專利名稱：日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)樣品技術(shù)研發(fā)領(lǐng)域，特別涉及日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，另外本發(fā)明還涉及其制備方法。
背景技術(shù)：
日本菟絲子(OAscwia japonica Choisy)，英文名稱dodder，中名別稱豆寄生、無根草。旋花科，菟絲子屬，一年生寄生草本。菟絲子的寄主范圍相當(dāng)?shù)膹V，多數(shù)草本雙子葉 (如豆科、黎科)及某些單子葉植物都可能成為菟絲子的寄生對(duì)象，當(dāng)菟絲子侵害植物時(shí)， 會(huì)長出吸器伸入植物體內(nèi)，吸收寄主的養(yǎng)分，繼續(xù)長出其它分枝?？梢娨恢贻私z子可復(fù)蓋住相當(dāng)大面積的農(nóng)作物或植物。而菟絲子的種子有休眠作用，所以一旦田地被菟絲子侵入后， 會(huì)造成連續(xù)數(shù)年均遭菟絲子危害問題。目前，我國檢疫機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行日本菟絲子檢疫鑒定時(shí)，所參照的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品多數(shù)是從國外進(jìn)境貨物中截獲的，或是其它相關(guān)部門贈(zèng)給的，也有的是在田間采集的。由于日本菟絲子來源不同，所以用于作為標(biāo)準(zhǔn)樣品的日本菟絲子其形態(tài)存在很大的差異，從而影響檢疫鑒定結(jié)果。當(dāng)前國際上尚無統(tǒng)一的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品用于有關(guān)部門進(jìn)行檢疫鑒定。所以，研制在形態(tài)上典型一致，具有代表性的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品具有重要
眉、ο

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，均勻性和穩(wěn)定性佳，促進(jìn)植物檢疫實(shí)驗(yàn)室檢疫鑒定工作，提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水平；本發(fā)明的另一目的是提供日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，工藝簡(jiǎn)單，易于操作。本發(fā)明日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，日本菟絲子鑲嵌在樹脂中，每塊樹脂中1顆日本菟絲子。本發(fā)明日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，具體步驟如下
第一步、標(biāo)準(zhǔn)樣品來源日本菟絲子種子來源于田間采集，種子經(jīng)鑒定及種植驗(yàn)證后擴(kuò)繁，收獲后將日本菟絲子種子進(jìn)行比較，把形態(tài)上相對(duì)一致的混合在一起，制成日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品；
第二步、標(biāo)準(zhǔn)樣品擴(kuò)繁首先將土壤進(jìn)行消毒處理然后把消毒好的土壤裝在大花盆中， 再把花盆整齊擺放到隔離網(wǎng)室里，在日本菟絲子的整個(gè)生長季都對(duì)其生長情況進(jìn)行了觀察和記錄，當(dāng)日本菟絲子成熟后，進(jìn)行采收并晾曬，將晾曬好的日本菟絲子裝在干燥器中室溫下保存，準(zhǔn)備用于標(biāo)準(zhǔn)樣品的篩選和制作標(biāo)準(zhǔn)樣品；
第三步、標(biāo)準(zhǔn)樣品篩選在進(jìn)行篩選前，首先要對(duì)種子進(jìn)行滅活處理，將經(jīng)滅活處理的種子倒在白磁盤中進(jìn)行初篩，挑選籽粒飽滿、大小適中的種子，將挑選出的種子準(zhǔn)備進(jìn)行細(xì)篩，關(guān)注種子個(gè)體間的形態(tài)鑒定特征的細(xì)微差別，將經(jīng)過細(xì)篩挑選出的種子分別放到白色磨口瓶內(nèi)，備用；第四步、標(biāo)準(zhǔn)樣品制備具體加工流程如下
(1)制作模具，將亮漆天然樹脂合成清漆均勻噴涂在模具表面；
(2)清潔模具后裝好外模；
(3)將水晶樹脂聚丙烯樹脂加入納米無塵填充料聚苯乙烯；
