專利名稱：一種水生鳶尾體細(xì)胞再生的組培方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種利用水生鳶尾體細(xì)胞胚進(jìn)行再生的組培方法。
背景技術(shù)：
水生鳶尾系鳶尾科鳶尾屬的多年生水生植物，原產(chǎn)美國路易斯安娜州。此類鳶尾在北美和歐洲一些國家早已被廣泛應(yīng)用，其花色豐富，花期長達(dá)4 5個月，不僅具有花大、 色艷、葉花并觀等優(yōu)良觀賞性狀，而且還有較強(qiáng)的適應(yīng)性，表現(xiàn)抗寒、耐旱、耐粗放，同時還能在我國長江以南周年保持常綠。目前該系列花卉植物的市場形勢看好，但由于其主要以分株、種子進(jìn)行繁殖，繁殖速度較慢，且費工費時，因此優(yōu)質(zhì)苗木供不應(yīng)求，滿足不了市場的需求。以往水生鳶尾組培快繁都是通過器官發(fā)生途徑，由外植體分化不定芽后再生植株，故存在外植體誘導(dǎo)愈傷組織周期較長，如從外植體消毒到獲得愈傷組織至少需要一個半月，其他各階段的培養(yǎng)時間也均在一個月左右，導(dǎo)致獲得無菌苗速度較慢、繁殖系數(shù)不夠高、且無菌苗長期連續(xù)增殖極易發(fā)生退化和變異等缺點。體細(xì)胞胚發(fā)生是由植物體細(xì)胞在離體條件下通過與合子胚類似的發(fā)育途徑形成新個體的過程，相對于器官發(fā)生而言，體細(xì)胞胚發(fā)生具有數(shù)量多、速度快、結(jié)構(gòu)完整、再生率高、后代遺傳穩(wěn)定性高等優(yōu)點。浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院從美國引進(jìn)水生鳶尾新品種后，擬通過體細(xì)胞胚再生途徑的組培技術(shù)大量繁殖無菌苗，以滿足國內(nèi)市場的需要。目前關(guān)于水生鳶尾組織培養(yǎng)方面的研究(賈明良，2010 ；劉慧春，2009 ；吳月燕，2009 ；王鵬，2009 ；楊俊梅，2009 ；張翼飛，2009 ； 黃潔，2008 ；朱旭東，2007，2009 ；徐立軍，2005 ；張金政，2004 ；黃蘇珍，1999，2003 ；陳德芬， 1997)，均是通過器官發(fā)生途徑再生植株。而通過體細(xì)胞胚途徑再生植株的研究在槐樹 (Plata，1990)、香雪蘭(王麗，1991 ； 1998)、福祿考(井忠平，1992)、仙客來(李會寧，2001 ； 曲復(fù)寧，2003)、長壽花(馬國華，2003 ；王桂蘭，2003)、蘭考泡桐(Ipekci，2003)、黃枝闊葉椴(Chalupa，2003)、黑種草(Elhag，2004)、月季(瞿素萍，2006)、地被菊(蔣細(xì)旺，2008)、 多花薔薇(田傳衛(wèi)，2008)等觀賞植物上已有報道。但關(guān)于水生鳶尾體細(xì)胞胚再生途徑的組培技術(shù)研究，在國內(nèi)外均未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是，針對水生鳶尾常規(guī)組織快繁技術(shù)中所存在的外植體誘導(dǎo)愈傷組織周期長、獲得無菌苗速度慢、繁殖系數(shù)低、無菌苗長期連續(xù)增殖極易發(fā)生退化和變異等缺陷，提供一種能大量快速繁殖結(jié)構(gòu)完整、再生率高、無菌種苗后代遺傳穩(wěn)定的水生鳶尾組織培養(yǎng)的方法。本發(fā)明目的通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)?！N水生鳶尾體細(xì)胞再生的組培方法，該方法按如下步驟進(jìn)行(1)培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的組分與各組分每升所含重量為1)基本培養(yǎng)基水生鳶尾芽誘導(dǎo)采用MS培養(yǎng)基，葉片胚狀體誘導(dǎo)和增殖、壯苗及生根均采用WPM培養(yǎng)基；其中，白糖15 60g/L，瓊脂5 8g/L，pH5. 6 5. 8 ；2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+6-BA0. 5 1. Omg/L 和 NAA0. 2 0. 5mg/L ；3)葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)基:WPM+ZT 0. O 1. Omg/L,TDZ 0. 25 0. 3mg/L 禾口 2，4_D 0. O 0. lmg/L ；4)繼代增殖培養(yǎng)基:WPM+ZT 0. 5 1. Omg/L,TDZ 0. 25 0. 3mg/L 禾Π 2，4-D0. 05 0. lmg/L ；5)壯苗培養(yǎng)基:WPM+BA0. 3 1. Omg/L 和 NAA0. 1 0. 3mg/L ；6)生根培養(yǎng)基:WPM+IBA0. 5 1. 5mg/L+NAA0. 5 1. 5mg/L ；(2)水生鳶尾脫毒組培苗的培養(yǎng)1)外植體的采取與滅菌取健壯水生鳶尾植株剪除基部以上葉片及根系后的幼嫩芽，經(jīng)10%洗潔精浸泡8 IOmiru流水沖洗3 4h后，于超凈工作臺上用無菌水沖洗干凈；用70%酒精浸泡30 60s，再用0. 