專利名稱：一種快速解除蔓荊子種子休眠的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種快速解除蔓荊子種子休眠的方法。
背景技術(shù)：
蔓荊子為馬鞭草科植物單葉蔓荊mex trifolia L. var. simplicifolia Cham. 或蔓荊V. trifolia L.的干燥成熟果實(shí)。蔓荊子臨床應(yīng)用廣泛，同時(shí)又是優(yōu)良的園林綠 化、防風(fēng)固沙、改良土壤的物種，具有較高的開發(fā)利用價(jià)值。目前蔓荊子資源以野生為主，主 產(chǎn)于山東、江西、廣西等省區(qū)，其中山東、江西以單葉蔓荊為主，廣西以蔓荊為主。近年來(lái)，蔓 荊子野生資源破壞嚴(yán)重，已被列為國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生藥材物種名錄(三類)。由于蔓荊子 種子具有休眠特性，生產(chǎn)上主要以營(yíng)養(yǎng)繁殖為主，解除蔓荊子種子休眠，提高蔓荊子繁殖系 數(shù)，對(duì)開展蔓荊子資源保護(hù)和可持續(xù)利用具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種安全性好、操作簡(jiǎn)單、容易控制的快速解除蔓荊子種子 休眠的方法。本發(fā)明的快速解除蔓荊子種子休眠的方法，包括以下步驟
1.收集10 11月份的黑色成熟的蔓荊子果實(shí)，常溫儲(chǔ)藏，用種子風(fēng)選凈度儀清選空 殼，選出凈種子，即為蔓荊子種子；
2.將蔓荊子種子用濃硫酸浸泡1 60分鐘，流水沖洗2小時(shí)后去掉表面碳化物質(zhì)；
3.將其在常溫20 25°C下，浸泡于0.1 5. Omg/ml赤霉素溶液1 36小時(shí)，之后用 1%次氯酸鈉消毒5 15分鐘，然后用蒸餾水清洗至pH = 7 ；
4.將蔓荊子種子置恒溫或變溫條件的光照培養(yǎng)箱中，用蛭石或濕沙或?yàn)V紙或海綿發(fā)芽 床，或置沙質(zhì)土壤中進(jìn)行發(fā)芽。本發(fā)明的快速解除蔓荊子種子休眠的方法，能有效解除阻礙蔓荊子種子萌發(fā)的各 種因素，包括種皮所形成的機(jī)械障礙，打破蔓荊子種子休眠，從而提高發(fā)芽率(發(fā)芽率可以 達(dá)到82. 1%)，與現(xiàn)有的營(yíng)養(yǎng)繁殖相比，具有操作簡(jiǎn)單、成本低廉、快速萌發(fā)等優(yōu)點(diǎn)，可廣泛用 于蔓荊子藥材的栽培和園林綠化中。


圖1為不同濃度赤霉素下濃硫酸酸蝕和未酸蝕與發(fā)芽率的關(guān)系，橫坐標(biāo)為赤霉素 的濃度，縱坐標(biāo)為發(fā)芽率，以百分比表示，WS表示未酸蝕處理，S表示酸蝕處理。圖2為濃硫酸處理后不同濃度赤霉素處理與發(fā)芽率的關(guān)系，橫坐標(biāo)為赤霉素的濃 度，縱坐標(biāo)為發(fā)芽率，以百分比表示。
具體實(shí)施例方式一種快速解除蔓荊子種子休眠的方法，其步驟是1.收集10 11月份的黑色成熟的蔓荊子果實(shí)，常溫儲(chǔ)藏，用種子風(fēng)選凈度儀清選空 殼，選出凈種子，即為蔓荊子種子；
2.將蔓荊子種子用98%的濃硫酸浸泡10 15分鐘，流水沖洗2小時(shí)后用紗布搓掉表 面碳化物質(zhì)；
3.再將其在常溫20°C下，浸泡于0.5 1. Omg/ml赤霉素溶液18小時(shí)，之后用1%次氯 酸鈉消毒15分鐘，然后用蒸餾水清洗至pH = 7 ；
4.再將蔓荊子種子置恒溫或變溫條件的光照培養(yǎng)箱中用濾紙發(fā)芽床進(jìn)行發(fā)芽。所述 的恒溫是15、20、25、30°C，所述的變溫條件是白天25°C培養(yǎng)18小時(shí)、晚上15°C培養(yǎng)8小時(shí)， 或者是白天30°C培養(yǎng)18小時(shí)、晚上20°C培養(yǎng)8小時(shí)。
以下通過(guò)實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明。說(shuō)明1.具體實(shí)施方式
