專利名稱：一種高效防治油茶主要病害的生物源農(nóng)藥及其應用的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明屬于植物保護領域，尤其涉及一種防治油茶炭疽病，軟腐病，葉枯病菌的生 物源農(nóng)藥及其應用。
背景技術(shù)：
油茶(Camellia oleifera)是我國特有的食用油料樹種，亦是世界四大木本油料 樹種之一，已有2000多年的利用和栽培歷史。它適應性廣，抗逆性強，適種于廣大的紅壤丘 陵地區(qū)。主要生長在南方，以湖南、江西、廣西為主，其中湖南省是國內(nèi)最大的油茶產(chǎn)地和最 大的茶油消費區(qū)。油茶全身都是寶，具有很高的經(jīng)濟價值。茶油的不飽和脂肪酸含量高達 90%，遠遠高于菜油、花生油和豆油，與橄欖油比維生素E含量高一倍，并含有山茶甙等特 定生理活性物質(zhì)，具有極高的營養(yǎng)價值。據(jù)統(tǒng)計，中國現(xiàn)在年產(chǎn)茶油1. 3 1. 5億公斤，是 二億多人口的主要食用油來源。但油茶的病害種類繁多，其危害程度也愈發(fā)嚴重。每年因 病害而造成的經(jīng)濟損失難以估計，其中因油茶炭疽病、軟腐病，葉枯造成的經(jīng)濟損失尤為嚴 重。油茶炭疽病，軟腐病，葉枯病分別由膠胞炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),油茶傘座抱菌(Agaricodochium camellia Liu, Wei et Fan),小抱擬 盤多毛孢(Pestalotiopsis m icrospora)侵染引起的3種毀滅性病害，是我國油茶產(chǎn)區(qū)的 主要病害，發(fā)生普遍，當病害嚴重時，會引起嚴重落果、落蕾、落葉、枝枯，甚至整株衰亡。病 害落果率通常在20%左右，嚴重時40%以上。目前對油茶炭疽病，軟腐病的防治主要通過 種植抗性品種和化學防治來控制，但過多使用化學殺菌劑會危害人類身體健康、破壞生態(tài) 環(huán)境，并易使病原菌產(chǎn)生抗藥性，影響茶油質(zhì)量，不利于整個油茶產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。尋求 安全、低毒、高效的生物源農(nóng)藥已成為當前防治油茶病蟲害社會普遍關(guān)注的問題。生物源農(nóng) 藥因其高效、低毒、低殘留等特征，從植物，昆蟲，微生物中尋找殺菌、抑菌活性物質(zhì)現(xiàn)已成 為當今開發(fā)、研制無公害新型生物源殺菌劑的熱點之一。其主要優(yōu)勢在于1)生物特別是 植物、微生物種類和數(shù)量眾多，環(huán)境相容性好，生物源農(nóng)藥在自然界有其順暢的降解途徑， 對環(huán)境污染?。?)生物活性多樣。植物本身提取物及分泌物，微生物及其代謝產(chǎn)物，不僅具 有殺菌活性，還兼有殺蟲和調(diào)節(jié)植物生長的作用，其作用方式多樣；3)對高等動物及害蟲 天敵安全；4)有害生物不易產(chǎn)生抗藥性。生物源農(nóng)藥往往含有數(shù)種有效成分，且作用機制 與一般化學農(nóng)藥不同，不易使有害生物產(chǎn)生抗藥性；5)對農(nóng)林作物安全，而且有的分泌物， 微生物及代謝產(chǎn)物還能誘導農(nóng)林作物產(chǎn)生抗病作用；

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的空白，提供一種高效防治包括炭疽病，軟腐病，葉 枯病等油茶主要病害的生物源農(nóng)藥，對油茶的無公害防治具有重要意義。本發(fā)明的目的是通過以下方式實現(xiàn)的一種高效防治油茶主要病害的生物源農(nóng)藥，是由植物提取物復配液A與枯草芽孢桿菌Y13發(fā)酵后的細菌過濾液B按體積比1-10 1-10混配而成；所述的植物提取物復配液 A是包括以下質(zhì)量含量組分的水溶劑丁香提取物5 % -10 %，黃芩提取物5-10 %，橘子皮提 取物5% -15%，茶皂素5-10% ；所述的枯草芽孢桿菌Y13保藏號CCTCC NO. M208264 (該菌 株已申請了發(fā)明專利，是由中南林業(yè)科技大學森林保護學實驗室從油茶健康葉中分離的一 種內(nèi)生細菌)。所述的植物源復配液A中丁香提取物，黃芩和橘子皮提取物的提取過程為分別 取過60目的干燥丁香，黃芩，橘子皮粉末，溫度在70°C 90°C，用丁香，黃芩和橘子皮粉末 重量的10-30倍體積的無菌水，水浴提取至少兩次，每次水浴提取時間為3-5小時，每次提 取后過濾，最后合并濾液，減壓濃縮至含水量約為4-6%膏狀，分別得到丁香提取物，黃芩提 取物和橘子皮提取物。所述的茶皂素純度為70% -95%。所述的枯草芽孢桿菌Y13發(fā)酵后的細菌過濾液B是將在NA培養(yǎng)基上的Y13于28°C 的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2天后，用接菌環(huán)移取一環(huán)置入裝有150ml的NB培養(yǎng)液的三角瓶中， 在28°C、150rpm的搖床上振蕩培養(yǎng)2_4天后；培養(yǎng)液用0. 22 μ m細菌過濾器過濾得到發(fā)酵 后細菌過濾液。所述的生物源農(nóng)藥的配制方法，先稱取所需茶皂素溶于35-60°C溫的無菌水中， 再分別按重量比稱取丁香提取物，黃芩提取物和橘子皮提取物，制成植物提取物復配液 A ；再將配制好的植物提取物復配液與枯草芽孢桿菌Y13發(fā)酵后細菌過濾液B，按體積比 1-10 1-10混配后即可。所述的生物源農(nóng)藥應用于防治林間油茶炭疽病，軟腐病和葉枯病等油茶病害。