專利名稱：紅花萱草組培配方及其培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種紅花萱草組培技術(shù)。
背景技術(shù)：
萱草為百合科多年生草本宿根花卉，原產(chǎn)我國(guó)、日本及歐洲南部。色彩華麗，廣泛用于城市綠化和園林景觀建設(shè)。除藍(lán)色和純白色以外其余花色均有栽培品種?；◤阶兓?，花期從晚春一直到秋季，大多數(shù)品種花期幾周甚至幾個(gè)月。一般采用分株、莖芽扦插等無(wú)性繁殖方式進(jìn)行增殖，由于其速度慢，一般1株萱草每年僅可繁殖4 5株，因而難以適應(yīng)市場(chǎng)商品化生產(chǎn)的需求。紅花萱草的葉狹長(zhǎng)，花呈喇叭形，花莖短而適中，花形各異。具有觀賞價(jià)值高、適應(yīng)性強(qiáng)、栽培管理粗放等特點(diǎn)。近年來(lái)市場(chǎng)對(duì)紅花萱草種苗的需求量越來(lái)越大，特別是紅花萱草的優(yōu)良品種。因此，找到紅花萱草快速繁殖的技術(shù)和方法，加速紅花萱草的推廣應(yīng)用也就顯得至關(guān)重要。萱草繁殖方式常采用種子繁殖，也可用分株和扦插繁殖，但是，利用傳統(tǒng)方式繁殖，其株型一致性較差，植株變異性較大，優(yōu)良性狀無(wú)法保持，因此，研究萱草離體快繁技術(shù)，進(jìn)一步提高萱草的觀賞應(yīng)用價(jià)值及其對(duì)北方環(huán)境條件的不斷適應(yīng)性，使其在園林綠化中能夠得到更廣泛的應(yīng)用，具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種可以快速大量的繁殖組培苗，能應(yīng)用于工廠化生產(chǎn)的紅花萱草組培配方。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的它包括最佳外植體花托；消毒時(shí)間0. (質(zhì)量百分比)升汞IOmin芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+6-BA1. Omg · L_1+KT 1. Omg · Γ1繼代增值培養(yǎng)基MS+6-BA2.Omg · I^+NAAO. Img · Γ1生根培養(yǎng)基1/2MS+NAA0. 2mg · Γ1上述培養(yǎng)基均添加3% (質(zhì)量百分比)蔗糖和0.8% (質(zhì)量百分比)瓊脂，ρΗ值 5. 8培養(yǎng)溫度為250C，光照時(shí)間為12h · cf1，光照強(qiáng)度約25 30 μ mol · m_2 · s-1移栽蛭石黑土 細(xì)沙=1:2:1本發(fā)明的紅花萱草組培配方還包括這樣一些技術(shù)特征1、所述的MS培養(yǎng)基為工作液濃度為單位mg/L，其中包含大量元素NH4NO31650、KNO3 1900、CaCl2 · 2H20 440、MgSO4 · 7H20 370、KH2PO4 170 ；微量元素KI0.83、H3BO3 6. 2、MnSO4 · 4H20 22. 3、ZnSO4 · 7H20 8.6、Na2MnO4 · 2Η200· 25、CuSO4 · 5Η20 0. 025、CoCl2 · 6Η20 0. 025 ；鐵鹽=FeSO4· 7Η20 27. 8、Na2-EDTA · 2Η20 37. 3 ；有機(jī)物質(zhì)肌醇100、煙酸0. 5、鹽酸吡哆醇(維生素Β6)0. 5、鹽酸硫胺素(維生素 Β1)0· 1、甘氨酸 2.0 ；2、所述的NAA為萘乙酸；3、所述的6-ΒΑ為6_芐基嘌呤；4、所述的KT為激動(dòng)素。本發(fā)明采用組織培養(yǎng)的方法，利用不同種類和不同濃度的激素配比，將紅花萱草進(jìn)行快速擴(kuò)繁，從而得到于紅花萱草“紅寶石”快速繁殖的最佳組培配方。本發(fā)明的另一目的在于提供一種紅花萱草組培的培養(yǎng)方法，它包括以下幾個(gè)步驟首先，播種紅花萱草‘紅寶石’的種子，得到播種苗，采集健壯的無(wú)病蟲害的花、莖節(jié)、塊莖、花托組織器官，作為組織培養(yǎng)的外植體，將采集到的外植體先混合洗衣粉在流水下沖洗30min，在超凈工作臺(tái)上用75%的酒精消毒10_30s，再用無(wú)菌水沖洗3_5遍，之后用 0. 