中所采用的發(fā)芽試驗(yàn)(除實(shí)施例5外)均為紙床發(fā)芽試驗(yàn) 法，具體如下直徑為9cm的培養(yǎng)皿內(nèi)放置濾紙，用水濕透，將多余的水倒掉，以保濕不積水 為度，選取50粒蔓荊子種子均勻放入培養(yǎng)皿內(nèi)的紙上，再將培養(yǎng)皿蓋好后放入微電腦控制 光照培養(yǎng)箱(LRH-250-G11 ；廣東省醫(yī)療器械廠生產(chǎn))，按照各個(gè)試驗(yàn)例所設(shè)計(jì)的特定溫度 (恒溫或變溫)條件進(jìn)行發(fā)芽，整個(gè)發(fā)芽過(guò)程中均進(jìn)行光照；發(fā)芽過(guò)程中每天檢測(cè)1 2 次，并適當(dāng)補(bǔ)足水分，蔓荊子種子開始發(fā)芽后，每天計(jì)數(shù)1次。發(fā)現(xiàn)有腐敗的種子應(yīng)隨時(shí)揀 出，若霉變種子> 5%，應(yīng)及時(shí)更換培養(yǎng)皿內(nèi)的濾紙，并將種子用蒸餾水清洗后再放入培養(yǎng) 皿內(nèi)繼續(xù)令其發(fā)芽。2.參照《國(guó)際種子檢驗(yàn)規(guī)程》(1985)、《農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程》(1995)等作為評(píng)定 種子是否發(fā)芽的標(biāo)準(zhǔn)(以長(zhǎng)出Icm為發(fā)芽)。3.種子發(fā)芽率是指發(fā)芽試驗(yàn)終期，在規(guī)定的日期內(nèi)發(fā)芽的全部種子數(shù)占供試種子 的百分率。發(fā)芽率(%)=規(guī)定日期內(nèi)發(fā)芽種子/供試種子粒數(shù)X100%。本試驗(yàn)中的發(fā)芽日 期均為自將發(fā)芽紙床放入箱中起的20天。4.本實(shí)驗(yàn)試圖通過(guò)多種方法打破蔓荊子的休眠，但只有赤霉素能打破蔓荊子種子 的休眠，其它方法如濕沙層積、生長(zhǎng)素、濃硫酸等均不能解除蔓荊子休眠。實(shí)驗(yàn)材料
本實(shí)驗(yàn)所用的蔓荊子種子為2009年10月份在江西省新建縣采收的黑色成熟的單葉蔓 荊子果實(shí)。將蔓荊子果實(shí)常溫陰干后，用種子風(fēng)選凈度儀清選空殼，選出的蔓荊子核果中有 種子者為蔓荊子種子，蔓荊子種子用牛皮紙袋常溫儲(chǔ)藏。實(shí)施例1
一、實(shí)驗(yàn)方法
將蔓荊子種子分為兩組，一組用濃硫酸酸蝕一定時(shí)間，一組空白對(duì)照。然后把蔓荊子種 子分別浸泡于0. 1,0. 5,1. 0,1. 5,2. O mg/ml赤霉素溶液中18小時(shí)后，用1%次氯酸鈉消毒 15分鐘，無(wú)菌水漂洗5次至至pH = 7。每個(gè)濃度平行四組，每組50粒置于30°C恒溫培養(yǎng)箱 全光照培養(yǎng)，每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率。二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
如圖1表明，在相同赤霉素濃度條件下酸蝕蔓荊子種子對(duì)其發(fā)率率和發(fā)芽勢(shì)均有明顯 提高。酸蝕處理蔓荊子種子的7天的發(fā)芽率為70%，而未酸蝕蔓荊子種子的發(fā)芽率為10%，20天時(shí)發(fā)芽率達(dá)到最高，酸蝕處理的發(fā)芽率為73. 5%，而未酸蝕的發(fā)芽率為69. 0%。酸蝕處 理的發(fā)芽勢(shì)也顯著高于未經(jīng)酸蝕處理的，第10天酸蝕處理的發(fā)芽勢(shì)為73. 5%，未酸蝕的為 58%。因此濃硫酸酸蝕處理可以打破蔓荊子果皮的機(jī)械束縛。實(shí)施例2
一、實(shí)驗(yàn)方法
用98%濃硫酸分別浸泡成熟的蔓荊子種子0. 5、5、10、15、30、60分鐘后，慢慢傾倒掉硫 酸，用清水沖洗2小時(shí)，然后用紗布搓掉蔓荊子表面碳化物質(zhì)，再將蔓荊子分別浸泡于1. 0 mg/ml赤霉素溶液中18小時(shí)后，用1%次氯酸鈉消毒15分鐘，無(wú)菌水漂洗5次至pH = 7。每 個(gè)處理平行四組，每組50粒，置于30°C恒溫培養(yǎng)箱全光照培養(yǎng)。每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見表1。表1濃硫酸酸蝕處理蔓荊子的發(fā)芽率
二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
如表1結(jié)果表明隨酸蝕時(shí)間的增加，發(fā)芽率有所提高，其中以15分鐘最佳，酸蝕30分 鐘時(shí)則下降。酸蝕處理提高萌發(fā)率可能與克服果皮的機(jī)械阻力有關(guān)。實(shí)施例3
一、實(shí)驗(yàn)方法
