專利名稱：一種活性粘紅酵母粉的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種活性粘紅酵母粉的制備方法，具體涉及一種采用直投式發(fā)酵劑的 快捷方法，生產(chǎn)活性粘紅酵母粉，屬生物工程領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
粘紅酵母含有豐富的氨基酸、蝦青素等多種營養(yǎng)成分，不僅在醫(yī)藥、食品、化工和 農(nóng)業(yè)等方面的到了越來越廣泛的重視，而且粘紅酵母是優(yōu)良的蝦青素生產(chǎn)菌和極具潛力的 鮮活單細胞生態(tài)餌料。在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面可代替單胞藻等傳統(tǒng)餌料用于海產(chǎn)動物的幼體開口 餌料和整個幼體時期的補充性餌料，增強水產(chǎn)動物免疫力、替代抗生素使用，是生態(tài)養(yǎng)殖的 優(yōu)良添加劑，是天然、健康的微生態(tài)活菌制劑。類胡蘿卜素主要包括胡蘿卜素、蝦青素，具有預(yù)防血管硬化、抑制腫瘤發(fā)生、 增加宿主免疫力和抗氧化能力等功能，已被FAO和WHO等國際組織認定為A類營養(yǎng)色素，并 在50多個國家和地區(qū)獲準作為營養(yǎng)、著色雙重功用的食品添加劑。β -胡蘿卜素被廣泛用 于醫(yī)藥保健、食品和化妝品行業(yè)。由于合成色素的毒性問題，許多國家限制合成色素的使 用。利用粘紅酵母生物合成β-胡蘿卜素具有以下優(yōu)點菌體無毒，并含有豐富的蛋白質(zhì)和 維生素；可利用蔗渣、廢糖蜜等進行培養(yǎng)，成本低且周期短、發(fā)酵控制簡單，有利于工業(yè)化生 產(chǎn)，因此，利用粘紅酵母生物合成β胡蘿卜素，將成為天然胡蘿卜素的重要來源。國內(nèi)為數(shù)不多的幾家企業(yè)生產(chǎn)粘紅酵母及其系列產(chǎn)品采用三級液態(tài)發(fā)酵或者固 態(tài)發(fā)酵的生產(chǎn)方式，存在著發(fā)酵周期長，產(chǎn)品活性低，操作復(fù)雜，容易感染雜菌等諸多缺陷， 本發(fā)明采用直投式發(fā)酵劑的形式，大大縮短了發(fā)酵時間，提高生產(chǎn)效率及設(shè)備利用率的同 時提高了產(chǎn)品純度及生物活性，該發(fā)明的實施，可帶來巨大的經(jīng)濟效益和社會效益，具有廣 闊的開發(fā)前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種活性粘紅酵母粉的制備方法。本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的本發(fā)明中所涉及的百分比除另有注明之外為質(zhì)量 比，本發(fā)明的產(chǎn)品采用這樣的方法來制備的1.粘紅酵母的選擇及培養(yǎng)基的制備本發(fā)明選擇的粘紅酵母(Rhodotorula glutinis)購置于中國工業(yè)微生物菌種包 藏中心，編號為32881，菌種培養(yǎng)基為5° Β 麥芽汁。2.直投式發(fā)酵劑的制備2.1母發(fā)酵劑的制備量取粘紅酵母菌種培養(yǎng)基200ml于1只500ml三角瓶內(nèi)，121°C滅菌20分鐘冷卻 至30°C，用接種環(huán)接種粘紅酵母菌株斜面一環(huán)，在28-30°C、150轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng)培養(yǎng)48 小時，作為母發(fā)酵劑。2. 2生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備
