專利名稱：一種虎奶菇的覆土栽培和菌種制作方法及培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種虎奶菇的覆土栽培和菌種制作方法及培養(yǎng)基，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
培養(yǎng)基是食用菌生長需要的營養(yǎng)基質(zhì)。根據(jù)試驗或生產(chǎn)的需要把菌種分為母鐘， 原種，生產(chǎn)種。培養(yǎng)基必須含有菌體生長的所有營養(yǎng)物質(zhì)，每種物質(zhì)有適當(dāng)?shù)臐舛缺壤?，適宜的酸堿度。制備培養(yǎng)基的物質(zhì)可因地制宜，來源廣，安全，無毒，成本低而適當(dāng)選用。培養(yǎng)基要經(jīng)過嚴(yán)格滅菌，在無菌狀態(tài)下培養(yǎng)以達(dá)到食用菌純培養(yǎng)的目的。斜面培養(yǎng)基也是固體培養(yǎng)基的一種形式；制作時應(yīng)趁熱定量分裝于試管內(nèi)，并凝固成斜面的稱為斜面培養(yǎng)基，用于菌種擴大轉(zhuǎn)管及菌種保藏。與斜面培養(yǎng)基相對和并列的概念是平面培養(yǎng)基、高層培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基倒在培養(yǎng)皿內(nèi)，凝固成平面的稱為平板培養(yǎng)基，用于菌種分離及研究菌類的某些特性；分裝在試管內(nèi)，直立凝固而制成的稱為高層培養(yǎng)基，這樣接入菌種后雖然發(fā)育的面小了一點，但培養(yǎng)基的厚度增大，營養(yǎng)豐富，時間長些也不容易干燥、開裂，常用于保存菌種?，F(xiàn)有虎奶菇菌種固體培養(yǎng)基為PDA+蛋白胨+磷酸二氫鉀+硫酸鎂+維生素B ,。 由于其中的蛋白胨較貴，且生產(chǎn)的菌絲稀疏、不健壯、產(chǎn)量不高，培養(yǎng)質(zhì)量又不如液體培養(yǎng)基，因此很少用于大面積推廣。目前，虎奶菇的大面積生產(chǎn)還是長期依靠液體種來栽培，然而液體培養(yǎng)基又存在檢測設(shè)備不過關(guān)，采用液體菌種用于生產(chǎn)又很容易造成大面積污染等問題，而且，虎奶菇的栽培采用袋式出菇法，由于培養(yǎng)基的水分容易干燥，所以采用該方法栽培產(chǎn)量上不去，生物轉(zhuǎn)化率只有30%。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種虎奶菇的覆土栽培方法。本發(fā)明的目的之二是提供一種菌絲粗壯，污染率小，獲取虎奶菇菌種時間短的斜
面培養(yǎng)基。本發(fā)明的目的之三是提供一種栽培虎奶菇菌種的固體培養(yǎng)基。本發(fā)明的目的之四是提供一種采用斜面培養(yǎng)基的制取虎奶菇菌種的制作方法。本發(fā)明的目的之五是提供一種采用固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)栽培虎奶菇的培養(yǎng)栽培方法，
本發(fā)明的總目的是提供一種虎奶菇栽培的成套技術(shù)，通過提供斜面培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基；及利用所述的斜面培養(yǎng)基制取虎奶菇菌種，再利用所述的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)栽培虎奶菇， 或在所述的固體培養(yǎng)基栽培虎奶菇時對虎奶菇進行培養(yǎng)后，再進行覆土栽培，本發(fā)明各發(fā)明的目的可集成使用，也可單獨使用，并提出權(quán)利要求，由于屬于生產(chǎn)虎奶菇的成套技術(shù)的同一主題，因此具有單一性。本發(fā)明的目的之一是這樣實現(xiàn)的包括以下幾種步驟
