專利名稱：烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法及其專用試劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種水生動物無損標記方法及專用標記試劑配方，特別涉及烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法及其專用試劑。
背景技術：
曼氏無針烏賊曾是我國漁場的四大漁業(yè)之一，對溫度的適應性較強，在我國沿海分布很廣，是一種經(jīng)濟價值很高的傳統(tǒng)漁業(yè)種類。由于過度捕撈和生態(tài)惡化，自20世紀70 年代以來，先后出現(xiàn)了衰退現(xiàn)象。上世紀八十年代有報道李星頡等對曼氏無針烏賊資源及增殖的初步研究，而國外有對商烏賊的生物學及養(yǎng)殖方面的報道。烏賊由于長期受到漁業(yè)捕撈壓力，種群數(shù)量銳減，亟需通過人工進行增殖放流。在逐步突破烏賊繁育技術后，放流被提上了議事日程。浙江海洋學院相關科研人員已多次對曼氏無針烏賊進行人工繁育及增殖放流，但在實踐中發(fā)現(xiàn)為了對放流效果和進一步深入研究烏賊的生長狀況，需要開發(fā)新型實際對烏賊進行相應的標記，滿足科研和生產(chǎn)的需要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法及其專用試劑，以此實現(xiàn)對曼氏無針烏賊的生長監(jiān)測及無損化學標記，并且具有觀察方便、成本低廉的優(yōu)點。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法，包括將需要標記的烏賊放入具有四環(huán)素的養(yǎng)殖水體進行養(yǎng)殖的操作步驟；養(yǎng)殖水體內(nèi)的四環(huán)素濃度為100至200mg/T ； 養(yǎng)殖水體在溶解四環(huán)素之前先在每噸養(yǎng)殖水體中加入EDTA為1至5g預處理。烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法，具有如下步驟①預處理步驟將經(jīng)凈化的海水放入緩釋標記養(yǎng)殖箱并微充氣，作為養(yǎng)殖水體； 養(yǎng)殖水體內(nèi)溶入EDTA并調濃度至1 5g/T，充分溶解后待用。②適應步驟將待標記的烏賊放入緩釋標記養(yǎng)殖箱的擴散調節(jié)裝置的一側養(yǎng)殖水體內(nèi)，并且保持該部分水體微充氣；③標記步驟將四環(huán)素以100 200mg/T養(yǎng)殖水體的比例，放入緩釋標記養(yǎng)殖箱的擴散調節(jié)裝置的另一側。緩釋標記養(yǎng)殖箱具有箱體，并且箱體內(nèi)安裝有能將箱體的內(nèi)部分割成兩部分的具有開合功能的擴散調節(jié)裝置；箱體內(nèi)還安裝有能控制擴散調節(jié)裝置開合的擴散控制件。擴散調節(jié)裝置為間隙設置的至少三塊活動隔板；活動隔板的一條邊沿的兩個端部外凸并動配合連接箱體；活動隔板的活動部分的邊沿制有內(nèi)凹的卡槽；卡槽連接有柔性刮片，并且柔性刮片靠近箱體內(nèi)壁的部分與箱體的內(nèi)壁滑動配合；箱體底部制有能限制隔板轉動越界的限位板。擴散控制件含有貫穿連接在箱體上部的連桿；連桿上設有單向步進控制機構；連桿上連接有繩索；繩索依次貫穿活動隔板，并且繩索上間隙設有卡球；單向步進控制機構為設置在連桿一側的單向齒輪；箱體外側靠近單向齒輪的部分設有具有彈簧回復件的卡鉤。相應提供烏賊海螵蛸四環(huán)素標記專用試劑，其按重量份數(shù)含有0. 1至0. 2份的四環(huán)素、1至5份的EDTA。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于本發(fā)明使用了將需要標記的烏賊放入具有四環(huán)素的養(yǎng)殖水體進行養(yǎng)殖的操作步驟；養(yǎng)殖水體內(nèi)的四環(huán)素濃度為100至200mg/T ；養(yǎng)殖水體在溶解四環(huán)素之前先在每噸養(yǎng)殖水體中加入EDTA為1至5g預處理。本發(fā)明的方法及試劑能去除養(yǎng)殖水體中的鈣離子，避免而后標記步驟所使用的四環(huán)素由于干擾離子而造成的損耗，確保標記濃度穩(wěn)定及標記效果的穩(wěn)定、對能實現(xiàn)烏賊無損標記、應激反應小。并且本發(fā)明實現(xiàn)成本低廉、操作方便、操作效率高。


圖1為本發(fā)明實施例緩釋標記養(yǎng)殖箱立體結構示意圖；圖2為本發(fā)明實施例緩釋標記養(yǎng)殖箱剖視結構示意圖；圖3為本發(fā)明實施例緩釋標記養(yǎng)殖箱局部部件立體放大圖；圖4為本發(fā)明實施例流程圖。
