特征，例如二倍體草魴和三倍體草魴的側(cè)線 上鱗數(shù)與側(cè)線下鱗數(shù)(分別為8、6和8、5 6)都要高于其母本草魚的(6 7、4 5)，表 現(xiàn)出體形優(yōu)美的特征。由上可見，本實(shí)施例方法獲得的三倍體草魴和二倍體草魴，不僅遺傳了父母本親 魚的多項(xiàng)優(yōu)良性狀，還具有受精率和孵化率高的特點(diǎn)，在生物進(jìn)化研究和魚類遺傳育種方 面具有重要的生物學(xué)意義。本實(shí)施例中，外周血細(xì)胞培養(yǎng)的染色體倍性檢測(cè)方法操作步驟為1)在超凈工作 臺(tái)中配制培養(yǎng)基，IOOml培養(yǎng)基含以下成分84ml RPMI-1640,15ml小牛血清，2支PHA，Iml 0.1%的肝素鈉，以7. 5 ^NaHCO3 (無菌)或IN HCl調(diào)pH至7. 2 7. 4 ；2)用注射器吸取 少量滅菌肝素鈉溶液，于用碘酒消毒后的實(shí)驗(yàn)魚尾部靜脈取血；3)按每IOml培養(yǎng)液中加入 約0. 2ml抗凝血的標(biāo)準(zhǔn)將抗凝血加入培養(yǎng)基中，于24°C 5%二氧化碳濃度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 68h 72h，培養(yǎng)期間，定期輕搖勻，以使細(xì)胞充分接觸培養(yǎng)基；4)終止培養(yǎng)前24h，在培養(yǎng)液 中用Iml注射器滴加10 μ g/ml的秋水仙堿，使終濃度為0. 05 μ g/ml 0. 07 μ g/ml (以上 步驟1 4均需無菌操作)；5)將培養(yǎng)物全部轉(zhuǎn)入潔凈的IOml離心管中，以IOOOrpm離心 5min，棄上清液；6)向離心管中加入低滲液9ml，混勻，低滲25min 30min ；7)加入Iml固 定液，輕輕混勻后IOOOrpm離心5min，棄上清液；8)加入5ml固定液，輕輕混勻，靜置20min 后IOOOrpm離心5min，棄上清液；9)重復(fù)步驟4 一次；10)視最后細(xì)胞數(shù)量多少加入適量固 定液制成細(xì)胞懸液(一般為Iml 2ml)后，吸取細(xì)胞懸液自20cm 30cm高處滴片，輕吹 散，空氣中自然干燥；11) Giemsa染液染色20min 40min，細(xì)水流沖洗載玻片背面去除染 液，氣干后鏡檢、拍照。本實(shí)施例中，流式細(xì)胞DNA含量測(cè)定法的操作步驟為用經(jīng)肝素鈉潤濕的一次性 注射器從魚尾靜脈血管采血約0. 2mL，注入裝有0. 8%生理鹽水的Eppendorf管中，在血液 和生理鹽水混合液中加入ImL細(xì)胞核提取液DAPI-A(nuclei extraction solution，德國 Partec Gmbh提供)，處理時(shí)間IOmin 15min ；樣品經(jīng)過20 μ m尼龍濾器(德國Partec GmbH 提供)過濾；DNA染色液(DAPI-B，德國Partec GmbH提供)靜置于暗處染色樣品約5min lOmin，然后上機(jī)檢測(cè)。本實(shí)施例中，血涂片法的操作步驟為1)用碘酒棉簽擦拭魚尾靜脈部位，用一次 性注射器取適量血液，輕推一滴于干凈載玻片一端，使血滴附于玻片面上；2)以一只手拿 該載玻片的兩端，迅速用另一只手拿住另一載玻片的一端，在滴有血液的載玻片上由前向 后接觸血滴，使兩載玻片約成45°角，輕輕移動(dòng)，使血滴成一直線，然后由前向后推為一均 勻的薄片；3)涂片在空氣中干燥后置于染色架上，滴加瑞氏染色液，使涂片被染色液覆蓋； 4)染色5min IOmin后，于載玻片背面用蒸餾水均勻沖洗，見涂片呈粉紅色后，自然晾干，
7最后鏡檢。
權(quán)利要求
