專利名稱：郁金香的薄層培養(yǎng)方法
技術領域：
本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)方法領域；特別是球根花卉繁殖方法領域。
背景技術：
郁金香(Tulipa gesneriana)百合科，郁金香屬。多年生球根花卉，花型多樣、花 色豐富、株型挺拔，觀賞價值極佳，深受人們喜愛。我國郁金香種球多為荷蘭進口，主要因為 郁金香自然繁殖速度慢，繁殖系數(shù)低，并且種球病毒易積累使種球退化或逐漸死亡。植物組 織培養(yǎng)技術有效地解決了這一問題，目前，百合、郁金香等球根花卉主要采用塊狀鱗莖為外 植體，不僅需要大量的鱗莖球而且增殖效果受到了極大的限制。薄層培養(yǎng)是一種新型的培養(yǎng)方式，多以植物葉片、花梗、花托、花芽為試材。鱗莖是 郁金香的主要繁殖器官，采用鱗片薄層培養(yǎng)可以使用有限的鱗莖繁殖更多的種球。鱗片薄 層接觸培養(yǎng)基面積大，對激素的敏感度比塊狀鱗片高，可以提高增殖系數(shù)，更加充分利用植 物材料。薄層培養(yǎng)(thin cell layer, TCL)是指從外植體表皮部位撕下數(shù)層細胞(包括表 皮層細胞和數(shù)層薄壁細胞)于合適的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，應用在實踐中多為切成1 5mm 厚的薄片。薄層培養(yǎng)不僅是一種較好的快繁方法，也是分子育種中建立遺傳轉(zhuǎn)化體系的一 種較好的方法。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為解決郁金香繁殖周期長，繁殖系數(shù)低，并且后代品質(zhì)下降的技術問題而 提供一種適合郁金香快速繁殖的方法，用以提高郁金香繁殖系數(shù)，建立高效穩(wěn)定的快繁體 系，保持親本植株的優(yōu)良性狀。郁金香的薄層培養(yǎng)方法，將郁金香鱗片縱切(TCL)或橫切(tTCL)成0. Imm 5mm的薄層，平鋪于培養(yǎng)基上；誘導增殖培養(yǎng)基為每升附加6-BA 1. 0 2. Omg, NAA 0. 1 1. 0mg，2，4-D 1. 0 4. Omg，蔗糖20g和瓊脂6g的MS培養(yǎng)基；培養(yǎng)條件為溫度23士2°C;光 照強度1500 2000Lx，光照時間為16h/d。所述的郁金香鱗片為組培鱗片。所述的薄層為鱗片橫切，厚度為0. 2 1mm。本發(fā)明具有的優(yōu)點和積極效果是組培鱗莖誘導率達100%，誘導的組培苗生長 健壯，同時其來源不受季節(jié)限制，組培鱗片為薄層培養(yǎng)材料較好的來源。切割方式對于鱗莖 的誘導有差異，采用橫向切割的鱗片的分化率和鱗莖誘導數(shù)均高于縱向切割的鱗片。采用 本發(fā)明的郁金香薄層培養(yǎng)方法，有效的提高了郁金香的鱗莖誘導數(shù)，比以往使用塊狀鱗片 作為外植體的鱗莖誘導數(shù)提高了一倍。本發(fā)明建立了郁金香的一種快繁方式，并為郁金香 的分子育種提供了一個高效穩(wěn)定的遺傳轉(zhuǎn)化體系。
具體實施例方式為了更好的了解本發(fā)明內(nèi)容及特點，茲例舉以下實例
例 1實驗組設為6組，每組處理60個外植體。采用本發(fā)明的方法將郁金香鱗片橫 切(tTCL)成薄層(具體厚度見表1)，平鋪于培養(yǎng)基上；誘導增殖培養(yǎng)基為每升附加6-BA， NAA，2，4-D(具體濃度見表1)，蔗糖20g和瓊脂6g的MS培養(yǎng)基；培養(yǎng)條件為溫度23士2°C ； 光照強度1500 2000Lx，光照時間為16h/d。對照設為將郁金香組培鱗片整片接種于每升添加6-BA 2. Omg/L, NAA 0. 2mg/L, 30g/L蔗糖和6g/L瓊脂的MS培養(yǎng)基上。培養(yǎng)條件均為溫度23士2°C ；光照強度1500 2000Lx，光照時間為16h/d。處理60個外植體。表1多因素考察對實驗組和對照組的籽球誘導影響
權利要求
1.郁金香的薄層培養(yǎng)方法，將郁金香鱗片縱切或橫切成0.Imm 5mm的薄層，平鋪于 培養(yǎng)基上；誘導增殖培養(yǎng)基為每升附加6-BA 1. 0 2. Omg5NAA 0. 1 1. 0mg，2，4_D 1. 0 4. Omg,蔗糖20g和瓊脂6g的MS培養(yǎng)基；培養(yǎng)條件為溫度23士2 °C ；光照強度1500 2000Lx，光照時間為16h/d。
2.根據(jù)權利要求1所述的郁金香的薄層培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的郁金香鱗片為 組培鱗片。
3.根據(jù)權利要求1所述的郁金香的薄層培養(yǎng)方法，其特征在于，將郁金香鱗片橫切成 厚度為0.2 Imm的薄層。
全文摘要
本發(fā)明涉及花卉繁殖方法領域；特別是球根花卉繁殖方法領域。郁金香的薄層培養(yǎng)方法，將郁金香鱗片縱切或橫切成0.1mm～5mm的薄層，平鋪于培養(yǎng)基上；誘導增殖培養(yǎng)基為每升附加6-BA 1.0～2.0mg，NAA 0.1～1.0mg，2，4-D 1.0～4.0mg，蔗糖20g和瓊脂6g的MS培養(yǎng)基；培養(yǎng)條件為溫度23±2℃；光照強度1500～2000Lx，光照時間為16h/d。本發(fā)明具有的優(yōu)點和積極效果組培鱗莖誘導率達100％，誘導的組培苗生長健壯，同時其來源不受季節(jié)限制，組培鱗片為薄層培養(yǎng)材料較好的來源。切割方式對于鱗莖的誘導有差異，采用橫向切割的鱗片的分化率和鱗莖誘導數(shù)均高于縱向切割的鱗片。
文檔編號A01H4/00GK102090332SQ201010537688
公開日2011年6月15日 申請日期2010年11月10日 優(yōu)先權日2010年11月10日
發(fā)明者楊鐵順 申請人:天津濱海國際花卉科技園區(qū)股份有限公司