專利名稱：木霉在提高藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制效果中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種木霉在提高藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制效果中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
木霉(Trichoderma)分類地位為木霉屬(Trichoderma)，是真菌門、半知菌亞門、 絲孢綱、叢梗孢目的一屬。形態(tài)特征菌絲透明有隔，分枝豐茂，分生孢子梗有對生或互生 分枝，分枝上可再分枝，分枝頂端為小梗，瓶狀，束生、對生、互生或單生，由小梗生出分生孢 子，多個(gè)分生孢子粘聚成球形的孢子頭。木霉俗稱綠霉。屬于真菌門，半知菌亞門。在自 然界中分布極廣，對各種食用菌的致病力強(qiáng)，不僅危害菌絲體生長階段，也危害食用菌子實(shí) 體，它是生產(chǎn)中發(fā)生最普遍、危害性最嚴(yán)重的雜菌之一，不論制種還是栽培，也不論生料、熟 料、發(fā)酵料、發(fā)菌期間均可發(fā)生，甚至在出菇階段也有發(fā)生，個(gè)別品種如草菇的菌種在完成 發(fā)菌后亦可發(fā)生該種雜菌，并且發(fā)生的溫度范圍也越來越廣，不少地區(qū)的銀耳、香菇，近年 的平菇、雞腿菇等生產(chǎn)中曾發(fā)生毀滅性的污染，木霉就是主要雜菌之一。木霉能生產(chǎn)纖維素 酶，合成核黃素，生產(chǎn)抗生素，轉(zhuǎn)化留族化合物。木霉也常寄生于某些真菌的子實(shí)體上，因此 是栽培蘑菇的勁敵。木霉的特征是產(chǎn)生大量的暗綠色孢子，已發(fā)現(xiàn)了許多木霉品種，如多孢木霉、康氏 木霉、綠色木霉等。木霉菌絲纖細(xì)，白色透明，有分枝，分隔。菌落初期呈白色斑塊，棉絮狀， 產(chǎn)生孢子后逐漸變?yōu)榫G色。木霉的孢子梗呈松塔狀，長在菌絲的短側(cè)枝上，常作2-3級分 枝。木霉主要生存在朽木、枯枝落葉、土壤、有機(jī)肥、植物殘?bào)w上和空氣中。木霉廣泛分 布于各種腐木、枯枝落葉、植物殘?bào)w、土壤和空氣中，自然界到處都可以找到它的家族成員。目前，沒有發(fā)現(xiàn)木霉具有抑制農(nóng)業(yè)病菌的作用。
發(fā)明創(chuàng)造內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種木霉在提高藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制效果中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的應(yīng)用為木霉在提高抗菌藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制效果中的應(yīng)用。所述抗菌藥劑為對西瓜枯萎病菌具有殺菌或抑菌效果的藥劑。所述西瓜枯萎病菌 優(yōu)選為尖孢鐮刀菌西瓜?；?，購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心(accc)，保藏號 為:30024o所述抗菌藥劑優(yōu)選自代森錳鋅原藥、代森錳鋅制劑、百菌清原藥、百菌清制劑、五 氯硝基苯原藥、五氯硝基苯制劑、多菌靈原藥、多菌靈制劑、撲海因原藥、撲海因制劑、咪鮮 胺原藥和咪鮮胺制劑中的一種或兩種以上任意混合。所述代森錳鋅制劑優(yōu)選為代森錳鋅可濕性粉劑，所述百菌清制劑優(yōu)選為百菌清可 濕性粉劑，所述五氯硝基苯制劑優(yōu)選為五氯硝基苯可濕性粉劑，所述多菌靈制劑優(yōu)選為多 菌靈可濕性粉劑；所述撲海因制劑優(yōu)選為撲海因可濕性粉劑，所述咪鮮胺制劑優(yōu)選為咪鮮 胺水乳劑。