升汞水溶液浸泡8 IOmin進(jìn)行滅菌后用無菌水沖洗5 6次；將其莖尖組織塊撥出、切成0. 2 0. 5cm3小塊作為外植體，備用；2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)將上述莖尖外植體接種到步驟(1) 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在溫度 25士2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行芽誘導(dǎo)培養(yǎng)10 20天至誘導(dǎo)形成叢生芽；3)葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)將上述叢生芽上的葉片切下并接種到步驟(1)3)葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在溫度25士2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)15 30天至誘導(dǎo)形成胚狀體或芽；4)繼代增殖培養(yǎng)將上述胚狀體或芽轉(zhuǎn)接到步驟(1)4)繼代增殖培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)溫度25士2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行增殖培養(yǎng)10 15天至形成叢生芽；根據(jù)對叢生芽數(shù)量的需求，每隔10 20天按同樣方法將所形成的叢生芽進(jìn)行
一次再增殖；5)壯苗培養(yǎng)將上述叢生芽轉(zhuǎn)接到步驟⑴5)壯苗培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)溫度 25 士 2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行壯苗培養(yǎng)20 30天至苗高6 8 cm ；6)生根培養(yǎng)將上述6 8cm高的壯苗轉(zhuǎn)接到步驟(1)6)生根培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度25士2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行生根培養(yǎng)15 30天，至基部長出1 5根根系即成水生鳶尾脫毒組培苗；(3)組培苗的移栽與培養(yǎng)將長高至10 15cm、長根> 5根的組培苗，移栽至由沙壤土 泥炭黃壤土按體積6:3:1的混合基質(zhì)中，在溫度25 ^°C，濕度70 85%， 光照宜先弱后強(qiáng)并控制在ΙΟΟΟΟΙχ以下條件下培養(yǎng)1 2個月后，即成水生鳶尾生產(chǎn)苗。本發(fā)明的有益效果是1)以無菌苗的葉片作為胚狀體誘導(dǎo)的外植體，這在大量節(jié)約外植體材料的同時也解決了體細(xì)胞再生過程中初代培養(yǎng)的污染問題，從而大大降低了組培成本，提高了效率；2)建立的水生鳶尾體細(xì)胞再生途徑的組培快繁技術(shù)體系，繁殖系數(shù)大、速度快、結(jié)構(gòu)完整、再生率高，與一般的器官發(fā)生途徑的組培方法比較，在整個組培周期上縮短了 75
4天，瓶苗增殖系數(shù)增加了 2. 4倍，組培苗生根率和移栽成活率達(dá)均100%，適合工廠化育苗， 可商品化生產(chǎn)。
具體實施例方式通過以下實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。對實施例所涉材料的說明ZT 玉米素(6-Trans-zeatin Riboside), Sigma 進(jìn)口國內(nèi)分裝，分析純，純度 95%。TDZ:噻苯隆(Thidiazuron)，Sigma進(jìn)口國內(nèi)分裝，分析純，純度99. 9%。2，4-D :2，4-二氯苯氧乙酸 Q，4-Dichloropohenoxyacetic acid), Sigma 進(jìn)口國內(nèi)分裝，分析純，純度98%。6-BA :6-芐氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine)，Sigma進(jìn)口國內(nèi)分裝，分析純，純度 99. 9%。IBA 卩引哚-3-丁酸(3-Indole butytic acid)，Sigma 進(jìn)口國內(nèi)分裝，分析純，純度 99%。NAA :a_ 萘乙酸(1-Naphthylacetic acid)，Sigma 進(jìn)口 國內(nèi)分裝，分析純，純度 99. 5%。洗潔精立白普通洗潔精，廣州立白企業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)。