(4)加入固化劑環(huán)氧樹脂固化劑、促進(jìn)劑N-環(huán)己基-2-苯并噻唑次磺酰胺、消泡劑有機(jī)硅氧烷、透明母料聚丙烯透明母料等配料并攪均勻；
(5)將樹脂倒入模具后，搖動(dòng)模具，使模具內(nèi)樹脂流動(dòng)均勻，均勻后將模具放正，防止樹脂凝固過程中變形；
(6)將種子放入樹脂內(nèi)；
(7)樹脂完全凝固后，脫去模具；
(8)將產(chǎn)品打磨，拋光。所述制得的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行均勻性和穩(wěn)定性檢驗(yàn)
(1)均勻性檢驗(yàn)均勻性檢驗(yàn)分兩步完成，一是“瓶內(nèi)”均勻性檢驗(yàn)，二是“瓶間”均勻性檢驗(yàn)
①“瓶內(nèi)”均勻性檢驗(yàn)隨機(jī)選取100粒日本菟絲子分組，每組分別經(jīng)專家進(jìn)行鑒定，均認(rèn)定日本菟絲子個(gè)體間存在的細(xì)微差異對(duì)該種子形態(tài)鑒定結(jié)果不會(huì)產(chǎn)生影響，日本菟絲子個(gè)體間在形態(tài)上是均勻的；
②“瓶間”均勻性檢驗(yàn)隨機(jī)選取20個(gè)已經(jīng)加工制作完成并帶有外包裝的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，首先肉眼觀察日本菟絲子的外部形態(tài)，并將其與正常的沒有進(jìn)行包裝處理的日本菟絲子進(jìn)行比對(duì)，確定鑲嵌在樹脂中的日本菟絲子與正常沒有進(jìn)行包裝處理的日本菟絲子在外部形態(tài)上是否存在差異；其次通過解剖鏡進(jìn)行觀察，確定被鑲嵌在樹脂中的日本菟絲子與正常裸露的日本菟絲子在解剖鏡下外部形態(tài)是否存在差異，如存在差異確定這些差異對(duì)日本菟絲子的鑒定結(jié)果是否會(huì)產(chǎn)生影響；
(2)穩(wěn)定性檢驗(yàn)驗(yàn)證日本菟絲子穩(wěn)定性的方法需要用肉眼或放大鏡、解剖鏡進(jìn)行觀察；觀察不同保存條件、不同“瓶間”日本菟絲子的形態(tài)特征是否發(fā)生變化，發(fā)生的變化是否影響結(jié)果鑒定。保存條件的設(shè)計(jì)不同條件下，經(jīng)過一定的時(shí)間間隔，對(duì)日本菟絲子的形態(tài)均不會(huì)產(chǎn)生影響，說明該標(biāo)準(zhǔn)樣品穩(wěn)定性良好
所述第二步標(biāo)準(zhǔn)樣品擴(kuò)繁中，在播種前將日本菟絲子進(jìn)行催芽處理。所述第三步標(biāo)準(zhǔn)樣品篩選中滅活處理，是將日本菟絲子種子放置到50°C的恒溫箱中，48h后進(jìn)行種子發(fā)芽試驗(yàn)，確認(rèn)種子已經(jīng)失去活力。本發(fā)明是將日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品鑲嵌在樹脂中，制成水晶標(biāo)本。其原因有三，其一是樹脂原料是呈液體狀的，具有非常好的流動(dòng)性，能夠充分充斥樣品表面，而干固成膜后不再溶于水。其二是樹脂透明度極高，便于觀察里面標(biāo)準(zhǔn)樣品的細(xì)微結(jié)構(gòu)。其三是樹脂具有阻燃、耐老化、無毒、抗氧化、耐熱、絕緣等優(yōu)良性能，綜上原因，本發(fā)明將日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品鑲嵌在樹脂中，延長了標(biāo)準(zhǔn)樣品的有效期，降低了標(biāo)準(zhǔn)樣品成本。本發(fā)明日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的包裝采用可以長期保存并耐磨損、透光性好的樹脂材料，并經(jīng)過特殊加工工藝制作。 日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品保存條件常溫下保存，防潮，避免陽光直射，有效期5年。本發(fā)明日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，以田間采集的日本菟絲子種子為原料， 通過隔離種植、擴(kuò)繁、篩選、制備、均勻性檢驗(yàn)、穩(wěn)定性檢驗(yàn)、包裝和儲(chǔ)存等程序制備成具有代表性的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，為植物檢疫實(shí)驗(yàn)室雜草檢疫鑒定工作提供鑒定依據(jù)，提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水平。具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明并不局限于具體實(shí)施例。實(shí)施例1