A、場地選擇選擇離水源近，土壤疏松肥沃，排灌良好的空地為出菇場地；場地選擇為露天或在場地上搭建蔭棚；
B、覆土的處理將畦面按寬1.0-1. 3m，深0. 08—0. I^ii挖淺溝，將松土收集進行堆制驅(qū)蟲和殺菌，每立方米土用1一 1. 5kg石灰兌30— 50kg水稀釋后拌入，蓋薄膜悶3-5天后，打開薄膜，翻松堆土備用；溝面噴質(zhì)量濃度為1一1. 5%的石灰水進行驅(qū)蟲和殺菌，作為菇床備用；
C、將長滿菌絲的菌袋開袋，先將畦面用質(zhì)量濃度為1一1.5%石灰水澆濕，然后把菌袋整齊地平放在畦面上，袋與袋間距2-5cm，填入2-5cm上述覆土處理后的土，澆透水，上面再用1一2 cm厚的稻草保濕遮光，便可；
D、出菇管理前期每天噴水1一2次，保持土層含水量在70—80%左右，并加蓋薄膜進行保溫保濕，7 —10天出現(xiàn)原基后，揭掉薄膜，加大噴水，保持空氣相對濕度在85— 90% ；在經(jīng)5—7天可進行第1潮菇子實體采收；第1潮菇采收后，整理畦面，停止噴水，加強通風(fēng)，養(yǎng)菌5 —10天，加大噴水，便可進行第2潮菇的誘導(dǎo)，管理方法同前；共同采收3— 8批，采收期40— 80天；生物轉(zhuǎn)化率在80—120%。本發(fā)明的目的之二是這樣實現(xiàn)的制取虎奶菇菌種的斜面培養(yǎng)基由以下重量份的原料組成玉米淀粉35— 40份、麥麩15 — 25份、蔗糖8 —12份、葡萄糖8 —12份、磷酸二氫鉀1. 8—2. 2份、硫酸鎂0. 9—1. 1份、酵母粉5—7份、VB1O. 008—0. 012份、瓊脂16 — 20 份、和水800—1200份。優(yōu)選由以下重量份的原料組成玉米淀粉40份、麥麩20份、蔗糖10份、葡萄糖10 份、磷酸二氫鉀2份、硫酸鎂1份、酵母粉6份、VB1O. 01份、瓊脂18份、和水1000份。本發(fā)明的目的之三是這樣實現(xiàn)的栽培虎奶菇菌種的固體培養(yǎng)基由以下重量份的原料組成棉子殼50-60份，木屑15 — 25份，麩皮15 — 25份，谷殼5_10份，碳酸鈣1_2份， 石灰1-2份。優(yōu)選由以下重量份的原料組成棉子殼53份，木屑20份，麩皮20份，谷殼5份，碳酸鈣1份，石灰1份。本發(fā)明的目的之四是這樣實現(xiàn)的虎奶菇菌種的制作方法包括以下幾種步驟
E、配制斜面培養(yǎng)基，其組份配方重量份比為玉米淀粉35—40份、麥麩15 — 25份、蔗糖8 —12份、葡萄糖8 —12份、磷酸二氫鉀1. 8—2. 2份、硫酸鎂0. 9—1. 1份、酵母粉5— 7 份、VB1O. 008—0. 012 份、瓊脂 16 — 20 份、和水 800—1200 份；
F、斜面培養(yǎng)基消毒，將步驟E得到的液體營養(yǎng)液，裝入試管內(nèi)，用棉花封口，包扎牛皮紙，在1. 1 一 1.3個大氣壓高壓滅菌鍋中蒸煮消毒35— 45分鐘，排斜冷卻，凝固成斜面?zhèn)溆茫?br> J、選取母種菌菇取實體圓潤，結(jié)實，成熟度為70%的一朵50—80克的鮮虎奶菇包好待
用；
H、母種菌菇消毒將待用的一朵50—80克的鮮虎奶菇放入接種箱內(nèi)，進行熏蒸處理， 熏蒸處理為將3-5克高錳酸鉀放入一玻璃器皿中，再倒入8-10毫升甲醛，熏蒸25—35分鐘后再進行下一步操作；
I、制作菌菇組織將虎奶菇用小刀切成切成0.5-Icm的方塊狀菌菇組織；J、組織培養(yǎng)在接種箱內(nèi)將制作好的菌塊用接種針?biāo)腿胄泵媾囵B(yǎng)基內(nèi)，塞好棉塞，包扎牛皮紙，置于26-30°C的環(huán)境內(nèi)，菌絲粗壯時，即獲得虎奶菇菌種。本發(fā)明的目的之五是這樣實現(xiàn)的包括以下幾種步驟
K、配制固體培養(yǎng)基，其配方重量份為棉子殼50-60份，木屑15 — 25份，麩皮15 — 25 份，谷殼5-10份，碳酸鈣1-2份，石灰1-2份；