實施例1 ( 一種水生鳶尾體細(xì)胞再生的組培方法1)(1)培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的組分與各組分在每升培養(yǎng)基中所含重量為1)基本培養(yǎng)基水生鳶尾芽誘導(dǎo)采用MS培養(yǎng)基，葉片胚狀體誘導(dǎo)和繼代增殖、壯苗及生根培養(yǎng)的培養(yǎng)基均采用WPM基本培養(yǎng)基；其中，瓊脂為5g/L，pH5. 8 ；2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基白糖 30g/L 的 MS+6-BA 0. 5mg/L 和 NAA 0. 2mg/L ；3)葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)基白糖30g/L的WPM+ZT 0. 5mg/L+TDZ 0. 25mg/L和2， 4-D 0.lmg/L ；4)繼代增殖培養(yǎng)基白糖為 30g/L 的 WPM+ZT 0. 5mg/L+TDZ0. 25mg/L 和 2，4_D 0. lmg/L ；5)壯苗培養(yǎng)基白糖為 30g/L 的 WPM+BA1. Omg/L 和 NAA 0. 3mg/L ；6)生根培養(yǎng)基白糖為 20g/L 的 WPM+IBAO. 5mg/L+NAA 1. 5mg/L ；(2)水生鳶尾脫毒組培苗的培養(yǎng)1)外植體的采取與滅菌取健壯水生鳶尾植株剪除基部以上葉片及根系后的幼嫩芽，經(jīng)10%立白洗潔精浸泡8min、流水沖洗3 4h后，于超凈工作臺上用無菌水沖洗干凈；用70%酒精浸泡30s，再用0. 升汞水溶液浸泡Smin進(jìn)行滅菌后用無菌水沖洗5 6 次；將其莖尖組織塊撥出、切成0. 2cm3小塊作為外植體，備用；2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)將上述莖尖外植體塊接種到步驟(1) 2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在溫度 25士 2°C，光強(qiáng)2000Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行芽誘導(dǎo)培養(yǎng)15天至誘導(dǎo)形成叢生芽；3)葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)將上述叢生芽上的葉片切下并接種到步驟(1) 3)葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在溫度25士2°C，光強(qiáng)2000Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)22天至誘導(dǎo)形成胚狀體或芽；4)繼代增殖培養(yǎng)將上述胚狀體或芽轉(zhuǎn)接到步驟(1)4)繼代增殖培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)溫度25士2°C，光強(qiáng)2000Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行增殖培養(yǎng)12天至形成叢生芽；根據(jù)對叢生芽數(shù)量的需求，每隔10 20天按同樣方法將所形成的叢生芽進(jìn)行一次再增殖；5)壯苗培養(yǎng)將上述叢生芽轉(zhuǎn)接到步驟⑴5)壯苗培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)溫度 25士2°C，光強(qiáng)2000Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行壯苗培養(yǎng)25天至苗高6 8cm ；6)生根培養(yǎng)將上述6 8cm高的壯苗轉(zhuǎn)接到步驟(1)6)生根培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度25 士 2°C，光強(qiáng)2000Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行生根培養(yǎng)23天，至基部長出1 5 根根系即成水生鳶尾脫毒組培苗；(3)組培苗的移栽與培養(yǎng)將長高至10 15cm、長根> 5根的組培苗，移栽至由沙壤土泥炭黃壤土按體積6 3 1的混合基質(zhì)中，在溫度觀！，濕度85%，光照宜先弱后強(qiáng)并控制在ΙΟΟΟΟΙχ以下的條件下培養(yǎng)1 2個月后，即成水生鳶尾生產(chǎn)苗。實施例2 ( 一種水生鳶尾體細(xì)胞再生的組培方法2)本實施例，基本培養(yǎng)基中的瓊脂為7g/L，pH為5. 7 ；芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為白糖20g/ L的MS+6-BA 0. 8mg/L和NAA 0. 