所述代森錳鋅制劑優(yōu)選為80%代森錳鋅可濕性粉劑，所述百菌清制劑優(yōu)選為 75%百菌清可濕性粉劑，所述五氯硝基苯制劑優(yōu)選為20%五氯硝基苯可濕性粉劑，所述多 菌靈制劑優(yōu)選為50%多菌靈可濕性粉劑；所述撲海因制劑為50%撲海因可濕性粉劑，所述 咪鮮胺制劑優(yōu)選為45%咪鮮胺水乳劑；所述百分含量為質(zhì)量百分含量。所述木霉優(yōu)選為保藏于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物菌種保藏管理中心的木霉菌株，保 藏號為30121。所述木霉在提高抗菌藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制效果的方法是將木霉與所述抗 菌藥劑混合使用。本發(fā)明還提供一種西瓜枯萎病菌抑制劑，由抑菌藥劑和木霉組成；所述抗菌藥劑 選自代森錳鋅原藥、代森錳鋅制劑、百菌清原藥、百菌清制劑、五氯硝基苯原藥、五氯硝基苯 制劑、多菌靈原藥、多菌靈制劑、撲海因原藥、撲海因制劑、咪鮮胺原藥和咪鮮胺制劑中的一 種或兩種以上任意混合。所述代森錳鋅制劑為代森錳鋅可濕性粉劑，所述百菌清制劑為百菌清可濕性粉 劑，所述五氯硝基苯制劑為五氯硝基苯可濕性粉劑，所述多菌靈制劑為多菌靈可濕性粉劑； 所述撲海因制劑為撲海因可濕性粉劑，所述咪鮮胺制劑為咪鮮胺水乳劑。所述代森錳鋅制劑為80%代森錳鋅可濕性粉劑，所述百菌清制劑為75%百菌清 可濕性粉劑，所述五氯硝基苯制劑為20%五氯硝基苯可濕性粉劑，所述多菌靈制劑為50% 多菌靈可濕性粉劑；所述撲海因制劑為50%撲海因可濕性粉劑，所述咪鮮胺制劑為45%咪 鮮胺水乳劑；所述百分含量為質(zhì)量百分含量。實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明的應(yīng)用可以大大提高藥劑的防治效果，提高藥劑對西瓜枯萎病的 抑菌效果，減少化學(xué)藥劑的使用量，大大降低殺菌防病的成本，對環(huán)境保護(hù)作出貢獻(xiàn)。下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。


圖1為咪酰胺及木霉對西瓜枯萎菌的抑制效果(左，對照；中，咪酰胺；右，咪酰胺 +木霉)圖2為多菌靈及木霉對西瓜枯萎菌的抑制效果(左，對照；中，多菌靈；右，多菌靈 +木霉)
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1、木霉在提高藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制效果中的應(yīng)用1、使用材料菌株西瓜枯萎病病原菌(鐮刀菌(Fusarium oxysporumf sp. Melonis)，下簡稱 FW，尖孢鐮刀菌西瓜專化型，購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心(accc)，保藏號為 30024 ；木霉菌(Trichoderma. sp) (V)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物菌種保藏管理中心(accc)， 保藏號30121。藥劑①75%百菌清可濕性粉劑(商品名達(dá)科寧，先正達(dá)公司)②20%五氯硝基 苯可濕性粉劑(商品名五洲，山西省臨汾有機(jī)化工廠)③50%多菌靈可濕性粉劑(商品 名多菌靈，上海諾爾化工有限公司)④50%撲海因可濕性粉劑(通用名異菌脲，拜耳作
4物科學(xué)公司)⑤45%咪鮮胺水乳劑(商品名滴翠，青島陽光農(nóng)藥有限公司)。2、木霉和藥劑混合使用對西瓜枯萎病菌的抑制作用將西瓜枯萎病菌接種于涂有步驟1所述的藥劑的培養(yǎng)基上，然后接種木霉菌 (Trichoderma. sp) (V)，檢測藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制作用，以步驟1所述的藥劑單獨(dú)使 用和無藥劑培養(yǎng)基作為對照，具體方法如下所示用培養(yǎng)在PDA培養(yǎng)基上生長5天的西瓜枯萎病菌，用直徑0. 5cm的打孔器沿菌落 邊緣打取菌餅，菌面朝下，接種涂有步驟1所述的藥劑(用無菌水配制一定濃度的藥劑，加 到20毫升溶化的PDA培養(yǎng)基中，制成含下述藥劑終濃度的PDA平板。