L、栽培袋的制作，滅菌，接種，及栽培或養(yǎng)菌用14一16cmX^—32cm的聚丙稀塑料袋，裝入步驟K的固體培養(yǎng)基，經(jīng)常規(guī)滅菌后，冷卻備用，然后在無菌接種箱中將每個栽培袋接上所述的J步驟中獲得虎奶菇菌種，然后移至培養(yǎng)室中，菌袋溫度控制在的溫度下培養(yǎng)；
本發(fā)明的目的之一的技術(shù)解決方案的優(yōu)選方案為
所述的C步驟中的將長滿菌絲的菌袋開袋，長滿菌絲的菌袋為L步驟中培養(yǎng)長滿菌絲的菌袋。本發(fā)明直接將菌核組織置于斜面培養(yǎng)基上進行菌種制作，經(jīng)過固體培養(yǎng)基培養(yǎng)栽培，再采用覆土栽培，解決了虎奶菇長期靠液體種和袋式出菇法栽培的問題。本發(fā)明斜面培養(yǎng)基具有配方簡單，便于大面積生產(chǎn)，且菌絲粗壯，污染率小于5 %。從組織分離至獲取菌種僅需7天時間。該敘面母種接入固體原種后，一般2 0-3 O天菌絲長滿。而普通要 3 0-4 Q天可長滿，且菌絲稀疏、不健壯，產(chǎn)量不高。固體培養(yǎng)基采用了有谷殼和石灰，谷殼具有良好的通氣性，完全可以滿足虎奶菇生長中的好氣性，石灰可以調(diào)節(jié)酸堿性度和滿足礦物質(zhì)需求。本發(fā)明采用先養(yǎng)菌，后覆土的栽培方法，具有良好的保濕性能，且可吸收土壤中的微量元素，生物轉(zhuǎn)化率可達(dá)到80%以上。
具體實施例方式本發(fā)明通過下面的實施例可以對本發(fā)明作進一步的描述，然而，本發(fā)明的范圍并不限于下述實施例。實施例1
(1)、一種用于制取虎奶菇菌種的斜面培養(yǎng)基，其配方重量為玉米淀粉40克、麥麩20 克、蔗糖10克、葡萄糖10克、磷酸二氫鉀2克、硫酸鎂1克、酵母粉6克、VB1IO毫克、瓊脂18 克、和水1000克；
(2)、一種虎奶菇菌種制作方法，主要步驟包括
a配制斜面培養(yǎng)基，其組份配方重量為玉米淀粉40克、麥麩20克、蔗糖10克、葡萄糖 10克、磷酸二氫鉀2克、硫酸鎂1克、酵母粉6克、VB1IO毫克、瓊脂18克、和水1000克；
b斜面培養(yǎng)基消毒，將步驟A得到的液體營養(yǎng)液，裝入試管內(nèi)，用棉花封口，包扎牛皮紙，在1. 2個大氣壓高壓滅菌鍋中蒸煮消毒40分鐘，排斜冷卻，凝固成斜面?zhèn)溆茫?br> c選取母種菌菇取實體圓潤，結(jié)實，成熟度為70%左右的一朵70克左右的鮮虎奶菇包好待用；
d母種菌菇消毒將待用的一朵70克左右的鮮虎奶菇放入接種箱內(nèi)，進行熏蒸處理，熏蒸處理為將4克高錳酸鉀放入一玻璃器皿中，再倒入9毫升甲醛，熏蒸30分鐘后再進行下一步操作；
e制作菌菇組織將虎奶菇用小刀切成切成0. 8cm的方塊狀菌菇組織；f組織培養(yǎng)在接種箱內(nèi)將制作好的菌塊用接種針?biāo)腿胄泵媾囵B(yǎng)基內(nèi)，塞好棉塞，包扎牛皮紙，置于培養(yǎng)，即獲得菌絲粗壯的虎奶菇菌種。(3)、用于栽培虎奶菇的固體培養(yǎng)基，其配方重量為棉子殼53千克，木屑20千克， 麩皮20千克，谷殼5千克，碳酸鈣1千克，石灰1千克；
(4)、虎奶菇栽培方法，包括以下幾種步驟
g配制固體培養(yǎng)基，其配方重量為棉子殼53千克，木屑20千克，麩皮20千克，谷殼5 千克，碳酸鈣1千克，石灰1千克；；
h栽培袋的制作，滅菌，接種，及栽培或養(yǎng)菌用大約15 X 30cm的聚丙稀塑料袋，裝入步驟G固體培養(yǎng)基，經(jīng)常規(guī)滅菌后，冷卻備用，然后在無菌接種箱中將每個培栽袋接上上述獲得虎奶菇菌種，然后移至培養(yǎng)室中，菌袋溫度控制在沈-30 V培養(yǎng)。i場地選擇選擇離水源近，土壤疏松肥沃，排灌良好的空地為出菇場地；
