專利名稱：苗期無(wú)破壞、快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種苗期無(wú)破壞、快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法。
背景技術(shù)：
隨全球變暖，華北地區(qū)平均氣溫逐漸升高，夏天延長(zhǎng)，冬天縮短，雨水分布失衡以及保護(hù)地黃瓜所占比重越來(lái)越大，黃瓜的耐熱，耐濕性今后將成為制約黃瓜生產(chǎn)發(fā)展的重要因子.未雨綢繆，加強(qiáng)黃瓜耐熱，耐濕性的研究工作，并篩選出一批相關(guān)資源是目前黃瓜育種工作者所面臨的一項(xiàng)重要課題。在苗期對(duì)黃瓜耐熱、耐濕性進(jìn)行無(wú)破壞快速鑒定，即可提高育種效率，又可縮短選育周期，以往的選育手段，需要做大量的生理、生化分析，成本高，技術(shù)復(fù)雜。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種簡(jiǎn)便、低成本、易學(xué)、易操作，相關(guān)性好的苗期無(wú)破壞快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法。本發(fā)明所提供的苗期無(wú)破壞快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法，包括如下步驟在晝/夜=12hr/12hr、晝溫度!35°C、夜溫度25°C、晝濕度80%、夜?jié)穸?00%、晝光照強(qiáng)度400001UX的人工模擬環(huán)境中進(jìn)行(1)黃瓜播種后第7天，進(jìn)行第一次篩選，選擇下胚軸長(zhǎng)度不超過(guò)4cm的幼苗；(2)播種后第9天，從(1)步入選的幼苗中選擇第一片真葉大小不超過(guò)4X5cm，真葉及子葉邊緣無(wú)熱灼傷的幼苗；(3)第( 步選出的幼苗在第3片真葉期分別接種霜霉菌和ZYMV ；對(duì)霜霉菌和 ZYMV均表現(xiàn)為抗性或耐性的苗，即為具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料。本發(fā)明的苗期無(wú)破壞快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法，其中所述霜霉菌接種濃度為5000個(gè)孢子/ml。本發(fā)明的苗期無(wú)破壞快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法，其中所述 ZYMV的接種方式為接種磨汁液，所述磨汁液為Ig發(fā)病癥狀典型的葉片加3gpH = 7. 0的 0. 05mol/L磷酸緩沖液鹽研磨，得到的清液。本發(fā)明的苗期無(wú)破壞快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法，其中所述霜霉菌和ZYMV均接種兩次。本發(fā)明的苗期無(wú)破壞快速具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法，對(duì)幼苗無(wú)破壞性， 通過(guò)三項(xiàng)簡(jiǎn)單的形態(tài)特征指標(biāo)，即可鑒定具耐熱、耐濕性的黃瓜育種材料，容易學(xué)習(xí)和操作，并且該方法的相關(guān)性好，準(zhǔn)確性高。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1、
華北露地型黃瓜2份，華北春、秋大棚型黃瓜2份，華北與歐洲雜交型黃瓜2份，泰國(guó)本土型黃瓜2份，泰國(guó)本土型與華北型雜交黃瓜Ff份，泰國(guó)本土型與華北型雜交黃瓜F22 份，歐洲型黃瓜1份，日本型黃瓜1份。在高溫，高濕(泰國(guó))的6-7月份，進(jìn)行棚內(nèi)苗期試驗(yàn)在上覆高透明塑料薄膜，四周圍以紗網(wǎng)的大棚中，晝平均氣溫35 °C，夜平均氣溫25°C ；晝平均濕度RH = 80%，夜平均濕度100% ；晝光照強(qiáng)度40000-550001uX。將上述14種不同類型的黃瓜材料，經(jīng)催芽后播入7cmX 7cm塑料缽，每份材料3次重復(fù)，每重復(fù)10株，每天在不同時(shí)斷記錄溫度，濕度，光照強(qiáng)度，從真葉展平時(shí)開(kāi)始，分別調(diào)查子葉大小，下胚軸長(zhǎng)度，下胚軸粗度，第一真葉大??；在第3真葉充分展開(kāi)后，分別接種霜霉菌 (Pseudoperonospora cubensis)、ZYMV(Zuccini yellow mosaic virus)調(diào)查抗病性(此 2種病害為熱帶高溫，高濕地區(qū)主要標(biāo)志性病害)，霜霉菌采用子葉點(diǎn)滴接種，1片子葉接種霜霉菌孢子懸浮液0. 06ml，孢子濃度5000個(gè)/ml，霜霉菌接種2次，兩次間隔5天；ZYMV采用摩擦接種在另一片子葉上，接種0. 15ml磨汁液，磨汁液為Ig發(fā)病癥狀典型的葉片加3gpH =7.0的0.05!1101/1磷酸緩沖液鹽研磨，得到的清液。ZYMV接種2次，兩次間隔5天。結(jié)果如表1所示。表1.苗期結(jié)果