升汞消毒2-20min ；第二，將消毒后的外植體接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，送入培養(yǎng)室進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)基為MS+6-BA 1. Omg · L^+KT 1. Omg · L—1。，將分化后的外植體繼代到繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng)，得到分化苗，繼代培養(yǎng)基為MS+6-BA2. Omg · L^+NAAO. Img · L—1 ；第三，將分化苗接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0. 2mg · L-1 ；第四，煉苗，把生根后的組培苗在煉苗室中開蓋鍛煉3-5d，然后移栽到蛭石黑土 細(xì)沙=1:2:1的基質(zhì)中，得到成品。本發(fā)明采用組織培養(yǎng)的方法，通過(guò)消毒外植體，得到無(wú)菌系，繼而利用不同種類和不同濃度的外源激素的配比，對(duì)組培苗進(jìn)行繼代增殖、生長(zhǎng)及生根進(jìn)行篩選、調(diào)控，最后確定最佳的外植體與培養(yǎng)基配方，使其能應(yīng)用于工廠化生產(chǎn)。創(chuàng)新點(diǎn)在于本發(fā)明的組培配方是將紅花萱草“紅寶石”大量擴(kuò)繁的最佳組合，可以快速大量的繁殖組培苗，以適應(yīng)園林綠化需要，而且一直未見(jiàn)其他團(tuán)隊(duì)有相關(guān)相似報(bào)道，尚屬國(guó)內(nèi)首例。本發(fā)明對(duì)紅花萱草‘紅寶石’品種的花、莖節(jié)、塊莖等外植體進(jìn)行了系列組培快繁研究，取得了較好的結(jié)果，但以花托為外植體進(jìn)行組培快繁，效果更優(yōu)于花莖節(jié)和塊莖，且取花托不影響母本植株正常生長(zhǎng)。本發(fā)明方法在消毒時(shí)間和效果、操作方法和再生效率、 生產(chǎn)成本等方面都明顯優(yōu)于以往的幾個(gè)黃色花系萱草品種的組培快繁，所建立的規(guī)?；唐飞a(chǎn)體系穩(wěn)定、周期較短(大約2個(gè)月左右)，能夠滿足規(guī)模化快繁生產(chǎn)。本發(fā)明主要應(yīng)用于紅花萱草“紅寶石”的快速擴(kuò)繁，使其應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)中。彌補(bǔ)了紅花萱草快速、工廠化繁殖的空白。


圖1為本發(fā)明培養(yǎng)方法的流程示意圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明結(jié)合圖1，首先，播種紅花萱草‘紅寶石’的種子，得到一定量的播種苗，本實(shí)施例中得到的播種苗量約為500株，采集健壯的無(wú)病蟲害的花、莖節(jié)、塊莖、花托等組織器官，作為組織培養(yǎng)的外植體。將采集到的外植體先混合洗衣粉在流水下沖洗30min，其中混合與外植體質(zhì)量相等的洗衣粉，在超凈工作臺(tái)上用75%的酒精消毒10-30s，再用無(wú)菌水沖洗3-5遍， 之后用0. 升汞消毒2-20min，篩選出最佳的外植體消毒方法0. 1% (質(zhì)量百分比)升汞 IOmin0第二，將消毒后的外植體接種到準(zhǔn)備好的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，送入培養(yǎng)室進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)室的培養(yǎng)溫度為25°C，光照時(shí)間為12h .(Γ1，光照強(qiáng)度約25 30μπιΟ1 ·πΓ2 -S^10 在這一過(guò)程中，根據(jù)不同培養(yǎng)基上各外植體分化情況的不同篩選出芽誘導(dǎo)得較好的外植體種類和培養(yǎng)基類型。效果最好的外植體為花托，培養(yǎng)基為MS+6-BA 1. Omg · L^+KT 1. Omg. T10將分化得較好的外植體繼代到繼代增殖培養(yǎng)基上(有3個(gè)以上明顯的分化芽)，經(jīng)過(guò)3 4輪的繼代培養(yǎng)，得到2 3倍數(shù)量的分化苗。