j覆土的處理將畦面按寬1. 0-1. 3m，深0. 08—0. I^ii挖淺溝，將松土收集進行堆制驅(qū)蟲和殺菌，每立方米土用1一 1.5kg石灰兌30— 50kg水稀釋后拌入，蓋薄膜悶3-5天后，打開薄膜，翻松堆土備用；溝面噴濃度為1一 1. 5%的石灰水進行驅(qū)蟲和殺菌，作為菇床備用； k將H步驟中長滿菌絲的菌袋開袋，先將畦面用濃度為1一1. 5%石灰水澆濕，然后把菌袋整齊地平放在畦面上，袋與袋間距2-5cm，填入上面消毒好的土，頂上再覆土 2-5cm，澆透水，上面再用少量1.5 cm左右厚的稻草保濕遮光，便可。1出菇管理前期每天噴水1一2次，保持土層含水量在70—80%左右，并加蓋薄膜進行保溫保濕，7—10天出現(xiàn)原基后，揭掉薄膜，加大噴水，保持空氣相對濕度在90%左右； 在經(jīng)5—7天可進行第1潮菇子實體采收；第1潮菇采收后，整理畦面，停止噴水，加強通風(fēng)， 養(yǎng)菌5天，加大噴水，便可進行第2潮菇的誘導(dǎo)，管理方法同前；共同采收3— 4潮，采收期 50天左右；生物轉(zhuǎn)化率一般在80—120%。以上場地可搭建蔭棚，蔭棚的搭建方法為一般農(nóng)戶可以搭建簡易菇棚，具體方法是用木、竹搭建一個高ail左右，上蓋稻草、茅草或杉木枝葉等的蔭棚，蔭棚遮陽度約80%。棚內(nèi)做寬0. 8-1. 2m的畦作為出菇床備用，畦間留40cm的人行道。長久菇棚搭建規(guī)?；a(chǎn)時，可搭建長久性的塑料或鋼質(zhì)骨架結(jié)構(gòu)的穹頂菇棚， 遮陽材料采用透光率為90%-95%的遮陽網(wǎng)。
權(quán)利要求
1.一種虎奶菇的覆土栽培方法，其特征是包括以下幾種步驟A、場地選擇選擇離水源近，土壤疏松肥沃，排灌良好的空地為出菇場地；場地選擇為露天或在場地上搭建蔭棚；B、覆土的處理將畦面按寬1.0-1. 3m，深0. 08—0. I^ii挖淺溝，將松土收集進行堆制驅(qū)蟲和殺菌，每立方米土用1一 1. 5kg石灰兌30— 50kg水稀釋后拌入，蓋薄膜悶3-5天后，打開薄膜，翻松堆土備用；溝面噴質(zhì)量濃度為1一1. 5%的石灰水進行驅(qū)蟲和殺菌，作為菇床備用；C、將長滿菌絲的菌袋開袋，先將畦面用質(zhì)量濃度為1一1.5%石灰水澆濕，然后把菌袋整齊地平放在畦面上，袋與袋間距2-5cm，填入2-5cm上述覆土處理后的土，澆透水，上面再用1一2 cm厚的稻草保濕遮光；D、出菇管理前期每天噴水1一2次，保持土層含水量在70—80%，并加蓋薄膜進行保溫保濕，7—10天出現(xiàn)原基后，揭掉薄膜，加大噴水，保持空氣相對濕度在85—90% ；在經(jīng)5—7 天可進行第1潮菇子實體采收；第1潮菇采收后，整理畦面，停止噴水，加強通風(fēng)，養(yǎng)菌5— 10天，加大噴水，便可進行第2潮菇的誘導(dǎo)，管理方法同前；共同采收3— 8批，采收期40— 80天；生物轉(zhuǎn)化率在80—120%。
2.一種制取虎奶菇菌種的斜面培養(yǎng)基，其特征是由以下重量份的原料組成玉米淀粉 35—40份、麥麩15 — 25份、蔗糖8 —12份、葡萄糖8 —12份、磷酸二氫鉀1. 8—2. 2份、硫酸鎂 0. 9—1. 1 份、酵母粉 5— 7 份、VB1O. 008—0. 012 份、瓊脂 16 — 20 份、和水 800—1200 份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種制取虎奶菇菌種的斜面培養(yǎng)基，其特征是由以下重量份的原料組成玉米淀粉40份、麥麩20份、蔗糖10份、葡萄糖10份、磷酸二氫鉀2份、硫酸鎂 1份、酵母粉6份、VB1O. 01份、瓊脂18份、和水1000份。
4.一種栽培虎奶菇菌種的固體培養(yǎng)基，其特征是由以下重量份的原料組成棉子殼 50-60份，木屑15 — 25份，麩皮15 — 25份，谷殼5-10份，碳酸鈣1_2份，石灰1_2份。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的栽培虎奶菇菌種的固體培養(yǎng)基，其特征是由以下重量份的原料組成棉子殼53份，木屑20份，麩皮20份，谷殼5份，碳酸鈣1份，石灰1份。