日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，具體步驟如下
第一步標(biāo)準(zhǔn)樣品來源將田間采集的日本菟絲子種子經(jīng)專家鑒定后，在生長季進(jìn)行隔離種植，根據(jù)整個(gè)植株及花果特征對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證，確認(rèn)日本菟絲子的真實(shí)性；
第二步標(biāo)準(zhǔn)樣品擴(kuò)繁土壤消毒處理 裝入花盆中 放入隔離網(wǎng)室 植入日本菟絲子種子 觀察、記錄 收獲、晾曬 保存；根據(jù)當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件，選擇不同的播種時(shí)期。首先將土壤進(jìn)行消毒處理，這樣可以殺死土壤中的其它雜草籽和病原菌，然后把消毒好的土壤裝在大花盆中，再把花盆整齊擺放到隔離網(wǎng)室里，并做好標(biāo)識(shí)。為了保證出苗率，在播種前將日本菟絲子進(jìn)行催芽處理。在日本菟絲子的整個(gè)生長季都對(duì)其生長情況進(jìn)行了觀察和記錄，并拍攝成圖片，準(zhǔn)備作為標(biāo)準(zhǔn)樣品技術(shù)資料中的一部分。當(dāng)日本菟絲子成熟后，進(jìn)行采收并晾曬。將晾曬好的日本菟絲子裝在干燥器中室溫下保存，準(zhǔn)備用于標(biāo)準(zhǔn)樣品的篩選和制作。另外，從該批日本菟絲子中挑選籽粒飽滿的種子裝在信封中做好標(biāo)識(shí)，作為日本菟絲子擴(kuò)繁的種子資源。第三步標(biāo)準(zhǔn)樣品篩選在進(jìn)行篩選前，為確保生物安全，首先要對(duì)種子進(jìn)行滅活處理。將日本菟絲子種子放置到50°C的恒溫箱中，48h后進(jìn)行種子發(fā)芽試驗(yàn)，確認(rèn)種子已經(jīng)失去活力。將經(jīng)滅活處理的種子倒在白磁盤中進(jìn)行初篩。初篩過程主要挑選籽粒飽滿、大小適中的種子，將挑選出的種子準(zhǔn)備進(jìn)行細(xì)篩。細(xì)篩過程主要是結(jié)合樣品均勻性試驗(yàn)來完成。細(xì)篩過程要關(guān)注種子個(gè)體間的形態(tài)鑒定特征的細(xì)微差別。將經(jīng)過細(xì)篩挑選出的種子分別放到白色磨口瓶內(nèi)，備用；
第四步、標(biāo)準(zhǔn)樣品制備具體加工流程如下
(1)制作模具，將亮漆天然樹脂合成清漆均勻噴涂在模具表面；
(2)清潔模具后裝好外模；
(3)將水晶樹脂聚丙烯樹脂加入納米無塵填充料聚苯乙烯；
(4)加入固化劑環(huán)氧樹脂固化劑、促進(jìn)劑N-環(huán)己基-2-苯并噻唑次磺酰胺、消泡劑有機(jī)硅氧烷、透明母料聚丙烯透明母料等配料并攪均勻；
(5)將樹脂倒入模具后，搖動(dòng)模具，使模具內(nèi)樹脂流動(dòng)均勻，均勻后將模具放正，防止樹脂凝固過程中變形；
(6)將種子放入樹脂內(nèi)；
(7)樹脂完全凝固后，脫去模具；
(8)將產(chǎn)品打磨，拋光。實(shí)施例2
上述實(shí)施例1制得的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行均勻性和穩(wěn)定性檢驗(yàn)
(1)均勻性檢驗(yàn)均勻性檢驗(yàn)分兩步完成，一是“瓶內(nèi)”均勻性檢驗(yàn)，二是“瓶間”均勻性檢驗(yàn)。①“瓶內(nèi)”均勻性檢驗(yàn)主要考慮盡可能減小日本菟絲子個(gè)體間存在的差異。通常情況下，“瓶內(nèi)”均勻性檢驗(yàn)要結(jié)合專家定性判定來完成。從上述細(xì)篩后的日本菟絲子中隨機(jī)選取100粒進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)。將100粒日本菟絲子分成5組，每組20粒，把5組日本菟絲子種子分別寄給5位專家進(jìn)行鑒定。要求專家首先對(duì)20粒日本菟絲子進(jìn)行形態(tài)鑒定，判定其是否是日本菟絲子，然后給出日本菟絲子鑒定特征，根據(jù)這些鑒定特征，比較日本菟絲子每個(gè)個(gè)體間是否存在差異，存在的差異是否會(huì)對(duì)鑒定結(jié)果產(chǎn)生影響，給出日本菟絲子個(gè)體間均勻性結(jié)論。最后，專家對(duì)100粒日本菟絲子的鑒定結(jié)果沒有疑義，鑒定結(jié)論均為日本菟絲子。每一位專家均認(rèn)定日本菟絲子個(gè)體間存在的細(xì)微差異對(duì)該種子形態(tài)鑒定結(jié)果不會(huì)產(chǎn)生影響，日本菟絲子個(gè)體間在形態(tài)上是均勻的。