專利名稱：一種優(yōu)質(zhì)抗螨蜜蜂蜂種的選育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于蜜蜂育種領(lǐng)域，涉及一種優(yōu)質(zhì)抗螨蜜蜂蜂種的選育方法。
背景技術(shù)：
蜂螨是蜜蜂最主要的寄生病蟲(chóng)害之一，它靠吸吮蜜蜂幼蟲(chóng)、蜜蜂蛹以及成年蜂的體液為食。受蜂螨危害的蜂群，蜂群群勢(shì)迅速削弱，幼蟲(chóng)早期死亡，出房的蜜蜂無(wú)翅或翅不全，使蜂群中蜜蜂數(shù)量下降，采集蜂也逐漸減少，從而導(dǎo)致蜂群生產(chǎn)力、生命力同時(shí)下降。又由于蜂螨的繁殖率極高，在普遍的蜂群中形成了惡性的生物斷鏈循環(huán)，可以導(dǎo)致蜂群的最后滅亡。全球中90%以上意蜂均有不同程度的蜂螨病。為了及時(shí)控制和治療蜂螨，幾十年來(lái)，養(yǎng)蜂從業(yè)人員大都采用藥物防治，但藥物防治有如下危害(1)蜂螨對(duì)治螨藥物易產(chǎn)生抗性，降低了蜜蜂群體質(zhì)量，同時(shí)導(dǎo)致其他蜂病如爬蜂病等相繼出現(xiàn)；(2)藥物治螨只能把蜂螨控制在低水平，養(yǎng)蜂者必須每年用藥物治螨2-3 次，不僅需要資金，還浪費(fèi)勞動(dòng)力和時(shí)間；(3)藥物治螨容易對(duì)蜂產(chǎn)品的造成污染，特別引起國(guó)際市場(chǎng)對(duì)我國(guó)蜂產(chǎn)品藥物殘留的過(guò)度關(guān)注，導(dǎo)致增加了貿(mào)易壁壘和技術(shù)壁壘。中華蜜蜂是蜂螨的原始寄主，對(duì)蜂螨有較強(qiáng)的抗性。利用營(yíng)養(yǎng)雜交技術(shù)結(jié)合常規(guī)的育種方法來(lái)選育優(yōu)質(zhì)抗螨蜂種是從根本上解決蜂螨危害的有效途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明主要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)上述藥物不能從根本上解決蜂螨問(wèn)題，提供一種利用營(yíng)養(yǎng)雜交、配子選育、人工受精、自然交尾配套育種技術(shù)來(lái)選育優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)抗螨蜂種方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是通過(guò)配子選育技術(shù)與人工受精技術(shù)定向選育高產(chǎn)蜂王漿的意大利蜜蜂和抗螨性強(qiáng)的中華蜜蜂。利用中蜂與意蜂營(yíng)養(yǎng)雜交技術(shù)和自然交尾方法培育意蜂蜂王。雜交數(shù)代后， 培育出優(yōu)質(zhì)抗螨意蜂蜂種。再通過(guò)蜜蜂育種常規(guī)指標(biāo)檢測(cè)技術(shù)、現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)和生化檢測(cè)技術(shù)等來(lái)選育一個(gè)抗螨的意蜂新品種。具體步驟是a)育種素材的選定根據(jù)蜜蜂生物學(xué)與遺傳育種特性的要求，按照抗螨性(工蜂自然蜂螨寄居率< 10% )、生產(chǎn)力(蜂王漿年產(chǎn)量> 8. 10kg、蜂蜜年產(chǎn)量> 96. 15kg、商品蜂花粉年> 4. 56kg)、生命力(蜜蜂抗氧化能力SOD活性> 35. 76U/ml)等系列指標(biāo)，我們篩選出蜂王漿產(chǎn)量較高的“江山2號(hào)”意蜂和產(chǎn)蜜性能優(yōu)越(年產(chǎn)蜜量> IlOkg)的法國(guó)純種意蜂以及抗螨性能優(yōu)越的健康(無(wú)各類蜜蜂疾病，并且蜜蜂抗氧化能力SOD活性> 37. 30U/ ml)本地中華蜜蜂蜂種為引種對(duì)象。