3mg/L ；葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)基為白糖20g/L的WPM+ZT 1. Omg/L+TDZ 0. ^mg/L ；繼代增殖培養(yǎng)基為白糖 20g/L 的 WPM+ZT 1. Omg/L+TDZ 0. 28mg/L 和 2，4-D 0. 05mg/L ；壯苗培養(yǎng)基為白糖 15g/L 的 WPM+BA 0. 5mg/L和 NAA 0. lmg/L ；生根培養(yǎng)基為白糖15g/L的WPM+TBA1. 0和NAA 0. 5mg/L ；幼嫩芽經(jīng)70%酒精浸泡45秒，0. 1 %升汞水溶液浸泡9分鐘后，撥出莖尖組織塊并切成0. 35cm3小塊；芽誘導(dǎo)、葉片胚狀體誘導(dǎo)、繼代增殖、壯苗及生根培養(yǎng)各階段的光強(qiáng)均為1500LX，各階段培養(yǎng)的時間分別為20天、15天、 15天、30天及15天；組培苗移栽培養(yǎng)的溫度為25°C，濕度為70% ；其余步驟工藝同于實施例1。實施例3 ( 一種水生鳶尾體細(xì)胞再生的組培方法3)本實施例，基本培養(yǎng)基中的瓊脂為8g/L，pH為5. 6 ；芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為白糖60g/ L的MS+6-BA 1. Omg/L和NAA 0. 5mg/L ；葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)基為白糖60g/L的WPM+TDZ 0. 3mg/L 和 2，4-DO. 05mg/L ；繼代增殖培養(yǎng)基為白糖 60g/L 的 WPM+ZTO. 75mg/L, TDZ 0. 3mg/L 和 2，4-DO. 075mg/L ；壯苗培養(yǎng)基為白糖 30g/L 的 WPM+BA 0. 3mg/L 和 NAA 0. 2mg/ L ；生根培養(yǎng)基為白糖30g/L的WPM+IBA1. 5和NAA1. Omg/L ；幼嫩芽經(jīng)70%酒精浸泡60秒， 0. 升汞水溶液浸泡10分鐘后，撥出莖尖組織塊并切成0. 5cm3小塊；芽誘導(dǎo)、葉片胚狀體誘導(dǎo)、繼代增殖、壯苗及生根培養(yǎng)各階段的光強(qiáng)均為2500LX，各階段培養(yǎng)的時間分別為10 天、30天、10天、20天及30天；組培苗移栽培養(yǎng)的溫度為^°C，濕度為75%;其余步驟工藝同于實施例1。試驗例(水生鳶尾由器官與體細(xì)胞胚不同發(fā)生途徑組培方法的效果對比試驗)1)器官發(fā)生途徑的組培本試驗例基本培養(yǎng)基均采用MS培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的瓊脂為5g/L，pH為5. 8 ；愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基為白糖30g/L的MS+6-BA 2. Omg/L和NAA 0. 3mg/L ； 芽分化培養(yǎng)基為白糖20g/L的MS+6-BA 1. 0mg/L和NAA 0. 3mg/L ；芽增殖培養(yǎng)基為白糖 20g/L 的 MS+6-BA 1. 0mg/L 和 NAA 0. 3mg/L ；壯苗培養(yǎng)基為白糖 20g/L 的 MS+BA 0. 2mg/L 和NAA 0. lmg/L ；生根培養(yǎng)基為白糖20g/L的MS+NAA0. 5mg/L ；幼嫩葉片經(jīng)70%酒精浸泡 30秒，0. 升汞水溶液浸泡6分鐘后，將葉片切成0. 3cm2小塊；愈傷誘導(dǎo)、芽分化、芽增殖、壯苗、生根各階段的培養(yǎng)溫度為25+2°C，光強(qiáng)均為1500Lx，各階段培養(yǎng)的時間分別為45天、 40天、27天、30天及30天；組培苗移栽培養(yǎng)的溫度為^°C，濕度為80% ；2)體細(xì)胞胚發(fā)生途徑的組培本試驗的步驟、工藝均同于實施例1。通過對比試驗可以看出，水生鳶尾由本發(fā)明體細(xì)胞胚作為發(fā)生途徑的組培方法比對照，在整個組培周期上縮短了 75天，瓶苗的增殖系數(shù)增加了 2. 4倍、苗子質(zhì)量如生根率和移栽成活率均達(dá)100%，因此育苗成本有了顯著下降。具體結(jié)果見表1 :表1不同發(fā)生途徑組培方法對比
權(quán)利要求
1. 一種水生鳶尾體細(xì)胞再生的組培方法，其特征在于按如下步驟進(jìn)行(1)培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的組分與各組分每升所含重量為1)基本培養(yǎng)基水生鳶尾芽誘導(dǎo)采用MS培養(yǎng)基，葉片胚狀體誘導(dǎo)和增殖、壯苗及生根均采用WPM培養(yǎng)基；其中，白糖15 60g/L，瓊脂5 8g/L，pH5. 6 5. 8 ；2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+6-BA0.5 1. Omg/L 和 ΝΑΑ0. 2 0. 5mg/L ；3)葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)基:WPM+ZT0. 