②“瓶間”均勻性檢驗(yàn)主要是考慮包裝后每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品個(gè)體間的差異，驗(yàn)證日本菟絲子被鑲嵌到樹脂中后，這些外部包裝材料對(duì)日本菟絲子的外部形態(tài)是否產(chǎn)生影響，是否影響日本菟絲子的形態(tài)鑒定。隨機(jī)選取20個(gè)已經(jīng)加工制作完成并帶有外包裝的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，首先肉眼觀察日本菟絲子的外部形態(tài)，并將其與正常的沒有進(jìn)行包裝處理的日本菟絲子進(jìn)行比對(duì)，確定鑲嵌在樹脂中的日本菟絲子與正常沒有進(jìn)行包裝處理的日本菟絲子在外部形態(tài)上是否存在差異。其次通過解剖鏡進(jìn)行觀察，確定被鑲嵌在樹脂中的日本菟絲子與正常裸露的日本菟絲子在解剖鏡下外部形態(tài)是否存在差異，如存在差異確定這些差異對(duì)日本菟絲子的鑒定結(jié)果是否會(huì)產(chǎn)生影響。通過對(duì)20個(gè)包裝好的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行肉眼和解剖鏡下觀察，在外部形態(tài)上，鑲嵌在水晶中的日本菟絲子與正常裸露的日本菟絲子幾乎沒有差異。說明外部包裝材料對(duì)日本菟絲子的形態(tài)鑒定結(jié)果沒有影響，日本菟絲子“瓶間，，個(gè)體也是均勻的。(2)穩(wěn)定性檢驗(yàn)驗(yàn)證日本菟絲子穩(wěn)定性的方法需要用肉眼或放大鏡、解剖鏡進(jìn)行觀察。觀察不同保存條件、不同“瓶間”日本菟絲子的形態(tài)特征是否發(fā)生變化，發(fā)生的變化是否影響結(jié)果鑒定。保存條件的設(shè)計(jì)充分考慮到標(biāo)準(zhǔn)樣品在儲(chǔ)存、運(yùn)輸和使用過程中可能遇到的各種情況，設(shè)計(jì)出光照、溫度、潮濕度、振動(dòng)等不同條件下，經(jīng)過一定的時(shí)間間隔， 對(duì)日本菟絲子的形態(tài)均不會(huì)產(chǎn)生影響。說明該標(biāo)準(zhǔn)樣品穩(wěn)定性良好。日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的包裝采用可以長期保存并耐磨損、透光性好的樹脂材料， 并經(jīng)過特殊加工工藝制作。日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品保存條件常溫下保存，防潮，避免陽光直射。有效期為5年。
權(quán)利要求
1.日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，其特征是日本菟絲子鑲嵌在樹脂中，每塊樹脂中1顆日本菟絲子。
2.日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，具體步驟如下第一步、標(biāo)準(zhǔn)樣品來源日本菟絲子種子來源于田間采集，種子經(jīng)鑒定及種植驗(yàn)證后擴(kuò)繁，收獲后將日本菟絲子種子進(jìn)行比較，把形態(tài)上相對(duì)一致的混合在一起，制成日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品；第二步、標(biāo)準(zhǔn)樣品擴(kuò)繁首先將土壤進(jìn)行消毒處理然后把消毒好的土壤裝在大花盆中， 再把花盆整齊擺放到隔離網(wǎng)室里，在日本菟絲子的整個(gè)生長季都對(duì)其生長情況進(jìn)行了觀察和記錄，當(dāng)日本菟絲子成熟后，進(jìn)行采收并晾曬，將晾曬好的日本菟絲子裝在干燥器中室溫下保存，準(zhǔn)備用于標(biāo)準(zhǔn)樣品的篩選和制作標(biāo)準(zhǔn)樣品；第三步、標(biāo)準(zhǔn)樣品篩選在進(jìn)行篩選前，首先要對(duì)種子進(jìn)行滅活處理，將經(jīng)滅活處理的種子倒在白磁盤中進(jìn)行初篩，挑選籽粒飽滿、大小適中的種子，將挑選出的種子準(zhǔn)備進(jìn)行細(xì)篩，關(guān)注種子個(gè)體間的形態(tài)鑒定特征的細(xì)微差別，將經(jīng)過細(xì)篩挑選出的種子分別放到白色磨口瓶內(nèi)，備用；第四步、標(biāo)準(zhǔn)樣品制備具體加工流程如下(1)制作模具，將亮漆均勻噴涂在模具表面；(2)清潔模具后裝好外模；(3)將水晶樹脂加入納米無塵填充料；(4)加入固化劑、促進(jìn)劑、消泡劑、透明母料等配料并攪均勻；(5)將樹脂倒入模具后，搖動(dòng)模具，使模具內(nèi)樹脂流動(dòng)均勻，均勻后將模具放正，防止樹脂凝固過程中變形；(6)將種子放入樹脂內(nèi)；(7)樹脂完全凝固后，脫去模具；(8)將產(chǎn)品打磨，拋光。