b)抗螨蜂種的選育先利用配子選育原理(即通過(guò)雄蜂的精子活力與畸形率檢測(cè)，選出最優(yōu)雄蜂)從江山2號(hào)中選育出種用雄蜂，然后遵照蜜蜂生物學(xué)與遺傳育種特性 (檢測(cè)對(duì)蜂王的初生重、卵巢管數(shù)、體長(zhǎng)與體寬指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比，選出最優(yōu)處女王。)的要求選育出江山2號(hào)處女蜂王，與選育出的種用雄蜂進(jìn)行人工受精雜交，形成生產(chǎn)性能、抗病性能較強(qiáng)的江山2號(hào)蜂種作為父本。以從法國(guó)引進(jìn)的產(chǎn)蜜性能優(yōu)越的純種意蜂為母本。選擇抗螨性(工蜂自然蜂螨寄居率< )能較強(qiáng)的健康中蜂，采集其新鮮蜂王漿，-20°C保存c)從春繁開(kāi)始，每隔7天檢查割除法國(guó)意蜂雄蜂蛹，直至育種結(jié)束。制作蠟質(zhì)意蜂王臺(tái)放入中蜂群清理12h。移中蜂幼蟲(chóng)，產(chǎn)漿3天后，在不破壞王漿的情況下去除中蜂幼蟲(chóng)， 移入法國(guó)意蜂一日齡幼蟲(chóng)。放入中蜂群繼續(xù)哺育10-12h后移出，放入江山2號(hào)強(qiáng)群(蜜蜂數(shù)量在4. 5kg以上)，每天用注射器往王臺(tái)中人工注射50ul新鮮中蜂蜂王漿，直至封蓋。營(yíng)養(yǎng)雜交子1代蜂王出房后與江山2號(hào)雄蜂自然交尾并產(chǎn)卵，組成新的蜂群，檢測(cè)其工蜂自然蜂螨寄居率。當(dāng)工蜂自然蜂螨寄居率大于5%時(shí)，取營(yíng)養(yǎng)雜交子1代一日齡幼蟲(chóng)按上述育種方法培育子2代、子3代、子4代營(yíng)養(yǎng)雜交蜂種。并每隔7天割除子1代、子2代和子3代雄蜂蛹，直至工蜂自然蜂螨寄居率小于5%為止。同理，以江山2號(hào)(引自江山健康種蜂場(chǎng)，) 為母本、浙大A系(引自浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院)為父本培育出“中意蜂營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂子1 代”，然后用同樣的方法以“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂子1代”母本、“江山2號(hào)”為父本培育出“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂(Fl，F(xiàn)i表示第i代，下同)”。當(dāng)在不用藥物防治情況下，“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂”蜂群蜂螨感染率下降至5%以下時(shí)，再將“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂”進(jìn)行姐妹雜交進(jìn)行基因固定，以此方式，每代進(jìn)行姐妹雜交固定，經(jīng)過(guò)4代的橫向固定和繼代繁殖，當(dāng)基因不再發(fā)生變化時(shí)，即形成一個(gè)遺傳穩(wěn)定的蜜蜂品系——優(yōu)質(zhì)抗螨高產(chǎn)蜂種。本發(fā)明，可以為蜂農(nóng)解決蜂螨對(duì)蜂群的危害，提高蜂群的繁殖速度和蜂產(chǎn)品的產(chǎn)量禾口質(zhì)量。


圖1為Nei ‘ s的UPGMA法聚類圖；圖2為育種技術(shù)流程圖；圖3為育種技術(shù)路線圖。其中A 江山2號(hào)，B:法國(guó)意蜂，C:中華蜜蜂，D 子1代，E 子4代。