首先配置20%的脫脂奶乳濁液，121°C滅菌20分鐘冷卻至28_30°C，按5%體積比 例接種母發(fā)酵劑，28-300C、150轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng)培養(yǎng)48小時，檢測脫脂奶乳濁液粘紅酵母 活菌數(shù)彡IO9個/ml，視同為發(fā)酵成熟，如果活菌數(shù)< IO9個/ml，繼續(xù)培養(yǎng)，直至達到IO9個 /ml，結(jié)束培養(yǎng)，凍干待用。2. 3直投式發(fā)酵劑的制備將成熟的生產(chǎn)發(fā)酵劑在無菌條件下導(dǎo)入玻璃安瓶中，液面高度低于0. 8-lcm，加蓋 瓶塞后放入-30°C冰柜速凍，凍結(jié)后將玻璃安瓶用托盤乘裝，放入凍干機進行冷凍干燥，制 得直投式發(fā)酵劑。3.活性粘紅酵母粉的制備3.1發(fā)酵培養(yǎng)基的制備葡萄糖2-5%蔗糖3%硫酸鎂0.15%酵母膏(水分含量< 30% )0· 2%磷酸氫二鉀0.5%尿素0.2%硫酸銨0. 1 %硝酸鉀0. 1 %pH 值 4-53. 2粘紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)接種量每噸發(fā)酵培養(yǎng)基接種150g直投式發(fā)酵劑。培養(yǎng)條件28-30°C，通風量80-95m7小時，培養(yǎng)時間48_55小時。營養(yǎng)源流加條件按發(fā)酵培養(yǎng)基重量添加營養(yǎng)源，包括蔗糖2%，尿素0. 3%，硫 酸銨0.1%，將三種原料混合后配制成30 %的溶液，發(fā)酵24小時以后連續(xù)流加營養(yǎng)源，18小 時加完。3. 3粘紅酵母濃縮采用管式離心機，5000轉(zhuǎn)/分鐘，取酵母濃縮液，按酵母濃縮液重量添加0. 蔗 糖酯，0. 05%單硬脂酸甘油酯，0. 低聚木糖，1.5-5%糊精，將這些添加物質(zhì)充分溶解于 酵母濃縮液中攪拌均勻。3. 4粘紅酵母成品制備50°C通風干燥使其水分在20-25%，進行造粒，然后50°C繼續(xù)干燥，使顆粒水分低 于5%，然后進行真空包裝。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作更詳細的描述實施例一1.粘紅酵母的選擇及培養(yǎng)基的制備本發(fā)明選擇的粘紅酵母(Rhodotorula glutinis)購置于中國工業(yè)微生物菌種包 藏中心，編號為32881，菌種培養(yǎng)基為5° Β 麥芽汁。
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2.直投式發(fā)酵劑的制備2. 1母發(fā)酵劑的制備量取粘紅酵母菌種培養(yǎng)基200ml于1只500ml三角瓶內(nèi)，121°C滅菌20分鐘冷卻 至30°C，用接種環(huán)接種粘紅酵母菌株斜面一環(huán)，在28-30°C、150轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng)培養(yǎng)48 小時，作為母發(fā)酵劑。2. 2生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備首先配置20%的脫脂奶乳濁液，121°C滅菌20分鐘冷卻至28_30°C，按5%體積比 例接種母發(fā)酵劑，28-300C、150轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng)培養(yǎng)48小時，檢測脫脂奶乳濁液粘紅酵母 活菌數(shù)彡IO9個/ml，視同為發(fā)酵成熟，如果活菌數(shù)< IO9個/ml，繼續(xù)培養(yǎng)，直至達到IO9個 /ml，結(jié)束培養(yǎng)，凍干待用。2. 3直投式發(fā)酵劑的制備將成熟的生產(chǎn)發(fā)酵劑在無菌條件下導(dǎo)入玻璃安瓶中，液面高度低于0. 8-lcm，加蓋 瓶塞后放入-30°C冰柜速凍，凍結(jié)后將玻璃安瓶用托盤乘裝，放入凍干機進行冷凍干燥，制 得直投式發(fā)酵劑。3.活性粘紅酵母粉的制備3. 1發(fā)酵培養(yǎng)基的制備葡萄糖2-5%蔗糖3%硫酸鎂0.15%酵母膏(水分含量< 30% )0· 2%磷酸氫二鉀0.5%尿素0.2%硫酸銨0. 1 %硝酸鉀0. 1 %pH 值 4-53. 2粘紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)接種量每噸發(fā)酵培養(yǎng)基接種150g直投式發(fā)酵劑。