6.采用權(quán)利要求2所述的一種制取虎奶菇菌種的斜面培養(yǎng)基的制取虎奶菇菌種的制作方法，其特征是包括以下幾種步驟E、配制斜面培養(yǎng)基，其組份配方重量份比為玉米淀粉35—40份、麥麩15—25份、蔗糖8 —12份、葡萄糖8 —12份、磷酸二氫鉀1. 8—2. 2份、硫酸鎂0. 9—1. 1份、酵母粉5— 7 份、VB1O. 008—0. 012 份、瓊脂 16 — 20 份、和水 800—1200 份；F、斜面培養(yǎng)基消毒，將步驟E得到的液體營養(yǎng)液，裝入試管內(nèi)，用棉花封口，包扎牛皮紙，在1. 1 一 1.3個大氣壓高壓滅菌鍋中蒸煮消毒35— 45分鐘，排斜冷卻，凝固成斜面?zhèn)溆茫籎、選取母種菌菇取實體圓潤，結(jié)實，成熟度為70%的一朵50—80克的鮮虎奶菇包好待用；H、母種菌菇消毒將待用的一朵50—80克的鮮虎奶菇放入接種箱內(nèi)，進行熏蒸處理， 熏蒸處理為將3-5克高錳酸鉀放入一玻璃器皿中，再倒入8-10毫升甲醛，熏蒸25—35分鐘后再進行下一步操作；I、制作菌菇組織將虎奶菇用小刀切成切成0. 5-Icm的方塊狀菌菇組織；J、組織培養(yǎng)在接種箱內(nèi)將制作好的菌塊用接種針?biāo)腿胄泵媾囵B(yǎng)基內(nèi)，塞好棉塞，包扎牛皮紙，置于26-30°C的環(huán)境內(nèi)，菌絲粗壯時，即獲得虎奶菇菌種。
7.采用權(quán)利要求4所述的一種栽培虎奶菇菌種的固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)栽培虎奶菇的培養(yǎng)栽培方法，其特征是包括以下幾種步驟K、配制固體培養(yǎng)基，其配方重量份為棉子殼50-60份，木屑15 — 25份，麩皮15 — 25 份，谷殼5-10份，碳酸鈣1-2份，石灰1-2份；L、栽培袋的制作，滅菌，接種，及栽培或養(yǎng)菌用14一16cmX^—32cm的聚丙稀塑料袋，裝入步驟K的固體培養(yǎng)基，經(jīng)常規(guī)滅菌后，冷卻備用，然后在無菌接種箱中將每個栽培袋接上所述的J步驟中獲得虎奶菇菌種，然后移至培養(yǎng)室中，菌袋溫度控制在的溫度下培養(yǎng)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種虎奶菇的栽培方法，其特征是所述的C步驟中的將長滿菌絲的菌袋開袋，長滿菌絲的菌袋為L步驟中培養(yǎng)的長滿菌絲的菌袋。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種虎奶菇的覆土栽培和菌種制作方法及培養(yǎng)基，直接將菌核組織置于斜面培養(yǎng)基上進行菌種制作，經(jīng)過固體培養(yǎng)基培養(yǎng)栽培，再采用覆土栽培，解決了虎奶菇長期靠液體種和袋式出菇法栽培的問題。斜面培養(yǎng)基為玉米淀粉35—40份、麥麩15—25份、蔗糖8—12份、葡萄糖8—12份、磷酸二氫鉀1.8—2.2份、硫酸鎂0.9—1.1份、酵母粉5—7份、VB10.008—0.012份、瓊脂16—20份、和水800—1200份，便于大面積生產(chǎn)，且菌絲粗壯，污染率小于５％，獲取菌種僅需７天時間；固體培養(yǎng)基中的谷殼具有良好的通氣性，石灰可調(diào)節(jié)酸堿性度和滿足礦物質(zhì)需求；覆土的栽培方法中的生物轉(zhuǎn)化率可達(dá)到80%以上。
文檔編號A01G1/04GK102301915SQ20111020234
公開日2012年1月4日 申請日期2011年7月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月19日
發(fā)明者方金山 申請人:撫州市臨川區(qū)金山生物科技發(fā)展中心