具體實(shí)施例方式a)育種素材的選定根據(jù)蜜蜂生物學(xué)與遺傳育種特性的要求，按照抗螨性(工蜂自然蜂螨寄居率< 10% )、生產(chǎn)力(蜂王漿年產(chǎn)量> 8. 10kg、蜂蜜年產(chǎn)量> 96. 15kg、商品蜂花粉年> 4. 56kg)、生命力(蜜蜂抗氧化能力SOD活性> 35. 76U/ml)等系列指標(biāo)，我們篩選出蜂王漿產(chǎn)量較高的“江山2號(hào)”意蜂和產(chǎn)蜜性能優(yōu)越(年產(chǎn)蜜量> IlOkg)的法國(guó)純種意蜂以及抗螨性能優(yōu)越的健康(無(wú)各類蜜蜂疾病，并且蜜蜂抗氧化能力SOD活性> 37. 30U/ ml)本地中華蜜蜂蜂種為引種對(duì)象。b)抗螨蜂種的選育先利用配子選育原理(即通過(guò)雄蜂的精子活力與畸形率檢測(cè)，選出最優(yōu)雄蜂)從江山2號(hào)中選育出種用雄蜂，然后遵照蜜蜂生物學(xué)與遺傳育種特性 (檢測(cè)對(duì)蜂王的初生重、卵巢管數(shù)、體長(zhǎng)與體寬指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比，選出最優(yōu)處女王。)的要求選育出江山2號(hào)處女蜂王，與選育出的種用雄蜂進(jìn)行人工受精雜交，形成生產(chǎn)性能、抗病性能
4較強(qiáng)的江山2號(hào)蜂種作為父本。以從法國(guó)引進(jìn)的產(chǎn)蜜性能優(yōu)越的純種意蜂為母本。選擇抗螨性(工蜂自然蜂螨寄居率< )能較強(qiáng)的健康中蜂，采集其新鮮蜂王漿，_20°C保存?zhèn)溆?。c)從春繁開(kāi)始，每隔7天檢查割除法國(guó)意蜂雄蜂蛹，直至育種結(jié)束。制作蠟質(zhì)意蜂王臺(tái)放入中蜂群清理12h。移中蜂幼蟲(chóng)，產(chǎn)漿3天后，在不破壞王漿的情況下去除中蜂幼蟲(chóng)，移入法國(guó)意蜂一日齡幼蟲(chóng)。放入中蜂群繼續(xù)哺育ιο-ia!后移出，放入江山2號(hào)強(qiáng)群 (蜜蜂數(shù)量在4. 5kg以上)，每天用注射器往王臺(tái)中人工注射50ul新鮮中蜂蜂王漿，直至封蓋。營(yíng)養(yǎng)雜交子1代蜂王出房后與江山2號(hào)雄蜂自然交尾并產(chǎn)卵，組成新的蜂群，檢測(cè)其工蜂自然蜂螨寄居率。當(dāng)工蜂自然蜂螨寄居率大于5%時(shí)，取營(yíng)養(yǎng)雜交子1代一日齡幼蟲(chóng)按上述育種方法培育子2代、子3代、子4代營(yíng)養(yǎng)雜交蜂種。并每隔7天割除子1代、子2代和子3代雄蜂蛹，直至工蜂自然蜂螨寄居率小于5%為止。同理，以江山2號(hào)(引自江山健康種蜂場(chǎng)，)為母本、浙大A系(引自浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院)為父本培育出“中意蜂營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂子1代”，然后用同樣的方法以“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂子1代”母本、“江山2號(hào)”為父本培育出“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂(Fl，F(xiàn)i表示第i代，下同)”。當(dāng)在不用藥物防治情況下，“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂”蜂群蜂螨感染率下降至以下時(shí)，再將“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂”進(jìn)行姐妹雜交進(jìn)行基因固定， 以此方式，每代進(jìn)行姐妹雜交固定，經(jīng)過(guò)4代的橫向固定和繼代繁殖，當(dāng)基因不再發(fā)生變化時(shí)，即形成一個(gè)遺傳穩(wěn)定的蜜蜂品系——優(yōu)質(zhì)抗螨高產(chǎn)蜂種。遺傳育種檢測(cè)①優(yōu)質(zhì)抗螨高產(chǎn)蜂種形態(tài)指標(biāo)及初生重測(cè)定本地漿蜂、法國(guó)意蜂、本地中華蜜蜂、營(yíng)養(yǎng)雜交F1、F2、F3和F4代的形態(tài)測(cè)定工作。