培養(yǎng)條件28-30°C，通風量80-95m7小時，培養(yǎng)時間48_55小時。營養(yǎng)源流加條件按發(fā)酵培養(yǎng)基重量添加營養(yǎng)源，包括蔗糖2%，尿素0. 3%，硫 酸銨0.1%，將三種原料混合后配制成30 %的溶液，發(fā)酵24小時以后連續(xù)流加營養(yǎng)源，18小 時加完。3. 3粘紅酵母濃縮采用管式離心機，5000轉(zhuǎn)/分鐘，取酵母濃縮液，按酵母濃縮液重量添加0. 蔗 糖酯，0. 05%單硬脂酸甘油酯，0. 低聚木糖，1.5%糊精，將這些添加物質(zhì)充分溶解于酵 母濃縮液中攪拌均勻。3. 4粘紅酵母成品制備50°C通風干燥使其水分在20-25%，進行造粒，然后50°C繼續(xù)干燥，使顆粒水分低 于5%，然后進行真空包裝。實施例二
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1.粘紅酵母的選擇及培養(yǎng)基的制備本發(fā)明選擇的粘紅酵母(Rhodotorula glutinis)購置于中國工業(yè)微生物菌種包 藏中心，編號為32881，菌種培養(yǎng)基為5° Β 麥芽汁。2.直投式發(fā)酵劑的制備2. 1母發(fā)酵劑的制備量取粘紅酵母菌種培養(yǎng)基200ml于1只500ml三角瓶內(nèi)，121°C滅菌20分鐘冷卻 至30°C，用接種環(huán)接種粘紅酵母菌株斜面一環(huán)，在28-30°C、150轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng)培養(yǎng)48 小時，作為母發(fā)酵劑。2. 2生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備首先配置20%的脫脂奶乳濁液，121°C滅菌20分鐘冷卻至28_30°C，按5%體積比 例接種母發(fā)酵劑，28-300C、150轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng)培養(yǎng)48小時，檢測脫脂奶乳濁液粘紅酵母 活菌數(shù)彡IO9個/ml，視同為發(fā)酵成熟，如果活菌數(shù)< IO9個/ml，繼續(xù)培養(yǎng)，直至達到IO9個 /ml，結(jié)束培養(yǎng)，凍干待用。2. 3直投式發(fā)酵劑的制備將成熟的生產(chǎn)發(fā)酵劑在無菌條件下導(dǎo)入玻璃安瓶中，液面高度低于0. 8-lcm，加蓋 瓶塞后放入-30°C冰柜速凍，凍結(jié)后將玻璃安瓶用托盤乘裝，放入凍干機進行冷凍干燥，制 得直投式發(fā)酵劑。3.活性粘紅酵母粉的制備3. 1發(fā)酵培養(yǎng)基的制備葡萄糖2-5%蔗糖3%硫酸鎂0.15%酵母膏(水分含量< 30% )0· 2%磷酸氫二鉀0.5%尿素0.2%硫酸銨0. 1 %硝酸鉀0. 1 %pH 值 4-53. 2粘紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)接種量每噸發(fā)酵培養(yǎng)基接種150g直投式發(fā)酵劑。培養(yǎng)條件28-30°C，通風量80-95m7小時，培養(yǎng)時間48_55小時。營養(yǎng)源流加條件按發(fā)酵培養(yǎng)基重量添加營養(yǎng)源，包括蔗糖2%，尿素0. 3%，硫 酸銨0.1%，將三種原料混合后配制成30 %的溶液，發(fā)酵24小時以后連續(xù)流加營養(yǎng)源，18小 時加完。3. 3粘紅酵母濃縮采用管式離心機，5000轉(zhuǎn)/分鐘，取酵母濃縮液，按酵母濃縮液重量添加0. 蔗 糖酯，0. 05%單硬脂酸甘油酯，0. 低聚木糖，5%糊精，將這些添加物質(zhì)充分溶解于酵母 濃縮液中攪拌均勻。3. 4粘紅酵母成品制備
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50°C通風干燥使其水分在2025%，進行造粒，然后50°C繼續(xù)干燥，使顆粒水分低 于5%，然后進行真空包裝。
權(quán)利要求