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，所述制得的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行均勻性和穩(wěn)定性檢驗(yàn)(1)均勻性檢驗(yàn)均勻性檢驗(yàn)分兩步完成，一是“瓶內(nèi)”均勻性檢驗(yàn)，二是“瓶間”均勻性檢驗(yàn)①“瓶內(nèi)”均勻性檢驗(yàn)隨機(jī)選取100粒日本菟絲子分組，每組分別經(jīng)專家進(jìn)行鑒定，均認(rèn)定日本菟絲子個(gè)體間存在的細(xì)微差異對(duì)該種子形態(tài)鑒定結(jié)果不會(huì)產(chǎn)生影響，日本菟絲子個(gè)體間在形態(tài)上是均勻的；②“瓶間”均勻性檢驗(yàn)隨機(jī)選取20個(gè)已經(jīng)加工制作完成并帶有外包裝的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，首先肉眼觀察日本菟絲子的外部形態(tài)，并將其與正常的沒有進(jìn)行包裝處理的日本菟絲子進(jìn)行比對(duì)，確定鑲嵌在樹脂中的日本菟絲子與正常沒有進(jìn)行包裝處理的日本菟絲子在外部形態(tài)上是否存在差異；其次通過解剖鏡進(jìn)行觀察，確定被鑲嵌在樹脂中的日本菟絲子與正常裸露的日本菟絲子在解剖鏡下外部形態(tài)是否存在差異，如存在差異確定這些差異對(duì)日本菟絲子的鑒定結(jié)果是否會(huì)產(chǎn)生影響；(2)穩(wěn)定性檢驗(yàn)驗(yàn)證日本菟絲子穩(wěn)定性的方法需要用肉眼或放大鏡、解剖鏡進(jìn)行觀察；觀察不同保存條件、不同“瓶間”日本菟絲子的形態(tài)特征是否發(fā)生變化，發(fā)生的變化是否影響結(jié)果鑒定；保存條件的設(shè)計(jì)不同條件下，經(jīng)過一定的時(shí)間間隔，對(duì)日本菟絲子的形態(tài)均不會(huì)產(chǎn)生影響，說明該標(biāo)準(zhǔn)樣品穩(wěn)定性良好。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，所述第二步標(biāo)準(zhǔn)樣品擴(kuò)繁中，在播種前將日本菟絲子進(jìn)行催芽處理。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，所述第三步標(biāo)準(zhǔn)樣品篩選中滅活處理，是將日本菟絲子種子放置到50°C的恒溫箱中，4 后進(jìn)行種子發(fā)芽試驗(yàn)，確認(rèn)種子已經(jīng)失去活力。
全文摘要
本發(fā)明屬于植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)樣品技術(shù)研發(fā)領(lǐng)域，特別涉及日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，另外本發(fā)明還涉及其制備方法。日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品，日本菟絲子鑲嵌在樹脂中，每塊樹脂中1顆日本菟絲子。本發(fā)明是將日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品鑲嵌在樹脂中，制成水晶標(biāo)本。其原因有三，其一是樹脂原料是呈液體狀的，具有非常好的流動(dòng)性，能夠充分充斥樣品表面，而干固成膜后不再溶于水。其二是樹脂透明度極高，便于觀察里面標(biāo)準(zhǔn)樣品的細(xì)微結(jié)構(gòu)。其三是樹脂具有阻燃、耐老化、無毒、抗氧化、耐熱、絕緣等優(yōu)良性能，綜上原因，本發(fā)明將日本菟絲子標(biāo)準(zhǔn)樣品鑲嵌在樹脂中，延長了標(biāo)準(zhǔn)樣品的有效期，降低了標(biāo)準(zhǔn)樣品成本。
文檔編號(hào)A01N3/00GK102301994SQ201110220768
公開日2012年1月4日 申請(qǐng)日期2011年8月3日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月3日
發(fā)明者劉卉秋, 徐鳳敏, 王有福, 郭蘭 申請(qǐng)人:劉卉秋, 王有福