各種藥劑的終濃度 為75%百菌清一終濃度1. 25% ；50%多菌靈一終濃度0. 83% ；20%五氯硝基苯一終濃 度0. 4%0 ；50%撲海因一終濃度0. 5%0 ；45%咪鮮胺一終濃度0. 23%。，上述％。均表示質(zhì)量 含量)的直徑9cm PDA平板中央，用同樣方法，取0.5cm直徑的木霉菌餅，接種在西瓜枯萎 病菌的周圍以正三角形狀放置，每個(gè)木霉菌餅與病原菌餅兩者相距3cm，以病原菌單獨(dú)放置 在含有上述藥劑和不含藥劑的PDA平板上培養(yǎng)作為對照；每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，28°C恒溫 培養(yǎng)，采用十字交叉法測量對峙培養(yǎng)中西瓜枯萎病菌和病原真菌菌落直徑以及對照中病原 菌的直徑，計(jì)算抑菌率。抑菌率(％)=[(對照菌落直徑-對峙菌落直徑)/對照菌落直 徑]X 100。其中，對峙培養(yǎng)菌落為在上述含有藥劑并接種木霉菌的平板上培養(yǎng)的病原菌或 者單獨(dú)在含有藥劑的平板上培養(yǎng)的病原菌。對照菌落為以病原菌單獨(dú)放置在不含上述藥劑 的平板中培養(yǎng)的病原菌。PDA培養(yǎng)基馬鈴薯200克/升，葡萄糖20克/升，瓊脂粉20克/升，其余為蒸餾 水。木霉和藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制作用見下表1所示。由表1可知，咪酰胺單獨(dú) 使用時(shí)的抑制率為最高，可達(dá)74. 3%，多菌靈的效果最差，僅有3. 9%，其他處理對FW的抑 制率都不超過50%，而藥劑與木霉共同處理大大提高了對FW的抑制率，特別是對多菌靈、 五氯硝基苯和撲海因這三種藥劑對FW的抑制率有顯著的提高效果。在木霉和藥劑共同作 用的處理中以藥劑⑤即咪酰胺和木霉共同作用，對FW的抑制效果最好，其抑制率能達(dá)到 79.4%，在藥劑單獨(dú)作用和藥劑與木霉聯(lián)合使用兩種情況下，聯(lián)合使用的效果遠(yuǎn)高于藥劑 單獨(dú)使用的效果，兩種處理之間達(dá)到極顯著。即化學(xué)藥劑在木霉的作用下，增強(qiáng)了對病原真 菌的抑制作用，增加了對病原菌的防治效果。圖1、圖2是幾種處理對FW的抑制效果照片。 圖2咪酰胺及木霉對西瓜枯萎菌的抑制效果(左，對照；中，咪酰胺；右，咪酰胺+木霉)圖 3為多菌靈及木霉對西瓜枯萎菌的抑制效果(左，對照；中，多菌靈；右，多菌靈+木霉)。表1綠色木霉和藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制作用及方差分析
處理平均抑制率(％)顯著水平α =0. 05α=0. 01⑤+V79. 3AA⑤74. 3AA①48. 0BB①+V46. 7BB④+V38. 9CC②+V30. 9DD③+V28. 9DDE④22. 1EE②12. 4FFV5. 8GFG③3. 9GG 上述實(shí)驗(yàn)證明，可以用木霉菌跟化學(xué)抑菌或殺菌的藥劑混合使用，達(dá)到比單用化 學(xué)藥劑更好的效果，因此可以減少化學(xué)藥劑的使用量。并且，木霉菌是對植物和環(huán)境無害的 微生物，并且培養(yǎng)成本很低。這種方法通過研究并充分利用生物防治和化學(xué)防治西瓜枯萎 病菌的協(xié)同作用，可以大大減少化學(xué)藥劑對環(huán)境的影響，提高防治效果，減緩病害對化學(xué)藥 劑的抗性突變，同時(shí)大大降低了防治病菌的成本。
權(quán)利要求
