專利名稱：一種耐高溫褐牙鲆新品種的選育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種耐高溫褐牙鲆新品種的選育方法，屬農(nóng)業(yè)海水養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
褐牙鲆QParalich thys olivaceus )，也稱牙鲆，俗稱牙片、偏口、比目魚，是名貴的 海產(chǎn)魚類，又是重要的海水增養(yǎng)殖魚類之一，屬鰈形目、鰈亞目、鲆科、牙鲆亞科、牙鲆屬。具 有生長(zhǎng)快、個(gè)體大、繁殖力強(qiáng)、洄游性小的特點(diǎn)，是開(kāi)展近海網(wǎng)箱和池塘養(yǎng)殖及工廠化養(yǎng)殖 的適宜品種。目前我國(guó)北方從20世紀(jì)90年代開(kāi)始進(jìn)行了大規(guī)模人工育苗及工廠化養(yǎng)殖， 取得了顯著的經(jīng)濟(jì)效益。浙江海域也逐漸形成規(guī)模，但由于夏季水溫高，只能利用秋季到春 季適宜的水溫期間進(jìn)行階段性的養(yǎng)殖，養(yǎng)殖周期短，當(dāng)水溫25V以上時(shí)，其生長(zhǎng)、攝食等生 理、生態(tài)行為便會(huì)受到影響，水溫大于27°C便停止攝食。經(jīng)浙江沿海池塘養(yǎng)殖試驗(yàn)，夏季高 溫期的成活率僅在30%-40%左右。因此，發(fā)明一種耐高溫褐牙鲆的選育方法，培育出耐高溫 的褐牙鲆新品種，有效解決褐牙鲆“度夏”難的問(wèn)題，將會(huì)極大的帶動(dòng)牙鲆養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)在我國(guó) 南方沿海地區(qū)的發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容
為克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明目的是提供一種耐高溫褐牙鲆新品種的選育 方法。為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)步驟為一、選擇個(gè)體較大、健康無(wú)病的 4-5齡野生馴養(yǎng)褐牙鲆作為后備親本，采用PIT (Passive Integrated Transponder)電子 標(biāo)記識(shí)別。二、用人工授精的方法，以1雌配1-2雄的原則建立50個(gè)牙鲆全同胞家系，其中 包括20個(gè)母系半同胞家系。在各家系Fl代染料標(biāo)記識(shí)別前，分家系隔離培育。三、對(duì)Fl代 家系染料注射標(biāo)記加以區(qū)別，而后各家系各取50尾在同一池混養(yǎng)，養(yǎng)殖至4月齡。四、以每 天升高0. 2°C的緩慢升溫方式對(duì)混養(yǎng)池水進(jìn)行加溫，當(dāng)達(dá)到32°C即牙鲆半致死溫度時(shí)停止 升溫，并維持該水溫至混養(yǎng)池中牙鲆死亡數(shù)量達(dá)到50%后，以每天降低1°C的速度，緩慢恢 復(fù)至正常水溫，統(tǒng)計(jì)各家系的死亡率。五、各家系按死亡率從小到大順序排列，將排名前10 位且死亡率小于50%的家系定義為耐高溫家系，死亡率大于50%的家系為不耐高溫家系，其 余為較耐高溫家系。保留耐高溫和較耐高溫家系Fl代各100尾，在6-7月份放入池塘度夏 養(yǎng)殖，池塘養(yǎng)殖期水溫8-30°C，鹽度M%。- %。，投喂飼料為新鮮、冷凍的小雜魚，養(yǎng)成期為 3年至牙鲆性成熟。六、淘汰在池塘養(yǎng)成期存活率小于5%的家系，最終在各剩余家系Fl代 中分別培育出5-10尾作為親魚，進(jìn)行PIT標(biāo)記，并且利用家系識(shí)別標(biāo)記追溯上一代耐高溫 家系和較耐高溫家系親本，共同作為耐高溫育種的優(yōu)良基礎(chǔ)群體。七、通過(guò)剩余的Fl代家 系間的雜交以及與上一代親本的回交再建立褐牙鲆F2代家系50個(gè)左右，建立方法參照步 驟二。八、重復(fù)步驟三至七，2次以上包括2次，進(jìn)行家系耐高溫篩選試驗(yàn)，最終獲得耐高溫 牙鲆新品種。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是1、親本采用電子標(biāo)記識(shí)別，遺傳背景清晰，有效避免了選育過(guò)程 中近交現(xiàn)象的發(fā)生。2、家系建立以1雌配1-2雄的原則，可為褐牙鲆各項(xiàng)遺傳參數(shù)計(jì)算及選 育分析提供極好的實(shí)驗(yàn)材料，加快選育進(jìn)展。3、耐高溫選擇時(shí)期涉及幼魚期及池塘養(yǎng)成期2 個(gè)階段，充分考慮到褐牙鲆不同生長(zhǎng)時(shí)期對(duì)溫度的耐受性，選擇的個(gè)體更具有耐高溫特性。
具體實(shí)施例本發(fā)明的實(shí)施按以下步驟操作
1、選擇個(gè)體較大、健康無(wú)病的4-5齡野生馴養(yǎng)褐牙鲆200尾作為后備親本，進(jìn)行PIT電 子標(biāo)記；標(biāo)記后強(qiáng)化培養(yǎng)，性腺促熟；