具體實施例方式以下結合附實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。附圖標號說明箱體1、限位板11、擴散調節(jié)裝置2、活動隔板21、卡槽21a、柔性刮片22、擴散控制件3、連桿31、單向齒輪32、卡鉤33、繩索34、卡球35。實施例參照圖1至圖4，烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法，包括將需要標記的烏賊放入具有四環(huán)素的養(yǎng)殖水體進行養(yǎng)殖的操作步驟；養(yǎng)殖水體內(nèi)的四環(huán)素濃度為100至200mg/ T ；養(yǎng)殖水體在溶解四環(huán)素之前先在每噸養(yǎng)殖水體中加入EDTA為1至5g預處理。烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法，具有如下步驟①預處理步驟將經(jīng)凈化的海水放入緩釋標記養(yǎng)殖箱并微充氣，作為養(yǎng)殖水體； 養(yǎng)殖水體內(nèi)溶入EDTA并調濃度至1 5g/T，充分溶解后待用。與水產(chǎn)養(yǎng)殖普通用法的屏蔽重金屬防止幼體發(fā)育畸形的目的不同，本發(fā)明的EDTA使用的目的是去除養(yǎng)殖水體中的鈣離子，避免而后標記步驟所使用的四環(huán)素由于干擾離子而造成的損耗。本實施例優(yōu)選 5gEDTA，養(yǎng)殖水體為1噸海水。②適應步驟將待標記的烏賊放入緩釋標記養(yǎng)殖箱的擴散調節(jié)裝置2的一側養(yǎng)殖水體內(nèi)，并且保持該部分水體微充氣；水體微充氣采用的充氣裝置采用位于擴散調節(jié)裝置 2水體較大的一側。③標記步驟將四環(huán)素以100 200mg/T養(yǎng)殖水體的比例，放入緩釋標記養(yǎng)殖箱的擴散調節(jié)裝置2的另一側。擴散調節(jié)裝置2水體較小的一側放置四環(huán)素。為了防止四環(huán)素或EDTA漂浮而造成濃度不足的現(xiàn)象，可以考慮采用篩絹包裹。本實施例優(yōu)選0. Ig四環(huán)素。緩釋標記養(yǎng)殖箱具有箱體1，并且箱體1內(nèi)安裝有能將箱體1的內(nèi)部分割成兩部分的具有開合功能的擴散調節(jié)裝置2 ；箱體1內(nèi)還安裝有能控制擴散調節(jié)裝置2開合的擴散控制件3。將試驗藥品投入擴散調節(jié)裝置2的一側，通過水體的自然擴散防止試驗生物的應激，并縮短實驗時間。擴散控制件3通過控制擴散調節(jié)裝置2間接實現(xiàn)對自然擴散速度的控制。擴散調節(jié)裝置2為間隙設置的至少三塊活動隔板21 ；活動隔板21的一條邊沿的兩個端部外凸并動配合連接箱體1 ；活動隔板21的活動部分的邊沿制有內(nèi)凹的卡槽21a; 卡槽21a連接有柔性刮片22，并且柔性刮片22靠近箱體1內(nèi)壁的部分與箱體1的內(nèi)壁滑動配合；箱體1底部制有能限制隔板21轉動越界的限位板11。隔板21的轉動形成兩個水體區(qū)域相連部分間隙的大小，直至近似完全相互隔開。以較為方便的方式人工限制了位于活動隔板21—側水體內(nèi)的藥物自由擴散到另一側水體中。與箱體1內(nèi)壁滑動配合的側面柔性刮片22能起到密閉作用，與轉動軸向平行的部分柔性刮片22則是在活動隔板21豎直的狀態(tài)下起到密封作用，同時采用柔性材料的柔性刮片22能防止試驗動物的皮膚擦傷。擴散控制件3含有貫穿連接在箱體1上部的連桿31 ；連桿31上設有單向步進控制機構；連桿31上連接有繩索34 ’繩索34依次貫穿活動隔板21，并且繩索34上間隙設有卡球35 ；單向步進控制機構為設置在連桿31 —側的單向齒輪32 ；箱體1外側靠近單向齒輪 32的部分設有具有彈簧回復件的卡鉤33。固定在繩索34上的卡球35在繩索34牽引的帶動下可調整活動隔板21傾斜的角度。單向齒輪32和卡鉤33在彈簧回復件的作用下，可限制繩索34在活動隔板21重力作用牽引繩索34，進而使活動隔板21穩(wěn)定在一定的傾斜角度。松開卡鉤33即可放下活動隔板21進行反向調節(jié)。烏賊海螵蛸四環(huán)素標記專用試劑，其按重量份數(shù)含有0. 1至0. 2份的四環(huán)素、1至 5份的EDTA。本實施例優(yōu)選0. Ig四環(huán)素配5gEDTA。盡管已結合優(yōu)選的實施例描述了本發(fā)明，然其并非用以限定本發(fā)明，任何本領域技術人員，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍的情況下，能夠對在這里列出的主題實施各種改變、同等物的置換和修改，因此本發(fā)明的保護范圍當視所提出的權利要求限定的范圍為準。