將濃硫酸酸蝕15分鐘后的蔓荊子分別浸泡于0. 1,0. 5,1. 0,2. 0,5. 0,10. 0 mg/ml赤霉 素溶液中18小時(shí)后，用1%次氯酸鈉消毒15分鐘，無(wú)菌水漂洗5次至至pH = 7。每個(gè)濃度 平行四組，每組50粒，置于30°C恒溫培養(yǎng)箱全光照培養(yǎng)。每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖 2。二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖2結(jié)果表明解除蔓荊子種子休眠的最佳濃度為0. 5 1. Omg/ml,本實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi) 發(fā)芽率沒有顯著性差異。實(shí)施例4
一、實(shí)驗(yàn)方法
將濃硫酸酸蝕15分鐘后的蔓荊子種子分別浸泡于1. Omg/ml赤霉素溶液中，浸泡的時(shí) 間為浸泡的時(shí)間為1、6、12、18、24、36小時(shí)。用次氯酸鈉消毒15分鐘，然后用蒸餾水清洗至 PH =7。每個(gè)濃度平行四組，每組50粒，置于30°C恒溫培養(yǎng)箱全光照培養(yǎng)。每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽 率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2 (A，B表示有顯著性差異)。二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表2結(jié)果表明赤霉素浸泡時(shí)間并不是影響蔓荊子種子發(fā)芽率的主要因數(shù)，但以18小 時(shí)的發(fā)芽率最高，浸泡18、24、36小時(shí)的發(fā)芽率沒有顯著性差異(P > 0.05)，故浸泡時(shí)間為 18小時(shí)。表2赤霉素浸泡時(shí)間與蔓荊子種子發(fā)芽率
權(quán)利要求
1.一種快速解除蔓荊子種子休眠的方法，其特征在于它包括以下步驟(a)收集10 11月份的黑色成熟的蔓荊子果實(shí)，常溫儲(chǔ)藏，用種子風(fēng)選凈度儀清選空 殼，選出凈種子；(b)將蔓荊子種子用濃硫酸浸泡1 60分鐘，流水沖洗2小時(shí)后去掉表面碳化物質(zhì)；(c)將其在常溫20 25°C下，浸泡于0.1 5. Omg/ml赤霉素溶液1 36小時(shí)，之后 用1%次氯酸鈉消毒15 18分鐘，然后用蒸餾水清洗至pH = 7 ；(d)再將蔓荊子種子轉(zhuǎn)入恒溫或變溫條件的光照培養(yǎng)箱中用蛭石或濕沙或?yàn)V紙或海綿 發(fā)芽床，或置沙質(zhì)土壤中進(jìn)行發(fā)芽。
2.如權(quán)利要求1所述的快速解除蔓荊子種子休眠的方法，其特征在于步驟(b)中蔓荊 子種子用濃硫酸浸泡10 15分鐘。
3.如權(quán)利要求1所述的快速解除蔓荊子種子休眠的方法，其特征在于步驟(c)中蔓荊 子種子浸泡于0. 5 1. Omg/ml赤霉素溶液18小時(shí)。
4.如權(quán)利要求1所述的快速解除蔓荊子種子休眠的方法，其特征在于步驟(d)中所述 的恒溫是15、20、25、30°C中的任意一種。
5.如權(quán)利要求1所述的快速解除蔓荊子種子休眠的方法，其特征在于步驟(d)中所 述的變溫條件是白天25°C培養(yǎng)18小時(shí)、晚上15°C培養(yǎng)8小時(shí)，或者是白天30°C培養(yǎng)18小 時(shí)、晚上20°C培養(yǎng)8小時(shí)。
全文摘要
一種快速解除蔓荊子種子休眠的方法，其步驟是選出蔓荊子凈種子，將其用濃硫酸浸泡，然后去掉表面碳化物質(zhì)；將其在常溫下，浸泡于赤霉素溶液，之后用次氯酸鈉消毒，然后用蒸餾水清洗；再將蔓荊子種子轉(zhuǎn)入恒溫或變溫條件的光照培養(yǎng)箱中用蛭石或濕沙或?yàn)V紙或海綿發(fā)芽床，或置沙質(zhì)土壤中進(jìn)行發(fā)芽。本發(fā)明的快速解除蔓荊子種子休眠的方法，能有效解除阻礙蔓荊子種子萌發(fā)的各種因素，包括種皮所形成的機(jī)械障礙，打破蔓荊子種子休眠，顯著提高種子發(fā)芽率，發(fā)芽率可達(dá)82.1%，與現(xiàn)有的營(yíng)養(yǎng)繁殖相比，具有操作簡(jiǎn)單、成本低廉、快速萌發(fā)等優(yōu)點(diǎn)，可廣泛用于蔓荊子藥材的栽培和園林綠化中。
文檔編號(hào)A01C1/00GK102090181SQ201010576590
公開日2011年6月15日 申請(qǐng)日期2010年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月7日
發(fā)明者吳波, 孫榮進(jìn), 張劍, 方磊, 曾金祥, 朱玉野, 朱繼孝, 杜婷, 楊雅琴, 漆樂(lè)媛, 熊詩(shī)華, 王文杰, 王曉云, 羅光明, 蔡財(cái)軍 申請(qǐng)人:江西中醫(yī)學(xué)院