本 發(fā)明具有如下的有益效果1)本發(fā)明的生物源農(nóng)藥中所需植物，在國內(nèi)分布廣泛且資源多。同時，本發(fā)明還將 保藏號CCTCC NO. M208264的油茶內(nèi)生細菌枯草芽孢桿菌Y13發(fā)酵后的細菌過濾液與植物 提取物混配，更能促進油茶對本發(fā)明的生物源農(nóng)藥的吸收，不污染環(huán)境。2)本發(fā)明的生物源農(nóng)藥不僅能在林間高效防治油茶病害，還能促進油茶生長，誘 導油茶產(chǎn)生對炭疽病，軟腐病，葉枯病的抗性，使得藥劑用藥量降低，藥效提高。3)本發(fā)明的生物源農(nóng)藥，工藝制作簡單，對環(huán)境污染小，有無公害和無殘毒的特 點，有效避免了化學農(nóng)藥的危害。4)本發(fā)明的生物源農(nóng)藥，一方面通過植物提取物間的復配及與Y13發(fā)酵后的細菌 過濾液混配，極大減少了油茶致病菌對本發(fā)明的生物源農(nóng)藥產(chǎn)生抗性的可能，另一方面，通 過混配大大降低了單種藥物林間防治的經(jīng)濟成本，且防治效果良好。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明，而非限制本發(fā)明。實施例1高效防治油茶主要病害的植物提取物的篩選采用菌絲生長速率法分別吸取表1中所述濃度為20mg/ml的植物提取物溶液 lml，，倒入已滅菌含有9mlPDA的培養(yǎng)皿中，對照用Iml的無菌水，待培養(yǎng)基凝固后，用直徑 0. 8cm打孔器制取菌碟，用接種針將菌碟接種到培養(yǎng)基中央，菌絲面朝下，每皿一塊，每處理重復3次，置于28培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)4天后用十字交叉法測量菌落直徑。以三次重復的 平均值計算抑制率。結(jié)果見表1表1不同植物提取物對油茶主要病害的抑制作用
權(quán)利要求
一種高效防治油茶主要病害的生物源農(nóng)藥，其特征在于，是由植物提取物復配液A與枯草芽孢桿菌Y13發(fā)酵后的細菌過濾液B按不同體積比1 10∶1 10混配而成；所述的植物提取物復配液A是包括以下質(zhì)量含量組分的水溶劑丁香提取物5％ 10％，黃芩提取物5％ 10％，橘子皮提取物5％ 15％，茶皂素為5％ 10％；所述的枯草芽孢桿菌Y13保藏號CCTCCNO.M208264。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效防治油茶主要病害的生物源農(nóng)藥，其特征在于，所述的 植物源復配液A中丁香提取物，黃芩和橘子皮提取物的提取過程為分別取過60目的干燥 丁香，黃芩，橘子皮粉末，溫度在70°C 90°C，用丁香，黃芩和橘子皮粉末重量的10-30倍體 積的無菌水，水浴提取至少兩次，每次水浴提取時間為3-5小時，每次提取后過濾，最后合 并濾液，減壓濃縮至含水量約為4-6%膏狀，分別得到丁香提取物，黃芩提取物和橘子皮提 取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效防治油茶主要病害的生物源農(nóng)藥，其特征在于，所述的 茶皂素純度為70% -95%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的高效防治油茶主要病害的生物源農(nóng)藥，其特征在于，所述 的枯草芽孢桿菌Y13發(fā)酵后的細菌過濾液B是將在NA培養(yǎng)基的Y13菌株上于28°C的恒溫 細菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2天后，用接菌環(huán)移取一環(huán)置入裝有150ml的NB培養(yǎng)液的三角瓶中，在 28°CU50rpm的搖床上振蕩培養(yǎng)2_4天后；培養(yǎng)液用0. 22 μ m細菌過濾器過濾得到發(fā)酵后 細菌過濾液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的生物源農(nóng)藥的配制方法，其特征在于，先稱取所 需茶皂素溶于35-60°C溫的無菌水中，再分別按重量比稱取丁香提取物，黃芩提取物，橘子 皮提取物制成植物提取物復配液A ；再將配制好的植物提取物復配液A與枯草芽孢桿菌Y13 發(fā)酵后細菌過濾液B，，按體積比1-10 1-10混配后即可。
6.權(quán)利要求1或2或3或4所述的生物源農(nóng)藥用于防治林間油茶炭疽病，軟腐病和葉 枯病油茶病害。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種高效防治油茶主要病害(油茶炭疽病，軟腐病，葉枯病)的生物源農(nóng)藥，具體是丁香提取物，黃芩提取物，橘子皮提取物和茶皂素及枯草芽孢桿菌Y13發(fā)酵后細菌過濾液復配的農(nóng)藥水劑，同時公開了其制備方法以及應用，屬植物保護技術(shù)領域。所述生物源復配藥劑能有效抑制油茶炭疽病菌、軟腐病、葉枯病的生長，提高油茶對炭疽病，軟腐病，葉枯病的抗病性。同時能高效防治油茶的主要病害，環(huán)境安全性好，具有良好的開發(fā)應用前景。
文檔編號A01N43/16GK101965848SQ20101051323
公開日2011年2月9日 申請日期2010年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月20日
發(fā)明者何苑皞, 劉君昂, 周國英, 周建宏, 宋光桃, 李河, 李琳 申請人:中南林業(yè)科技大學