材料名稱播種后第7天播種后第9天第二真葉期
下胚軸長(zhǎng)度第一真葉大小(cm)抗病性(DM，ZYMV)
__(cm)___
華北露地型一184.9X5.4耐DM,抗ZYMV
平北露地型_264.4X5.4耐DM，抗ZYMV
華北春，秋大棚型5 —5.5X6_感DM，抗ZYMV
華北春，秋大棚型_2 “ 7.5 — 4X4.5感DM,耐ΖΥΜ ^
華北與歐洲雜交型一 1δΤ 5. 5X6. 5感DM,感ZYMV^
華北與歐洲雜交型一245. 5X6感DM,感ZYMV^
泰國(guó)木土型一13784X5抗DM，抗ZYMV~
泰國(guó)本土型一2 23. 5X4. 3抗 DM，抗 ZYMV
泰國(guó)本土與華北雜交F1-65X6I 感DM,抗ZYMVι
權(quán)利要求
1.一種苗期無(wú)破壞快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法，包括如下步驟， 在晝/夜=12hr/12hr、晝溫度!35°C、夜溫度25°C、晝濕度80%、夜?jié)穸?00%、晝光照強(qiáng)度400001UX的人工模擬環(huán)境中進(jìn)行(1)黃瓜播種后第7天，進(jìn)行第一次篩選，選擇下胚軸長(zhǎng)度不超過(guò)km的幼苗；(2)播種后第9天，從(1)步入選的幼苗中選擇第一片真葉大小不超過(guò)4X5cm，真葉及子葉邊緣無(wú)熱灼傷的幼苗；(3)第(2)步選出的幼苗在第3片真葉期分別接種霜霉菌和ZYMV；對(duì)霜霉菌和ZYMV均表現(xiàn)為抗性或耐性的苗，即為具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述霜霉菌接種濃度為5000個(gè)孢子/ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述ZYMV的接種方式為接種磨汁液， 所述磨汁液為Ig發(fā)病癥狀典型的葉片加3gpH = 7. 0的0. 05mol/L磷酸緩沖液鹽研磨，得到的清液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述霜霉菌和ZYMV均接種兩次。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種苗期無(wú)破壞快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法，包括如下步驟在晝/夜＝12hr/12hr、晝溫度35℃、夜溫度25℃、晝濕度80％、夜?jié)穸?00％、晝光照強(qiáng)度40000lux的人工模擬環(huán)境中進(jìn)行(1)黃瓜播種后第7天，進(jìn)行第一次篩選，選擇下胚軸長(zhǎng)度不超過(guò)4cm的幼苗；(2)播種后第9天，從(1)步入選的幼苗中選擇第一片真葉大小不超過(guò)4×5cm，真葉及子葉邊緣無(wú)熱灼傷的幼苗；(3)第(2)步選出的幼苗在第3片真葉期分別接種霜霉菌和ZYMV；對(duì)霜霉菌和ZYMV均表現(xiàn)為抗性或耐性的苗，即為具耐熱、耐濕性的黃瓜育種材料。本發(fā)明的苗期無(wú)破壞快速鑒定具耐熱、耐濕性黃瓜育種材料的方法，對(duì)幼苗無(wú)破壞性，通過(guò)三項(xiàng)簡(jiǎn)單的形態(tài)特征指標(biāo)即可鑒定出具耐熱、耐濕性的黃瓜育種材料，容易學(xué)習(xí)和操作，并且該方法的相關(guān)性好，準(zhǔn)確率高。
文檔編號(hào)A01G1/00GK102523854SQ20101058391
公開(kāi)日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2010年12月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月10日
發(fā)明者劉立功, 張峰 申請(qǐng)人:北京市農(nóng)林科學(xué)院