一種活性粘紅酵母粉的制備方法，其特征是每噸發(fā)酵培養(yǎng)基接種150g直投式發(fā)酵劑，28 30℃，通風量80 95m3/小時，經(jīng)過流加營養(yǎng)源，培養(yǎng)時間48 55小時，然后采用管式離心機，5000轉(zhuǎn)/分鐘，取酵母濃縮液，按酵母濃縮液重量添加0.1％蔗糖酯，0.05％單硬脂酸甘油酯，0.1％低聚木糖，1.5 5％糊精，將這些添加物質(zhì)充分溶解于酵母濃縮液中攪拌均勻，50℃通風干燥使其水分在20 25％，進行造粒，然后50℃繼續(xù)干燥，使顆粒水分低于5％，然后進行真空包裝。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種活性粘紅酵母粉的制備方法，其特征是發(fā)酵培 養(yǎng)基采用這樣方法制備葡萄糖2-5%，蔗糖3 %，硫酸鎂0. 15%，酵母膏(水分含量 < 30% )0. 2%，磷酸氫二鉀0. 5%，尿素0. 2%，硫酸銨0. 1%，硝酸鉀0. 1%，ρΗ值4-5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種活性粘紅酵母粉的制備方法，其特征是直投式發(fā)酵 劑采用這樣方法制備量取5° Be麥芽汁200ml于1只500ml三角瓶內(nèi)，121°C滅菌20分 鐘冷卻至30°C，用接種環(huán)接種粘紅酵母菌株斜面一環(huán)，在28-30°C、150轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng) 培養(yǎng)48小時，作為母發(fā)酵劑；然后配置20%的脫脂奶乳濁液，121 °C滅菌20分鐘冷卻至 28-300C，按5%體積比例接種母發(fā)酵劑，28-300C、150轉(zhuǎn)/分鐘搖床培養(yǎng)培養(yǎng)48小時，檢測 脫脂奶乳濁液粘紅酵母活菌數(shù)> IO9個/ml，視同為發(fā)酵成熟，如果活菌數(shù)< IO9個/ml，繼 續(xù)培養(yǎng)，直至達到IO9個/ml，結(jié)束培養(yǎng)，凍干待用；將成熟的生產(chǎn)發(fā)酵劑在無菌條件下導(dǎo)入 玻璃安瓶中，液面高度低于0. 8-lcm,加蓋瓶塞后放入-30°C冰柜速凍，凍結(jié)后將玻璃安瓶 用托盤乘裝，放入凍干機進行冷凍干燥，制得直投式發(fā)酵劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種活性粘紅酵母粉的制備方法，其特征是流加營養(yǎng)源 采用這樣方法制備按發(fā)酵培養(yǎng)基重量添加營養(yǎng)源，包括蔗糖2%，尿素0.3%，硫酸銨 0. 1%，將三種原料混合后配制成30%的溶液，進行流加。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種活性粘紅酵母粉的制備方法，其特征是發(fā)酵24小時以 后連續(xù)流加營養(yǎng)源，18小時加完。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種活性粘紅酵母粉的制備方法，以粘紅酵母為出發(fā)菌株，首先制備直投式發(fā)酵劑凍干菌粉末，每噸發(fā)酵培養(yǎng)基接種150g直投式發(fā)酵劑，28-30℃，通風量80-95m3/小時，24小時后連續(xù)流加由2％蔗糖、0.3％尿素、0.1％硫酸銨配制的營養(yǎng)源，18小時加完，培養(yǎng)時間48-55小時，然后采用管式離心機，5000轉(zhuǎn)/分鐘，取酵母濃縮液，按酵母濃縮液重量添加0.1％蔗糖酯，0.05％單硬脂酸甘油酯，0.1％低聚木糖，1.5-5％糊精，將這些添加物質(zhì)充分溶解于酵母濃縮液中攪拌均勻，50℃通風干燥使其水分在20-25％，進行造粒，然后50℃繼續(xù)干燥，使顆粒水分低于5％，然后進行真空包裝。
文檔編號A23K1/16GK101912041SQ201010242120
公開日2010年12月15日 申請日期2010年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月2日
發(fā)明者滕春紅, 陳成 申請人:哈爾濱市海澳斯生物科技開發(fā)有限公司