權利要求
1.烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法，其特征是將需要標記的烏賊放入具有四環(huán)素的養(yǎng)殖水體進行養(yǎng)殖；所述的養(yǎng)殖水體內(nèi)的四環(huán)素濃度為100至200mg/T ；所述的養(yǎng)殖水體在溶解四環(huán)素之前先在每噸養(yǎng)殖水體中加入EDTA為1至5g預處理。
2.根據(jù)權利要求1所述的烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法，其特征是具有如下步驟①預處理步驟將經(jīng)凈化的海水放入緩釋標記養(yǎng)殖箱并微充氣，作為養(yǎng)殖水體；所述的養(yǎng)殖水體內(nèi)溶入EDTA并調濃度至1 5g/T，充分溶解后待用；②適應步驟將待標記的烏賊放入所述的緩釋標記養(yǎng)殖箱的擴散調節(jié)裝置O)的一側養(yǎng)殖水體內(nèi)，并且保持該部分水體微充氣；③標記步驟將四環(huán)素以100 200mg/T養(yǎng)殖水體的比例，放入所述的緩釋標記養(yǎng)殖箱的擴散調節(jié)裝置O)的另一側。
3.根據(jù)權利要求2所述的烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法，其特征是所述的緩釋標記養(yǎng)殖箱具有箱體(1)，并且所述的箱體(1)內(nèi)安裝有能將箱體(1)的內(nèi)部分割成兩部分的具有開合功能的擴散調節(jié)裝置O)；所述的箱體(1)內(nèi)還安裝有能控制所述的擴散調節(jié)裝置(2) 開合的擴散控制件(3)。
4.根據(jù)權利要求3所述的烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法，其特征是所述的擴散調節(jié)裝置O)為間隙設置的至少三塊活動隔板；所述的活動隔板的一條邊沿的兩個端部外凸并動配合連接所述的箱體(1)；所述的活動隔板的活動部分的邊沿制有內(nèi)凹的卡槽Ola)；所述的卡槽(21a)連接有柔性刮片(22)，并且所述的柔性刮片Q2)靠近箱體 (1)內(nèi)壁的部分與所述的箱體(1)的內(nèi)壁滑動配合；所述的箱體(1)底部制有能限制所述的隔板轉動越界的限位板(11)。
5.根據(jù)權利要求3所述的烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法，其特征是所述的擴散控制件 (3)含有貫穿連接在所述的箱體(1)上部的連桿(31)；所述的連桿(31)上設有單向步進控制機構；所述的連桿(31)上連接有繩索(34)；所述的繩索(34)依次貫穿所述的活動隔板 (21)，并且繩索(34)上間隙設有卡球(3 ；所述的單向步進控制機構為設置在所述的連桿 (31) 一側的單向齒輪(3 ；所述的箱體(1)外側靠近單向齒輪(3 的部分設有具有彈簧回復件的卡鉤(33)。
6.烏賊海螵蛸四環(huán)素標記專用試劑，其特征是按重量份數(shù)含有0.1至0. 2份的四環(huán)素、1至5份的EDTA。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種烏賊海螵蛸四環(huán)素標記方法及其專用試劑包括將需要標記的烏賊放入具有四環(huán)素的養(yǎng)殖水體進行養(yǎng)殖的操作步驟；養(yǎng)殖水體內(nèi)的四環(huán)素濃度為100至200mg/T；養(yǎng)殖水體在溶解四環(huán)素之前先在每噸養(yǎng)殖水體中加入EDTA為1至5g預處理。相應的試劑，其按重量份數(shù)含有0.1至0.2份的四環(huán)素、1至5份的EDTA。本發(fā)明的方法及試劑能去除養(yǎng)殖水體中的鈣離子，避免而后標記步驟所使用的四環(huán)素由于干擾離子而造成的損耗，確保標記濃度穩(wěn)定及標記效果的穩(wěn)定、對能實現(xiàn)烏賊無損標記、應激反應小。并且本發(fā)明實現(xiàn)成本低廉、操作方便、操作效率高，以此實現(xiàn)對曼氏無針烏賊的生長監(jiān)測及無損化學標記，并且具有觀察方便、成本低廉的優(yōu)點。
文檔編號A01K61/00GK102265798SQ201110173500
公開日2011年12月7日 申請日期2011年6月24日 優(yōu)先權日2011年6月24日
發(fā)明者吳常文, 遲長鳳, 郭寶英 申請人:浙江海洋學院