木霉在提高抗菌藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制效果中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述抗菌藥劑為對西瓜枯萎病菌具有殺 菌或抑菌效果的藥劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述抗菌藥劑選自代森錳鋅原藥、代森錳 鋅制劑、百菌清原藥、百菌清制劑、五氯硝基苯原藥、五氯硝基苯制劑、多菌靈原藥、多菌靈 制劑、撲海因原藥、撲海因制劑、咪鮮胺原藥和咪鮮胺制劑中的一種或兩種以上任意混合。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述抗菌藥劑為百菌清原藥、百菌清制 劑、五氯硝基苯原藥、五氯硝基苯制劑、多菌靈原藥、多菌靈制劑、撲海因原藥、撲海因制劑、 咪鮮胺原藥和咪鮮胺制劑中的一種或兩種以上任意混合。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述代森錳鋅制劑為代森錳鋅可濕性粉 劑，所述百菌清制劑為百菌清可濕性粉劑，所述五氯硝基苯制劑為五氯硝基苯可濕性粉劑， 所述多菌靈制劑為多菌靈可濕性粉劑；所述撲海因制劑為撲海因可濕性粉劑，所述咪鮮胺 制劑為咪鮮胺水乳劑；所述代森錳鋅制劑優(yōu)選為80%代森錳鋅可濕性粉劑，所述百菌清制 劑優(yōu)選為75%百菌清可濕性粉劑，所述五氯硝基苯制劑優(yōu)選為20%五氯硝基苯可濕性粉 劑，所述多菌靈制劑優(yōu)選為50%多菌靈可濕性粉劑；所述撲海因制劑優(yōu)選為50%撲海因可 濕性粉劑，所述咪鮮胺制劑優(yōu)選為45%咪鮮胺水乳劑；所述百分含量優(yōu)選為質(zhì)量百分含量
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于所述木霉為保藏于中國農(nóng) 業(yè)科學(xué)院微生物菌種保藏管理中心的木霉菌株，保藏號為30121。
7.—種西瓜枯萎病菌抑制劑，由抗菌藥劑和木霉組成；所述抗菌藥劑選自代森錳鋅原 藥、代森錳鋅制劑、百菌清原藥、百菌清制劑、五氯硝基苯原藥、五氯硝基苯制劑、多菌靈原 藥、多菌靈制劑、撲海因原藥、撲海因制劑、咪鮮胺原藥和咪鮮胺制劑中的一種或兩種以上 任意混合；所述抗菌藥劑優(yōu)選為百菌清原藥、百菌清制劑、五氯硝基苯原藥、五氯硝基苯制 劑、多菌靈原藥、多菌靈制劑、撲海因原藥、撲海因制劑、咪鮮胺原藥和咪鮮胺制劑中的一種 或兩種以上任意混合。
8.根據(jù)權(quán)利要求8所述的西瓜枯萎病菌抑制劑，其特征在于所述代森錳鋅制劑為代 森錳鋅可濕性粉劑，所述百菌清制劑為百菌清可濕性粉劑，所述五氯硝基苯制劑為五氯硝 基苯可濕性粉劑，所述多菌靈制劑為多菌靈可濕性粉劑；所述撲海因制劑為撲海因可濕性 粉劑，所述咪鮮胺制劑為咪鮮胺水乳劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求9所述的西瓜枯萎病菌抑制劑，其特征在于所述代森錳鋅制劑為 80%代森錳鋅可濕性粉劑，所述百菌清制劑為75%百菌清可濕性粉劑，所述五氯硝基苯制 劑為20%五氯硝基苯可濕性粉劑，所述多菌靈制劑為50%多菌靈可濕性粉劑；所述撲海因 制劑為50%撲海因可濕性粉劑，所述咪鮮胺制劑為45%咪鮮胺水乳劑；所述百分含量為質(zhì) 量百分含量。
10.根據(jù)權(quán)利要求7-9中任意一項(xiàng)所述的西瓜枯萎病菌抑制劑，其特征在于所述木霉 為保藏于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物菌種保藏管理中心的木霉菌株，保藏號為30121。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種木霉在提高藥劑對西瓜枯萎病菌的抑制效果中的應(yīng)用。使用木霉同藥劑混合可大大提高藥劑對對西瓜枯萎病菌的抑菌效率。實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明的應(yīng)用可以大大提高藥劑的利用效率，提高藥劑對西瓜枯萎病的抑菌效果，可大大提高殺菌防病的成本，對環(huán)境保護(hù)作出貢獻(xiàn)。
文檔編號A01N63/04GK101919414SQ201010244899
公開日2010年12月22日 申請日期2010年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月25日
發(fā)明者劉菲菲, 張新春, 王家保 申請人:中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所