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定指標(biāo)為吻長(zhǎng)、右前翅長(zhǎng)度、右前翅寬度、第三腹節(jié)背板長(zhǎng)度、肘脈指數(shù)、翅鉤數(shù)等六外部形態(tài)指標(biāo)及初生重。②優(yōu)質(zhì)抗螨高產(chǎn)蜂種生化特性研究以本地漿蜂、法國(guó)意蜂、本地中華蜜蜂和營(yíng)養(yǎng)雜交Fl、F4代工蜂為材料，應(yīng)用聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳技術(shù)檢測(cè)工蜂蘋(píng)果酸脫氫酶 II的基因型、基因型頻率、基因頻率、雜合度和純合度。③優(yōu)質(zhì)抗螨高產(chǎn)蜂種微衛(wèi)星DNA遺傳多樣性分析以本地漿蜂、法國(guó)意蜂、本地中華蜜蜂和營(yíng)養(yǎng)雜交Fl、F4代工蜂為實(shí)驗(yàn)材料，運(yùn)用微衛(wèi)星DNA遺傳多樣性分析技術(shù)檢測(cè)以上蜜蜂的DNA多態(tài)性。④優(yōu)質(zhì)抗螨高產(chǎn)蜂種繁殖率、蜂螨寄生率和衛(wèi)生行為測(cè)定以本地漿蜂、法國(guó)意蜂和營(yíng)養(yǎng)雜交F1、F4代蜂群為材料，檢測(cè)各個(gè)蜂種的繁殖率，蜂螨寄生率和衛(wèi)生行為。⑤優(yōu)質(zhì)抗螨高產(chǎn)蜂種抗農(nóng)藥性能測(cè)定以本地漿蜂、法國(guó)意蜂和營(yíng)養(yǎng)雜交F4代蜂群為材料，通過(guò)農(nóng)藥攝入法檢測(cè)以上蜜蜂的抗農(nóng)藥特性。⑥實(shí)驗(yàn)蜂群生產(chǎn)力的測(cè)定在生產(chǎn)季節(jié)，定時(shí)定群記錄每組蜂群的蜂蜜及蜂王漿產(chǎn)量。⑦蜂蜜、蜂王漿的質(zhì)量檢測(cè)用抗螨意蜂生產(chǎn)出來(lái)的蜂蜜、蜂王漿質(zhì)量是否符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，取樣送往農(nóng)業(yè)部蜂產(chǎn)品檢測(cè)中心進(jìn)行水分、蛋白質(zhì)、蔗糖、癸希酸等指標(biāo)分析。通過(guò)本發(fā)明選育的蜂種與親本蜂種對(duì)比如下1、營(yíng)養(yǎng)雜交子4代工蜂和親本蜂種形態(tài)指標(biāo)對(duì)比
權(quán)利要求
1. 一種優(yōu)質(zhì)抗螨蜜蜂蜂種的選育方法，其特征在于包括以下步驟a)育種素材的選定根據(jù)蜜蜂生物學(xué)與遺傳育種特性的要求，按照抗螨性工蜂自然蜂螨寄居率< 10%，生產(chǎn)力蜂王漿年產(chǎn)量> 8. 10kg、蜂蜜年產(chǎn)量> 96. Mkg、商品蜂花粉年> 4. 56kg，生命力蜜蜂抗氧化能力SOD活性> 35. 76U/ml這些系列指標(biāo)，篩選出蜂王漿產(chǎn)量較高的“江山2號(hào)”意蜂和年產(chǎn)蜜量> IlOkg的產(chǎn)蜜性能優(yōu)越的法國(guó)純種意蜂以及抗螨性能優(yōu)越的健康無(wú)各類蜜蜂疾病且蜜蜂抗氧化能力SOD活性> 37. 30U/ml的本地中華蜜蜂蜂種為引種對(duì)象；b)抗螨蜂種的選育通過(guò)雄蜂的精子活力與畸形率檢測(cè)，選出最優(yōu)雄蜂的辦法，從江山2號(hào)中選育出種用雄蜂，然后檢測(cè)對(duì)蜂王的初生重、卵巢管數(shù)、體長(zhǎng)與體寬指標(biāo)，進(jìn)行對(duì)比，選出最優(yōu)的江山2號(hào)處女蜂王，與選育出的種用雄蜂進(jìn)行人工受精雜交，形成生產(chǎn)性能、抗病性能較強(qiáng)的江山2號(hào)蜂種作為父本；以從法國(guó)引進(jìn)的產(chǎn)蜜性能優(yōu)越的純種意蜂為母本；選擇工蜂自然蜂螨寄居率< 的抗螨性能較強(qiáng)的健康中蜂，采集其新鮮蜂王漿，-20°C保存?zhèn)溆?