一種草魚與團(tuán)頭魴亞科間遠(yuǎn)緣雜交的方法，包括以下步驟首先挑選雌性草魚和雄性團(tuán)頭魴作為親魚進(jìn)行專池培育，然后在繁殖季節(jié)對(duì)所述親魚進(jìn)行人工催產(chǎn)，挑選催產(chǎn)效果良好的親魚進(jìn)行干法人工授精，對(duì)授精完成后的受精卵進(jìn)行流水孵化，孵化的魚苗在大面積的水泥池中進(jìn)行飼養(yǎng)，對(duì)飼養(yǎng)后的雜交魚進(jìn)行檢測(cè)、篩分，獲得三倍體草魴和二倍體草魴。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的草魚與團(tuán)頭魴亞科間遠(yuǎn)緣雜交的方法，其特征在于，具體包 括以下步驟1)親魚的選擇和培育在繁殖期前3 4個(gè)月，挑選性成熟特征明顯、體征良好的雌性 草魚和雄性團(tuán)頭魴作為遠(yuǎn)緣雜交的親魚進(jìn)行專池培育，保持水質(zhì)良好；在繁殖期前一個(gè)月 以精餌飼養(yǎng)所述親魚，每隔2 3天流水刺激一次，以促進(jìn)親魚性腺發(fā)育成熟；2)人工催產(chǎn)在同年的5月中旬至6月上旬，當(dāng)水溫穩(wěn)定在20°C以上時(shí)，為上述親魚注 射黃體素釋放激素類似物、絨毛膜促性腺激素與地歐酮的混合催產(chǎn)劑進(jìn)行催產(chǎn)，所述黃體 素釋放激素類似物的用量為2 μ g/kg 3 μ g/kg，絨毛膜促性腺激素的用量為100IU/kg 150IU/kg，地歐酮的用量為lmg/kg 1. 5mg/kg ；先注射母本親魚，4h 5h后再注射父本親 魚，父本親魚的注射劑量減半；注射完畢后按1 (6 8)的數(shù)量比將母、父本親魚放入同 一產(chǎn)卵池中，然后視水情及時(shí)向池中沖水，在產(chǎn)卵前3h 4h，注入一定水量后，停止注水， 讓魚在靜水中催產(chǎn)，直至其開始順利產(chǎn)卵和產(chǎn)精；3)授精孵化挑選產(chǎn)卵順利的母本親魚，然后與產(chǎn)精量大的父本親魚進(jìn)行干法人工授 精，得到的受精卵置于水溫為19°C 20°C的孵化環(huán)道或人工孵化器中進(jìn)行流水孵化；4)飼養(yǎng)魚苗全部孵出后，于孵化環(huán)道或人工孵化器中繼續(xù)培育2 3天，待魚苗出現(xiàn) 腰點(diǎn)后將魚苗轉(zhuǎn)入預(yù)先培肥的水泥池中飼養(yǎng)，1 2天后潑灑豆?jié){，2 3次/天，魚苗長成 后經(jīng)檢測(cè)、篩分獲得三倍體草魴和二倍體草魴。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的草魚與團(tuán)頭魴亞科間遠(yuǎn)緣雜交的方法，其特征在于所 述的檢測(cè)操作具體是指利用流式細(xì)胞DNA含量測(cè)定法、外周血細(xì)胞培養(yǎng)的染色體倍性檢測(cè) 方法和血涂片法對(duì)飼養(yǎng)后的魚苗分別進(jìn)行DNA含量、染色體數(shù)目以及血細(xì)胞大小的檢測(cè)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種鯉科魚類中亞科間遠(yuǎn)緣雜交的方法，具體公開了一種草魚與團(tuán)頭魴亞科間遠(yuǎn)緣雜交的方法，包括以下步驟首先挑選雌性草魚和雄性團(tuán)頭魴作為親魚進(jìn)行專池培育，然后在繁殖季節(jié)對(duì)所述親魚進(jìn)行人工催產(chǎn)，挑選催產(chǎn)效果良好的親魚進(jìn)行干法人工授精，對(duì)授精完成后的受精卵進(jìn)行流水孵化，孵化的魚苗在大面積的水泥池中進(jìn)行飼養(yǎng)，對(duì)飼養(yǎng)后的雜交魚進(jìn)行檢測(cè)、篩分，獲得三倍體草魴和二倍體草魴。本發(fā)明的方法受精率高、孵化率高、后代性狀優(yōu)良，對(duì)遺傳育種具有重要意義。
文檔編號(hào)A01K61/00GK101884314SQ20101023664
公開日2010年11月17日 申請(qǐng)日期2010年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月26日
發(fā)明者何偉國, 劉剛, 劉少軍, 劉筠, 周工健, 張純, 張虹, 羅凱坤, 肖軍, 胡婕, 趙如榕, 陶敏 申請(qǐng)人:湖南師范大學(xué)