2、選擇性腺成熟度好，個(gè)體健康的親魚，用人工授精的方法，以1雌配1-2雄的原則建 立50個(gè)牙鲆全同胞家系，其中包括20個(gè)母系半同胞家系，在各家系Fl代染料標(biāo)記識(shí)別前， 分家系隔離培育，養(yǎng)殖環(huán)境應(yīng)保持一致；
3、對(duì)全長(zhǎng)IOcm左右的各家系魚苗進(jìn)行染料標(biāo)記，通過(guò)染料的注射部位及染料顏色的 不同對(duì)家系加以區(qū)分，從所有家系中各取50尾在同一池中養(yǎng)殖，養(yǎng)殖至4月齡；
4、以每天升高0.2V的緩慢升溫方式對(duì)混養(yǎng)池進(jìn)行加溫，當(dāng)達(dá)到32°C牙鲆半致死溫度 時(shí)停止升溫，并維持該水溫至混養(yǎng)池中牙鲆死亡數(shù)量達(dá)50%后，以每天降低1°C的速度，緩 慢恢復(fù)至正常水溫，統(tǒng)計(jì)各家系的死亡率；
5、各家系按死亡率從小到大順序排列，將排名前10位且死亡率小于50%的家系定義為 耐高溫家系，死亡率大于50%的家系為不耐高溫家系，其余為較耐高溫家系。保留耐高溫和 較耐高溫家系Fl代各100尾，在6-7月份放入池塘度夏養(yǎng)殖，池塘養(yǎng)殖期水溫8-30°C，鹽度 24%o - %。，投喂飼料為新鮮、冷凍的小雜魚，養(yǎng)成期為3年至牙鲆性成熟；
6、淘汰在池塘養(yǎng)成期存活率小于5%的家系，最終在各剩余家系Fl代中分別培育出 5-10尾作為親魚，進(jìn)行PIT標(biāo)記，并且利用家系識(shí)別標(biāo)記追溯上一代耐高溫家系和較耐高 溫家系親本，共同作為耐高溫育種的優(yōu)良基礎(chǔ)群體；
7、利用各耐高溫和較耐高溫家系Fl代培育出的親魚及上一代保留的親魚進(jìn)行家系雜 交和回交，構(gòu)建新的耐高溫家系50個(gè)，建立方法參照步驟2 ；構(gòu)建時(shí)做好親魚個(gè)體識(shí)別和譜 系認(rèn)定，避免近交；
8、重復(fù)步驟3-7，2次以上包括2次，進(jìn)行家系耐高溫篩選，最終獲得適合我國(guó)南方池塘 養(yǎng)殖“度夏”的褐牙鲆新品種。
權(quán)利要求
1. 一種耐高溫褐牙鲆新品種的選育方法，其特征在于按下列步驟操作(1)選擇個(gè)體較大、健康無(wú)病的4-5齡野生馴養(yǎng)褐牙鲆作為后備親本，進(jìn)行PIT電子標(biāo)記；(2)用人工授精的方法，以1雌配1-2雄的原則建立褐牙鲆半同胞及全同胞家系；(3)對(duì)全長(zhǎng)IOcm左右的各家系魚苗進(jìn)行染料標(biāo)記，通過(guò)染料的注射部位及染料顏色的 不同對(duì)家系加以區(qū)分，從所有家系中各取50尾在同一池中養(yǎng)殖，養(yǎng)殖至4月齡；(4)以每天升高0.2°C的緩慢升溫方式對(duì)混養(yǎng)池進(jìn)行加溫，當(dāng)達(dá)到32°C牙鲆半致死溫 度時(shí)停止升溫，并維持該水溫至混養(yǎng)池中牙鲆死亡數(shù)量達(dá)50%后，以每天降低1°C的速度， 緩慢恢復(fù)至正常水溫，統(tǒng)計(jì)各家系的死亡率；(5)各家系按死亡率從小到大順序排列，將排名前10位且死亡率小于50%的家系定 義為耐高溫家系，死亡率大于50%的家系為不耐高溫家系，其余為較耐高溫家系；保留耐 高溫和較耐高溫家系Fl代各100尾，在6-7月份放入池塘度夏養(yǎng)殖，池塘養(yǎng)殖期年水溫在 8-30°C，鹽度M%。- %。，投喂飼料為新鮮、冷凍的小雜魚，養(yǎng)成期為3年至牙鲆性成熟；(6)淘汰在池塘養(yǎng)成期存活率小于5%的家系，最終在各剩余家系Fl代中分別培育出 5-10尾作為親魚，進(jìn)行PIT標(biāo)記，并且利用家系識(shí)別標(biāo)記追溯上一代耐高溫家系和較耐高 溫家系親本，共同作為耐高溫育種的優(yōu)良基礎(chǔ)群體；(7)利用各耐高溫和較耐高溫家系Fl代培育出的親魚及上一代保留的親魚進(jìn)行家系 雜交和回交，再構(gòu)建新的F2代耐高溫家系50個(gè)；(8)重復(fù)步驟(3)-(7)，重復(fù)2次以上包括2次，最終選育出耐高溫褐牙鲆新品種。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種耐高溫褐牙鲆新品種的選育方法，屬農(nóng)業(yè)海水養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過(guò)構(gòu)建譜系清晰的褐牙鲆半同胞及全同胞家系，選擇在半致死溫度下對(duì)褐牙鲆家系的多代選育，充分考慮到選育過(guò)程中可能出現(xiàn)的近交和褐牙鲆在幼魚和成魚期不同生長(zhǎng)階段對(duì)致死溫度的耐受性，重復(fù)2次以上包括2次篩選，可有效選育出耐高溫褐牙鲆新品種，解決褐牙鲆在我國(guó)南方部分省份養(yǎng)殖“度夏難”問(wèn)題。
文檔編號(hào)A01K61/00GK102144587SQ201110077779
公開(kāi)日2011年8月10日 申請(qǐng)日期2011年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月30日
發(fā)明者史會(huì)來(lái), 徐冬冬, 李三磊, 樓寶, 毛國(guó)民, 程麗娜, 程國(guó)寶, 耿智, 詹煒, 辛儉 申請(qǐng)人:浙江省海洋水產(chǎn)研究所