；c)從春繁開(kāi)始，每隔7天檢查割除法國(guó)意蜂雄蜂蛹，直至育種結(jié)束；制作蠟質(zhì)意蜂王臺(tái)放入中蜂群清理12h;移中蜂幼蟲(chóng)，產(chǎn)漿3天后，在不破壞王漿的情況下去除中蜂幼蟲(chóng)，移入法國(guó)意蜂一日齡幼蟲(chóng)；放入中蜂群繼續(xù)哺育10-1 后移出，放入蜜蜂數(shù)量在4. 5kg以上的江山2號(hào)強(qiáng)群，每天用注射器往王臺(tái)中人工注射50ul新鮮中蜂蜂王漿，直至封蓋；營(yíng)養(yǎng)雜交子1代蜂王出房后與江山2號(hào)雄蜂自然交尾并產(chǎn)卵，組成新的蜂群，檢測(cè)其工蜂自然蜂螨寄居率；當(dāng)工蜂自然蜂螨寄居率大于5 %時(shí)，取營(yíng)養(yǎng)雜交子1代一日齡幼蟲(chóng)按上述育種方法培育子2代、子3代、子4代營(yíng)養(yǎng)雜交蜂種；并每隔7天割除子1代、子2代和子3代雄蜂蛹， 直至工蜂自然蜂螨寄居率小于5%為止；同理，以引自江山健康種蜂場(chǎng)的江山2號(hào)為母本、 引自浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院的浙大A系為父本培育出“中意蜂營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂子1代”，然后用同樣的方法以“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂子1代”母本、“江山2號(hào)”為父本培育出“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂Fl ； 當(dāng)在不用藥物防治情況下，“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂”蜂群蜂螨感染率下降至5%以下時(shí)，再將“營(yíng)養(yǎng)雜交意蜂”進(jìn)行姐妹雜交進(jìn)行基因固定，以此方式，每代進(jìn)行姐妹雜交固定，經(jīng)過(guò)4代的橫向固定和繼代繁殖，當(dāng)基因不再發(fā)生變化時(shí)，即形成一個(gè)遺傳穩(wěn)定的蜜蜂品系——優(yōu)質(zhì)抗螨高產(chǎn)蜂種。
全文摘要
一種優(yōu)質(zhì)抗螨蜜蜂蜂種的選育方法，其特征在于包括以下步驟1)育種素材的選定按照抗螨性、生產(chǎn)力、生命力等系列指標(biāo)，篩選出蜂王漿產(chǎn)量較高的“江山2號(hào)”意蜂和產(chǎn)蜜性能優(yōu)越的法國(guó)純種意蜂以及抗螨性能優(yōu)越的健康本地中華蜜蜂蜂種為引種對(duì)象；2)抗螨蜂種的選育先從江山2號(hào)中選育出種用雄蜂，然后遵照蜜蜂生物學(xué)與遺傳育種特性的要求選育出江山2號(hào)處女蜂王，與選育出的種用雄蜂進(jìn)行人工受精雜交，形成生產(chǎn)性能、抗病性能較強(qiáng)的江山2號(hào)蜂種作為父本；以從法國(guó)引進(jìn)的產(chǎn)蜜性能優(yōu)越的純種意蜂為母本；3)從春繁開(kāi)始，每隔7天檢查割除法國(guó)意蜂雄蜂蛹，直至育種結(jié)束。本發(fā)明可以為蜂農(nóng)解決蜂螨對(duì)蜂群的危害，提高蜂群的繁殖速度和蜂產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量。
文檔編號(hào)A01K67/033GK102342264SQ20111024700
公開(kāi)日2012年2月8日 申請(qǐng)日期2011年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月25日
發(fā)明者何旭江, 曾志將, 汪志平, 陳利華 申請(qǐng)人:蘭溪市鴻香生物科技有限公司