效果最好的繼代培養(yǎng)基為 MS+6-BA2. Omg · I^+NAAO. Img · Γ1。第三，將生長(zhǎng)得健壯的分化苗接種到生根培養(yǎng)基上，進(jìn)行生根培養(yǎng)。在這一過(guò)程中，篩選出生根較好的培養(yǎng)基。生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0. ang·!/1。(1/2MS培養(yǎng)基是MS 培養(yǎng)基的大量元素減半)。做完生根培養(yǎng)的分化苗下一步就要經(jīng)過(guò)煉苗，然后移栽，從而真正的進(jìn)入園林綠化中。煉苗，一般要把生根較好的組培苗在煉苗室中開蓋鍛煉3-5d，然后移栽到蛭石 黑土 細(xì)沙=1 2 1的基質(zhì)中，移栽成活率在95%左右。本實(shí)施例實(shí)施過(guò)程中，對(duì)大量的培養(yǎng)基配方進(jìn)行比對(duì)，得到以下組分最佳外植體花托消毒時(shí)間0. (質(zhì)量百分比)升汞IOmin芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+6-BA1. Omg · L_1+KT 1. Omg · Γ1繼代增值培養(yǎng)基MS+6-BA2.Omg · I^+NAAO. Img · Γ1生根培養(yǎng)基1/2MS+NAA0. 2mg · Γ1上述培養(yǎng)基均添加3% (質(zhì)量百分比)蔗糖和0.8% (質(zhì)量百分比)瓊脂，ρΗ值 5. 8培養(yǎng)溫度為25°C，光照時(shí)間為12h · cT1，光照強(qiáng)度約25 30μπιΟ1 · πΓ2 · s—1移栽蛭石黑土細(xì)沙=1:2:1其中1、MS培養(yǎng)基配方單工作液濃度單位mg/L大量元素=NH4NO31650 KNO3 1900 CaCl2 · 2H20 440 MgSO4 · 7H20 370 KH2PO4 170微量元素=KI0. 83 H3BO3 6. 2 MnSO4 · 4H20 22. 3 ZnSO4 · 7H20 8. 6 Na2MnO4 · 2H20 0. 25CuS04 · 5H20 0. 025 CoCl2 · 6H20 0. 025鐵鹽=FeSO4 · 7H20 (27. 8) Na2-EDTA · 2H20 (37. 3) 有機(jī)物質(zhì)肌醇100煙酸0. 5鹽酸吡哆醇(維生素B6)0. 5鹽酸硫胺素(維生素 Β1)0· 1甘氨酸2.0
2、NAA為萘乙酸3、6_BA為6_芐基嘌呤4、KT為激動(dòng)素。
權(quán)利要求
1.一種紅花萱草組培配方，其特征在于它包括 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+6-BA 1. Omg · L-1+KT 1. Omg · L-1 繼代增值培養(yǎng)基MS+6-BA2. Omg · I^+NAAO. Img · Γ1 生根培養(yǎng)基1/2MS+NAA 0. 2mg · Γ1上述培養(yǎng)基均添加3%質(zhì)量百分比的蔗糖和0. 8%質(zhì)量百分比的瓊脂，ρΗ值5. 8。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紅花萱草組培配方，其特征在于所述的MS培養(yǎng)基為 工作液濃度單位為mg/L，其中包含大量元素NH4NO3 1650、KNO3 1900、CaCl2 · 2H20 440、MgSO4 · 7H20 370、KH2PO4 170 ； 微量元素:KI 0. 83、H3BO3 6. 2、MnSO4 · 4H20 22. 3、ZnSO4 · 7H20 8. 6、Na2MnO4 · 2H20 0. 25、CuSO4 · 5H20 0. 025、CoCl2 · 6H20 0. 025 ；鐵鹽:FeS04 · 7H20 27. 8, Na2-EDTA · 2H20 37. 3 ；有機(jī)物質(zhì)肌醇100、煙酸0. 5、鹽酸吡哆醇0. 5、鹽酸硫胺素0. 1、甘氨酸2. 0。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的紅花萱草組培配方，其特征在于所述的NAA為萘乙酸。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的紅花萱草組培配方，其特征在于所述的6-BA為6-芐基嘌呤。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的紅花萱草組培配方，其特征在于所述的KT為激動(dòng)素。