0 1. Omg/L、TDZ 0. 25 0. 3mg/L和2，4_D 0. 0 0. lmg/L ；4)繼代增殖培養(yǎng)基:WPM+ZT0. 5 1. Omg/L、TDZ 0. 25 0. 3mg/L 和 2，4_D0. 05 0. lmg/L ；5)壯苗培養(yǎng)基:WPM+BA0.3 1. Omg/L 和 NAAO· 1 0. 3mg/L ；6)生根培養(yǎng)基:WPM+IBA0.5 1. 5mg/L+NAA0. 5 1. 5mg/L ；(2)水生鳶尾脫毒組培苗的培養(yǎng)1)外植體的采取與滅菌取健壯水生鳶尾植株剪除基部以上葉片及根系后的幼嫩芽， 經(jīng)10%洗潔精浸泡8 IOmiru流水沖洗3 4h后，于超凈工作臺上用無菌水沖洗干凈；用 70%酒精浸泡30 60s，再用0. 升汞水溶液浸泡8 IOmin進(jìn)行滅菌后用無菌水沖洗 5 6次；將其莖尖組織塊撥出、切成0. 2 0. 5cm3小塊作為外植體，備用；2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)將上述莖尖外植體接種到步驟⑴2)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在溫度 25士2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行芽誘導(dǎo)培養(yǎng)10 20天至誘導(dǎo)形成叢生芽；3)葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)將上述叢生芽上的葉片切下并接種到步驟(1)3)葉片胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在溫度25士2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)15 30天至誘導(dǎo)形成胚狀體或芽；4)繼代增殖培養(yǎng)將上述胚狀體或芽轉(zhuǎn)接到步驟(1)4)繼代增殖培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)溫度25士2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行增殖培養(yǎng)10 15天至形成叢生芽；根據(jù)對叢生芽數(shù)量的需求，每隔10 20天按同樣方法將所形成的叢生芽進(jìn)行一次再增殖；5)壯苗培養(yǎng)將上述叢生芽轉(zhuǎn)接到步驟(1) 壯苗培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)溫度25士2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間12h/d條件下進(jìn)行壯苗培養(yǎng)20 30天至苗高6 8cm ；6)生根培養(yǎng)將上述6 8cm高的壯苗轉(zhuǎn)接到步驟(1)6)生根培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度 25士2°C，光強(qiáng)1500 2500Lx，光照時間Uh/d條件下進(jìn)行生根培養(yǎng)15 30天，至基部長出1 5根根系即成水生鳶尾脫毒組培苗；(3)組培苗的移栽與培養(yǎng)將長高至10 15cm、長根>5根的組培苗，移栽至由沙壤土泥炭黃壤土按體積6:3:1的混合基質(zhì)中，在溫度25 ^°C，濕度70 85%，光照宜先弱后強(qiáng)并控制在ΙΟΟΟΟΙχ以下條件下培養(yǎng)1 2個月后，即成水生鳶尾生產(chǎn)苗。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種水生鳶尾體細(xì)胞再生的組培方法，屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。方法包括(1)培養(yǎng)基的配制；(2)水生鳶尾脫毒組培苗的培養(yǎng)(3)組培苗的移栽與培養(yǎng)等步驟。本發(fā)明以無菌苗葉片作為胚狀體誘導(dǎo)外植體所建立的組培快繁技術(shù)體系，具有繁殖系數(shù)大、速度快、結(jié)構(gòu)完整、再生率高及生產(chǎn)成本低等特點，與一般器官組培方法相比較，在整個組培周期上縮短了75天，瓶苗增殖系數(shù)增加了2.4倍，組培苗生根率和移栽成活率達(dá)均100％，適合工廠化育苗，可商品化生產(chǎn)。本方法可在水生鳶尾種苗的企業(yè)化生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。
文檔編號A01H4/00GK102165920SQ20111004258
公開日2011年8月31日 申請日期2011年2月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月21日
發(fā)明者劉慧春, 周江華, 朱開元, 鄒清成, 金久宏 申請人:浙江省蕭山棉麻研究所