6.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的紅花萱草組培方法，其特征在于它包括以下幾個(gè)步驟 首先，播種紅花萱草‘紅寶石’的種子，得到播種苗，采集健壯的無(wú)病蟲害的花、莖節(jié)、塊莖、花托組織器官，作為組織培養(yǎng)的外植體，將采集到的外植體先混合洗衣粉在流水下沖洗 30min,在超凈工作臺(tái)上用75%的酒精消毒10_30s，再用無(wú)菌水沖洗3_5遍，之后用0. 1 %升汞消毒2-20min ；第二，將消毒后的外植體接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，送入培養(yǎng)室進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)基為 MS+6-BA 1. Omg-L^+KT 1. Omg .L—1。，將分化后的外植體繼代到繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng)，得到分化苗，繼代培養(yǎng)基為MS+6-BA2. Omg · L^+NAAO. Img · L—1 ；第三，將分化苗接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0. 2mg · L-1 ；第四，煉苗，把生根后的組培苗在煉苗室中開蓋鍛煉3-5d，然后移栽到蛭石黑土細(xì)沙=1 2 1的基質(zhì)中，得到成品。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的紅花萱草組培方法，其特征在于所述的外植體優(yōu)選為花托。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的紅花萱草組培方法，其特征在于所述的外植體消毒方法優(yōu)選 0. 質(zhì)量百分比的升汞lOmin。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的紅花萱草組培方法，其特征在于所述的培養(yǎng)室的培養(yǎng)溫度為 25°C，光照時(shí)間為12h · cf1，光照強(qiáng)度約25 30 μ mo 1 · m_2 · s—1。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種紅花萱草組培配方及其培養(yǎng)方法，通過(guò)消毒外植體，得到無(wú)菌系，繼而利用不同種類和不同濃度的外源激素的配比，對(duì)組培苗進(jìn)行繼代增殖、生長(zhǎng)及生根進(jìn)行篩選、調(diào)控，最后確定最佳的外植體與培養(yǎng)基配方，使其能應(yīng)用于工廠化生產(chǎn)。本發(fā)明的組培配方可以將紅花萱草“紅寶石”大量擴(kuò)繁，可以快速大量的繁殖組培苗，以適應(yīng)園林綠化需要。本發(fā)明方法在消毒時(shí)間和效果、操作方法和再生效率、生產(chǎn)成本等方面都明顯優(yōu)于以往的幾個(gè)黃色花系萱草品種的組培快繁，所建立的規(guī)?；唐飞a(chǎn)體系穩(wěn)定、周期較短，能夠滿足規(guī)模化快繁生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102172224SQ201110072438
公開日2011年9月7日 申請(qǐng)日期2011年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月24日
發(fā)明者盧寶偉, 唐翠, 孟慶敏, 安鳳霞, 徐國(guó)柱, 景向欣, 李偉, 王洪軍, 蘇小霞, 鄭寶仁, 黃石竹 申請(qǐng)人:黑龍江生態(tài)工程職業(yè)學(xué)院